LM改良混合固定液在病理技术中的应用

在病理技术工作中从标本取材、固定、脱水到切片、染色等各种环节若处理不当都可影响切片的质量 ,延误诊断[1,2 ] 。其中常遇到因固定不充分造成切片困难、着色不良现象。在实际工作中 ,组织标本常用体积分数为 10 %福尔马林固定一夜后再进行脱水、透明、浸蜡等处理[3～ 5] ,所需时间较长 (4 8h) ,拖延了病理报告发出的时间 ,给患者和临床诊断治疗带来不便。作者改进了固定方法 ,用新的混合固定液代替原固定液 ,取得了满意效果。1　材料与方法1.1　混合固定液的配制　甲醛、无水乙醇、蒸馏水 ,混合配制成体积分数为 2 0 %福尔马林液和体积分…     

593例淋巴结病理切片制作效果分析

淋巴转移是癌转移的主要方式之一。淋巴结为主要的外周淋巴器官 ,是参与淋巴细胞再循环的重要部位。由于它的这一特性 ,就决定了其在病理制片中的重要地位。在实际工作中常出现由于切片制作不良 ,给诊断带来困难。现将在淋巴结制片中的体会和讨论 ,报告如下。1　材料和方法本文收集我院 1999～ 2 0 0 1年中淋巴结切片的材料 ,共为5 93例。把送检标本完整摘除后 ,投入中性福尔马林液中固定数小时～ 1ｄ ,固定的好坏决定了以后制片的各个环节 ,如果固定不良会导致淋巴结组织结构模糊不清 ,着色不均 ,妨碍镜检。脱水液常用乙醇 ,置换组织中的水…     

病理组织学诊断检材的制备技术

1 组织的固定 1.1 凡需要进行病理组织学检查的标本(器官或组织),离体(活体或尸体)后,应尽快置放(浸泡)于装有足够量固定液的容器中固定.固定液量应为被固定标本体积的5～10倍.置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定,应适当大一些.     

快速印片配合冰冻切片的诊断及应用价值

细胞病理学是诊断病理学的一个重要分支 ,其重要作用已为大家共识 ,而细胞快速印片在临床外科手术中配合病理组织学冰冻切片的快速诊断作用 ,还没有广泛推广和使用。现将二者密切配合 ,相辅相成 ,在临床工作中的诊断及应用价值介绍如下。1　材料与方法1.1　材料来源　手术中送检的快速标本 ,疑为肿瘤者。1.2　方法及步骤　将标本切开 ,取组织块进行冰冻切片 ,剩下的标本用载物片轻轻按压它的切面 ,使其表面的一层细胞印在玻片上 ,可连续印数张 ,立即固定、染色。HE快速染色步骤 :(1) 95 %酒精固定 1min ;(2 )水洗一过 ;(3 )苏木素液 1min ;…     

肥大细胞甲苯胺兰染色法的改进

肥大细胞的染色方法很多,如甲苯胺兰、硫堇、中性红和醛复红等,其中以甲苯胺兰染色法较常用。我们在科研中发现,用经典甲苯胺兰染色法染食管粘膜组织中的肥大细胞效果不够理想,改进后,肥大细胞在淡兰色的背景中鲜明显著。现将改进的方法介绍如下材料和方法手术切除食管癌标本40例,分别固定于酒精福尔马林液(AF液)与10%     

睾丸、附睾和眼球在乙醇内长期保存后的密度与体积变化

笔者最近对比研究了SD大鼠睾丸、附睾和眼球在新鲜状态下、经Bouin液浸润固定24-36小时后以及经70%乙醇脱水3-7天、保存1-3月后的密度与体积的变化[1].考虑到人们有时需要长期保存标本,有必要了解器官长期保存后的密度与体积变化.因此,本研究利用前期研究[1]中所剩的部分标本以及同期取材并经相同处理(新鲜取材、Bouin液浸润固定24小时、70%乙醇脱水与保存)的部分其他标本,根据以前所述方法[1],继续测量了以上器官在乙醇内(脱水)保存11月后的密度与体积,并将之与新鲜状态以及固定并脱水保存3月后的结果进行了比较.     

