脂联素对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞黏附因子mRNA表达的影响

目的 探讨脂联素对肿瘤坏死因子(TNF-α)引起的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVCEs)分泌黏附因子的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为对照组、TNF-α刺激组和脂联素干扰组.用PCR方法检测脂联素对人脐静脉内皮细胞VCAM-1,ICAM-1和E-selectin mRNA表达的影响.结果 HUVECs经TNF-α刺激6 h后其VCAM-1、ICAM-1和E-selectin mRNA表达较对照组相比明显增强(P<0.05);当HUVECs在TNF-α刺激之前首先与不同浓度的脂联素共同孵育一段时间后,其VCAM-1、ICAM-1和E-selectin mRNA表达与单纯给予TNF-α刺激相比明显减弱(P<0.05),并呈现剂量依赖性.结论 脂联素可以通过抑制血管内皮细胞黏附因子的表达水平来调节血管内皮细胞的炎症反应,从而发挥其抗炎,抗动脉粥样硬化的作用.     

脂联素和TNF-α在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 检测子痫前期患者胎盘中脂联素及TNF-α的表达并探讨两因子之间的相关性.方法 采用放射免疫分析的方法检测子痫前期组和正常对照组胎盘脂联素及TNF-α的表达水平.结果 子痫前期组胎盘脂联素表达水平均低于正常组(P<0.01,P<0.01);子痫前期组胎盘TNF-α表达水平显著高于正常组(P<0.05,P<0.01);子痫前期组中脂联素与TNF-α呈负相关性(r=-0.536及r=-0.554).结论 脂联素和TNF-α参与子痫前期的发病,且两者之间存在负相关性.     

脂联素与肿瘤坏死因子-α在子痫前期的表达及相关性研究

目的 检测子痫前期患者血清及胎盘中脂联素和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达并探讨两者之间的相关性.方法 采用酶联免疫吸附试验及免疫组化法分别检测30例轻度、10例重度子痫前期患者及20例正常孕妇的血清及胎盘中脂联素及TNF-α的表达水平.结果 ①轻度、重度子痫前期血清TNF-α水平明显高于正常组,而血清脂联素水平明显低于正常组,重度组与正常组差异有显著性意义(P＜0.05).②重度组胎盘脂联素表达与正常组相比差异有极显著性意义(P<0.01);轻度及重度子痫前期胎盘TNF-α表达显著高于正常组(P<0.05及P<0.01).③重度组脂联素与TNF-α呈负相关(r=-0.512,P<0.05).结论 脂联素及TNF-α参与子痫前期的发病,且TNF-α可以调节脂联素的水平.     

不同浓度脂联素对HepG2细胞内甘油三酯含量的影响及其机制

目的:观察不同浓度脂联素对HepG2细胞内载脂蛋白A5（apoA5）mRNA和蛋白表达水平及甘油三酯（TG）含量的影响,探讨脂联素与TG之间的剂量依赖关系,为研究脂联素降低TG含量的机制奠定基础。方法:将正常生长的HepG2细胞分为对照组、低剂量脂联素组、中剂量脂联素组和高剂量脂联素组,分别用不同浓度（0、12.5、25.0和50.0 mg·L^-1）脂联素作用24 h,酶法检测各组HepG2细胞内TG含量,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞内apoA5 mRNA表达水平,Western blotting法检测HepG2细胞内apoA5 mRNA蛋白表达水平。结果:与对照组比较,脂联素各组HepG2细胞内TG含量均明显降低(P<0.05）;与低剂量脂联素组比较,中、高剂量脂联素组HepG2细胞内TG含量均明显降低(P<0.05）,但高剂量组与中剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,脂联素各组HepG2细胞内apoA5 mRNA和蛋白表达均明显增加(P<0.05）; 与低剂量脂联素组比较,中、高剂量脂联素组HepG2细胞内apoA5 mRNA和蛋白表达均明显增加(P<0.05）,但高剂量组与中剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:脂联素能降低HepG2细胞TG含量,并呈剂量依赖关系,提示脂联素降低肝脏中TG含量可能与其增加apoA5表达有关。     

脂联素对TNF-α介导的血管炎症反应的影响及意义

目的:探讨脂联素对TNF-α引起的血管内皮细胞炎症反应的影响.方法:体外培养HUVEC,随机分为正常组、单纯TNF-α刺激组和脂联素与TNF-α联合刺激组;HUVEC与脂联素联合孵育一段时间后再给予TNF-α刺激与单纯TNF-α刺激做对照,观察其N0、NOS、ET-1及MCP-1的表达情况.结果:HUVEC经TNF-α(10ng/ml)刺激6～12个小时后其NO、iNOS、ET-1及MCP-l的表达明显增加(p＜0.01);HUVEC在TNF-α刺激之前与脂联素共同孵育一段时间后,血管内皮细胞NO、iNOS、ET-1及MCP-1的表达明显降低(p＜0.01).结论:在体外,脂联素可以通过抑制某些炎症因子的表达水平来调节血管内皮细胞的炎症反应.     

