Ⅲ型胶原、TNF-a在胎膜早破患者胎膜组织中的表达及意义

目的:通过检测Ⅲ型胶原及TNF-α在胎膜早破患者胎膜组织中的表达,探讨二者在胎膜早破发病机制中的作用及其相互关系,分析推断足月胎膜早破(tPROM)与未足月胎膜早破(pPROM)的发病机制是否相同。方法:选取非足月胎膜早破组(pPROM)18例,足月胎膜早破组(tPROM)20例,选取与胎膜早破组孕周相对应的早产组(18例)和足月组(20例)分娩孕妇为对照组。均行剖宫产,胎盘胎膜娩出后避开自然破裂口或人工破口处取胎膜组织,常规HE染色在光镜下进行形态学观察,采用免疫组化法检测Ⅲ型胶原和TNF-α的表达情况,并进行直线相关分析。结果:①胎膜早破组胎膜组织完整性差,羊膜层和绒毛膜层分离现象多见,羊膜层胶原纤维及细胞外基质呈无序状态并减少。②4组胎膜组织中均有Ⅲ型胶原及TNF-α蛋白不同程度的阳性表达,Ⅲ型胶原主要定位于羊膜的ECM中,TNF-α主要定位于绒毛膜滋养细胞胞浆中。③Ⅲ型胶原在pPROM组、tPROM组的表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),在pPROM组的表达亦低于在tPROM组,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。TNF-α在pPROM组、tPROM组的表达水平均高于相应对照组,差异有统计学意义(P<0.01),在pPROM组的表达低于在tPROM组,但无统计学差异(P>0.05)。④Ⅲ型胶原与TNF-α两者在tPROM组中的表达水平呈负相关性(r=-0.655,P<0.01),但两者在pPROM组中的表达水平无相关性(r=-0.385,P>0.05)。结论:①tPROM的发生可能与胎膜的退行性变及各种因素引发的胎膜细胞过度凋亡有关,而pPROM的发生更倾向于胎膜本身结构异常所致。②推断pPROM和tPROM两者是否有胎膜组织结构异常所导致的共同结果,但可能存在不同的机制。     

胎膜早破孕妇胎膜组织中HLA-G、MMP-9的表达及意义

目的研究胎膜早破(PROM)孕妇胎膜组织中人类白细胞抗原-G(HLA-G)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及意义。方法选择2015年8月-2017年1月重庆市东南医院产科收治的200例PROM患者为研究对象,分为足月胎膜早破(tPROM)组和足月前胎膜早破(pPROM)组,每组各100例,同时选择同期入院的200例足月妊娠且未发生PROM的孕妇为对照组。采用免疫组化ENVISION法测定3组患者胎膜各组织中的HLA-G和MMP-9的表达情况,比较各组的差异,并采用Spearman等级相关法分析HLA-G和MMP-9表达阳性率之间的相关性。结果在绒毛膜细胞液中,对照组HLA-G的表达阳性率均高于pPROM组和tPROM组,而pPROM组与tPROM组比较差异无统计学意义(P0.05);3组MMP-9的表达阳性率表现为pPROM组tPROM组对照组(均P0.05);未发现3组患者在羊膜上皮细胞胞质和蜕膜层细胞胞液中的HLA-G、MMP-9的表达阳性率间存在差异;相关性分析结果显示,绒毛膜细胞液中HLA-G与MMP-9的表达阳性率间存在负相关关系(r=-0.441,P0.05)。结论 PROM的发生、发展可能与绒毛膜细胞液中HLA-G及MMP-9的异常表达有关,且两者存在负相关关系。     

血脂多糖结合蛋白、白介素-6浓度与胎膜早破的相关性研究

目的探讨脂多糖结合蛋白(LBP)以及和其紧密相关的IL-6和羊膜炎的关系.方法选取2013年7月到2015年7月我院妇产科收治的20例早产胎膜早破孕妇(pPROM组)、足月胎膜早破孕妇(tPROM组)18例以及正常妊娠初产孕妇20例检测其血脂多糖结合蛋白、白介素-6浓度,应用统计学方法处理数据.结果tPROM、pPROM、正常对照组的白介素-6浓度比较,三组数据差异显著具有统计学意义(P<0.05),pPROM的含量最高,正常对照组的含量最低.相关性分析发现:血脂多糖结合蛋白与绒毛羊膜炎有相关性(r=0.039,P<0.05).结论加强胎膜早破孕妇血清的检测,能够在早期发现并干预出现亚临床宫内感染.     