用Gendre液固定活检组织作常规制片的体会

常规制片质量的好坏直接影响着病理诊断水平的发挥 ,而在常规制片中对固定、脱水、透明三环节的把握至关重要。本科自 2 0 0 0年 2月以来应用 Gendre液固定 180 0多例来自不同器官、不同病种的活检组织作出常规制片 ,取得良好的效果 ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　 1Gendre液 :苦味酸 95 %酒精饱和液 80 ml,甲醛 15 ml,冰乙酸 5 ml三液混合 ;2 80 %酒精 ,90 %酒精 ,95 %酒精 ,10 0 %酒精 ,二甲苯等 ;3自动脱水机 (TS- 12 H型 ,湖北省医用电子仪器厂 )。1.2　方法　将大标本取材成≤ 2 cm× 2 cm× 0 .2 cm,小标本及破碎组织用纱纸…     

肾切片制作方法的改进

制作肾切片一般要经过取材、固定、切片、染色等程序 ,传统的方法是将动物致死后取材固定 ,但由于固定液渗透到组织内部需要一定的时间 ,而肾组织又易自溶 ,在固定液未渗透组织深处时 ,其组织结构已经发生了改变、残缺、细胞变形变位 ,所制出的切片效果甚差 ,难以满足教学和科研的需要。笔者对传统的固定方法作了改进 ,采用固定液活体灌注和肾脏表面滴加固定液的方法 ,效果很满意。1　材料与方法(1)将大白鼠进行腹腔麻醉后 ,用Ｚｅｎｋｅｒ液经心脏行灌注固定 ,同时切开腹腔在肾脏表面滴加固定液 ;(2 )灌注完毕后 ,置于 4℃冰箱内保存约 2 0…     

冰冻快速切片改良技术及临床应用

冰冻切片技术已广泛应用于手术前或手术中的快速病理诊断。但在日常工作中由于许多州县医院送检标本均已固定，无法进行常规冰冻切片及快速诊断，而使临床诊治工作受到一定的影响，为此，我们对固定后的标本进行了改良冰冻切片的快速诊断。现将我们的体会总结如下：材料与方法1标本来源：我院手术室及外院固定后送检标本．其中有较小的胃镜、宫颈活俭、淋巴结及胃癌根治术等组织性质不同的标本。2仪器设备：国产BL－3C型生物半导体冰冻切片机。3根据标本大小所用固定液及固定时间长短决定加热时间。如组织小加热时间短，采用10％福尔马林…     

不同固定液对冷冻切片HE染色影响的比较

冷冻切片的质量直接影响术中病理诊断的快速性和准确性 ,因此制备高质量的冷冻切片具有重要意义 ,然而其受多种因素影响 ,其中固定液的选择至关重要。目前文献中有关报道结果不一 [1 ,2 ] 。笔者选用组织学技术常用、容易配制的几种固定液 [3]进行比较 ,观察 HE的染色效果 ,以期获得对冷冻切片染色效果最好的固定液。1　材料与方法1.1　材料　标本 :临床手术切除的新鲜标本 ,主要有乳腺、甲状腺等器官组织。固定液如下 :A　中性福尔马林溶液B　 95 %乙醇C　 AF(4 0 %福尔马林 10 ml,95 %乙醇 90 ml)D　 Carnoy(纯乙醇 60 ml,氯仿 3 0 ml…     

保证免疫组化染色工作质量的途径

免疫组化染色是病理诊断的常规手段.总结我院病理科近10年开展免疫组化染色工作的实践,探讨提高免疫组化染色工作质量的途径. 　　1 组织固定 　　组织标本离体后一般30 min内应进入固定液.一种理想的固定液即要保持组织结构或细胞形态的完整,又不损害组织细胞内有效成分和抗原性.常用的固定液为10%中性缓冲福尔马林,这种固定液能保持长时间的稳定,固定液时间一般为6～12 h,不宜超过24 h,固定时间越长,抗原决定簇被封闭的可能性就越大.……     

