哮喘患儿外周血淋巴细胞CD23、CD40L及IgE检测

目的:研究哮喘儿童白细胞表面分化抗原CD23及CD40L的表达与血清IgE的相关性。方法:哮喘发作儿童 40例,缓解期 25例;肺炎患儿 16例,正常儿童 28例,利用流式细胞分析技术检测外周血CD23、CD40L阳性淋巴细胞的百分率,同时用免疫化学发光法检测血清IgE水平。结果: 哮喘发作组CD23、CD40L的百分率及IgE水平均明显高于哮喘缓解组、肺炎组和正常组(P均<0. 01);哮喘缓解组 3项指标明显高于肺炎组和正常组 (P均 <0. 01);哮喘发作组CD23、CD40L与IgE呈正相关(r分别为 0. 74、0. 81,P均<0. 01)。结论:CD23、CD40L的表达在哮喘发作中发挥重要作用。     

支气管哮喘患者外周血CD4+CXCR5+ 滤泡辅助性T细胞样细胞的变化及其意义

目的:探讨CD4+CXCR5+T细胞在支气管哮喘患者外周血中的数量变化及其临床意义。方法:选取23例急性发作期、17例缓解期哮喘患者及20例健康对照作为研究对象。采用流式细胞术检测外周血中CD4+CXCR5+T细胞占CD4+T细胞的百分率,并进行肺功能检查,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清总IgE、白细胞介素(interleukin,IL)-4和IL-21水平。结果:①急性发作组哮喘患者外周血CD4+CXCR5+T细胞占CD4+T细胞的比例高于健康对照组[(12.6±0.5)%vs(9.5±1.7)%,P<0.05]。而缓解组和健康对照组之间差异无统计学意义[(10.2±0.4)%vs(9.5±1.7)%,P>0.05];②CD4+CXCR5+T细胞比例与患者的第1秒用力呼气容积占预计值的百分比呈负相关(P<0.05),与总IgE水平呈正相关(P<0.05);③急性发作组血清IL-4、IL-2l含量均高于缓解组和对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。缓解组血清IL-4水平高于对照组(P<0.05),而血清IL-21水平在缓解组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:外周血CD4+CXCR5+滤泡辅助性T细胞样细胞的异常可能参与哮喘的发病,IL-4和IL-21细胞因子微环境改变可能与滤泡辅助性T细胞异常有关。     

ALL病儿T淋巴细胞CD28表达及意义

目的探讨儿童B细胞型急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗前后外周血T淋巴细胞表面CD28的表达及临床意义。方法采用流式细胞术,检测27例初发的B细胞型ALL病儿化疗前后外周血T淋巴细胞表面CD28的表达,其中经化疗后达到完全缓解(CR)21例,未缓解(NR)6例。以同期23例健康体检儿童作为正常对照组。结果与正常对照组比较,治疗前初发ALL病儿外周血CD4+T淋巴细胞表面、CD8+T淋巴细胞表面CD28的表达均显著降低(t=21.56、44.02,P<0.05)。化疗后CR组病儿外周血CD4+T淋巴细胞表面、CD8+T淋巴细胞表面CD28较治疗前均显著升高(t=10.84、25.30,P<0.05),而NR组病儿CD4+T淋巴细胞表面、CD8+T淋巴细胞表面CD28与治疗前比较差异无显著性(P>0.05)。结论 CD28是参与ALL发病的重要共刺激分子,其表达异常可能是ALL的发病因素之一;其表达水平可能是判断ALL预后及化疗敏感性的因素之一。     

特应性皮炎患儿CD23与血清IgE的相关性研究

目的了解特应性皮炎（AD）患儿外周血淋巴细胞CD23与血清IgE的相关关系。方法采用流式细胞术检测56例AD患儿和35例正常儿童外周血淋巴细胞CD23的阳性细胞百分率（percentage of positive cell,PPC）,同时用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IgE水平,并进行相关性分析。结果两组外周血淋巴细胞CD23的PPC和血清IgE水平差异有统计学意义（P〈0．01）,AD患儿高于正常对照组。进一步分析显示,CD23与血清IgE水平呈显著正相关（r=0．380,P〈0．01）。结论AD患儿CD23和血清IgE水平有明显升高,并且CD23和血清IgE关系密切,可能参与了AD的发生发展过程。     