胎膜早破凋亡机理的探讨

目的:探讨细胞凋亡调控蛋白Bax、Bc l-2、Fas、Caspase-3在胎膜早破发病机制中的作用,凋亡与感染的关系,及临床的防治意义。方法:收集临产前剖宫产分娩的初产妇(包括足月胎膜早破、足月前胎膜早破及正常对照)胎膜51例,应用免疫组化法检测胎膜中Bax、Bc l-2、Fas、Caspase-3的表达情况,并常规HE染色进行胎膜的组织学检查,和经TUNEL原位标记后精确测定胎膜中细胞凋亡指数。结果:胎膜早破组Bax、Fas、Caspase-3阳性表达率分别为91.18%、88.24%、85.29%,明显高于其对照组58.82%、52.94%、23.53%,差异有显著统计学意义(P=0.018,0.014,0.000),但两组间Bc l-2阳性表达率无差异(P=0.105);胎膜早破组羊膜绒毛膜炎的发生率和细胞凋亡指数亦较其对照组高(P=0.035,0.000)。胎膜组织学证实为羊膜绒毛膜炎的和无羊膜绒毛膜炎的其Bax、Bc l-2、Caspase-3阳性表达率无统计学差异(P=0.846,0.332,0.334),但羊膜绒毛膜炎组Fas阳性表达率显著增高(P=0.039),而且细胞凋亡指数亦高有统计学差异(P=0.000)。结论:胎膜早破发生亦与凋亡有关。无论有无感染,促凋亡蛋白Bax、Fas、Caspase-3在胎膜早破患者胎膜组织中呈显著表达,且Fas还参与炎症反应。基因和环境因素共同作用下的细胞凋亡增加可能是胎膜早破的又一发病机理,凋亡与感染可能是胎膜早破的独立致病因素,亦或协同作用。     

巨噬细胞移动抑制因子及基质金属蛋白酶-9在胎膜早破产妇胎膜中的表达及意义

目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胎膜早破(PROM)产妇胎膜中的表达及其相关性,与绒毛膜羊膜炎之间的关系。方法:选择2005年6月～2007年2月期间天津医科大学总医院产科住院分娩的产妇共57例,以足月胎膜早破剖宫产分娩组为研究组,以足月剖宫产分娩组为对照组,采用免疫组织化学方法检测胎膜中MIF、MMP-9的分布及表达,统计学分析其表达的差异性。采用HE染色的方法确诊绒毛膜羊膜炎,并分析其与MIF、MMP-9的关系。同时对MIF、MMP-9进行相关性分析。结果:MIF、MMP-9主要定位于羊膜上皮细胞、基底膜等细胞的胞浆中。足月胎膜早破(PROM)剖宫产分娩组与足月剖宫产分娩组(对照组)比较,胎膜中MIF、MMP-9表达PROM组明显高于对照组,经统计学分析,两组间有显著性差异(P0.05)。组织学诊断为非绒毛膜羊膜炎组与绒毛膜羊膜炎组比较,胎膜中MIF、MMP-9表达绒毛膜羊膜炎组明显高于非绒毛膜羊膜炎组,经统计学分析,两组间有显著性差异(P0.05)。MIF、MMP-9的表达,经统计学分析,二者具有正相关性。结论:MIF、MMP-9在胎膜早破的发病机制中起着重要的作用。MIF通过调控AP-1或NF-kB间接上调MMP-9的表达,使MMP-9活性增加,引起胎膜中胶原的大量降解,导致MMP/TIMP的失衡,从而引起胎膜早破,二者具有相关性。MIF及MMP-9与绒毛膜羊膜炎关系密切,在绒毛膜羊膜炎的炎症机制中发挥着重要的作用。     

