自体神经干细胞移植后功能恢复的影像学评价

目的　用1 8F 脱氧葡萄糖 (FDG)PET显像、功能磁共振 (fMRI)和扩展格拉斯哥愈后评分(GOSE)评价成人脑外伤自体神经干细胞移植后功能的恢复。方法　从开放性脑外伤患者中挑选 7例进行神经干细胞移植 ,同时选择 7例年龄相仿、损伤部位及程度一致的患者作为对照。收集暴露于硬膜外的脑组织 ,进行神经干细胞培养 2 5～ 30d后 ,在MRI引导下围绕损伤区将细胞悬液注射于 7个靶点。患者在术后 1周进行1 8F FDGPET、fMRI检查和GOSE ,在接受神经干细胞移植后 1个月进行相同的检查 ,第 1年每 3个月随访 1次 ,第 2年每 6个月随访 1次 ,每次随访都行1 8F FDGPET、fMRI检查和GOSE。对照组同法进行观察。结果应用感兴趣区 (ROI)半定量分析和统计参数地图 (SPM)分析。结果　随访第 3个月时 ,1 8F FDG半定量分析示移植组葡萄糖代谢值由移植前的 (71. 1± 7 .9) %增至移植后的 (15 .7 5± 8. 9) % ,对照组由 (74 . 1± 9. 7) %增至 (91. 6± 17 .6 ) % (P <0 .0 1)。移植组1 8F FDG摄取值在移植后开始升高 ,第 3个月时达平台期 ,对照组1 8F FDG摄取值缓慢上升 ,至 6～ 9个月后达平台期 ;SPM分析结果表明移植组中央前回顶部和前额叶葡萄糖代谢明显增加。fMRI结果示损伤区神经干细胞移植后 3个月出现兴奋信号 ,对照组在随访     

移植神经干细胞促进脊髓全横断大鼠结构与功能修复的研究

目的　探讨移植神经干细胞对脊髓全横断性大鼠部分结构与功能修复的影响。方法　在脊髓全横断处移植神经干细胞 6 0d后 ,在横断处下方 3mm注射荧光金逆行标记轴突再生的上运动神经元 ,用免疫组织化学检测神经干细胞在宿主内的分化 ,同时用体视学方法观测脑干细核和大脑皮质感觉运动区内锥体细胞层的神经元密度变化。用BBB评分法和爬网格法观测大鼠后肢运动功能的恢复等。结果　移植的神经干细胞能在宿主内存活并向前后方向迁移到脊髓内 ,部分神经干细胞分化为GFAP、NF - 2 0 0和GAP -43阳性细胞。移植神经干细胞后在红核和感觉运动区内锥体细胞层可见有被荧光金荧光金标记的神经元胞体 ,脊髓横断处附近脊髓组织的溃变程度减轻 ,红核及躯体感觉运动区内神经元密度高于未移植组 ,大鼠后肢的自主运动功能明显好于未移植组。结论　神经干细胞移植入损伤脊髓后能分化为神经元及神经胶质细胞 ,能减轻脊髓的继发性损伤 ,保护受损伤的神经元 ,促进运动功能的恢复     

人神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响

目的:探讨人神经干细胞(hNSCs)移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响及可能机制。方法:取2～3个月流产胎儿海马区组织,体外培养神经干细胞;采用通用型脊髓打击器将24只成年SD大鼠制成脊髓损伤模型,伤后第8天随机分为移植组和对照组,于损伤中心分别注入CM-DiI标记的hNSCs悬液和DMEM/F12培养液。分别于hNSCs移植后当天及1、2、3、4、6、8周采用Basso,Beattie,Bresnahan(BBB)行为功能评定量表评估大鼠后肢运动功能恢复情况。移植后第4、8周取损伤部位脊髓,行病理切片,免疫组化方法观察移植细胞的存活和迁移,并检测损伤脊髓处胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核心抗原(NeuN)、2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNPase)、神经巢蛋白(Nestin)等抗原的表达。结果:移植组后肢运动功能评分随时间延长而逐渐升高,移植1周时后肢运动功能有所改善,与对照组无明显差异(6.4±0.99 vs 6.0±0.93,P>0.05);移植4周时后肢运动功能比1周时有明显恢复,BBB评分明显高于对照组(9.7±1.04 vs 7.4±0.95,P<0.05);移植的hNSCs可在损伤脊髓处长时间存活(至少8周),并分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞。结论:人神经干细胞可在损伤脊髓处向神经元和神经胶质细胞分化,并能促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的部分恢复。     