传染性单核细胞增多症外周血CD19、CD21的表达

目的 探讨外周血B淋巴细胞CD19、CD21的表达在传染性单核细胞增多症（IM）中的作用.方法 选择2008年1月至2011年12月川北医学院附属医院收治的38例IM患儿为IM组,选择同期来本院体检的22例健康儿童作为对照组.采用流式细胞术测定两组的外周血B淋巴细胞CD19、CD21的表达水平,并进行比较.结果 IM组外周血中B淋巴细胞CD21表达显著高于对照组（P＜0.05）,CD19的表达水平显著低于对照组（P＜0.01）;肝功能受损的IM患儿外周血CD21淋巴细胞百分率显著高于肝功能正常的IM患儿（P＜0.01）,而CD19淋巴细胞百分率无明显差异.结论 EB病毒感染可诱导B淋巴细胞持续高表达CD21,而CD19低表达,以利于病毒进入细胞并导致潜伏型感染和增殖性感染.     

支气管哮喘患者外周血Th17细胞及相关趋化因子表达水平检测

目的探讨支气管哮喘患者外周血Th17细胞及相关趋化因子表达水平与肺功能的关系。方法选取60例支气管哮喘患者分为急性发作组和缓解组,每组各30例,另选取健康体检者30例为对照组。采用流式细胞术检测三组人群外周血中Th17细胞(CD4+IL-17+)上CCR4、CCR6表达水平,用ELISA法检测患者血清中总IgE、IL-17、IL-23、CCL20的蛋白表达水平。结果 1急性发作组哮喘患者外周血Th17细胞CCR4、CCR6表达水平明显高于缓解组哮喘患者(P<0.05),缓解组哮喘患者外周血Th17细胞CCR4、CCR6表达水平高于健康对照组(P<0.05);2急性发作组哮喘患者外周血血清中总IgE、IL-17、IL-23、CCL20的蛋白表达水平明显高于缓解组哮喘患者(P<0.05),缓解组哮喘患者外周血血清中总IgE、IL-17、IL-23、CCL20的蛋白表达水平高于健康对照组(P<0.05);3CCR4、CCR6表达水平与患者的总IgE、IL-17、IL-23、CCL20的蛋白表达水平正相关(P<0.05)。结论支气管哮喘患者外周血中Thl7细胞相关趋化因子CCR4、CCR6表达增高并与Th17细胞造成的炎症损伤有关。     

干燥综合征患者外周血CD5~+ B细胞、CD5 mRNA变化的研究

目的:了解干燥综合征患者外周血中CD5+B细胞的变化及其B淋巴细胞CD5在基因水平上的表达,探讨CD5+B细胞与干燥综合征的关系。方法:采用免疫荧光双标记技术和流式细胞仪检测了20例干燥综合征患者和10例健康对照者外周血中CD5+B细胞(CD5+CD19+)的百分率。应用流式细胞仪分选B淋巴细胞的基础上,运用Real-time RT-PCR方法检测7例干燥综合征患者外周血CD5 mRNA的表达水平。结果:干燥综合征患者外周血CD5+B(CD5+CD19+)细胞的百分率高于健康对照组(P<0.05)。86%的患者CD5 mRNA高于正常人水平。结论:干燥综合征患者外周血CD5+B细胞及CDS转录水平和干燥综合征的发病有一定的关联。     

