甲状腺癌中p53基因248位密码子突变及其蛋白过度表达的临…

对５４例甲状腺癌标本分别用ＤＮＡ聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法检测ｐ５３基因第２４８位密码子的突变及免疫组化法检测ｐ５３蛋白，并用时序检验分析ｐ５３基因突变和ｐ５３蛋白表达与甲状腺癌的关系。结果发现，甲状腺癌中１５例（２７．８％）有ｐ５３基因突变和３０例（５５．６％）有ｐ５３蛋白过度表达，临床分期晚、分化程度低的甲状腺癌突变率较高，ｐ５３抑癌基因突变和ｐ５３蛋白阳性病     

甲状腺癌中p53基因248位密码子突变及其蛋白过度表达的临床意义

对５４例甲状腺癌标本分别用ＤＮＡ聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法检测ｐ５３基因第２４８位密码子的突变及免疫组化法检测ｐ５３蛋白，并用时序检验分析ｐ５３基因突变和ｐ５３蛋白表达与甲状腺癌的关系。结果发现，甲状腺癌中１５例（２７８％）有ｐ５３基因突变和３０例（５５６％）有ｐ５３蛋白过度表达，临床分期晚、分化程度低的甲状腺癌突变率较高，ｐ５３抑癌基因突变和ｐ５３蛋白阳性的病例有较高的复发率和死亡率。表明ｐ５３基因突变及其蛋白过度表达在甲状腺癌的发生和发展过程中起重要作用，是预后不良的标志。     

ras和p53在甲状腺癌中的表达

目的 探讨ｒａｓ和ｐ５３基因过度表达在甲状腺癌发生中的相互作用,以及甲状腺癌的临床病理标准与ｒａｓ和ｐ５３基因过度表达的关系。方法 采用ＬＳＡＢ免疫组化法检测了ｒａｓ和ｐ５３在８０例甲状腺病变中的表达,其中５４例为甲状腺癌,２６例为良性甲状腺结节性病变。结果 ｒａｓ和ｐ５３在甲状腺癌和良性甲状腺结节性病变中的表达阳性率分别为９０．７％及２３．０％和５５．５％及３０．７％,两者相比较,差异有显著性意     

阴茎癌组织中K－ras基因点突变和ras基因产物P21表达的探讨

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）及免疫组化方法研究２８例阴茎癌Ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子点突变和ｒａｓ基因产物Ｐ２１蛋白的表达情况。结果显示２８例阴茎癌发现３例存在Ｋ－ｒａｓ基因第１２位点突变，１２例标本有Ｐ２１蛋白阳性表达，而癌旁组织Ｐ２１表达阴性，并且Ｐ２１阳性表达率与阴茎癌分化程度和临床分期有关。提示ｒａｓ基因的激活在阴茎癌的发生中有一定的作用。首先发现了阴茎癌中Ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子点突变和Ｐ２１蛋白表达阳性。     

胆道癌中k-ras基因12密码子点突变的检测

ｒａｓ癌基因激活在人类许多肿瘤发生中起重要作用。有关胆道癌ｋｒａｓ基因１２密码子点突变的研究国内外报道较少,我们采用聚合酶链式反应限制性长度片段多态性（ＰＣＲＲＦＬＰ）方法,检测了ｋｒａｓ基因１２密码子在胆道良恶性疾病中的突变情况。１．材料和方法：取用手术切除常规石蜡包埋组织标本７８例。其中胆囊癌１０例、胆管癌４３例、慢性胆囊炎１０例、胆囊腺瘤和胆囊腺肌症各４例、胆总管囊肿７例。１０μｍ连续切片２张,其中１张常规ＨＥ染色,判定肿瘤细胞存在。另１张随机编号,按文献［１］操作提取标本ＤＮＡ…     

胆汁中突变基因与大肠癌肝转移关系的研究

目的 探讨胆汁中的点突变基因对诊断大肠癌肝转移的价值。方法 采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ测序技术,检测大肠癌患者原发灶、肝转移灶、胆汁中相同突变位点的ｐ５３、ｋ－ｒａｓ基因。结果 在５０例大肠癌中,检出有ｐ５３、ｋ－ｒａｓ基因突变３８例（７６．０％）。其中有ｐ５３基因突变２８例（５６．０％）,ｋ－ｒａｓ基因突变１６例（３２．０％）。在１２例出现肝转移者的胆汁中检出有与原发灶相同的点突变基因者１０例     

肝细胞癌与p53基因突变的关系研究

目的 探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）和ｐ５３基因突变的关系，方法 采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析技术，检测ＨＣＣｐ５３基因第７外显子点突变，研究来自黄曲霉素Ｂ１（ＡＦＢ１）污染严重的南宁地区的ＨＣＣ标本５５例，结果 ３４例ＨＣＣｐ５３基因２４９密码子中的点突变，突变频率为６２％（３４／５５），伴乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性组ｐ５３基因突变率６２．５％，ＨＢｓＡｇ阴性组ｐ５３基因突变率５７     

肾癌组织中H－ras基因点突变和ras基因产物P21表达的检测

肾癌组织中Ｈ－ｒａｓ基因点突变和ｒａｓ基因产物Ｐ２１表达的检测丁强，张元芳，孙逊ｒａｓ原癌基因的激活与众多人类恶性肿瘤的发生有关。中国人肾癌Ｈ－ｒａｓ基因点突变情况，国内尚未见报道。我们对４５例肾癌组织中Ｈ－ｒａｓ基因第１２位密码子的点突变和基因产物...     