早期运动对大鼠出生后神经肌肉连接发育的影响

目的:探讨运动对出生后早期神经肌肉连接(Neuromuscular junction,NMJ)发育的影响及其有关机制,为早期发展运动能力研究提供依据。方法:新生Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为运动组和对照组。运动组进行每周6天、每天1小时的游泳训练,于3周龄时测定并比较运动组和对照组大鼠腓肠肌运动终板周长和终板面积、N乙酰胆碱受体(nAChR)γ-、ε-、δ-亚基、发育诱导因子Agrin及其受体MuSK以及肌源性神经营养因子NT-3表达水平。结果:运动组大鼠3周龄时腓肠肌运动终板面积和周长均显著大于对照组;腓肠肌成熟型亚基ε-AChR和诱导因子Agrin及其受体MuSK表达水平也显著高于对照组。结论:早期运动可以在一定程度上促进NMJ形态和结构成分的发育,其中发育诱导因子表达增加可能是其机制之一。     

去细胞神经同种异体移植的运动功能恢复

目的 研究去细胞同种异体神经移植修复大型哺乳类动物粗大和长段周围神经缺损的效果。方法 15只犬分为去细胞神经同种异体移植组（实验组）6只、自体神经移植组（对照组Ⅰ）6只、新鲜神经同种异体移植组（对照组Ⅱ组）3只。右侧坐骨神经主干造成5cm长缺损，分别以上述三种神经移植物桥接修复，术后6个月进行步态分析。结果 实验组和对照组Ⅰ功能恢复一般情况相似，对照组Ⅱ无任何恢复；实验组和对照组Ⅰ的右后肢运动及步态周期非常相似，踝关节跖屈及背伸肌群的肌力均有一定程度的恢复，但不及正常犬。结论 化学去细胞神经同种异体移植修复犬坐骨神经长段缺损，在术后6个月近期运动功能恢复与自体神经移植相似。     

高压氧对大鼠神经离断后运动神经元和失神经肌肉影响的初步观察

目的：观察大鼠神经离断后，高压氧（HBO）对脊髓前角运动神经元变性和腓肠肌萎缩的影响。方法：采用大鼠坐骨神经横断伤模型。在动物模型分别接受不同疗程的常压空气（NA）、常氧高压（N2－O2）和HBO治疗后，进行脊髓切片尼氏体染色，观察脊髓前角运动神经元的变性存活状况；测量腓肠肌湿重，观察神经损伤后肌肉萎缩的情况。结果：治疗15d，HBO组脊髓前角运动神经元的变性坏死程度比NA组和N2－O2组轻（P＜0．05）。治疗8d，HBO组的腓肠肌湿重比NA组和N2－O2组大（P＜0．01）。结论：HBO能够减轻脊髓前角运动神经元变性坏死程度和延缓失神经肌肉的萎缩。     

全小肠移植术后移植肠功能的恢复

国内首例全小肠移植患者移植肠功能完全恢复，表现为：完全停止静脉营养，恢复口服饮食维持营养良好。肠道对糖、氨基酸的吸收能力恢复正常。大便成形，２－３／ｄ。移植肠形态结构正常，无排斥及ＧＶＨＤ发生，运动及屏障功能正常。促进和维护移植肠功能的恢复，应缩短缺血时间，熟练血管吻合技术，积极防治排斥及感染，保护肠屏障功能等。     

