原发性肝癌组织P16蛋白的缺失与HBV感染

目的研究Ｐ１６蛋白缺失与原发性肝癌发生发展的关系以及ＨＢＶ感染与Ｐ１６蛋白缺失的相关性．方法用免疫组化技术（ＬＳＡＢ法）检测７０例原发性肝癌组织标本中的Ｐ１６蛋白和ＨＢｓＡｇ．结果有６０６％（４０／６６）的肝细胞癌（ＨＣＣ）和７５０％（１／４）的胆管细胞癌（ＣＣＣ）Ｐ１６蛋白缺失；Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ和Ⅳ级（按Ｅｄｍｏｎｄｓｏｎ标准）ＨＣＣＰ１６蛋白缺失率分别为００％（０／１），４４１％（１５／３４），８２１％（２３／２８）和６６７％（３／４），组间差异显著（Ｐ＜００５）．在有癌旁肝组织的４８例标本中，癌组织Ｐ１６蛋白阴性率（７２６％）明显高于癌旁肝组织（４１２％，Ｐ＜００５）．有６２５％（３０／４８）的ＨＣＣ癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ阳性．ＨＢｓＡｇ阳性病例与阴性病例的Ｐ１６阴性率分别为７３３％（２２／３０）和６６７％（１２／１８），差异无显著性（Ｐ＞００５）．结论Ｐ１６蛋白缺失与原发性肝癌相关，与肝癌的恶性发展关系密切，可能对预后有重要影响．ＨＢＶ感染与Ｐ１６蛋白缺失无明显相关性．     

幽门螺杆菌感染与胃癌和癌旁组织中MUC5AC基因表达

１材料和方法１．１材料１０例正常胃粘膜取自胃癌手术切缘组织，经ＨＥ染色不存在癌组织及癌前病变，２例十二指肠组织取自胃癌切除标本的十二指肠部分；４５例胃癌组织取自本院手术切除标本，其中３５例含癌旁胃粘膜，肠化粘膜２７例．所有标本均经１００ｍＬ／Ｌ福尔马...     

HCC中nm23H1mRNA、蛋白产物的表达与预后指标的相关性研究

本研究主要探讨ｎｍ２３的表达与肝细胞癌（ＨＣＣ）转移、预后,术后复发及存活率的关系．１临床资料收集１９９６／１９９７新鲜ＨＣＣ标本４０例,其中１０例有随访２ａ资料,６例有肝内转移复发已死亡;另收集１４０例ＨＣＣ手术切除标本,上述每例均有癌与癌旁肝组织...     

胃癌多基因和癌胚抗原同步检测的临床意义

胃癌的发生发展是一个涉及多基因、多分子水平的多阶段过程．目前，文献报道癌基因产物的检测，多数针对某单一癌基因的变化，其结果可比性较差，结论常常不一致．我们采用免疫组化方法，从胃癌的连续切片中同步检测ｐ５３，ｐ２１ｒａｓ，ＣｅｒｂＢ２和癌胚抗原（ＣＥＡ）的蛋白产物，分析它们在胃癌形成过程中的变化规律和临床意义．１　材料和方法１．１　材料　胃癌组织１００例取自我院１９９６０１／１９９７１１之手术标本．标本均经常规１００ｍＬ／Ｌ中性福尔马林固定，石蜡包埋，５μｍ厚连续切片，分别进行免疫组化和Ｈ…     

肝癌及癌旁组织HBV DNA定点PCR研究

目的采用定点ＰＣＲ技术，研究ＨＢＶ的Ｓ和Ｃ基因在肝癌与癌旁组织的存在状态，探讨癌旁ＨＢｓＡｇ表达与Ｓ基因的关系。方法福尔马林固定，石蜡包埋肝癌及癌旁组织２８例，ＨＢｓＡｇ免疫组化后的切片分别切割癌组织、癌旁ＨＢｓＡｇ强阳性区（Ｐ２）及癌旁ＨＢｓＡｇ阴性区（Ｐ１）各１个低倍视野，作Ｓ及Ｃ基因ＰＣＲ。结果癌组织Ｓ基因较Ｃ基因检出率高（１８／２８ｖｓ１０／２８，Ｐ＜０．０５），癌旁二者无差异；癌旁中Ｐ１与Ｐ２的Ｓ及Ｃ基因检出率无显著性差异；高分化肝癌Ｓ和／或Ｃ基因检出率较中分化者低（２／５ｖｓ２０／２８，Ｐ＜０．０５）。结论癌组织中整合的ＨＢＶＤＮＡ为残缺不全的，ＨＢｓＡｇ强阳性与阴性区的Ｓ基因检出无显著性差异。     