循经敷贴法对哮喘患者CD4~+CD25~+调节性T细胞及生活质量的影响

目的:观察循经敷贴法(敷贴法)对哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)、血清总IgE以及生活质量的影响。方法:120例缓解期哮喘患者随机分为敷贴组和对照组,观察治疗前后CD4+CD25+Tr、血清总IgE及成人哮喘生命质量评分表(AQLQ)评分变化情况。结果:治疗后敷贴组外周血CD4+CD25+Tr数量增加,血清总IgE水平明显下降,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。两组间AQLQ评分治疗后有显著性差异(P<0.05)。结论:敷贴法治疗缓解期哮喘,可改善哮喘患者生存质量,可能与调节体内细胞免疫反应,抑制炎性介质介导的气道炎症性反应,从而减少哮喘复发频次有关。     

小儿支气管哮喘发作期细胞免疫及体液免疫的改变

目的 :对 84例支气管哮喘发作期患儿进行了外周血T淋巴细胞亚群及总IgE测定 ,并与健康儿童对照组进行比较。方法 :采用单克隆抗体检测T淋巴细胞亚群试剂盒检测病儿外周血T淋巴细胞亚群阳性细胞百分率 ;应用微粒子化学发光法测定外周血总IgE水平。结果 :哮喘组中CD4+ 平均值为 47.2 8± 8.6 4,对照组平均值为 31.10± 6 .86 ,CD4+ 值高于对照组 (P <0 0 5 ) ;哮喘组CD8+ 平均值 32 .19± 5 .2 1,对照组平均值为 37.14± 5 .6 1,CD8+ 值低于对照组 (P <0 .0 5 )。哮喘组总IgE平均值为 80 4± 14 4 ,对照组平均值为 2 76± 12 5 ,总IgE值高于对照组 (P <0 .0 5 )。结果提示 :小儿支气管哮喘发作期CD4+ 细胞升高 ,CD8+ 细胞下降和血清总IgE升高。     

哮喘患者外周血Rho激酶及CD4+CD25+调节性T细胞测定

目的：比较不同研究对象外周血Rho激酶及CD4+CD25+调节性T细胞的表达规律，探讨Rho激酶和CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘患者中的变化和相关性。方法：选取中、重度哮喘患者16例，健康对照组14例，通过年龄、性别配对，ELISA测定所有研究对象血清Rho激酶水平，流式细胞仪测定CD4+CD25+调节性T细胞水平，所有研究对象经肺功能仪测定肺功能。结果：哮喘组外周血Rho激酶表达水平高于对照组(P<0.05)，外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平低于对照组(P<0.05)；两组外周血Rho激酶与肺功能第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second，FEV1)占预计值百分比(FEV1%)无相关关系(r=-0.491，P>0.05)；两组外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平与肺功能FEV1%呈轻度正相关关系(r=0.380，P=0.038)；两组外周血Rho激酶与CD4+CD25+调节性T细胞水平无相关关系(r=-0.438，P>0.05)。结论：哮喘患者外周血Rho激酶水平升高，CD4+CD25+调节性T细胞水平降低，可能在哮喘发病过程中起一定的作用。     

哮喘患者CD4+T细胞对单核/巨噬细胞抗原递呈功能的影响

目的:探讨支气管哮喘患者CD4⁺T细胞对单核/巨噬细胞抗原递呈功能的影响。 方法：哮喘患者20例,健康对照22例,分别取静脉血5 mL,并 分离单核/巨噬细胞、CD4⁺T细胞和B细胞。每份血样分成4组：MΦ递呈抗原组、CD4⁺T细胞参与MΦ递呈抗原组、CD4⁺T细胞体外活化后对MΦ递呈抗原影响组及自然状态下CD4⁺T细胞对MΦ细胞递呈抗原影响组。各组用CTLL2P抗原刺激18 h后,洗去刺激原,与自体B细胞共同孵育10 d,吸取上清液,测定特异性IgM、IgE、IgG含量。 结果：哮喘患者CD4⁺T细胞与单核/巨噬细胞共同培养递呈抗原时,产生特异性IgM(A₄₉₀ nm)（0.033±0.031）低于健康人（0.098±0.062）（P<0.05）;产生特异性IgG(A₄₉₀ nm)（0.080±0.035）明显高于健康人（0.055±0.024）(P<0.05);产生特异性IgE(A₄₉₀ nm)（0.154±0.119）的调节作用与健康人（0.186±0.101）差异无显著性（P>0.05）;在无抗原刺激的自然状态下,哮喘患者CD4⁺T细胞与递呈抗原单核/巨噬细胞共同培养,也能产生高水平的特异性IgG（哮喘组：0.075±0.018,对照组：0.057±0.018;P<0.05）。 结论：哮喘患者CD4⁺T细胞对单核/巨噬细胞递呈抗原产生的各型免疫球蛋白均有不同程度的调节作用。     