胞磷胆碱胶囊联合神经肌肉刺激治疗脑损伤疗效及对认知功能与功能独立性康复影响

目的探讨胞磷胆碱胶囊联合神经肌肉刺激治疗脑损伤的疗效及对认知功能与功能独立性康复的影响。方法选取首都医科大学附属北京康复医院自2016年9月至2018年9月收治的90例脑损伤患者为研究对象。采用随机数表法将患者分为与A组(n=44)与B组(n=46)。A组患者使用神经肌肉刺激治疗,B组在A组的基础上,加用胞磷胆碱胶囊进行治疗。比较两组患者的临床疗效、认知功能评分、功能独立性评分(FIM)、格拉斯哥昏迷(GCS)评分、血清髓鞘碱性蛋白(MBP)及S-100β蛋白水平变化情况。结果 B组患者治疗的总有效率为95.7%(44/46),高于A组的72.7%(32/44),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者的认知功能评分、FIM、GCS评分均显著改善,且B组患者各项评分均高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后血清标志物水平均显著改善,且B组患者MBP、S-100β水平均低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论使用胞磷胆碱胶囊联合神经肌肉刺激治疗脑损伤患者的效果显著,可有效改善患者认知功能与功能独立性。     

双复磷和酰胺磷定对梭曼中毒神经肌肉接头终板区持续性去极化…

在大鼠的膈肌离体不均匀牵张肌肉标本（ＩＮＳＭＰ）上，肟类化合物双复磷（Ｏｂｉ）和酰胺磷定（ＨＩ－６）对正常神经肌肉接头（ＮＭＪ）具有轻度抑酶作用，在突触后抑制作用的浓度（１．０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｏｂｉ和０．５，１．０ｍｍｏｌ／Ｌ ＨＩ－６）下对抗梭曼致终板区持续性去极化（ＳＤ）的产生。冲洗药物后，Ｏｂｉ的对抗作用完全消失，ＨＩ－６的对抗作用不完全消失。表明Ｏｂｉ和ＨＩ－６主要以突触后抑制作用生理性地对     

自体静脉桥接上肢神经缺损32例

目的：评估静脉移植修复周围神经缺损的疗效及长度问题．方法：从１９８６年以来，用自体静脉移植桥接上肢神经缺损，并获１年以上随访者３２例；伤后３月治疗１９例，４～６月９例，６月以上４例．结果：总优良率７５％，以缺损在３～４ｃｍ以内及３～４月内治疗者疗效最佳．结论：对较粗大的、６ｃｍ以内的神经缺损且又不愿取自体神经移植者，静脉桥接是一种可供选择的治疗方法．     

感觉神经植入术后Merkel氏细胞轴突复合体的溃变与再生

目的：研究神经植入对失神经皮肤中Merkel氏细胞轴突复合体再生的影响。方法：利用猴失神经手指模型,将感觉神经全程植入失神经皮肤的手指,于术后1,3,5,8和12个月对实验猴手指指腹标本进行免疫组化染色和光、电镜观察。结果：Merkel氏细胞轴突复合体随失神经时间延长逐步减少,直至完全消失;神经植入后3个月,失神经皮肤内的Merkel氏细胞轴突复合体停止溃变,且与植入的神经建立了联系。结论：感觉神经的植入能延缓神经的溃变,使Merkel氏细胞轴突复合体获得神经再支配,是一项有效的周围神经修复方法。     

Diffusion-weighted imaging for the follow-up of patients after matrix-associated autologous chondrocyte transplantation

Objective

To evaluate the use of diffusion-weighted imaging (DWI) for the assessment of cartilage maturation in patients after matrix-associated autologous chondrocyte transplantation (MACT).