胎膜早破孕妇羊水、血清中IL-6、IL-8与基质金属蛋白酶的相关性研究

目的探讨胎膜早破患者羊水及血清中IL-6、IL-8的水平,胎膜组织中基质金属蛋白酶(MMP-9)的表达情况,IL-6、IL-8与MMP-9是否有相关性.方法随机选择胎膜早破孕妇37例为实验组,其中Ⅰ组为足月胎膜早破22例,Ⅱ组为未足月胎膜早破患者15例,正常足月孕妇25例Ⅲ组作为对照组,用酶联免疫吸附实验测定母血及羊水中IL-6、IL-8水平,用免疫组化(SP)法测定胎膜中MMP-9的水平.结果实验组羊水及血清中IL-6、IL-8的水平明显高于对照组,具有显著性差异(P＜0.01);实验组胎膜组织中MMP-9表达水平高于对照组(P＜0.05);实验组母血及羊水中IL-6、IL-8均与胎膜组织中MMP-9有相关性(相关系数分别为0.882,0.729).结论母血及羊水中IL-6、IL-8水平变化可作为胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎的诊断指标之一,基质金属蛋白酶(MMP-9)在感染引起的胎膜早破中起关键性作用,炎性细胞因子IL-6、Ⅱ-8通过诱导MMP-9的合成和活化,间接导致胎膜早破.     

端粒酶在未足月胎膜早破中的表达及临床意义

目的分析胎膜组织中人端粒酶反转录酶(hTERT)、基质金属蛋白酶9 (MMP-9)、抗凋亡蛋白(Bcl-2)的表达及在胎膜早破发生中的作用及临床意义,为孕妇是否会发生胎膜早破进行预测并筛选出潜在的高风险胎膜早破孕妇实施及早干预提供理论依据。方法收集65例未足月胎膜早破(pPROM)患者的胎膜组织为研究组,55例未足月胎膜完整(PTL)患者的胎膜组织为对照组;采用免疫组织化学SP法检测hTERT与MMP-9、Bcl-2蛋白的表达并分析其相关性;采用Western Blot法检测hTERT、MMP-9、Bcl-2蛋白的表达。结果免疫组化结果表明,PTL组和pPROM组胎膜中hTERT阳性表达率分别为87. 27%、49. 23%,MMP-9的阳性表达率分别为56. 36%、83. 08%,Bcl-2的阳性表达率分别为76. 36%、43. 08%。65例pPROM中hTERT与MMP-9蛋白表达呈负相关(r=-0. 294,P 0. 05),hTERT与Bcl-2蛋白表达呈正相关(r=0. 697,P 0. 05)。Western blot结果表明,hTERT与Bcl-2蛋白的表达在pPROM组低于对照组,MMP-9蛋白的表达在pPROM组高于对照组,差异均有统计学意义(P0. 05)。结论 hTERT、MMP-9、Bcl-2在胎膜早破发生中起重要作用,并且存在协调关系。     

TLR2和TLR4在胎膜早破孕妇胎膜中的表达及意义

目的通过检测胎膜早破孕妇胎膜组织中TLR2和TLR4的表达,探讨其与胎膜早破及绒毛膜羊膜炎的关系。方法随机选择胎膜旱破孕妇60例,包括足月前胎膜旱破组（PPROM）30例、足月胎膜旱破组（PROM）30例。选择正常非胎膜早破孕妇30例作为对照组。免疫组化方法测定三组孕妇胎膜组织中TLR2、TLR4的表达。结果（1）胎膜早破孕妇胎膜组织中TLR2和TLR4的表达明显高于正常对照组;（2）有组织学绒毛膜羊膜炎者,其胎膜组织中TLR2和TLR4的表达高于无绒毛膜羊膜炎者。结论TLR2和TLR4在感染引起的胎膜旱破中起一定的作用。     

多项血清因子联合检测在胎膜早破早期宫内感染预测中的意义

目的探讨血清IL-6I、L-8与TNF-a联合检测在胎膜早破早期宫内感染预测中的价值。方法采用酶联免疫吸附法对2008年6月-2010年6月医院收治的52例胎膜早破孕妇终止妊娠时血清IL-6I、L-8、TNF-a进行检测,产后取胎膜组织做病理检查;选择同期正常足月妊娠孕妇50例作为对照组;比较细胞因子水平与绒毛膜羊膜炎严重程度的关系。结果产后胎膜早破组45例胎膜病检确诊为绒毛膜羊膜炎,其血清IL-6I、L-8、TNF-a水平分别为(521.1±237.2)(、740.6±258.5)(、676.2±295.1)pg/ml,明显高于对照组的(293.3±153.7)、(560.3±185.2)(、442.4±289.6)pg/ml,并且其严重程度与IL-6I、L-8、TNF-a水平呈正相关。结论胎膜早破孕妇血清IL-6I、L-8、TNF-a水平明显增高,其含量与绒毛膜羊膜炎的严重程度密切相关,可作为预测绒毛膜羊膜炎的重要指标。     