c—erbB—2及p53蛋白在原发性肝癌肝组织的表达

目的和方法 应用免疫组化ＬＳＡＢ（Ｌａｂｌｌｅｄｓｔｒａｐｔａｖｉｄｉｎ－ｂｉｏｔｉｎ）法对４５例人原发性肝癌（ＰＨＣ）及其癌周肝组织以及５例正常肝组织进行了ｃ－ｅｒｂＢ－２和突变型ｐ５３癌基因蛋白的表达研究。结果 ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白和ｐ５３蛋白在ＰＨＣ及其癌肝硬变非肝硬变组织中的阳性表达率分别为７１．１％，２１．４％，（６／２８），１１．７％（２／１７）和４６．７％，１４．３％（４／２８     

老年人膀胱移行细胞癌P16、P53、bc1-2及c-erbB-2基因的异常表达

目的检测老年人膀胱移行细胞癌组织中Ｐ１６、Ｐ５３、ｂｃ１２及ｃｅｒｂＢ２的基因表达，探讨其与膀胱癌病理分级、临床分期和转移的关系。方法应用免疫组化ＳＰ法检测５５例老年人膀胱癌组织中Ｐ１６、Ｐ５３、ｂｃ１２及ｃｅｒｂＢ２的基因表达。结果５５例膀胱癌中Ｐ１６、Ｐ５３、ｂｃ１２及ｃｅｒｂＢ２的阳性率分别为４３６％、４９１％、４１８％及４１８％，多种癌基因激活和抑癌基因失活与肿瘤病理分级、临床分期和有无转移有密切的关系。７０９％的肿瘤有上述癌基因和（或）抑癌基因的异常表达，其中５０９％的肿瘤同时有多个基因的表达异常。结论肿瘤的多基因分析比单基因分析更有价值，癌基因ｂｃ１２、ｃｅｒｂＢ２和抑癌基因Ｐ１６、Ｐ５３的表达异常及协同作用可能在老年人膀胱癌的发生、发展中起重要作用。     

肝癌凋亡相关抗原的表达与原位末端标记的关系

目的探讨Ｆａｓ等凋亡相关抗原在肝细胞癌（ＨＣＣ）的表达及其与凋亡的关系．方法剖腹ＨＣＣ３０例，标本作Ｆａｓ，Ｂａｘ，Ｉｃｅ，Ｂｃｌ２免疫组化和原位末端标记（ＩＳＥＬ）．结果ＩＳＥＬ与ＨＥ的凋亡形态及定位基本吻合，ＨＣＣ有小片及大片的凋亡；凋亡与坏死形态不同，且坏死ＩＳＥＬ阴性，可与凋亡鉴别．凋亡及健全癌细胞Ｆａｓ，Ｂａｘ阳性率均较高．癌旁及正常肝的Ｆａｓ，Ｂａｘ均较ＨＣＣ者低．Ｂｃｌ２在ＨＣＣ表达甚低．结论凋亡的ＨＣＣ组织Ｆａｓ表达高，较健全癌细胞、癌旁及正常肝组织的表达为高     

