通心络超微粉对高脂饮食兔主动脉内皮保护机制的实验研究

目的： 探讨通心络超微粉对高脂饮食兔主动脉内皮损伤的干预作用及其可能机制。方法： 健康雄性新西兰白兔32只随机分为空白对照组、模型组、阿托伐他汀组、通心络组4组。空白对照组饲以普通饲料；模型组饲以高脂饲料；阿托伐他汀组饲以高脂饲料同时阿托伐他汀3 mg·kg^-1·d^-1灌胃；通心络组饲以高脂饲料同时通心络超微粉0.31 g·kg^-1·d^-1灌胃，连续给药，于6周末酶法检测各组血脂水平，比色法检测各组血清NO、MDA水平及SOD活性，免疫组织化学染色法检测主动脉内皮细胞NF-κB核转位情况及ICAM-1 蛋白表达，RT-PCR法检测ICAM-1 mRNA表达。结果：模型组血清TC、TG、LDL-C、HDL-C及MDA水平均显著高于空白对照组(P<0.01)，NO水平及SOD活性低于空白组(P<0.01)；主动脉内皮细胞NF-κB核转位、ICAM-1基因及蛋白表达明显多于空白组（P<0.01）。两药物干预组TC、TG、LDL-C及MDA水平均显著低于模型组(P<0.01)，NO水平和SOD活性则高于模型组（P<0.05, P<0.01），主动脉内皮细胞NF-κB核转位、ICAM-1基因及蛋白表达亦明显少于模型组（P<0.05，P<0.01），通心络组HDL-C显著高于模型组（P<0.05），且通心络组对上述指标的作用均优于阿托伐他汀组（P<0.05，P<0.01）。结论： ① 高脂血症可使血管内皮细胞受损，其机制可能与氧化应激、NF-κB的激活及ICAM-1基因与蛋白的表达异常有关。② 通心络超微粉可在一定程度上减轻上述病理损伤，可能与其抗氧化、抑制NF-κB核转位进而降低ICAM-1基因及蛋白表达有关。     

罗格列酮对阿霉素肾病大鼠肾组织中PPARγ、TGF-β1表达的影响

目的：探讨阿霉素肾病大鼠肾组织中过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）、转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达和罗格列酮对阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用及其可能机制。方法: 将大鼠随机分成3组，正常对照组（n=6）、阿霉素肾病组（n=7）、罗格列酮治疗组（n=7），12周后测大鼠尿蛋白、血浆白蛋白、血脂和血肌酐、尿素氮，用免疫组化检测肾组织NF-κB p65的核转位及ELISA（夹心法）检测肾组织NF-κB p65的活性，RT-PCR测肾皮质PPARγ mRNA及TGF-β₁ mRNA的表达及免疫印迹检测肾皮质PPARγ、TGF-β₁蛋白表达，并进行相关分析。 结果: 与阿霉素肾病组相比，罗格列酮治疗组大鼠24 h尿蛋白排泄减少，血清白蛋白升高，血甘油三酯和胆固醇下降,差异显著(P＜0.01),肾脏病理损害减轻；肾组织NF-κB p65活化和TGF-β₁ mRNA和蛋白的表达均明显受抑制，而肾皮质PPARγ mRNA和蛋白表达显著增强，差异显著（P＜0.01)；阿霉素肾病组和罗格列酮治疗组大鼠肾组织中NF-κBp65活性与PPARγ mRNA表达呈直线负相关（r=－0.8305, P＜0.01）；肾组织中PPARγ mRNA与TGF-β₁ mRNA表达呈直线负相关（r=－0.7938, P＜0.01 ）。结论:罗格列酮作用于阿霉素肾病大鼠后，可能通过上调PPARγ表达，部分抑制肾组织NF-κB p65活性，进而抑制肾组织中TGF-β₁ 表达，从而使系膜基质沉积减少，肾组织病变减轻。     