细胞间黏附分子-1在早产胎膜早破患者胎膜组织中的表达及意义

目的:研究细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在早产胎膜早破患者胎膜组织中的表达及意义。方法:收集产科已确诊的早产胎膜早破的38例患者的胎膜为研究组,收集与研究组孕妇孕周相对应的胎膜完整的自发早产的36例孕妇的胎膜为对照组,应用免疫组化二步法检测两组胎膜ICAM-1的表达,并进行临床病理的相关性分析。结果:两组胎膜中均存在不同程度的ICAM-1阳性表达,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);研究组中有21例(55.26%)存在绒毛膜羊膜炎,对照组中有13例(36.11%)存在绒毛膜羊膜炎,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),研究组ICAM-1的表达与绒毛膜羊膜炎的相关系数为0.90,对照组ICAM-1的表达与绒毛膜羊膜炎的相关系数为0.72,且病理显示炎症越重的胎膜,其ICAM-1的阳性表达越明显。结论:ICAM-1的表达与胎膜的感染程度相关,感染越重的胎膜其ICAM-1的表达越明显,提示妊娠的结局相对严重;ICAM-1在早产早破胎膜中的表达也提示其在早产胎膜早破的发病过程中可能起一定的作用。     

C-反应蛋白、新蝶呤水平与亚临床感染胎膜早破的相关性研究

目的 探讨足月胎膜早破孕妇血清C-反应蛋白(CRP)和新蝶呤(Npt)水平与亚临床感染的相关性,为早期诊断提供参考.方法 选取2009年1月-2012年1月剖宫产分娩的足月胎膜早破孕妇40例为试验组;同期剖宫产分娩的正常足月孕妇40例为对照组,所有孕妇入院后抽取静脉血3 ml,胎盘娩出后取胎膜组织进行病理组织学检查,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定孕妇血清中CRP、Npt水平.结果 试验组孕妇血清CRP(4.55±1.72)mg/L和Npt(15.06±5.05) nmol/L,均高于对照组(3.14±1.16) mg/L和(10.29±3.96) nmol/L(P＜0.05);试验组孕妇血清CRP和Npt水平有一定的相关性(r=0.346,P＜0.05);两组80例孕妇胎膜病理检查,发现绒毛膜羊膜炎38例(试验组29例、对照组9例),血清CRP诊断绒毛膜羊膜炎的灵敏度和特异度分别为63.16％和52.38％,而Npt诊断绒毛膜羊膜炎的灵敏度和特异度分别为73.68％和61.90％.结论 孕妇血清中CRP和Npt水平与亚临床感染足月胎膜早破有相关性,通过检测孕妇血清CRP和Npt水平间接反应亚临床感染胎膜早破孕妇和宫内胎儿感染的严重程度.     

绒毛膜羊膜炎早产子宫平滑肌、胎膜表皮生长因子受体的表达

目的 考察绒毛膜羊膜炎早产子宫平滑肌、胎膜上表皮生长因子受体(EGFR)的表达变化.方法 早产(28～36周妊娠)患者60例,根据分娩后送检胎盘病理有无绒毛膜羊膜炎分为早产合并绒毛膜羊膜炎组即早产感染组孕妇30例,早产无合并绒毛膜羊膜炎组即早产非感染组孕妇30例,对照组为同期正常足月产(37 ～41周妊娠)孕妇30例;各组均行剖宫产,均在术前取子宫下段平滑肌和胎膜,利用免疫组织化学染色法结合图象分析技术检测临产后EGFR在子宫平滑肌、胎膜上的表达.结果 早产感染组孕妇子宫平滑肌细胞、胎膜细胞EGFR表达显著高于早产非感染组和正常足月组,差异均有显著性(P＜0.01);早产非感染组孕妇EGFR水平虽高于正常足月组,但差异无显著性(P＞0.05).结论 绒毛膜羊膜炎能引起孕妇子宫平滑肌、胎膜细胞EGFR表达显著升高.     