肝细胞性肝癌AFP-mRNA检测外周血癌细胞的价值

目的通过对原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）外周血中癌细胞的检测，为临床建立诊断肝癌转移的常规方法．．方法以甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｍＲＮＡ为ＨＣＣ的标记物，应用ｎｅｓｔｅｄＲＴＰＣＲ对３０例ＨＣＣ外周静脉全血标本及不同细胞株进行检测及分析．结果ＨＣＣ患者３０例外周血癌细胞阳性检出率为５６７％，并与肝内静脉癌栓形成（１１／１３，８４６％ｖｓ６／１７，３５３％）、肝内转移（１６／２３，６９６％ｖｓ１／７，１４３％）和细胞分化密切相关（Ｐ＜００５）；最低检出浓度为全血肝癌细胞２×１０４／Ｌ．对照组中结肠癌、鼻咽癌等肝转移癌以及胆囊结石患者的外周血中均未发现ＡＦＰｍＲＮＡ．结论ＮｅｓｔｅｄＲＴＰＣＲ对ＨＣＣ的检测具有较强的特异性和较高的灵敏度，对于ＨＣＣ诊断、判断转移可能具有较为重要的临床应用价值     

肝细胞癌及癌旁组织中c－erbB－2蛋白的表达与乙型肝炎病毒感染的关系

目的及方法应用免疫组织化学技术检测了７６例肝细胞癌（ＨＣＣ）及其癌旁组织中ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果及结论ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在ＨＣＣ和癌旁组织内表达的阳性率分别为５７．９％（４４／７６）和７１．９％（４１／５７），阳性表达与ＨＣＣ组织学分级及细胞增殖状态无相关性，而与ＨＢＶ感染密切相关。ＰＣＮＡ在ＨＣＣ及癌旁组织的阳性率分别为７７．６％（５９／７６）和３５．１％（２０／５７），ＰＣＮＡ标记指数与ＨＣＣ组织学分级呈正相关。     

肝细胞癌及癌旁组织中c—erbB—2—蛋白的表达与乙型肝炎病毒感 …

目的及方法 应用免疫组织化学技术检测了７６例肝细胞癌（ＨＣＣ）及其癌旁组织ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，结果及结论 ｅ－ｅｒｂＢ－２蛋白在ＨＣＣ和癌旁组织内表达的阳性率分别为５７．９％（４４／７６）和７１．９％（４１／５７），阳性表达与ＨＣＣ组织学分级及细胞增殖状态无相关性，而与ＨＢＶ感染密切相关，ＰＣＮＡ在ＨＣＣ及癌旁组织阳性率分别为７７．６％（５９／７６）和３５．１％     

肝细胞癌发生中p16基因缺失与甲基化的研究

目的 探讨肝细胞癌（ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＨＣＣ）发生过程中抑癌基因Ｐ１６的存在及蛋白表达情况。方法 随机引物法标记制备Ｄｉｇ－ｐ１６ｃＤＮＡ探针，分子杂交及免疫组化方法检测肝细胞癌发生中Ｐ１６基因的存在及表达情况。结果 斑点杂交显示Ｐ１６探针敏感率为１．０ｐｇ。５６例ＨＣＣ癌组织及２８例癌旁组织ＤＮＡ与Ｐ１６探针点杂交的阳性率分别为５５．３６％（３１／５６）、８９．２     

c－erbB－2及p53蛋白在原发性肝癌肝组织的表达

目的和方法应用免疫组化ＬＳＡＢ（Ｌａｂｌｌｅｄｓｔｒａｐｔａｖｉｄｉｎ－ｂｉｏｔｍ）法对４５例人原发性肝癌（ＰＨＣ）及其癌周肝组织以及５例正常肝组织进行了ｃ－ｅｒｂＢ－２和突变型ｐ５３癌基因蛋白的表达研究。结果ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白和ｐ５３蛋白在ＰＨＣ及其癌周肝硬变和非肝硬变组织中的阳性表达率分别是７１．１％，２１．４％（６／２８），１１．７％（２／１７）和４６．７％，１４．３％（４／２８），０％（０／１７），在５例非肝脏疾病的正常肝组织中均未见表达。ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｐ５３蛋白二者表达强度与ＰＨＣ病理组织学分级具有一定程度相关关系，但与ＰＨＣ的不同组织学类型无显著差别。ｃ－ｅｒｂＢ－２与ｐ５３蛋白在原发性肝癌中的表达二者具有显著的相关性（Ｐ＜０．００５）。结论突变型ｐ５３和癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２在ＰＨＣ中具有独立和协同作用，对肝癌的发展具有重要影响。     