糖尿病大鼠肾小管骨调素和p38MAPK表达的动态研究

目的:动态观察骨调素（OPN）在链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠肾小管的表达，探讨它与p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、核转录因子-κB（NF-κB）及肾损害之间的关系。方法：雄性SD大鼠，注射STZ诱导糖尿病（DM），随机分成5组，每组分别设鼠龄匹配的正常对照组。免疫组化方法检测肾小管OPN、p38MAPK、NF-κB及纤连蛋白（FN）的表达；Western印迹法检测肾皮质OPN和p38MAPK蛋白质水平；生化方法测定血糖、血肌酐及24 h尿蛋白量；光镜检查肾组织的形态改变。结果： Western印迹和免疫组化检测发现糖尿病3 d大鼠肾组织p38MAPK和DM 7 d OPN的表达增多，并随病程发展而增加，与正常对照组比较有显著差异（P<0.01）。DM 4周，肾小管OPN的表达与p38MAPK、NF-κB、FN表达及蛋白尿呈显著正相关。结论： 糖尿病大鼠肾小管OPN表达增加参与了糖尿病肾小管间质损害的发病机制；肾小管p38MAPK可能介导了DM状态时NF-κB的表达，进而调节OPN的表达增多。     

阿托伐他汀对自发性高血压大鼠心室重塑的作用及机制

目的：研究阿托伐他汀对自发性高血压大鼠（SHR）心室重塑的作用及机制。方法：雄性SHR 12只，随机分为2组（每组6只）：阿托伐他汀组（阿托伐他汀50 mg·kg^-1·d^-1）和SHR（0.5%阿拉伯胶浆10 mL·kg^-1·d^-1）组；另选WKY大鼠6只（0.5%阿拉伯胶浆10 mL·kg^-1·d^-1）作为正常对照组。实验6周后，称取大鼠全心重量及左心室重量，计算左心室重量指数；同时检测心肌羟脯氨酸、胶原蛋白含量；大鼠血清C反应蛋白含量；免疫组化检测心肌血管细胞黏附分子(VCAM)的表达；原位杂交测定心肌细胞NF-κB的表达；透射电镜观察心肌的超微结构。结果：SHR组心肌NF-κB的表达和心肌VCAM的表达强于WKY组；阿托伐他汀组大鼠的心脏重量、心肌羟脯氨酸、胶原蛋白和大鼠血清C反应蛋白的含量低于SHR组；同时心肌NF-κB的表达和心肌VCAM的表达低于SHR组。透射电镜显示：阿托伐他汀组细胞核膜不完整，肌原纤维排列紊乱，横纹不清，间质胶原纤维增生等病理改变轻于SHR组。结论：阿托伐他汀具有改善SHR心室重塑的作用，其分子机制可能下调SHR心肌NF-κB的表达和心肌VCAM的表达，抑制心肌的慢性炎症有关。     

CCK-8抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞NF-κB活性的cAMP-PKA通路研究

目的： 用cAMP激动剂forskolin和PKA抑制剂H-89，探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞（PIMs）核因子-κB （NF-κB）活性的cAMP-PKA信号通路机制。 方法： 分离纯化大鼠PIMs。用电泳迁移率改变分析（EMSA）法检测大鼠PIMs中NF-κB活性，用Western blotting分析IκB-α蛋白水平。 结果： 正常对照组大鼠PIMs核内未检测到与特异性寡核苷酸探针相结合的NF-κB，LPS组细胞内NF-κB活性明显高于正常对照组（P<0.01），胞浆中IκB-α水平显著低于正常对照组（P<0.01）。CCK组和Fsk组细胞内NF-κB活性和胞浆中IκB-α含量均无明显差异（P>0.05）。CCK+LPS组和Fsk+LPS组，细胞内NF-κB活性均低于LPS组（P<0.05），IκB-α含量均高于LPS组（P<0.01）。LPS+CCK+H-89组NF-κB活性高于CCK+LPS组（P<0.01），而IκB-α蛋白水平低于CCK+LPS组（P<0.01）。 结论： cAMP-PKA信号通路的活化可抑制LPS诱导的大鼠PIMs细胞内NF-κB活性升高和IκB-α蛋白水平的降低，CCK-8的抗炎作用是通过激活cAMP-PKA信号通路进而抑制NF-κB活性来实现的。     

