COMPARATIVE STUDY ON DETECTION OF ANTI-TOXOPLASM A GONDII ANTIBODIES BY USING DOT-ELISA AND DOT-IMMUNOGOLD SILVER STAINING

为比较斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫抗体的敏感性和特异性，本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原，同时用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测６５份弓形虫感染者血清、１７６份其他寄生虫感染者血清和７６份对照血清。结果显示，用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为９８．４６％及９２．３１％，平均抗体滴度分别为１∶３８４及１∶２１８（１∶２０－１∶２５６０）。用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测，有２３份血清抗体滴度高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，有８份低于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。二种方法所测抗体滴度呈直线正相关关系（ｒ＝０．６０８，Ｐ＜０．０１）。二种方法检测其他寄生虫感染者和对照血清，假阳性率分别为５．９５％及１３．８９％。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ操作流程和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ相似，但敏感性、特异性均优于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，前者不使用对人体有害的底物，有较好的推广前景。     

斑点免疫金银染色用于弓形虫病血清学诊断的研究

采用斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和斑眯酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＩ．ＩＳＡ），以弓形速殡子可溶性蛋白抗原作为靶抗原检测６５例弓形虫感染者血清抗弓 虫ＩｇＧ，Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＳＩＳＡ检测阳性率分别不９８．４６％和９２．４６％。血清平均滴度在Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为１：３９４，在Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为１：２１８。两法均一的有５９例，其中在两法中抗体滴度相同者２８例，Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测滴     

Dot-IGSS,Dot-IGS和Dot-ELISA检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的比较研究

应用自制的直径２０ｎｍ的胶体金标记ＧＡＲ－ＩｇＧ，以斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）、斑点免疫金染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种方法，同时检测９９例脑囊虫病人脑脊液（ＣＳＦ）中循环抗原（ＣＡｇ），阳性率分别为９４．９５％、９３．９４％和９２．９３％。检测５１份非囊虫病患者和６２例其他脑部疾病患者的ＣＳＦ，三种方法均为阴性。诊断指数分别为１９４．９５％、１９３．９４％和１９２．９３％。检出ＣＡＳ的最小量Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为２４４ｎｇ／ｍｌ．Ｄｏｔ－ＩＧＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为４８８ｎｇ／ｍｌ。试验表明三种方法诊断脑囊虫病具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行．有希望用于脑囊虫病的临床诊断。     

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46-58kD蛋白的纯化及其在诊断中的应用

本研究以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合，分离纯化旅毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（ＴＳＬＩ－ＥＳ）中４６－５８ｋＤ的蛋白组份，并用于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断旋毛虫病．检测结果：旋毛虫病人血清３４份，阳性３２份，阳性反应率为９４．１２％；正常人血精１００份未发现假阳性；对蛔虫病人（１２份）、囊虫病人（１５份）、血吸虫病人（１５份）及肺吸虫病人（２０份）血清亦无交叉叵应出现；建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ易于操作．重复性和稳定性较好。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ比较纯化抗原和ＴｓＬ１－ＥＳ的诊断效果，结果经卡方检验后显示：用纯化抗原和用ＴｓＬ１－ＥＳ检测的敏感性无显著差异，但纯化抗原的特异性显著优于ＴｓＬ１－ＥＳ。     

三种免疫学方法检测抗班氏丝虫IgG的比较

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）同步检测５０份班氏微丝蚴血症者血清中抗丝虫ＩｇＧ。ＥＬＩＳＡ，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测抗体阳性率分别为８６％（４３／５０），９０％（４５／５０）。ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ联合应用阳性率为９６％（４８／５０）。ＥＬＩＳＡ与Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ检测微丝蚴血症者抗体阳性率有     

四种弓形虫病血清学诊断方法的比较研究

本研究应用弓形虫的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、常规酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）及间接血凝抑制试验（ＩＨＡ）四种方法，分别检测了同一批人血清（１５０份）。结果表明：（１）四种方法中以Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ最为敏感，血清阳性检出率最高为１９．３％；ＩＦＡ次之为１１．３％；ＥＬＩＳＡ为８．６９％；ＩＨＡ最低仅为６．６６％。（２）Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ明显优于常规ＥＬ     

混合血清法检测献血员血清抗弓形虫抗体

将徐州市区义务献血员６人一组混合，用斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）进行检测，同时对所有血清用同样方法逐份进行检测，以研究混合血清法筛检抗弓形虫抗体的可能性。检测结果显示，混合血清法的敏感性为９２．３１％。特异性为９９．９６％，混合血清法与逐份血清法的一致率为９９．７３％，Ｋａｐｐａ值为０．９４７（Ｐ〈０．０１）。以全国弓形虫平均感染率（４．８６％）进行定量效益分析，用混合血清法筛检献血员，     