不同固定液对延迟处理标本的HE制片的影响

目的：观察比较10%甲醛、10%甲醛冰醋酸1：1的混合液及丙酮三种固定液对延迟固定标本的固定效果,为临床病理做出更好的延迟固定标本切片提供实验基础。方法：取术中送检标本80例,分别延迟24、48、72h后,相同延迟固定时间标本分别用三种固定液固定,然后做HE染色,观察各自的组织结构及染色情况。结果：同一延迟固定时间,甲醛固定的组织结构自溶现象最显著,染色黯淡;混合固定液自溶现象相对较轻,染色效果优于甲醛;丙酮固定的组织结构自溶现象最轻,染色效果最好。且延迟固定时间越久,变化越显著。结论：三种固定液都可用于固定延迟固定标本,但丙酮效果最好。     

乳腺肿瘤病理学的检验诊断

<正>病理学作为肿瘤的诊断方法,是目前肿瘤诊断学中最广泛应用和准确可靠的方法。常用的方法有细胞检查,活体组织检查等。有时为最终明确诊断及治疗效果,或为研究目的也应用尸体解剖检查。病理检查最后都要在显微镜下做出诊断。1原理与技术1.1活体组织检查(活检):(1)切除活检:为乳腺肿物确定病变性质最常用的方法。将整个可疑肿块全部剔除,并带有一定量的周围组织。将标本切开,观察可疑肿瘤部分。进行描述记录后,切除2～3mm厚之组织块。首先制做冰冻切片,同时印片。其余部分及其周围组织取数块制成石蜡切片。如送检标本很小(小于1cm)可整个包埋。同时留小块(1g以上)新鲜     

高原14例慢性乙型病毒性肝炎的临床病理分析

根据 95方案病理诊断的分级分期标准 ,本文对高原 14例慢性乙型肝炎的肝组织病理结果进行分析 ,报告如下。1　材料和方法1.1　选择对象 :14例均为本院传染科 1999年 6月至2 0 0 0年 3月收治的慢性乙型肝炎肝穿刺标本 ,其中 3例混合感染 ,1例合并 HAV、HEV感染 ,1例合并HAV感染 ,1例合并 HCV感染。诊断标准符合 1995年修改的病毒性肝炎的诊断标准 ,排除其他疾病引起的肝脏继发性改变者。1. 2　方法 :行肝脏穿刺 ,用上海注射针厂生产的B4 9-0 5吸入式肝脏针 12～ 16号 ,按常规操作进行 ,将所得标本用 10 %福尔马林液固定送检 ,将标本固…     

环氧树脂618在生物样品中的快速包埋法

为达到对临床活检标本快速诊断的目的,我们通过反复实验,改进了生物透射电镜样品传统的制备方法,采用了环氧树脂618快速包埋法。材料与方法按照常规透射电镜取材方法进行取材,样品应小于1ｍｍ3,固定于2.5%,戊二醛(ＧｌｕｔａｒａｌｄｅｈｙｄｅＣ5Ｈ8Ｏ2)液中。经甲醛固定的大体标本表层固定最佳,应从表层取材[1]。切取1ｍｍ3小块,经磷酸缓冲液充分漂洗后用1%酸(ＯｓｍｌｕｍｔｅｔｒｏｘｉｄｅＯｓＯ4)后固定。制成腊块的标本,选取蜡块的最佳部位切取1ｍｍ3的小块,用二甲苯脱腊再经乙醇梯度脱水。用0.1ｍｏｌ/Ｌ二甲胂酸钠缓冲液充分漂洗后…     

肺组织标本的制样技术改进

在常规电镜样品制备中,肺组织样品由于含有气体漂浮在固定液上边,影响固定液的固定和浸透,同时存在尘埃不好切割和磨损玻璃刀,给切片工作带来一些困难,对此我们进行了一些改进,现报告如下。1标本制备实验大鼠体重(200±50)g,雌雄不限,10%水合氯醛腹腔注射麻醉,开胸暴露心脏,剪开右心耳,经左心室先注入温生理盐水至血液冲净,随后再注入预冷的2%多聚甲醛与2.5%戊二醛混合液,固定后取右侧肺门处的小块肺组织,放入预冷的1%~2%多聚甲醛与2.5%戊二醛混合固定液内,待肺组织稍硬后将其切成1 mm3见方的小块并放入固定液中,室温下固定1~2 h,所用固定液…     