罗格列酮对阿霉素肾病大鼠肾组织中PPARγ、TGF-β1表达的影响

目的:探讨阿霉素肾病大鼠肾组织中过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达和罗格列酮对阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用及其可能机制.方法:将大鼠随机分成3组,正常对照组(n=6)、阿霉索肾病组(n=7)、罗格列酮治疗组(n=7),12周后测大鼠尿蛋白、血浆白蛋白、血脂和血肌酐、尿素氮,用免疫组化检测肾组织NF-κB p65的核转位及ELISA(夹心法)检测肾组织NF-κB p65的活性,RT-PCR测肾皮质PPARγ mRNA及TGF-β1 mRNA的表达及免疫印迹检测肾皮质PPARγ、TGF-β1蛋白表达,并进行相关分析.结果:与阿霉素肾病组相比,罗格列酮治疗组大鼠24 h尿蛋白排泄减少,血清白蛋白升高,血甘油三酯和胆固醇下降,差异显著(P＜0.01),肾脏病理损害减轻;肾组织NF-κB p65活化和TGF-β1 mRNA和蛋白的表达均明显受抑制,而肾皮质PPARγ mRNA和蛋白表达显著增强,差异显著(P＜0.01);阿霉素肾病组和罗格列酮治疗组大鼠肾组织中NF-κBp65活性与PPARγ mRNA表达呈直线负相关(r=-0.8305,P＜0.01);肾组织中PPARγ mRNA与TGF-β1mRNA表达呈直线负相关(r=-0.7938,P＜0.01).结论:罗格列酮作用于阿霉素肾病大鼠后,可能通过上调PPARγ表达,部分抑制肾组织NF-κB p65活性,进而抑制肾组织中TGF-β1表达,从而使系膜基质沉积减少,肾组织病变减轻.     

阿托伐他汀减轻肾性高血压大鼠血管重构

目的探讨内皮脂肪酶(EL)在高血压血管重构中的的作用及阿托伐他汀的干预效应。方法用两肾一夹法建立肾性高血压大鼠模型,将21只大鼠随机均分为假手术组(Sham)、肾性高血压组(RH)和阿托伐他汀组(ATV),术后4周末开始用阿托伐他汀30 mg/(kg.d)连续灌胃8周。检测大鼠尾动脉收缩压(SBP),光镜下观察血管结构,并计算胸主动脉中层壁厚与内径之比(MT/LD),免疫组化法检测EL与NF-κB的表达,实时荧光定量RT-PCR检测ELmRNA表达。结果RH组较Sham组SBP、MT/LD、ELmRNA及EL、NF-κB蛋白表达显著升高(P<0.05),而高密度脂蛋白(HDL)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)水平显著降低(P<0.05)。ATV组较RH组MT/LD、ELmRNA及EL、NF-κB蛋白表达显著降低(P<0.05),TC、LDL水平明显下降,HDL水平显著升高(P<0.05)。结论阿托伐他汀可以减轻血管重构,其机制可能与抑制EL表达有关。     

伊贝沙坦联合舒洛地特对糖尿病大鼠肾脏协同保护作用的研究

目的： 探讨伊贝沙坦联合舒洛地特对大鼠糖尿病肾脏协同保护作用及其机制。 方法：将雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组（C）、糖尿病模型组(D)、伊贝沙坦组(I)、舒洛地特组（S）及伊贝沙坦与舒洛地特联合给药组（I+S）,糖尿病大鼠模型用STZ诱导。 12周后观察尿白蛋白的排泄率(UAER),做肾组织病理检查,测定肾组织中MDA含量与SOD、CAT、GSH-PX的活性变化。RT-PCR法检测肾组织中ICAM-1 mRNA的表达。EMSA 检测NF-κB的活性。结果：各给药组均可抑制糖尿病大鼠UAER的增加及肾组织病理结构损害,联合组优于单独给药组。对肾组织MDA含量增加及抗氧化应激的SOD、CAT、GSH-PX活性降低的改善作用,联合组优于单给药组。各给药组均可抑制肾组织NF-κB活性,以联合组最明显;糖尿病大鼠肾组织ICAM-1 mRNA表达明显高于对照组,各给药组肾组织ICAM-1 mRNA表达明显低于模型组,其中以联合组最明显。 结论：伊贝沙坦与舒洛地特联合用药对糖尿病肾脏保护作用优于任一单种用药,其机制可能部分是通过对糖尿病肾组织氧化应激、NF-κB 活性及 ICAM-1 mRNA表达协同抑制而实现的。     

雷公藤甲素对糖尿病肾病大鼠肾组织PGE2与NF-κB表达的影响

目的观察雷公藤甲素对糖尿病肾病大鼠肾组织前列腺素E2(PGE2)与核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法选取50只雄性SD大鼠,随机分为正常组(n=10)、模型组(n=20)及雷公藤甲素组(n=20)。模型组与雷公藤甲素组大鼠给予高糖高脂饮食,并以链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病肾病大鼠模型。8周后处死大鼠,检测相应生化指标并计算肾脏指数,免疫组织化学方法和Western blot方法检测PGE2与NF-κB的蛋白表达。结果模型组大鼠肾脏指数、血糖、血肌酐和24 h尿蛋白较对照组显著升高,P0.05;与模型组相比,雷公藤甲素组大鼠的各项指数显著降低,P0.05。与对照组比较,模型组大鼠肾脏组织PGE2与NF-κB的蛋白表达显著升高,P0.05;与模型组相比,雷公藤甲素组大鼠肾脏组织PGE2与NF-κB的蛋白表达显著降低,P0.05。结论雷公藤甲素能降低糖尿病肾病大鼠肾组织PGE2与NF-κB的水平,具有一定的肾保护作用。     