哮喘患儿急性发作期CD4+ CD25+ 调节性 T细胞水平和体质量指数的关系

 【目的】 探讨急性发作期哮喘患儿外周血CD4+ CD25+ 调节性T细胞(Tr)的变化及其与体质量指数(BMI)的关系&;#65377; 【方法】 外周血来自70例哮喘发作组患儿&;#65380;30例缓解组和50例正常对照组小儿&;#65377;将哮喘发作组再分为体质量正常组(40例)和超重组(30例)&;#65377;应用流式细胞术检测患儿外周血的Tr细胞数变化,并计算患儿的BMI&;#65377; 【结果】 急性发作期组患儿外周血Tr水平 [(6.17 ± 1.72)%]明显低于缓解期组患儿[(7.56 ± 1.48)%]和对照组儿童[(7.13 ± 1.48)%](P < 0.05),而缓解期患儿外周血Tr水平与对照组儿童无明显差异(P > 0.05)&;#65377;正常体质量哮喘患儿CD4+ CD25+ Tr水平[(6.34 ± 1.71)%]明显高于超重患儿[(4.74 ± 1.20)%](P < 0.05)&;#65377;哮喘组患儿外周血CD4+ CD25+ Tr水平[(6.17 ± 1.72)%]与其BMI水平(16.00 ± 2.14)呈显著的负相关(rp = -0.814,P < 0.05)&;#65377; 【结论】 外周血Tr水平在哮喘患儿发作期显著降低,而在超重的患儿更低,且其水平与患儿的BMI呈显著的负相关&;#65377;     

Influence of Danshen Injection on airway inflammation and CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells of asthmatic rats

Objective： To investigate the influence of Danshen Injection on airway inflammation and CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells（CD4^＋CD25^＋ Tr） of asthmatic rats, and elucidate the possible mechanism of Danshen Injection in treatment of asthma. Methods： 30 Wister rats were randomly divided into control group, asthma group and Danshen Injection treated group. Bronchoalveolar lavage fluids （BALF） were collected, and cytology studies were conducted. Lung tissues were obtained and pathologic analyses were done with hematoxylin and eosin stain （HE）. Flow cytometry was used to detect the CD4^＋CD25^＋ Tr ratio in peripheral blood mononuclear cells （PBMCs）. Results： Total cell, the percentage of lymphocytes, neutrophils and eosinophils （Eos） in BALF of Danshen Injection-treated group were lower than that in asthma group （P〈0.05, P〈0.01）. Compared with asthma group, less infiltration of inflammatory cells in lung tissues was observed in Danshen Injection-treated group. CD4^＋CD25^＋ Tr of asthma group was lower than that of control and Danshen Injection treated group （P〈0.05）. Conclusion： Danshen Injection can suppress airway inflammation of asthmatic rats, probably by increasing the number of CD4^＋CD25^＋ Tr.     