NF-κB p65在早产和足月产胎盘组织中的不同表达

目的 比较NF-κB p65蛋白在足月和早产孕妇绒毛、脐带、胎膜等胎盘组织中的表达情况,探索NF-κB p65蛋白在早产发生中的意义.方法 收集本院早产分娩产妇50例,足月分娩产妇30例为对照组,按分娩方式不同分为阴道分娩组和剖宫产组.采用免疫组织化学法对其绒毛、脐带、胎膜和蜕膜等胎盘组织进行NF-κB p65蛋白检测,比较不同组间NF-κB p65蛋白的表达强度.结果 （1）足月产孕妇在不同胎盘组织中NF-κB P65蛋白表达强度均以阴性和弱阳性为主,部分阳性主要表达部位为细胞浆.足月孕妇临产前后绒毛、脐带和胎膜等不同胎盘组织中NF-κB P65蛋白的表达强度差异均无统计学意义（P＞0.05）.（2）早产孕妇胎盘组织中NF-κB p65蛋白表达以阳性和强阳性为主,阳性表达部位为胞浆和胞核均有.早产组孕妇绒毛和胎膜中NF-κB p65蛋白表达水平（18%,56%）高于足月组（6.7%,13.3%,P＜0.01）,早产剖宫产组胎膜、蜕膜NF-κB p65蛋白表达（52.9%,58.8%）高于足月剖宫产组（13.3%,6.7%,P＜0.01）,早产阴道产绒毛、胎膜（24.2%,57.6%）高于足月阴道产（6.7%,13.3%,P＜0.01）.结论 足月分娩孕妇临产前后不同胎盘组织中NF-κB p65蛋白表达强度变化不明显;且与分娩方式无关.NF-κB p65蛋白在早产胎盘组织中表达强度高于足月组,其参与了早产的发生和发展机制.     

蛋白酶在胎膜早破合并羊膜炎中的表达及对妊娠结局的影响

目的探讨氧化型α1-抗胰蛋白酶(ox-AAT)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE),在未足月胎膜早破(pPROM)合并组织学绒毛膜羊膜炎(HCA)中的表达及对妊娠结局的影响。方法选择2012年10月-2013年10月妇产科分娩的60例pPROM产妇为研究对象,将60例pPROM产妇分为观察组27例(合并HCA)和对照组33例(未合并HCA);检测孕妇、新生儿和胎膜中ox-AAT、NE、ox-AAT-mRNA)及NE-mRNA等指标。结果观察组产妇外周血及新生儿脐血ox-AAT、NE表达水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01),观察组胎膜组织ox-AAT、NE、ox-AAT mRNA、NE mRNA表达水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);观察组剖宫产率和新生儿肺炎发生率分别为66.67%和62.96%,高于对照组的30.30%和33.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ox-AAT与NE的水平与HCA的发生及不良妊娠结局密切相关,可通过检测ox-AAT与NE的水平对pPROM合并HCA的发病进行早期诊断与预防。     

基质金属蛋白酶-3基因多态性与早产胎膜早破的相关性研究

目的 研究MMP-3的基因多态性及其在胎膜组织上的表达情况与早产胎膜早破相关性. 方法 荧光定量PCR(SYBR Green法)检测MMP-3m RNA;Western blot法检测MMP-3蛋白表达量;MALDI-TOF质谱分析法对MMP3基因型检测分析. 结果 早产胎膜早破组与足月胎膜早破组、正常足月组胎膜组织上MMP-3m RNA含量比较,差异有统计学意义;MMP4蛋白表达量早产胎膜早破组、足月胎膜早破组和正常足月组分别为(0.76±0.10)、(0.40±0.06)和(0.25 ±0.03),早产胎膜早破组高于足月胎膜早破组及正常足月组,差异有统计学意义;早产胎膜早破组MMP-3(rs617819) C/C、G/C、G/G基因型分布频率、C等位基因分布频率与足月胎膜早破组相比,差异有统计学意义;MMP-3(rs35068180) A/A、A/-、-/-基因型分布频率、A等位基因分布频率早产胎膜早破组与其他各组比较,差异有统计学意义. 结论 MMP-3基因多态性与早产胎膜早破发生存在一定相关性,MMP-3(rs35068180) A/A、A/-、-/-各基因型、MMP-3(rs35068180)A等位基因有可能是早产胎膜早破的高危易感因素.     