Materials and methods

Fifteen patients after MACT were examined by 3.0-T magnetic-resonance-tomography; the examination was up to 13 month after surgery in group 1, and later than 13 month after surgery in group 2. Both groups had a follow-up one-year later. DWI was acquired using a steady-state gradient-echo sequence. Mean values of the diffusion quotients of regions of interest within cartilage repair tissue and of reference regions were assessed. Each region-of-interest was subdivided into a deep, and a superficial area.

Results

Mean diffusion quotients of cartilage repair tissues were 1.44 (baseline), and 1.44 (follow-up). Mean diffusion quotients of reference tissues were 1.29 (baseline) and 1.28 (follow-up). At the follow-up diffusion quotients of cartilage repair tissue were significantly higher than those of reference cartilage. In group 1 the diffusion quotients were significantly lower at the follow-up (1.45 versus 1.65); in group 2 no statistically significant differences between follow-up (1.39) and baseline (1.41) were found.Reference cartilages and cartilage repair tissues of group 2 showed a decrease of diffusion quotients from the deep to the superficial area being stable at the follow-up. In group 1 initially a significant increase (1.49 versus 1.78) of the diffusion quotients from deep to superficial area of the cartilage repair tissue was found changing into a decrease (1.65 versus 1.52) at the follow-up.

Conclusions

DWI detected changes of diffusion within cartilage repair tissue that may reflect cartilage maturation. Changes in diffusity occurred up to two years after surgery and were stable later. Zonal variations within cartilage could be measured.     

活化小胶质细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的疗效初探

目的 研究活性小胶质细胞移植对脊髓损伤后大鼠运动功能恢复的作用.方法 选用成年雌性Wistar大鼠40只,随机分为4组,前两组为运动功能观察组,采用自制改良Allen脊髓打击装置打击脊髓,建立中度脊髓损伤的动物模型,分成移植组和对照组,每组10只.后两组为组织学观察组,用相同方法制作动物模型,也分为移植组与对照组,每组10只.在动物模型制作早期进行新生大鼠小胶质细胞的培养、分离以及纯化,并对小胶质细胞进行鉴定和细胞纯度的测定.移植组术后7 d再次暴露损伤部位,微量注射器以损伤部位为中心注射移植活化小胶质细胞悬液.而对照组不移植.运动功能观察组分别在移植后第1天、第1,2,3,4周对大鼠进行运动功能评分;组织学观察组在相同时相点进行Naoumenko及Feigin小胶质细胞石蜡切片染色,每个时间点移植组和对照组每组随机抽取两只大鼠取材切片,镜下观察并计数小胶质细胞.对所得数据进行统计学分析.结果 术后1,2,3,4周,对照组与移植组随时间延长BBB评分均逐渐升高,移植组术后2,3,4周后肢运动功能评分较对照组明显升高(P＜0.05);Naoumenko-Feigin染色计数,移植组比同期对照组阳性细胞数显著增多(P＜0.05).结论 小胶质细胞移植可促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的恢复.     

经冠脉自体骨髓干细胞移植治疗扩张型心肌病的临床研究

目的：探讨经冠状动脉自体骨髓干细胞移植治疗扩张型心肌病的疗效。方法：选择经超声、冠状动脉造影证实为扩张型心肌病患者24例,随机分为自体骨髓干细胞移植组（细胞移植组）和对照组,两组均予常规抗心力衰竭药物治疗,细胞移植组自体骨髓干细胞经冠脉造影导管注入左、右冠状动脉。两组术前,术后l、3、6、12个月分别行超声心动图检查、组织B超看心肌协调性,6min步行试验。结果：术后6个月,细胞移植组6min步行路程增加,与对照组有显著差异（P〈0.05）,与术前有显著差异（P〈0.05）,超声心动图显示两组间左室射血分数有统计学差异（P〈0.05）。组织彩色多普勒超声心肌协调性好,有显著差异。结论：经冠状动脉自体骨髓干细胞移植治疗扩张型心肌病有效。     