脂蛋白脂酶在肝细胞脂肪变性过程中的表达及脂联素的干预作用

目的 探讨脂联素干预脂肪变性肝细胞模型中肝细胞脂蛋白脂酶(LPL)的表达及意义.方法 以正常肝细胞株L02进行细胞培养,用油酸诱导建立肝细胞肪变性模型,在此模型中给予脂联素刺激.采用油红O染色观察细胞内的脂滴,RTPCR法检测LPL mRNA的表达,Weston blot检测LPL蛋白的表达.结果 红O染色显示在72h干预组肝细胞内的脂滴明显少于脂肪变组,干预组(T组)LPL的表达上调,于6h开始增高,24h表达最强,与脂肪变组(F组)相比差异统计学意义(P＜0.01).结论 脂联素可能通过增强LPL表达来减少肝细胞内甘油三酯的合成,从而缓解肝细胞脂肪变性.     

脂联素对TNF-α介导的血管炎症反应的影响

目的:探讨脂联素对肿瘤坏死因子(TNF-α)引起的血管内皮细胞炎症反应的影响.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).随机分为对照组,TNF-α刺激组和脂联素 TNF-α刺激组.HUVEC与脂联素联合孵育一段时间后再给予TNF-α刺激与单纯TNF-α刺激做对照,分别采用化学法,放免法及ELISA法检测脂联素对血管内皮细胞NO,iNOS,ET-1及MCP-1蛋白表达的影响.结果:HUVEC经TNF-α刺激6～12 h后其NO,iNOS,ET-1及MCP-1蛋白的表达(607.7±7.6,42.2±2.2,199.3±11.9,167.7±15.9)与对照组(543.5±2.2,23.8±2.0,148.4±5.3,128.0±8.4)相比明显增强(P＜0.05);当HUVEC在TNF-α刺激之前首先与脂联素共同孵育一段时间后,则血管内皮细胞NO,iNOS,ET-1及MCP-1蛋白的表达(565.7±13.0,36.5±2.7,170.8±8.3,142.6±5.6)与单纯给予TNF-α刺激相比明显减弱(P＜0.05).结论:脂联素可以通过抑制血管内皮细胞某些炎症因子的表达水平来调节血管内皮细胞的炎症反应,从而发挥其抗炎,抗动脉粥样硬化的作用.     

球状脂联素抑制晚期糖基化终产物诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的机制研究

目的 观察球状脂联素(globular adiponectin,gAd)是否抑制晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡,并探讨其相关的机制.方法 用不同浓度(100、200和400 mg/L)AGEs培养HUVECs 24 h或48 h,其中一组预先用3mg/L gAd处理24 h.MTT比色法测定细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染标记流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫印记检测phospho一α AMPK和αAMPK蛋白表达,以及TT-PCP,检测内皮细胞脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)mRNA的表达.结果 与对照组比较,随着AGEs浓度的增加,细胞活性显著下降(P<0.01),细胞凋亡率显著增加(P<0.01).与200mg/L AGEs组比较,经gAd预处理后的200mg/L AGEs组细胞活性显著增加(P<0.01),细胞凋亡率显著下降(P<0.01),P-αAMPK/αAMPK蛋白表达显著增加(P<0.01),AdipoR1 mRNA表达显著增加(P<0.01).结论 gAd可能通过激活AMPK/AdipoR1通路抑制AGEs诱导HUVECs发生凋亡.     