人原发性肝内胆管细胞癌中乙肝病毒基因及其抗原的表达及意义

的检测ＨＢＶ基因及其抗原在人原发性肝内胆管细胞癌中的表达，探讨人原发性肝内胆管细胞癌的发病因素及发病机制．方法用免疫组化技术检测ＨＢＶ抗原，用原位分子杂交技术检测ＨＢＶ基因．结果在２０例肝内胆管细胞癌中，ＨＢｘＡｇ，ｐｒｅＳ１，ｐｒｅＳ２，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ阳性检出率分别为７５％，４０％，４０％，１０％和０％；在１９例癌旁肝组织中，其阳性检出率分别为８４２％，４７９％，４７９％，３１６％和３１６％．在４０例肝内胆管细胞癌中，ＨＢＶＤＮＡ，Ｘ基因，ｐｒｅＳ基因，Ｓ基因及Ｃ基因阳性检出率分别为７７５％，７０％，４７５％，４０％和４２５％；在３３例癌旁肝组织中，其阳性检出率分别为８７９％，８４８％，６３６％，６９７％和６６７％．结论人原发性肝内胆管细胞癌的发生与ＨＢＶ慢性感染有密切关系，特别是与ＨＢＶＸ基因及其蛋白在肝癌发病中起着更重要的作用     

肺鳞癌组织Mdm2蛋白表达p53基因突变相关性研究

目的探讨原发性肺鳞癌与Ｍｄｍ２蛋白表达、ｐ５３基因突变之间的相关性。方法采用ＳＰ免疫组织化学方法和银染聚合酶链式反应单链构象多态性（银染ＰＣＲＳＳＣＰ）方法检测手术切除、经病理证实的４５例原发性肺鳞癌组织及癌旁肺组织中Ｍｄｍ２蛋白表达和ｐ５３基因突变情况。结果免疫组织化学检测的４５例肺鳞癌组织Ｍｄｍ２蛋白阳性率为６２％（２８／４５）,２例癌旁肺组织中Ｍｄｍ２蛋白呈弱阳性表达,免疫组织化学方法结合银染ＰＣＲＳＳＣＰ检测４５例肺癌组织ｐ５３基因突变,阳性率为５１％（２３／４５）,４５例癌旁肺组织未检测到ｐ５３基因突变。（１）肺鳞癌与ｐ５３基因突变有明显相关性（Ｐ＜０．０５）。（２）肺鳞癌与Ｍｄｍ２基因产物过度表达有明显相关性（Ｐ＜０．０５）。（３）Ｍｄｍ２蛋白过度表达与ｐ５３基因突变复合存在和肺鳞癌淋巴转移（６６％,１０／１５）有明显相关性（Ｐ＜０．０５）。结论Ｍｄｍ２蛋白过度表达与ｐ５３基因突变是临床估计患者预后重要的分子生物学指标     

HBV DNA在肝癌细胞中的整合模式

１材料和方法１．１材料６６例ＨＣＣ标本来自山东省省立医院、山东医科大学附属医院及济南市千佛山医院，手术后经病理证实均为原发性肝细胞癌．标本置２０℃冰冻保存，用于抽提ＤＮＡ．１．２方法探针的制备按地高辛甙元标记试剂盒（ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｈｅｉ...     

肿瘤转移抑制基因nm23在人肝细胞癌中的表达

目的探讨ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平与人肝癌转移倾向的相关性．方法采用地高辛标记的ｎｍ２３Ｈ１反义ｃＲＮＡ探针对２４例肝细胞癌进行原位杂交，检测癌及癌旁正常肝组织中ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平．２４例标本依分组标准合为两组．分组标准：①肝门淋巴结已有转移；②肝内肿癌数≥２；③门静脉内癌栓；③癌性卫星结节形成．具备备件①或②、②或③、④者为高转移潜能组（ｎ＝６），其他归入低转移潜能组（ｎ＝１８）．地高辛标记试剂盒为ＤＩＧＲＮＡｌａｂｅｌｉｎｇｋｉｔ，为德国宝灵曼公司产品．ｎｍ２３Ｈ１ｃＤＮＡ由Ｒｏｓｅｎｇａｒｄ惠赠．原位杂交方法参照公开发表的资料稍加改良．结果原位杂交染色呈阳性者为胞浆型颗粒状或团块状．ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ强阳性表达在低转移倾向组有１０例，高转移倾向组无；阴性表达者在低转移倾向组有１例，高转移倾向组有３例，统计处理Ｐ＜００５．ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平与肝癌大小、相关肝脏疾病背景等临床指标均无关（Ｐ＞００５）．结论ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平可被认为是反映人肝细胞癌转移倾向的指标之一．     