15例间叶组织恶性肿瘤超微结构分析

来源于间叶组织的恶性肿瘤称为肉瘤。在临床病理诊断中 ,有些肉瘤在光学显微镜下很难作出客观的诊断。其原因之一是瘤细胞分化差 ,要想达到完全确诊 ,必须借助于电镜技术 ,对瘤组织本身及其与周围组织的关系进行超微结构的分析 ,以判断瘤细胞的组织学来源。我们对 5年来 15例疑难间叶组织恶性肿瘤进行光、电镜观察并结合临床资料进行了探讨 ,报道如下。1　材料和方法1.1　材料来源　收集附属医院及邻区医院光镜下不能确诊的肉瘤标本 15例。1.2　方法　每例标本均做光镜、电镜常规处理。光镜标本经 10 %福尔马林液固定 ,脱水 ,石蜡包埋 ,切片…     

病理组织切片制作不佳的影响因素及预防对策

病理组织切片质量的优劣 ,直接影响着病理诊断的及时性、准确性 ,影响着病人的预后。日常工作中经常会遇到各种影响制片质量的因素。因此 ,笔者结合实际工作中遇到的一些问题进行归纳分析 ,提出预防对策。1　组织固定和取材1.1　组织固定不及时和固定不当 ,引起自溶 ,出现细胞核质着色较浅 ,轮廓不清 ,以及不同程度的片状发白区的现象 ,特别是淋巴组织。取材时 ,组织块过厚、过大 ,固定液不易渗透致组织固定不良 ;太薄、太小的组织 ,在固定和脱水过程中易变硬 ,产生弯曲 ,扭转 ;组织周围脂肪过多 ,引起脱水不良 ,导致切片困难。1.2　预防对策　 (1)标本无论大小 ,离体后 30 min内立即固定 ,较大标本沿最大的剖面切开、空腔脏器应剪开 ,注意组织块不要与容器壁紧贴 ,手术标本最好固定 2 4 h后再取材 ,固定液量要足够 ,并检查是否失效 ,如福尔马林溶液 ,缺少刺鼻味或出现白色沉淀表明已失效 ;淋巴组织外围包有一层比较致密的结缔组织被膜 ,试剂难以渗透到组织内部 ,虽然皮质部细胞被固定 ,但髓质的淋巴细胞自溶尚在继续进行 ,因此 ,淋巴结活检组织一经切除 ,应立即沿长轴从中央做纵切面 ,以充分固定组织 ,...     

骨髓组织制片和胶原与网状纤维复合染色的应用

在病理活检组织中 ,骨髓穿刺标本的制片和特殊染色要求较高。为适应临床诊断和研究工作的需要 ,我们对组织制片和染色方法进行改进 ,提高组织固定液的浓度 ,以加强对组织细胞的渗透能力 ;选用酸和醛脱钙液 ,以减少对骨髓的损害程度 ,控制组织脱水、透明和浸蜡时间 ,提高制片质量。为了更好地证明骨髓纤维化中含有两种纤维成分 ,我们改进了双重染色法 ,能够较好地同时显示胶原和网状纤维成分 ,其色彩鲜艳、对比清晰 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　组织制片方法1.1.1　组织固定与脱钙　选用 15 %中性甲醛液固定 3 h,使组织得到及时固定 ,组…     

股骨头坏死经手术治疗后再生骨的电镜标本制备方法

在透射电镜生物样品的制作过程中 ,骨组织的制作是较复杂的 ,脱钙过程、切片刀的要求、切片速度、厚度都与其它组织不同 ,特别是人的股骨头坏死经治疗后再生骨的材料更难得。现将实验过程归纳如下。1　材料与方法1 1　材料　标本来源　被诊断为股骨头坏死病人经安装自制的器械后再生骨 4例。1 2　方法1 2 1　取材　取股骨头坏死病人放置治疗器械后生长出的骨组织 2mm3 左右 ,迅速放入 3%戊二醛固定液中 ,室温固定 7～ 10d。入 0 1M磷酸缓冲液两天 ,每天换液一次。1 2 2　脱钙与固定　在 80 %及 95 %酒精内脱脂各 3h后 ,在EDTA脱钙液 (p…