去细胞异体神经桥接面神经缺损的实验研究

目的为修复面神经缺损寻找一种理想的材料。方法40只大鼠随机分成去细胞异体神经移植组和自体胫神经移植组，制成面神经缺损模型，分别以去细胞异体神经和自体神经移植修复。术后5个月分别行神经电生理、再生神经及下唇肌肉免疫组化等检测．结果两组的运动功能恢复、再生神经形态及数量、神经肌肉接头重建等相似（P〉0．05）结论去细胞异体神经有可能用于修复面神经缺损。     

自体外周血干细胞经冠状动脉移植治疗急性心肌梗死安全性及近期临床疗效观察

目的　观察经皮经腔冠状动脉内移植外周血干细胞 (PBSC)治疗急性心肌梗死 (AMI)的可行性与近期临床疗效。方法　自 2 0 0 3年 11月至 2 0 0 4年 8月共入选AMI患者 4 5例 ,其中 6个月随访 13例。AMI患者入院后在常规AMI治疗 (药物与介入治疗 )基础上给予包涵体型粒细胞 集落刺激因子 (G CSF) ,30 0～ 6 0 0 μg d皮下注射 ,连用 5d。第 6d经美国Baxter公司生产的CS30 0 0PLUS血细胞分离机 ,分离PBSC悬液 5 7ml,采集后的干细胞悬液未做任何处理 ,常规经皮经腔导管技术建立梗死相关动脉 (IRA)通道 ,利用OVERTHEWIRE球囊封闭IRA ,并将分离的PBSC经OVERTHEWIRE导管中心腔注入IRA。在PBSC动员时观察有无骨痛 ,乏力 ,皮疹 ,发热 ,胃肠道反应 (恶心、呕吐、便秘 ) ,心绞痛或心衰加重 ,及一些少见的并发症 :自发性脾破裂、严重化脓性感染、高凝状态、自身免疫性疾病等发生 ;在PBSC分离及采集过程中观察有无低钙性口周麻木、抽搐 ,迷走神经反应性面色苍白、晕厥 ,低血容量性面色苍白、晕厥 ,心绞痛发作 ,心衰加重等 ;在自体PBSC经冠状动脉内回输过程中可出现心律失常 ,如 :窦性心动过缓、窦性停搏或Ⅲ°房室传导阻滞 (AVB)、心室颤动 ,可出现低血压等。术前、术后 6个月应用超声心动图评价全心功能及局部心肌节段     

A cadaveric analysis of contact stress restoration after osteochondral transplantation of a cylindrical cartilage defect

Osteochondral transplantation is a successful treatment for full-thickness cartilage defects, which without treatment would lead to early osteoarthritis. Restoration of surface congruency and stability of the reconstruction may be jeopardized by early mobilization. To investigate the biomechanical effectiveness of osteochondral transplantation, we performed a standardized osteochondral transplantation in eight intact human cadaver knees, using three cylindrical plugs on a full-thickness cartilage defect, bottomed on one condyle, unbottomed on the contralateral condyle. Surface pressure measurements with Tekscan pressure transducers were performed after five conditions. In the presence of a defect the border contact pressure of the articular cartilage defect significantly increased to 192% as compared to the initially intact joint surface. This was partially restored with osteochondral transplantation (mosaicplasty), as the rim stress subsequently decreased to 135% of the preoperative value. Following weight bearing motion two out of eight unbottomed mosaicplasties showed subsidence of the plugs according to Tekscan measurements. This study demonstrates that a three-plug mosaicplasty is effective in restoring the increased border contact pressure of a cartilage defect, which may postpone the development of early osteoarthritis. Unbottomed mosaicplasties may be more susceptible for subsidence below flush level after (unintended) weight bearing motion.     