哮喘缓解期患者外周血T淋巴细胞亚群的增殖及其分子机制研究

目的 探讨哮喘缓解期患者外周血T淋巴细胞亚群增殖规律及其分子机制。方法 收集45例哮喘急性发作期患者（哮喘急发组）、哮喘缓解期患者（哮喘缓解组）和正常对照（对照组）的外周血标本（各15例）,体外分离获得并培养3组患者的外周血CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞,用流式细胞术检测细胞周期时相分布、细胞周期调节蛋白[P27^kipl、细胞周期素（Cyclin）D、E]、PI3K和STAT6的表达水平。结果 （1）3组CD4^＋T淋巴细胞的G0／G1期分布比例、S期分布比例,G2／M期和（S＋G2）／M期比例差异有统计学意义（Z值分别为12．35、8．05、9．16、12．80,均P〈0．05）,3组CD8^＋T淋巴细胞的G0／G1期分布比例、S期分布比例和（S＋G2）／M期比例差异有统计学意义（Z值分别为21．60、25．22和21．52,均P〈0．01）;（2）3组CD4^＋T淋巴细胞的P27^kipl、Cyclin D和Cyclin E表达水平差异有统计学意义（Z值分别为10．63、10．66和6．64,均P〈0．05）,3组CD8^＋T淋巴细胞的P27^kipl表达水平差异有统计学意义（Z值为9．30,P〈0．05）;（3）3组CD;T淋巴细胞的PI3K、STAT6蛋白表达水平差异有统计学意义（Z值分别为9．04和18．08,P值分别〈0．05和0．01）,哮喘缓解期患者处于增殖状态的CD;T细胞较正常对照者明显增多,与哮喘发作期患者相比处于增殖状态的CD4^＋、CD8^T细胞显著减少。PI3K信号转导途径可能通过上调CyclinD和／或CyclinE影响CD4^＋、CD8^＋细胞增殖活化,而JAK1-STAT6信号转导途径可能通过下调P27^kipl发挥作用。结论 哮喘缓解期患者体内CD4^＋T细胞存在过度增殖,可能与细胞周期蛋白和信号转导蛋白异常有密切关系。     

哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞与IL- 4,IL- 5的表达

目的:探讨哮喘患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞与IL- 4,IL- 5的水平变化及其相互关系.方法:采用流式细胞技术检测40例哮喘患者和40例健康对照者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞的表达水平,采用ELISA法检测外周血中IL- 4,IL- 5水平.结果:哮喘患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞低于健康对照者(P＜0.01);急性发作期哮喘患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞低于非急性发作期(P＜0.01);哮喘患者IL- 4,IL- 5的表达水平高于健康对照者(P＜0.05);急性发作期患者IL- 4,IL- 5的表达水平高于非急性发作期(P＜0.05);急性发作期哮喘患者外周血CD4 CD25 T细胞与IL- 4,IL- 5的表达水平呈负相关(r分别为-0.675,-0.767,P＜0.01).结论:CD4 CD25 调节性T细胞在哮喘的疾病活动中起着重要作用,是导致哮喘患者细胞免疫失调的重要原因.     

支气管哮喘病人CD8+T细胞CD25,CD30表达状况

目的：通过观察哮喘病人外周血CD8^ T细胞CD25，CD30表达水平，了解哮喘病人CD8^ T细胞功能状态。方法：将所分离出的CD8^ T细胞分别用PPD，PHA刺激，最后用流式细胞仪检测细胞表面CD25，CD30表达水平。结果：PHA刺激组CD8^ T细胞CD25表达水平高于健康对照(P＜0．05)，而CD60表达则无差异；PPD刺激组CD8^ T细胞CD25，CD30表达与健康对照组相比无显著差异；哮喘病人自然状态下(即未受抗原剁激)CD8^ T细胞CD25表达与健康对照无差异，而CD30表达低于健康对照(P＜0．05)。结论：哮喘病人CD8^ T细胞活化状态明显异常。     

血清总IgE检测在儿童哮喘中的临床意义

目的 探讨血清总IgE检测在儿童哮喘中的临床意义.方法 采用电化学发光法检测哮喘发作期患儿20例、缓解期患儿27例和21例健康儿童血清总IgE水平.结果 发作期、缓解期哮喘患儿血清总IgE水平较健康对照组明显增高（P＜0.01）,哮喘发作期组明显高于缓解期组（P＜0.01）.结论 血清总IgE检测在儿童哮喘中起到辅助性诊断作用,为哮喘病的疗效观察提供实验依据.