重组改构人TNF-α联合顺铂对人胶质瘤U251细胞的生长抑制作用

目的:观察重组改构人肿瘤坏死因子α(rmhTNF-α)联合顺铂(CDDP)对人胶质瘤细胞生长的抑制作用.方法:人胶质瘤U-251细胞分为对照组(不加药);T组:加入rmhNF-α(20μg/L);C组:加入CDDP(2 mg/L);T C组:加入rmhTNF-α(20μg/L)及CDDP(2 mg/L).MTT法检测细胞生长抑制率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期变化情况,用免疫组织化学方法检测细胞PCNA、Bcl-2、P170蛋白的表达情况.结果:T组、C组细胞生长抑制率、细胞凋亡率均高于对照组(P＜0.05),T C组细胞生长抑制率、细胞凋亡率均高于其他各组(P＜0.05).T组PCNA-LI、Bcl-2蛋白表达低于对照组(P＜0.05),T C组PCNA-LI、Bcl-2蛋白表达均明显低于其他各组(P＜0.05),对照组、T组及T C组P170蛋白表达低于C组(P＜0.05).结论:rmhTNF-α能抑制人胶质瘤细胞生长,其机制与诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖活性有关,且rmhTNF-α与CDDP联用有协同增效作用.     

HIFU联合化疗对裸鼠皮下胶质瘤细胞凋亡及增殖的影响研究

目的:探讨高强度聚焦超声(High intensity focused ultrosound,HIFU)联合化疗对裸鼠皮下胶质瘤靶区周围细胞凋亡和增殖的影响.方法:建立人(U251)胶质瘤移植模型,随机分入3组,局部分别行单HIFU治疗、单盐酸尼莫司汀(Nimustine,ACNU)及HIFU联合ACNU治疗.治疗24 h后切取肿瘤组织,行HE染色观察组织病理变化,免疫组织化学法检测增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达和TUNEL法检测细胞凋亡.治疗7d后分别测量3组瘤块体积.结果:HIFU联合化疗组靶区周围组织凋亡细胞数较单HIFU组及单化疗组高(P＜0.01);而PCNA阳性细胞数较后两者降低(P＜0.01).联合治疗组肿瘤体积较单HIFU组及单化疗组缩小(P＜0.01).结论:HIFU治疗及化疗在胶质瘤的治疗中具有协同作用.HIFU联合化疗能明显提高HIFU治疗疗效,诱导靶区周围胶质瘤细胞凋亡并抑制其增殖发挥抗肿瘤作用,有利于胶质瘤的治疗.     

科索亚对心力衰竭大鼠骨骼肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:探讨科索亚对心力衰竭大鼠骨骼肌细胞的凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法:将38只SD大鼠随机分为4组:正常对照组(A组,n=8),心力衰竭组(B组,n=10),心力衰竭科索亚治疗1组(C组,n=10),心力衰竭科索亚治疗2组(D组,n=10).B、C、D组分别腹腔一次性注射野百合碱30 mg/k.2周后,C组和D组分别用科索亚10 mg·k-1·d-1和30 mg·k-1·d-1灌胃2周,A组和B组则以生理盐水灌胃2周.2周后处死动物,以腓肠肌质量和体质量比作为骨骼肌萎缩的指标.TUNEL法检测腓肠肌细胞凋亡.免疫组织化学和免疫印迹法检测腓肠肌Bcl-2、Bax的表达,并计算Bax/Bcl-2的比值.结果:与A组相比,B组腓肠肌凋亡指数升高(P＜0.01),Bcl-2表达减少(P＜0.01),Bax表达升高(P＜0.05),Bax/Bcl-2比值＞1.与B组相比,C组和D组腓肠肌细胞凋亡指数降低(P＜0.01);且C组和D组Bcl-2表达升高(P＜0.01),Bax表达减少(P＜0.05),Bax/Bcl-2比值均＜1.结论:细胞凋亡可能是心力衰竭时骨骼肌萎缩的原因之一;科索亚可能通过改变Bax/Bcl-2比值减轻心力衰竭时骨骼肌的凋亡和萎缩.     