Importance of sports in cartilage regeneration after autologous chondrocyte implantation: a prospective study with a 3-year follow-up

BACKGROUND: There have been no data in the literature reporting the influence of sports on the outcome of autologous chondrocyte implantation in chondral defects of the knee. HYPOTHESIS: Sports can improve the result of autologous chondrocyte implantation in postoperative follow-up. STUDY DESIGN: Cohort study; Level of evidence, 2. METHODS: Between 1997 and 2003, 118 patients with symptomatic isolated chondral lesions of the knee underwent autologous chondrocyte implantation. According to the sports activity level before the start of symptoms, patients were assigned to 2 groups: group II with no or rare sports involvement (1-3 times/month); group I with regular (1-3 times/week) or competitive sports (4-7 times/week). All patients underwent clinical and magnetic resonance imaging evaluation preoperative and 6, 18, and 36 months after autologous chondrocyte implantation. RESULTS: Group I patients showed significantly better results (< .01) in the International Cartilage Repair Society and Cincinnati scores than group II patients. Preoperative evaluation revealed no correlation between the sports activity levels and the clinical scores (P > .05). However, from the sixth month on, correlation was statistically significant, increasing from 6 to 18 months, and from 18 to 36 months postoperatively. CONCLUSION: Physical training improves long-term results after autologous chondrocyte implantation of the knee and should be carried out for at least 2 years after surgery.     

诱导性自体干细胞移植后间质纤维化肾的结构与功能变化

目的观察诱导性自体干细胞经肾动脉移植对肾脏间质纤维化（UUO）模型免肾功能及结构的影响。方法诱导兔成纤维细胞逆向分化为自体多能干细胞,经肾动脉移植到体内,分别于UUO损伤前和UUO损伤后第1、4、8w和移植后第1、4、8w于兔耳缘静脉采血,检测血清肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）,观察肾功能情况,并于UUO损伤后第16w和移植后第8w随机于模型组和移植组各取1只兔肾做病理切片,观察肾组织病理变化。结果UUO损伤后第4w,两组动物Scr、BUN开始逐渐升高（P〈0．05或0．01）;从诱导性自体干细胞移植后第4W起,移植组Scr、BUN水平逐渐低于模型组（P〈0．05）。模型组可见肾小管数目减少、重度萎缩,萎缩的肾小管基底膜增厚、结构紊乱,肾小球囊腔扩张、囊腔内毛细血管球明显闭塞、呈缺血改变,肾间质弥漫性炎细胞浸润、重度纤维化,呈慢性病改变镜像;移植组可见肾小管中度萎缩,基底膜偏厚,小管多灶性扩张,肾小球囊腔扩张,肾间质散在炎细胞浸润、轻-中度纤维化改变。结论诱导性自体干细胞移植能降低肾脏UUO损伤后血清Scr和BUN水平,在一定程度上促进UUO损伤后的肾结构与功能修复。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗唐氏综合征临床观察

目的探讨自体骨髓间充质干细胞移植治疗唐氏综合征患儿的有效性。方法海军总医院儿科自2012年11月—2014年11月收治的骨髓间充质干细胞移植的唐氏综合征患儿51例（年龄0.5～7岁）,骨髓动员后进行骨髓采集间充质分选,分别行右侧侧脑室穿刺1次及腰椎穿刺2次骨髓间充质干细胞移植。每次移植的细胞数为1×106/kg。每例患儿进行Gesell发育诊断量表评估,对术前6个月及术后6个月2个相同长度时间内发育速率进行自身对照观察。同时,对移植术后1、3、6个月患儿的发育情况进行追踪随访。结果51例中1例失访,余50例完成观察。其中32例在术后1~6个月逐渐出现不同程度智力、语言、运动进步,术后6个月患儿细动作能、应物能、应人能进步月份值较术前6个月明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨髓间充质干细胞移植安全可靠,能改善唐氏综合征患儿智力和运动发育水平,且主要表现在情绪、细动作能、应人能及应物能的改善。