脂联素对非酒精性脂肪性肝炎的作用及其机制

目的 探讨脂联素对非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的治疗作用及其机制.方法 给予NASH大鼠5周脂联素治疗后,取血液及肝脏标本进行肝湿质量、肝三酰甘油(triglyceride,TG)含量及血清学相关指标检测,天狼星红-苦味酸染色法观察肝组织病理形态学变化.同时检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及肝组织TNF-α mRNA表达水平;α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)免疫组织化学染色用以观察脂联素对肝组织肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)活化的影响.结果 给予脂联素治疗后,NASH大鼠肝湿质量、肝脏TG值与模型组比较显著降低(P<0.05),血清学指标天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、TG、总胆固醇、透明质酸、血糖、胰岛素等显著改善,脂肪肝Brunt分级有显著降低(P<0.05);血清TNF-α水平及肝组织TNF-α mRNA表达显著降低(P<0.05),α-SMA免疫组织化学染色显著降低(P<0.05).结论 脂联素可通过改善胰岛素抵抗、抑制炎性因子TNF-α表达和HSC活化等多个途径治疗NASH.     

急性脑梗死患者血清脂联素与肿瘤坏死因子-α、超敏C-反应蛋白的相关性

目的 检测急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)患者血清脂联素、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-alpha,TNF-α)、超敏C-反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hsCRP)水平,并探讨其相关性.方法 ACI患者64例(ACI组),健康体检者20例为正常对照组(对照组),于急性期和恢复期分别检测其血清脂联素、TNF-α、hsCRP、血脂水平,并进行比较分析.结果 (1)ACI组急性期和恢复期血清脂联素、HDL-C明显低于对照组(P<0.01);TNF-α,hsCRP,TG,LDL-C高于对照组(P<0.05,P<0.01).(2)与恢复期比较.ACI组急性期脂联素、HDL-C明显低于恢复期(P<0.01),TNF-α,hs-CRP,LDL-C水平显著高于恢复期(P<0.05,P<0.01).相关分析显示:脂联素与TNF-α(r=-0.334,P<0.01)、hsCRP(r=-0.358,P<0.01)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(r=-0.281,P<0.05)呈负相关,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈正相关(r=0.286,P<0.05);TNF-α(r=0.404,P<0.01)、hsCRP(r=0.356,P<0.01)与LDL-C呈正相关,与HDL-C无相关性;TNF-α与hsCRP(r=0.263,P<0.05)、TG(r=0.457,P<0.01)、TC(r=0.417,P<0.01)呈正相关.结论 脂联素、TNF-α、hs-CBP、LDL-C与ACI的发生和发展密切相关,脂联素可能是ACI形成中炎症反应的保护因素.     

内脂素在糖尿病大鼠肝组织的表达及其对肝糖代谢的作用

目的：检测糖尿病大鼠肝组织内脂素（visfatin）的表达,探讨内脂素在肝糖代谢的作用。方法雄性 SD 大鼠,分为5组：正常对照组（NC 组）、肥胖组（DIO 组）、糖尿病组（DM 组）、胰岛素治疗组（INS 组）、二甲双胍治疗组（MET 组）。检测大鼠空腹血糖（FPG）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、游离脂肪酸（FFA ）、空腹胰岛素（Fins）水平;RT‐PCR 测定大鼠肝组织 visfatin 、葡萄糖6磷酸酶（G‐6‐Pase）mRNA 的水平,Western blot 检测 visfatin 、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶‐α（p‐AMPKα）和腺苷酸活化蛋白激酶‐α（AMPKα）蛋白表达量。结果 DM 组 FBG 较 NC 组、DIO 组均显著升高（P＜0．01）;INS 组、MET 组 FBG 较 DM 组显著下降（P＜0．01）。 DIO 组、DM 组 HOMA‐IR 均较 NC 组显著升高（P＜0．01）;DM 组 HOMA‐IR 较 DIO 组显著升高（P ＜0．01）。DIO 组、DM 组 ISI 均较 NC 显著降低（P＜0．01）,DM 组 ISI 较 DIO 组显著降低（P＜0．01）。 DIO 组 TG 较 NC 组显著升高（P＜0．01）;INS 组、MET 组 TG 较 DM 组显著降低（P＜0．05）,DM 组、INS 组、MET 组 TG 、TC 均较 NC 组升高（P＜0．05）。 DM 组、MET 组、INS 组 FFA 均较 NC 组明显升高（P＜0．05）;DM 组 FFA 较 DIO 组明显升高（P＜0．05）。 DM 组 visfatin mRNA 表达较NC 组、DIO 组显著升高（P＜0．05）;INS 组、MET 组 visfatin mRNA 较 DM 组显著降低（P ＜0．01）。 DM 组、MET 、INS 组 G‐6‐Pase mRNA 较 DIO 组显著升高（P＜0．05）,MET 组 G‐6‐Pase mRNA 较 DM 组显著降低（P ＜0．05）。 DM 组、INS 组、MET 组visfatin 蛋白表达较 NC 组显著升高（P＜0．05）;DM 组、MET 组、INS 组 AMPKα蛋白表达较 NC 组显著降低（P＜0．05）,DM 组AMPKα蛋白表达较 DIO 组显著降低（P ＜0．05）;DIO 组、DM 组、INS 组、MET 组 p‐AMPKα蛋白表达较 NC 组显著降低（P＜0．01）。结论大鼠肝组织 visfatin 表达可能与肝糖脂代谢有关联,visfatin 可能未参与到二甲双胍激活 AMPK 降低血糖的机制中。     