Dot—ELISA检测抗原与IHA,COPT检测抗体诊断血吸虫病的比较

本文比较了斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测循环抗原，间接血凝试验（ＩＨＡ），环卵沉淀试验（ＣＯＰＴ）检测抗体诊断血吸虫病的效果，１２例急性血吸虫病患者血清３种方法检测均为阳性，２７７例慢性血吸虫病患者血清３种方法检测阳性率分别为７９．４２％，６４．６２％和６３．１８％，１４例华支睾吸虫病患者血清和８９例健康人血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测均为阴性，１０例急性血吸虫病患者，在离开流行区经吡     

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46—58kD蛋白的纯化及其在诊断中的…

本研究以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合，分离纯化旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中４６－５８ｋＤ的蛋白组份，并用于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断旋毛虫病。检测结果；旋毛虫病人血清３４份，阳性３２份，阳性反应率为９４．１２％；正常人血清１００份未发现假阳性；对蛔虫病人，囊虫病人，血吸虫病人及肺吸虫病血清谱无交叉反应出现。     

金标抗rSjc26GST多克隆抗体斑点免疫金渗滤法检测？…

目的 探索一种简捷的检查血吸虫循环抗原的方法。方法 应用抗日本血吸虫重组谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ）的多克隆抗体标记胶体金，建立检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的双抗体夹心斑点免疫金渗滤法（Ｓ－ＤＩＧＦＡ），并以Ｓ－ＥＬＩＳＡ作对比。结果 用Ｓ－ＤＩＧＦＡ和Ｓ－ＥＬＩＳＡ平行检测９５例慢性血吸虫病患者，阳性检出率分别为８１．０５％和８２．１１％；正常人血清１８０份，两者的假阳性率分别     

应用单克隆抗体检测蚊体内幼丝虫的实验观察

以马来丝虫感染期幼虫为靶抗原制备多株单克隆抗体从中筛选出１Ｇ１，１Ｈ１单克隆抗体，检测人工感染马来丝虫的中华按蚊。当中华按蚊吸食马来微丝蚴的兔血后，分别解剖同时以ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测饲养不同时间的中华按蚊。结果显示，饲养９ｄ的按蚊马来丝虫幼虫阳性率，人工解剖为８６．６％，ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＳＩＡ法分别为８２．２％和７７．８％。     

糖尿病并发弓形虫感染的初步研究

本文用ＩＨＡ、ＩＦＡ、Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种血清学方法检测３２０例糖尿病病人血清的弓形虫抗体，阳性率分别是１０．３１％、１８．１３％和１９．０６％。均高于对照组（Ｐ＜０．００５），这是糖尿病患者并发弓形虫感染的首次报告。     

弓形虫病诊断方法的对比研究

应用５种不同方法测定了６例弓形虫病人不同病期的血清标木。用ＩＨＡＴ和ＩＦＡＴ测定抗弓形虫总免疫球蛋白，ＩＨＡＴ在发病后第３周的２份血清标本中有１份已呈阳性，１４～１７周达高峰。滴度升高非常明显；ＩＦＡＴ第３周的标本都呈阳性，１７～２４周达高峰。用ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ和ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ，ＩｇＭ－ＩＦＡＴ分别测定抗弓形虫特异性抗体ＩｇＧ和ＩｇＭ，ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ从第６周呈阳性，随病情延长，滴度明显升高；ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ两份第３周的标本都呈阳性，至少第１７周仍保持较高水平，其中１人第２４周的标本仍呈阳性；但ＩｇＭ－ＩＦＡＴ仅２例（２／６）呈阳性且滴度不很高，在较短时间内就转阴。结果表明：病人的抗体类型相似；ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ，ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ和ＩＦＡＴ敏感特异，ＩＨＡＴ简便、快速；高滴度特异性ＩｇＧ易掩盖ＩｇＭ－ＩＦＡＴ；ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ可为早期诊断提供依据。     

单克隆抗体Dot-ABC-ELISA检测包虫病人循环抗原

作者用活化生物素标记抗细粒棘球蚴抗原单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１Ｄ８，以聚氯乙烯（ＰＶＣ）白色薄膜凹孔板为载体，建立了ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ检测包虫病人循环抗原的方法。测定人源包虫囊液抗原的灵敏度为６ｎｇ／３μｌ样品．９２例确诊包虫病人血清循环抗原检出率为７６．１％（７０／９２），在抗体阳性者中循环抗原检出率为８１．６％（６２／７６），抗体阴性者中检出率为５０％（８／１６）。１００份正常人和１２２份羹虫病等其它寄生虫病人血清，仅１份囊虫病人血清出现交叉反应．测定循环抗原对包虫病人，尤其是血清抗体阴性者的免疫诊断有重要价值．本法简便、快速，适于推广．     