绒毛膜羊膜炎相关发病因素分析与对策

目的 探讨绒毛膜羊膜炎的相关发病因素及其对新生儿结局的影响和处理对策.方法 回顾性分析83例绒毛膜羊膜炎的产妇(观察组)和同期排除绒毛膜羊膜炎产妇142例(对照组)的一般资料,分析孕期影响因素,统计母婴并发症.结果 两组孕产妇在围产期保健、孕20周前访视、胎膜早破、死胎发生率方面差异有显著性(P＜0.05);两组胎儿的出生孕周、出生体重差异无统计学意义(P＞0.05),Apgar评分、早产率、低体重率差异有统计学意义(P＜0.05).观察组比对照组更易出现血糖不稳定及心、脑损伤(P＜0.05).结论 胎膜早破易引起绒毛膜羊膜炎,不利于妊娠结局;建议加强孕产期保健宣传,提倡孕期访视及正规产检.     

胎膜早破外周血单个核细胞Th1/Th2免疫偏移的临床研究

目的 检测胎膜早破(PROM)外周血单个核细胞(PBMC)产生Th1/Th2细胞因子水平差异,探讨PROM 的Th1/Th2免疫偏移.方法 对足月胎膜早破(PROM)组39例、未足月胎膜早破(PPROM)组34例和正常足月妊娠组(对照组)38例3组的PBMC经植物血凝素(PHA)诱导后,用ELISA法测定上清液中的γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,同步检查绒毛羊膜炎病理改变,用PV-9000免疫组化两步法检测IFN-γ和IL-4在胎盘局部的表达.结果 3组PBMC分泌IFN-γ水平总体差异有统计学意义(F=36.313,P＜0.01);其中PROM组IFN-γ为(158.6±38.9)ng/L,对照组为(105.3±33.6)ng/L,PPROM组为(201.4±29.2)ng/L,PROM组较对照组升高(q=6.438,P＜0.05),但低于PPROM组(q=4.033,P＜0.05);3组PBMC分泌IL-4水平总体差异有统计学意义(F=23.291,P＜0.05);其中PROM组IL-4水平较对照组降低(q=2.051,P＜0.05),但高于PPROM组(q=2.842,P＜0.05);3组IFN-γ/IL-4比值总体差异有统计学意义(F=15.262,P＜0.05);PPROM组绒毛羊膜炎病理改变明显,PROM组绒毛羊膜炎改变较轻;3组间IFN-γ在胎盘局部表达的总体差异有统计学意义(F=7.382,P＜0.05),PPROM组最高;3组间IL-4表达的总体差异有统计学意义(F=5.878,P＜0.05),PPROM组最低.结论 胎膜早破的免疫偏移状态表现为Th1型增强和Th2型减弱,Th1/Th2型免疫平衡指数IFN-γ/IL-4比值明显增高.     

PDTC对百草枯致肺纤维化大鼠结缔组织生长因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的动态变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的干预效果,探讨PQ致肺纤维化机制及PDTC干预作用.方法 SD大鼠随机分为对照组(6只)、PQ染毒组(56只)、PDTC干预组(46只).染毒组和干预组给予PQ(80 mg/kg)一次性灌胃后2h,染毒组给予等量生理盐水腹腔注射,PDTC干预组给予PDTC(100mg/kg)一次性腹腔注射;对照组给予生理盐水1 ml/kg灌胃后2h,给予等量生理盐水腹腔注射.于不同处理后1、3、7、14、25、56 d蛋白免疫印迹法(Western blot)测定大鼠肺组织CTGF蛋白表达;实时荧光定量多聚酶链式反应(real-time PCR)测定CTGF、Col Ⅰ、ColⅢmRNA表达水平;同时测定肺组织羟脯氨酸(hyp)含量,观察中毒大鼠的肺组织病理变化.结果 染毒组大鼠肺组织CTGF蛋白表达随时间延长而逐渐升高,3～14d升高幅度缓慢,28～56d增幅较大,各时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).染毒组大鼠肺组织CTGF mRNA表达水平于染毒后1d即明显升高,3～14d表达迅速升高,28～56 d维持在较高水平,各时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).染毒组染毒后1、3 d Col Ⅰ mRNA表达无明显变化,7d表达略微增强,14～56 d水平大幅度升高,与对照组比较,7～56 d mRNA水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);染毒组ColⅢmRNA水平于染毒后1d即开始升高,7d达到高峰,之后呈下降趋势,各时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);Masson染色可见染毒后14～28 d成纤维细胞大量增殖,胶原纤维数量逐渐增多.与染毒组比较,PDTC干预组大鼠肺组织CTGF蛋白表达降低、CTGF、Col Ⅰ、ColⅢmRNA表达下调,相应时点的差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 CTGF表达持续增高;可能通过上调Col Ⅰ、ColⅢ转录水平,增加胶原分泌和基质合成,在PQ所致肺纤维化中起重要作用;PDTC抑制了上述因子的表达,可以减轻PQ中毒大鼠的肺损伤.     