肌肽对糖尿病肾病大鼠氧化应激及NF-κB信号通路的影响

目的　探讨肌肽对糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织的保护作用及其对氧化应激、NF-κB信号通路的影响。 方法　60只SPF级8周龄雄性SD大鼠，随机选取12只为对照组，其余予以高糖高脂饮食+链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型。注射链脲佐菌素3 d后，将符合糖尿病标准大鼠随机分为模型组、肌肽（100、300、900 mg/kg）组。肌肽各组分别灌胃100、300、900 mg/kg肌肽，每日1次。8周后，检测空腹血糖（FBG）、血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24 h尿微量白蛋白（mAlb）。PAS染色法观察大鼠肾形态学变化；试剂盒检测肾组织的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量；免疫组织化学及Western blot检测肾组织P-NF-κB P65蛋白的表达。 结果　 DN大鼠建模成功。与模型组相比，肌肽组肾组织病理损伤明显减轻。肌肽各组大鼠mAlb、FBG、BUN水平下降，呈量-效依赖性关系（P<0.05），而SOD、GSH、GSH-Px的含量逐级升高，同时MDA和P-NF-κB P65含量减少。 结论　肌肽对DN模型大鼠肾组织具有保护作用，其机制可能与抑制氧化应激和NF-κB信号通路异常激活有关。     

Modern aspects of diabetic retinopathy and diabetic macular oedema treatment

Main reasons of eyesight deterioration in diabetic patients are diabetic retinopathy (DR) and diabetic macular oedema (DMO). International multicenter studies have shown that retinal laser coagulation in the event of DMO decreases the risk of eyesight loss in 50%, though only in 16% patients it was also possible to improve their eyesight. Use of vascular endothelial growth factor inhibitor--Ranibizumab--have opened a new era in DMA treatment. It's efficacy and safety have been proven in several international studies. This article contains our own data upon the use of Lucentis in patients with DMO. Intravitreal Luzentis injections and subsequent retinal lasercoagulation in the macular zone were performed on 43 eyes; follow up period--6 months. Additional injections were required in 19 cases, average amount of injections--1,4. Mean corrected visual acuity before the treatment was 0,37 +/- 0,06, after 7 days, 1, 3 and 6 months. - respectively 0,41 +/- 0,06, 0,49 +/- 0,06, 0,51 +/- 0,07 and 0,52 +/- 0,07(p<0,05). Mean retina thickness in central zone was 428 +/- 125 mkm before treatment, 391 +/- 24 mkm 7 days after the last injection 349 +/- 23, 313 +/- 21 and 308 +/- 20 mkm (p<0,05) after 1, 3 and 6 months. In addition to that Luzentis use in preoperative period in patients with non-complicated proliferative DR allowed to decrease the risk of hemorrhagic complications. Thereby, intravitreal injections of Luzentis improve functional result of treatment of patients with DMO, increase efficacy and safety of surgical interventions in patients with complicated forms of proliferating DR.     

Establishment of a diabetic mouse model with progressive diabetic nephropathy

Although diabetic animal models exist, no single animal model develops renal changes identical to those seen in humans. Here we show that transgenic mice that overexpress inducible cAMP early repressor (ICER Igamma) in pancreatic beta cells are a good model to study the pathogenesis of diabetic nephropathy. Although ICER Igamma transgenic mice exhibit extremely high blood glucose levels throughout their lives, they survive long enough to develop diabetic nephropathy. Using this model we followed the progress of diabetic renal changes compared to those seen in humans. By 8 weeks of age, the glomerular filtration rate (GFR) was already increased, and glomerular hypertrophy was prominent. At 20 weeks, GFR reached its peak, and urine albumin excretion rate was elevated. Finally, at 40 weeks, diffuse glomerular sclerotic lesions were prominently accompanied by increased expression of collagen type IV and laminin and reduced expression of matrix metalloproteinase-2. Nodular lesions were absent, but glomerular basement membrane thickening was prominent. At this point, GFR declined and urinary albumin excretion rate increased, causing a nephrotic state with lower serum albumin and higher serum total cholesterol. Thus, similar to human diabetic nephropathy, ICER Igamma transgenic mice exhibit a stable and progressive phenotype of diabetic kidney disease due solely to chronic hyperglycemia without other modulating factors.     