Effects of Environmental Factors on Ischemic Cardiac Myocyte Apoptosis and Expression of Bcl-2, Bax and Caspase-3 in Rats

目的:探讨光照、黑暗、行为限制对心肌梗死大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响.方法:Wistar大鼠随机分为假手术组(A组)、心肌梗死组(B组)、黑暗组(C组)、光照组(D组)及行为限制组(E组),用TUNEL法检测心肌凋亡细胞,免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白及基因表达.结果:(1)与A组比较,B、C、D、E组的凋亡指数增加(P＜0.01);与B组比较,D、E组的凋亡指数增加(P＜0.05);与C组比较,D、E组的凋亡指数增加(P＜0.05).(2)与A组比较,B、C、D、E组的Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达增加(P＜0.01);与B组比较,D、E组的Bax、Caspase-3蛋白表达增加(P＜0.05);与C组比较,D、E组的Bax、Caspase-3蛋白表达增加(P＜0.05).(3)与A组比较,B、C、D、E组的Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达增加(P＜0.01);与B组比较,D、E组的Bax、Caspase-3 mRNA表达增加(P＜0.01);与C组比较,D、E组的Bax、Caspase-3 mRNA表达增加(P＜0.01).结论:光照环境、行为限制可增加大鼠缺血心肌细胞凋亡,其机制可能与上调Bax、Caspase-3的表达有关.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达的改变及银杏叶提取物的保护作用

目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达的变化及银杏叶提取物对其表达的影响.方法制造大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.40只Wistar雄性大鼠被随机分为A假手术组、B缺血组、C小剂量治疗组和D大剂量治疗组.于术前30min及术后1 h分别给予银杏叶提取物20mg/kg和40mg/kg腹腔内注射.应用TTC染色及HE染色观察梗死体积及缺血坏死程度,应用免疫组化染色及POD法检测Bcl-2蛋白表达及凋亡细胞数.结果C、D两组梗死体积明显小于B组(P＜0.01),D组梗死体积小于C组(P＜0.05);C、D两组凋亡细胞数明显少于B组(P＜0.01),D组凋亡细胞数少于C组(P＜0.05);C、D两组Bcl-2蛋白表达明显高于B组(P＜0.01),D组Bcl-2蛋白表达高于C组(P＜0.05).结论银杏叶提取物可通过上调Bcl-2蛋白表达,减少神经细胞凋亡,对脑缺血再灌注损伤起保护作用,疗效与剂量有关.     

紫河车提取物联合顺铂对人胶质瘤细胞增殖凋亡的影响

目的 观察紫河车提取物联合顺铂对人脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响.方法 把正常培养传代后的U251胶质瘤细胞按随机分配的方法分为四组,A组仅加普通培养液,B、C、D组各加紫河车提取物(400 mg/mL)2 mL、顺铂(1 mg/mL)0.01 mL、紫河车提取物(400 mg/mL)2 mL+顺铂(1 mg/mL)0.01 mL;MTT法观察U251细胞增殖情况,流式细胞仪检测U251细胞凋亡率.结果 培养12、24、36、48、60 h,B、C、D组细胞增殖指数逐渐下降,与A组进行比较,各组P值均小于0.05;其中,将D组与B、C组进行比较,P值小于0.05.将各组培养24 h后上机,测得A、B、C、D各组细胞的凋亡率分别为(0.3±0.2)%,(10.6±1.5)%,(35.9±2.8)%,(52.1±4.1)%.其中,B、C、D各组和A组进行比较,P值均小于0.05;将D组与B、C组两组进行比较,P值也均小于0.05.结论 紫河车提取物联合顺铂可抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖,并诱导其凋亡.     

槲皮素与顺铂对人膀胱癌裸鼠移植瘤抑瘤作用的研究

目的 观察槲皮素（Quercetin）与顺铂(Cisplatin, DDP)联用对膀胱癌 BIU-87 细胞的BALB/ c 裸鼠移植瘤生长的抑制作用,检测移植瘤中 Bcl-2, Caspase-3 和 PCNA 的表达水平及肿瘤细胞凋亡指数,探讨其作用机制。方法 建立膀胱癌细胞株BIU-87裸鼠移植瘤模型并随机分成4组：对照组（A组）、顺铂组（B组）、槲皮素组（C组）、槲皮素+ 顺铂组（D组）。治疗间观察移植瘤体积和裸鼠体重的变化,第15天后将移植瘤完整取出,称瘤重,计算抑瘤率,并用免疫组织化学技术检测各组移植瘤组织中Bcl-2, Caspase-3 和 PCNA 的表达,原位凋亡TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果 B 、C、 D各用药组肿瘤的生长受到明显抑制,瘤体质量明显低于A组,其抑瘤率分别为46.10 %、 39.17 %、 64.09 %, 联合用药组抗瘤作用进一步增强。Bcl-2和PCNA的表达在A组高于 B、C、D 组,Caspase-3 表达在A组明显低于 B、 C、 D 组,各用药组与对照组相比差异均有统计学意义( P < 0. 05);肿瘤细胞的凋亡指数在各用药组都比对照组明显提高,差异有统计学意义( P < 0. 05)。结论 槲皮素和顺铂均可明显抑制膀胱癌细胞在小鼠体内的生长作用,两药联合应用的抑瘤效果优于两药单用。其作用机制可能是通过调控肿瘤中 Bcl-2和 Caspase-3 的表达,也可能通过调节 PCNA 的表达,从而抑制细胞增殖和促进细胞凋亡。     