福建肝癌细胞EBV感染与HBV及P53蛋白表达的关系

目的探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）中ＥＢＶ与ＨＢＶ感染的相关性及ＥＢＶ与Ｐ５３蛋白表达的关系．方法采用原位杂交技术以地高辛标记的单链ｃＤＮＡ探针、生物素标记的双链ｃＤＮＡ探针及免疫组化ＳＰ法检测ＨＣＣ５９例（含癌旁肝组织）和９例肝硬变组织中高拷贝数ＥＢＥＲ１（ＥＢＶ编码的小ＲＮＡ）、ＨＢＶＤＮＡ和Ｐ５３蛋白．结果肝癌细胞核内ＥＢＥＲ１阳性率为２０３％,显著高于癌旁肝组织（Ｐ＜００１）．肝癌组织内ＨＢＶＤＮＡ阳性率为５９３％,ＥＢＶ存在与ＨＢＶ感染无明显相关性（Ｐ＞００５）．肝癌组织内Ｐ５３蛋白表达率为３３９％,Ｐ５３表达与ＥＢＥＲ１无显著关系（Ｐ＞００５）．结论肝癌细胞内ＥＢＶ感染与ＨＢＶ存在无明显关系,肝癌中Ｐ５３表达与ＥＢＥＲ１无关     

肝细胞癌患者HCV感染及其致癌机理研究

目的：揭示肝细胞癌患者的ＨＣＶ感染情况及其致癌机理。方法：应用免疫组织化学ＳＰ法对４６例肝细胞癌癌组织及其３８例癌旁肝组织中丙型肝炎病毒核心抗原作了定位研究，并进一步检测其中癌基因ｒａｓ、ｃｍｙｃ和抑癌基因ｐ５３的蛋白表达。结果：核心抗原的检出率分别为２１７％和３６８％，４６例肝癌患者中１６例存在丙型肝炎病毒感染；ｐ２１、ｃｍｙｃ和ｐ５３蛋白在癌组织中的检出率分别为５８７％、６７４％和３０４％；丙型肝炎病毒感染的阳性与阴性组患者之间的ｐ２１、ｃｍｙｃ和ｐ５３蛋白的表达无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；两组患者癌旁肝硬化的阳性率分别为８７５％和８６７％（Ｐ＞００５）。结论：上述结果提示丙型肝炎病毒致肝细胞癌的机理可能与ｒａｓ、ｃｍｙｃ和ｐ５３基因的激活或失活无关，其机理尚待进一步探索     

胃癌中癌基因ras c-myc mRNA表达的临床意义

目的探索癌基因ｒａｓ和ｃｍｙｃｍＲＮＡ在胃癌发生中单独和协同作用关系，选择胃癌的早期诊断依据．方法应用原位分子杂交（ＩＳＨ）技术，检测８８例胃癌组织中Ｈｒａｓ，Ｋｒａｓ，ＣｍｙｃｍＲＮＡ的表达，结合临床资料综合分析．结果Ｋｒａｓ，Ｈｒａｓ，ＣｍｙｃｍＲＮＡ在肿瘤区的阳性表达分别为７８４％，７０５％和５８０％，在癌旁区的阳性表达分别为２８４％，２７３％和２０５％，呈梯度下降趋势，３种癌基因的表达与胃癌的临床分型、组织学分类及有无淋巴结转移无关，ＣｍｙｃｍＲＮＡ的表达与患者生存期关系密切（Ｐ＜００５）．结论Ｋｒａｓ，Ｈｒａｓ，ＣｍｙｃｍＲＮＡ的表达可作为胃癌早期诊断的参考依据．