The diabetic foot

These are the guidelines for preventive care, diagnosis and treatment of diabetic foot syndrome. Diabetic neuropathy, peripheral vascular disease, bone deformity and altered biomechanics are foot-related risk conditions. The position statement is focused on screening methods and recommendations for clinical care for diabetics, who currently have no foot ulcers. A decision pathway is offered with respect to diagnosis and management of diabetic patients at increased risk or who manifest injuries.     

核黄素对STZ诱导的大鼠糖尿病肾病的治疗作用

目的:探讨核黄素对STZ诱导的大鼠糖尿病肾病的治疗作用及机制。方法:将雄性Sprague-Daw-ley大鼠随机分为3组,即正常对照组、糖尿病模型组、核黄素治疗组,采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病大鼠模型,收集各组血、尿及肾组织,生化方法检测24h尿蛋白量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)的含量,并计算肾脏脏器系数(KW/BW);Western blotting检测不同组别肾皮质TGF-β1、纤溶酶原活化抑制因子-1(PAI-1)蛋白质水平;光镜观察肾组织形态改变。结果:与糖尿病模型组大鼠比较,核黄素治疗组大鼠尿蛋白量显著降低(P0.01),肾组织及血清SOD、CAT活性升高(P0.01),肾组织MDA含量显著降低(P0.01),核黄素治疗组肾皮质TGF-β1及PAI-1蛋白表达明显低于糖尿病模型组。结论:核黄素对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏有一定的保护作用,其机制可能与其降低肾组织TGF-β1、PAI-1蛋白表达有关。     

初探糖尿病视网膜病变与糖尿病肾病的相关性

目的:分析糖尿病视网膜病变(DR)与糖尿病肾病(DN)之间的关系。方法:对236例二型糖尿病患者进行荧光素眼底血管造影(FFA)和12小时尿白蛋白排泄率(AER)的检查,根据眼底改变将病人分为三组,计算各组患者并发糖尿病肾病的比例,并做尿白蛋白排泄率与DR眼底改变的相关性分析。结果:DR临床前期组的病人中有5%并发DN,DR非增殖期组的病人中有42%并发DN,DR增殖期组的病人中有71%并发DN;AER与DR的眼底改变呈显著的正相关性。结论:糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病临床表现密切相关,呈平行发展关系。     

Analysis of epistasis for diabetic nephropathy among type 2 diabetic patients

Diabetic nephropathy (DN) is one of the most serious complications of diabetes, accounting for the majority of patients with end-stage renal disease. The molecular pathogenesis of DN involves multiple pathways in a complex, partially resolved manner. The paper presents an exploratory epistatic study for DN. Association analysis were performed on 231 SNP loci in a cohort of 264 type 2 diabetes patients, followed by the epistasis analysis using the multifactor dimensionality reduction and the genetic algorithm with Boolean algebra. A two-locus epistatic effect of EGFR and RXRG was identified, with a cross-validation consistency of 91.7%.     

Podocalyxin与糖尿病肾病的关系

足细胞标记蛋白(podocalyxin)作为足突顶端质膜的主要构成部分,是足突顶膜区主要的带负电荷的唾液酸蛋白,参与维持足细胞的正常结构和滤过屏障。糖尿病肾病早期以肾脏肥大和肾小球高滤过为特征。在肾小球足细胞的检测中,podocalyxin作为最常用的标记蛋白之一,对监测肾小球疾病的发生和发展起到极其重要的作用。深入研究podocalyxin对糖尿病肾小球病变的早期诊断及治疗有着重要的指导意义。     

炎症与糖尿病肾病

近年来,炎症反应在糖尿病及其并发症发病机制中的作用引起了人们的广泛关注,研究报道炎症因子及促炎症因子与糖尿病肾病的发生和发展密切相关,并认为糖尿病肾病是一种炎症性疾病,炎症因子的大量产生参与并促进糖尿病肾病的进展。本文重点就炎症因子与糖尿病肾病的关系以及抗炎治疗对糖尿病肾的保护作用进行综述。