姜黄素对肾脏缺血再灌注损伤大鼠模型保护作用的研究

目的:探讨姜黄素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、姜黄素+缺血再灌注组(C组)和姜黄素+缺血再灌注组+锌-原卟啉组(D组),各15只。C组和D组术前5 d腹腔注射姜黄素100 mg/kg,A、B组注射等量的0.9%氯化钠注射液。D组大鼠术前60 min腹腔注射锌-原卟啉20μmol/kg。手术游离并阻断双肾肾蒂血管,60 min后恢复灌注,分别于4 h、12 h、24 h取血检测血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血红素氧合酶-1(HO-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,24 h切除肾组织检测肾组织髓过氧化物酶(MPO)活性的表达水平。结果:C组和D组血清SCr、BUN、TNF-α、ICAM-1及肾组织MPO水平均高于A组,但低于B组(P<0.05~P<0.01);HO-1的表达低于A组,高于B组(P<0.05~P<0.01)。D组TNF-α和ICAM-1表达水平在各时间点均高于C组(P<0.05~P<0.01),SCr、BUN及肾组织MPO的表达在12 h和24 h高于C组(P<0.05~P<0.01),在4 h时差异无统计学意义(P>0.05);HO-1在各时间点表达均低于后者(P<0.05~P<0.01)。结论:姜黄素对肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用,能够有效减轻肾组织的炎性及氧化应激损害。HO-1可能参与姜黄素对肾脏的保护。     

小干扰RNA干扰核因子κB信号通路对内毒素刺激巨噬细胞释放肿瘤坏死因子α的影响

目的 探讨小于扰RNA(siRNA)抑制核因子κB(NF-κB)信号通路对细菌脂多糖(LPS)刺激的巨噬细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 人单核细胞白血病THP-1细胞经氟波酯诱导为巨噬细胞后分2组,分别感染应用分子克隆技术构建的针对NF-κB P65的siRNA逆转录病毒质粒(siRNA病毒组)及乱序(Scramble)对照序列逆转录病毒质粒(Scramble病毒组).用终浓度50μg/ml的LPS持续刺激2组巨噬细胞,分别应用RT-PCR技术检测LPS刺激不同时间巨噬细胞NF-κB P65 mRNA和TNF-α mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测NF-κB P65蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验检测巨噬细胞培养上清液TNF-α含量.结果 LPS刺激12和24 h,siRNA病毒组巨噬细胞NF-κB P65 mRNA表达水平(0.97±0.02,0.89±0.01)明显低于Scramble病毒组(1.01±0.03,0.97±0.01,均P＜0.05);LPS刺激24和72 h,siRNA病毒组NF-κB P65蛋白表达水平(0.95±0.04,0.94±0.01)明显低于Scramble病毒组(1.07±0.06,1.03±0.05,均P＜0.05).LPS刺激4、8、12和24 h的各时点,siRNA病毒组TNF-α mRNA表达水平均明显低于Scramble病毒组(0.92±0.02比0.98 ±-0.01,0.86±0.02比1.00±0.01,0.79±0.03比1.01±0.01,0.78±0.03比1.02±0.01,均P＜0.05).LPS刺激2、4、8、24、36、48、54和72 h的各时点,siRNA病毒组巨噬细胞培养上清液TNF-α含量均明显低于Sramble病毒组(均P＜0.01).结论 针对NF-κB P65的siRNA可抑制NF-κB信号通路的功能活性,进而抑制内毒素刺激引起的巨噬细胞活化和TNF-α释放,提示RNA干扰技术在急性肺损伤早期过度炎症反应的防治中具有潜在应用价值.     