地塞米松对羊水过少胎盘和胎膜组织中水通道蛋白8表达的影响及其机制研究

目的探讨地塞米松对羊水过少胎盘和胎膜组织中水通道蛋白8(AQP8)表达的影响及其可能机制。方法选取2014年1月-12月间在该院产科住院的足月羊水过少孕妇20例为研究组,选取同期足月正常妊娠孕妇20例为对照组。采用RTPCR技术、免疫组化法检测2组孕妇羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞、胎盘合体滋养细胞中AQP8 mRNA及蛋白的表达情况;在研究组胎盘和胎膜组织细胞中分别加入不同剂量的地塞米松,孵育24 h后再次检测胎膜和胎盘组织中AQP8 mRNA的表达水平。结果研究组羊膜上皮细胞、胎盘合体滋养细胞的AQP8 mRNA表达强度均明显低于对照组(t值分别为6.931、8.550,均P0.05);研究组绒毛膜滋养细胞AQP8 mRNA表达强度与对照组之间差异无统计学意义(t=0.439,P0.05)。2组AQP8蛋白在3种细胞中均有表达,均位于细胞膜和细胞质中,表现为棕黄色颗粒。研究组羊膜上皮细胞和胎盘合体滋养细胞的AQP8蛋白表达水平明显低于对照组(t值分别为9.660、7.135,均P0.05);2组AQP8蛋白在绒毛膜滋养细胞中的表达差异无统计学意义(t=0.193,P0.05)。2组羊膜上皮细胞、胎盘合体滋养细胞的AQP8 mRNA的表达水平随着地塞米松浓度的增加而逐渐提升;当浓度为50μg/ml时,2组羊膜上皮细胞、胎盘合体滋养细胞的表达水平明显高于浓度为0μg/ml时,差异有统计学意义(t值分别为18.924、25.037,均P0.01)。结论羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞和羊水量存在一定相关性;地塞米松可促进AQP8mRNA的表达,其可能机制为通过上调羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞中AQP8的表达而影响羊水量的稳态。     

胎膜早破孕妇羊水、血清中IL-6、IL-8与基质金属蛋白酶的相关性研究

目的:探讨胎膜早破患者羊水及血清中IL-6、IL-8的水平,胎膜组织中基质金属蛋白酶(MMP-9)的表达情况,IL-6、IL-8与MMP-9是否有相关性。方法:随机选择胎膜早破孕妇37例为实验组,其中Ⅰ组为足月胎膜早破22例,Ⅱ组为未足月胎膜早破患者15例,正常足月孕妇25例Ⅰ组作为对照组,用酶联免疫吸附实验测定母血及羊水中IL-6、IL-8水平,用免疫组化(SP)法测定胎膜中MMP-9的水平。结果:实验组羊水及血清中IL-6、IL-8的水平明显高于对照组,具有显著性差异(P<0.01);实验组胎膜组织中MMP-9表达水平高于对照组(P<0.05);实验组母血及羊水中IL-6、IL-8均与胎膜组织中MMP-9有相关性(相关系数分别为0.882,0.729)。结论:母血及羊水中IL-6、IL-8水平变化可作为胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎的诊断指标之一,基质金属蛋白酶(MMP-9)在感染引起的胎膜早破中起关键性作用,炎性细胞因子IL-6、II-8通过诱导MMP-9的合成和活化,间接导致胎膜早破。