多项免疫吸附凝集试验检测孕妇弓形虫感染的实验研究

用弓形虫ＩｇＧ／ＩｇＡ／ＩｇＭ免疫吸附凝集试验检测５０７份孕妇血清，并与ＤＡ、ＳＦＴ、ＩＳＡＧＡ－ＩｇＭＥＩＡ－ＩｇＭ多项方法检测结果比较分析。多项检测结果阴性的２０１份血清中，该法检测出ＩｇＧ阳性２１份，ＩｇＡ、ＩｇＭ均为阴性，较ＤＡ敏感；多项检测结果为非活动性弓形虫感染的２０３份血清中，该法检出ＩｇＧ阳性１９７份、ＩｇＡ阳性１１份、ＩｇＭ阳性４份，阳性率分别为９７．０５％、５．４１％、１．９７％两者结果基本相符；多项检测结果为活动性感染的１０３份血清中，该法检出ＩｇＭ阳性８７份，ＩｇＡ阳性６１份，ＩｇＧ阳性１０３份，其中ＩｇＭ阳性与单项的ＩＳＡＧＡ－ＩｇＭ阳性结果相符率较高为８３．０２％。弓形虫ＩｇＧ／ＩｇＡ／ＩｇＭ免疫吸附凝集试验盒可作弓形虫感染的定性、定量检测，对判定孕妇的弓形虫感染时间是较好的方法。     

检测日本血吸虫病家兔尿中循环抗原的实验研究

本研究首次用单克隆抗体证实了日本血吸虫病兔尿液中存在日本血吸虫肠相关趋阴极抗原。用ＭｃＡｂ－ＲＩＨＡ和ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ平行对比检测浓缩５倍的重感染家兔尿样６１份和正常家兔尿样３０份。两法的阳性率分别为８１．９７％和７８．６９％；假阳性率分别为１３．３３％和０％。认为可进一步用于检测日本血吸虫病患者尿排泄抗原的研究。     

应用Dot-ELISA进行日本血吸虫循环抗原检测时其滴度与感染度关系的动态观察

以２０条／只和１００条／只剂量的尾蚴感染家兔，并于第９ｗｋ用吡喹酮对约半数家兔进行一次性灌胃治疗，依此建立日本血吸虫感染模型。用分别定位于日本血吸虫表皮膜、肠道上皮和虫卵的单克隆抗体建立直接斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）并应用该法分别检测感染家兔血中３类循环抗原、膜相关抗原（ＭＡＡ），肠相关抗原（ＧＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ），观察循环抗原滴度水平和日本血吸虫感染度之间的关系。结果发现，当用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测３类循环抗原时，２０条尾蚴感染组与１００条尾蚴感染组家兔不论治疗与否，血中３类循环坑原滴度水平无显著性差异。因此Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测循环抗原不适宜于作为日本血吸虫感染度的判断方法     

McAb Dot—ELISA检测卫氏并殖吸虫循环免疫复合物

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体ＩＦ８Ａ３检测了卫氏并及虫感染犬血清循环免疫复合物动态，感染后１～２ｗｋ可以检测免疫复合物，３～４ｗｋ阳性滴度逐渐上升，５～６ｗｋ处于较高汪洋，第８ｗｋ达高峰，然后较快地下降，研究结果表明，卫氏并殖吸虫囊蚴抗原特异的循环免疫复合物具有明显的期特异性；单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测特异的循环免疫复合物，可用于卫氏并殖吸虫病的早期诊断和活动性感     

DIFA等四项免疫学方法检测血吸虫病合并弓形虫感染的研究

弓形虫ＩＨＡ和ＥＬＩＳＡ对急性血吸虫病有严重的交叉反应，影响弓形虫病的临床诊断。本文用ＤＩ－ＦＡ、ＩＦＴ、ＩＳＡＧＡ－ＩｇＧ和ＩＨＡ检测６６例急性血吸虫病，结果其阳性率分别为１９．７０％、２２．７３％、１６．６７％和６５．１６％；用ＤＩＦＡ和ＩＦＴ检测健康人群的弓形体阳性率为９％；还用上述方法检测两种病的混合血清和兔急性血吸虫病血清。通过比较、分析认为前三种方法可用于两病的鉴别。本文还用上述方法检测２１例慢性血吸虫病，阳性率在０～１９．０５％之间，无明显血清交叉反应。     

McAbDot-ELISA检测卫氏并殖吸虫循环免疫复合物

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体ＩＦ８Ａ３检测了卫氏并殖吸虫感染犬血清循环免疫复合物动态。感染后１～２ｗｋ可以检测到免疫复合物，３～４ｗｋ阳性滴度逐渐上升，５～６ｗｋ处于较高水平，第８ｗｋ达高峰，然后较快地下降。研究结果表明，卫氏并殖吸虫囊蚴抗原特异的循环免疫复合物具有明显的期特异性；单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测特异的循环免疫复合物，可用于卫氏并殖吸虫病的早期诊断和活动性感染的诊断。