2型糖尿病患者肿瘤坏死因子α及环氧合酶2组蛋白H3乙酰化研究

目的 探讨2型糖尿病患者外周血单个核细胞(PBMC)肿瘤坏死因子α(TNF-α)及环氧合酶2(COX-2)mRNA表达情况及基因启动子区域组蛋白H3乙酰化状态.方法 分离12例2型糖尿病患者及12名正常对照PBMC,实时定量-PCR法检测TNF-α及COX-2 mRNA表达情况.染色质免疫沉淀技术检测TNF-α及COX-2启动子区H3乙酰化状态.结果 2型糖尿病患者PBMC TNF-α及COX-2 mRNA表达比正常对照组增高,分别为正常对照的2.28±0.09倍及2.78±0.26倍(P<0.05);TNF-α启动子区H3高乙酰化(1.54±0.43比0.97±0.39,P=0.0094);COX-2启动子区H3高乙酰化(1.20±0.58比0.64±0.21,P=0.0161).结论 2型糖尿病患者PBMC TNF-α及COX-2启动子区域H3高乙酰化可能导致TNF-α及COX-2基因过表达,从而在其发病过程中起重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the expression of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and cyclooxygenase-2(COX-2)mRNA and evaluate the status of histone H3 acetylation at TNF-α and COX-2 promoter in peripheral blood mononuclear cells ( PBMCs) from type 2 diabetics. Methods The PBMCs from 12 type 2 diabetics and 12 healthy controls were isolated by Ficoll-Hypaque density gradient centrifugation.The differential expression of TNF-α and COX-2 mRNA was measured by real-time PCR ( polymerase chain reaction). Chromatin immunoprecipitation analysis was used to detect the status of H3 acetylation at TNF-α and COX-2 promoter region. Results TNF-α and COX-2 mRNA were overexpressed in PBMCs from Type 2 diabetics as compared with normal controls ( 2. 28 ± 0. 09 fold and 2. 78 ± 0. 26 fold ) . ( P < 0. 05 ).Compared with normal controls, H3 acetylation at the TNF-α (1. 54 ± 0. 43 vs 0. 97 ± 0. 39, P = 0. 0094) and COX-2 (1. 20 ±0. 58 vs 0. 64 ±0. 21 ,P =0. 0161) gene promoter region was elavetedin PBMCs from Type 2 diabetic patients. Conclusion Increased H3 acetylation at TNF-α and COX-2 promoter in PBMCs from type 2 diabetics may contribute to the pathogenesis of type 2 diabetes through the elevated expressions of TNF-α and COX-2.     

糖尿病周围神经痛患者血清促炎细胞因子水平的相关性研究

目的 检测糖尿病周围神经痛患者血清中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、肿瘤坏死因子(TNF-α),白介素6(IL-6)的水平变化,探讨促炎细胞因子在糖尿病周围神经痛中所发挥的作用.方法 选择无并发症的糖尿病患者(DM)28例、糖尿病周围神经病变患者(DPN)32例、糖尿病周围神经痛患者(DPNP)28例及正常对照人群28名,采用双抗体酶联免疫吸附法检测血清MIF、TNF-α、IL-6的水平.结果 DM及DPN、DPNP组的血清MIF、TNF-α、IL-6水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.05);DPN及DPNP组的血清MIF、TNF-α水平又均高于DM组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.001,P<0.01),而DPN和DPNP组间血清MIF、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05);DM、DPN、DPNP组三者间血清IL-6水平差异无统计学意义(P>0.05).相关性分析结果 显示:血清MIF、TNF-α仅及IL-6水平三者间相互呈正相关(r=0.337,P<0.01;r=0.216,P<0.001;r=0.281,P<0.05).结论血清促炎细胞因子MIF、TNF-α、IL-6水平的升高可能参与了糖尿病及糖尿病周围神经病的发生、发展,但在糖尿病周围神经痛的发生中可能不起主导作用.     