人重组p53腺病毒感染p53突变mBGC-823细胞对顺铂敏感性的影响

目的:观察人重组p53腺病毒(rAd-p53)感染含突变型p53基因胃癌BGC-823细胞(mBGC-823)对顺铂(CDDP)敏感性的影响.方法:采用免疫细胞化学和Western Blot法检测rAd-p53(5×1010vp/L)感染mBGC-823细胞48 h后P53蛋白的表达;MTT法测定rAd-p53单药组(5×109、5×1010、5×1011vp/L)、CDDP单药组(3.125、6.25、12.50 mg/L)及联合用药组(5×109/3.125、5×1010/6.25、5×1011/12.5vp,mg/L)作用后mBGC-823细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测其细胞周期与凋亡率.结果:rAd-p53感染mBGC-823细胞48 h,P53蛋白的阳性表达率为(63.74±4.21)%,显著高于对照组的(30.80±5.32)%(t=-13.039,P＜0.001);rAd-p53、CDDP单药及联合用药均可抑制细胞生长,其作用呈剂量依赖性(P均＜0.001).rAd-p53单药产生以G2/M期为主的阻滞,凋亡率为(11.76±2.33)%;CDDP单药产生以G1期为主的阻滞,凋亡率为(24.70±2.42)%;联合用药组产生G2/M期为主阻滞,凋亡率为(51.88±2.03)%;各组凋亡率比较差异有统计学意义(F=1 620.595,P均＜0.001).结论:腺病毒介导p53基因感染mBGC-823细胞改变了细胞内在突变的p53状态,诱导凋亡并增加对CDDP的敏感性.     

阿司匹林对小鼠胶质瘤干细胞增殖及凋亡的体外研究

目的 研究阿司匹林(Aspirin)对小鼠胶质瘤干细胞增殖及凋亡的影响.方法 体外培养小鼠胶质瘤GL261细胞株的干细胞,分为对照组(加入等体积生理盐水)和阿司匹林2.5、5、10 mmol/L处理组(n=5).应用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,TUNEL染色检测细胞凋亡情况,LDH试剂盒检测细胞受损情况.结果 与对照组相比较:不同浓度的阿司匹林均可抑制胶质瘤干细胞的增殖(P＜0.05),并且呈剂量—时间依赖性.各种浓度的阿司匹林作用后胶质瘤干细胞的成球能力明显下降(P＜0.05).阿司匹林影响胶质瘤干细胞的细胞周期,S期的细胞比例减少,G0/G1期的细胞比例增加(P＜0.05).3种浓度阿司匹林作用3d后,胶质瘤干细胞的凋亡细胞数目增多(P＜0.05),细胞释放LDH明显上升(P＜0.05).结论 阿司匹林具有抑制胶质瘤干细胞的增殖,并促进其凋亡的作用.     

The Influence of Diao-mo-zhi-beng Prescription on Expression of Bcl-2 and Bax in Hyperplastic Endometrium of Rats

目的:探讨凋膜止崩方宫腔靶向干预前后Bcl-2和Bax在无排卵功血(ADUB)大鼠增生子宫内膜组织中的蛋白表达情况.方法:将健康成年雌性SD大鼠40只,随机分成空白组(A)、模型组(B)、实验大剂量组(C)、实验小剂量组(D),去势大鼠雌激素负荷造模成功后宫腔注药,采用Western-blot方法检测4组大鼠子宫内膜组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果:动情前期A组Bcl-2表达较低,B组表达较高;且A组与B组、B组与C、D组之间差异有统计学意义(P＜0.05).而动情前期A组Bax表达较高,B组表达则较低;且A组与B组、B组与D组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:凋膜止崩方可能通过下调ADUB大鼠增生子宫内膜中Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,加速子宫内膜细胞凋亡,达到祛除子宫内膜的目的.