MANF蛋白表达水平与肝纤维化程度的相关性研究

目的：探讨中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)蛋白在慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者肝纤维化发生发展中的作用及其与临床特点的相关性。方法采用相对和绝对定量同位素标记( ITRAQ)蛋白质组学和免疫组化法检测肝脏穿刺组织中MANF蛋白的表达,分析其表达水平与肝脏炎症纤维化分期的关系;采用实时荧光定量PCR技术检测正常对照( NC)、乙肝病毒携带者( ASC)、慢性乙型肝炎患者( CHB)及乙肝后肝硬化患者( LC)外周血白细胞中MANF mRNA的表达水平,分析其与不同阶段慢性HBV感染者的临床病毒学和生化学指标的相关性。结果 MANF蛋白主要在肝细胞质中表达,其表达水平随着肝脏炎症及纤维化的程度加重而升高。 NC 组、ASC 组和 CHB 组分别与LC组比较,MANF mRNA的表达差异均有统计学意义( P<0．01)。 MANF mRNA 的表达水平在乙肝病毒表面抗原(HBsAg)<1．5×106 IU/L、(1．5×106~2．0×107) IU/L和>2．0×107 IU/L 3组间差异有统计学意义(P<0．05);在乙肝病毒e抗原( HBeAg)阳性组与阴性组之间差异有统计学意义(P<0．01);在胆红素正常组与异常组之间差异有统计学意义( P <0．01)。结论 MANF 蛋白可能参与了慢性HBV感染者肝纤维化的发生发展,并与其临床特点相关。     

非诺贝特对胰岛素抵抗大鼠肌肉过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子1α基因表达的影响

目的 观察非诺贝特干预对高游离脂肪酸(FFA)所致胰岛素抵抗大鼠肌肉组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子1α(PGC-1α)基因表达的影响.方法 将8周龄体重300 g左右雄性SD大鼠分为3组,即正常对照组(10只)、脂肪乳输注组(FFA,10只)及非诺贝特+脂肪乳输注组(F-FFA,10只).3组大鼠在空腹8～10 h后给予颈静脉插管,其中对照组以1 ml/h的速度输注生理盐水6 h,FFA组以1 ml/h的速度输注20%脂肪乳(加入40 U/ml肝素)6 h,F-FFA组为正常大鼠以非诺贝特(100 mg·kg-1·d-1)管喂14 d后继以1 ml/h的速度输注20%脂肪乳(加入40U/ml肝素)6 h,在输注4 h后开始做正常血糖高胰岛素钳夹试验,以葡萄糖输注率(GIR)评价胰岛素敏感性.试验结束后,取骨骼肌肌肉组织,待提取总RNA,行实时定量PCR检测PGC-1α基因的表达.结果 (1)输注脂肪乳6 h后,FFA组血FFA、胰岛素水平较对照组明显增高,F-FFA组血FFA、胰岛素水平较FFA组明显下降[FFA:对照组0.46(0.08～0.72)mmol/L,FFA组1.45(0.87～1.70)mmol/L,F-FFA组0.54(0.06～0.84)mmol/L,均P＜0.01;胰岛素:对照组(6.56±0.78)μIU/ml,FFA组(10.54±0.86)μIU/ml,F-FFA组(6.69±0.84)μIU/ml,均P＜0.01].(2)FFA组GIR较对照组下降约55.6%,存在明显的胰岛素抵抗,非诺贝特干预逆转了约110%[对照组(25.13±2.10)mg·kg-1·min-1,FFA组(10.16±0.75)mg·kg-1·min-1,F-FFA组(21.72±2.89)mg·kg-1·min-1,均P＜0.01].(3)FFA组肌肉组织PGC-1α基因表达较对照组减少约71%,非诺贝特干预后肌肉PGC-1αmRNA表达较FFA组增加约1.50倍(P＜0.01).结论 (1)升高循环中的游离脂肪酸水平可以导致胰岛素抵抗并影响肌肉组织PGC-1α基因的表达.(2)非诺贝特可以改善胰岛素抵抗及PGC-1α基因表达.     

青藤碱对佐剂性关节炎大鼠TLR4/MyD88信号通路的影响

目的:探讨青藤碱对佐剂性关节炎大鼠TLR4/MyD88信号通路诱导炎症的影响。方法:选择清洁级SD大鼠40只,随机分为模型组、青藤碱组、甲氨蝶呤组及正常对照组。前3组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂诱发大鼠佐剂性关节炎模型,正常对照组大鼠右后足跖皮内注射等量0.9%氯化钠注射液。4组分别干预4周后,取膝关节滑膜,采用Real-time PCR法检测TLR4 mRNA、MyD88 mRNA表达,ELISA法检测炎性因子TNF-α。结果:模型组大鼠膝关节滑膜组织TLR4 mRNA、MyD88 mRNA及炎性因子TNF-α表达均较正常对照组明显升高(P<0.01)。经青藤碱治疗后,TLR4 mRNA、MyD88 mRNA及炎性因子TNF-α表达均较模型组明显下降(P<0.01)。结论:青藤碱可改善佐剂性关节炎大鼠的关节炎症,该作用可能与抑制TLR4/MyD88信号通路有关。