巢式PCR—RFLP检测直肠癌K—ras癌基因第12位密码子点突变及意义

采用巢式ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术，对２６例直肠癌患者标本进行了Ｋ－ｒａｓ第１２位密码子点突变进行检测，结果显示，２６例直肠癌患者中有１３例有Ｋ－ｒａｓ点突变，突变发生与年龄相关，与性别、Ｄｕｋｅｓ分期及有无转移无关，发化程度越差突变率越高，发生Ｋ－ｒａｓ点突变者预后较差。     

ras癌基因点突变与膀胱癌关系的研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ），结合限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析的方法，检测２４例石蜡包埋的膀胱癌组织中１５例Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子的点突变呈阳性（６２．５％），提示Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子的点突变随膀胱癌的级别、期别升高，可作为判断肿瘤恶性程度、进展和预后的监测指标。     

P21、P185、P53蛋白表达及ras、P53基因突变与膀胱癌的关系

为探讨癌基因及抑癌基因改变与膀胱癌生物学行为的关系，采用免疫组织化学方法及分子生物学技术，检测了８２例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达及３８例ｒａｓ、Ｐ５３基因突变。结果表明：Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达阳性分别为５１例（６２．２％）、４８例（５８．５％）、２６例（３１．７％）。Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达阳性率与膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期呈正相关（Ｐ＜０．０１）；Ｐ１８５蛋白阳性率与膀胱移行细胞癌分级、分期呈负相关（Ｐ＜０．０５）。膀胱移行细胞癌组织中１５例（３９．５％）有Ｈａｒａｓ癌基因第１２位密码子突变；１２例（３１．６％）有Ｐ５３抑癌基因突变，其中全部有第２８０位密码子ＧＣ突变；３例合并有２４８密码子突变；１例有２４９密码子点突变。Ｈａｒａｓ癌基因及Ｐ５３抑癌基因点突变与膀胱癌病理分级和临床分期呈显著正相关（Ｐ＜０．０５）；与预后显著相关（Ｐ＜０．０５）；且死亡率高于点突变阴性者。６例既有Ｈａｒａｓ基因突变，又有Ｐ５３基因突变的病例中４例死亡。     

抑癌基因p53突变与肝细胞癌预后的关系

探讨抑癌基因ｐ５３突变与肝细胞癌预后的关系。方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析技术，检测ＨＣＣｐ５３基因第７外显子点突变，研究５５例来自南宁地区的ＨＣＣ。结果３４例ＨＣＣｐ５３基因２４９密码子发生点突变，伴ＨＣＣ转移者１６例，未转移者１８例；级分化１例，Ⅱ－Ⅲ级１５例，Ⅳ级１８例。     

野生型p53基因导入对膀胱癌细胞生长抑制和H－ras基因表达调控

通过逆转录病毒载体将外源野生型ｐ５３基因导入膀胱癌细胞ＢＩＵ－８７和ＥＪ，使细胞在体外标准培养条件下生长速率降低，丧失裸鼠致瘤性。细胞周期分析显示Ｇ０＋Ｇ１细胞比率明显增高，已证明，ＢＩＵ－８７和ＥＪ细胞都有ｒａｓ基因突变和表达扩增。进一步研究发现，转染的细胞内Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ表达低于非转染细胞。结果提示，增加细胞内野生型ｐ５３基因表达量能抑制突变的ｒａｓ基因表达，从而抑制膀胱癌细胞的恶性增殖。     

PCR—SSP快速检测胰腺癌K—ras基因第12位密码子点突变

为研究简便、快速、特异、灵敏的检测胰腺癌Ｋ－ｒａｓ基因突变和突变方式的方法及其在胰腺肿块术前定性诊断中的价值，我们采用针对Ｋ－ｒａｓ基因点突变方式（ＣＧＴ、ＧＴＴ、ＧＡＴ）设计的顺序特异性引物（ＳＳＰ），对冰冻胰腺癌组织进行ＰＣＲ，产物借助常规电泳即可知有无Ｋ－ｒａｓ基因突变及突变方式，无露酶切、杂文、放射性及非放射性显影。结果发现：３４例胰腺癌标本皆存在Ｋ－ｒａｓ基因点突变，其中８例存在两种方式突变，１３例正常胰腺组织、１７例胰腺良性疾病、７例胆管癌、５例壶腹癌及４例十二指肠乳头癌均未见Ｋ－ｒａｓ基因点突变。结果说明该法简便、快速、特异、灵敏，对于胰腺肿块术前定性诊断具有重要参考价值。     

前列腺癌组织中ras基因产物P21表达和H—ras基因点突变探讨

应用聚合酶链反应结合寡聚核苷酸探针杂交技术及免疫组化及方法检测前列腺癌组织中Ｈ－ｒａｓ基因第１２位密码子突变及其基因产物Ｐ２１蛋白表达水平。２８例前列腺癌中仅发２例这种点突变和１３例Ｐ２１蛋白表达阳性，５例正常组织及癌旁组织Ｐ２１２表达有性     

肝细胞肝癌中p53、ras基因与血管内皮生长因子表达的关系

目的 研究肝细胞肝癌中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达与ｐ５３,ｒａｓ基因之间的关系。方法 用免疫组织化学方法研究４５例肝癌标本ＶＥＧＦ,ｐ５３及ｒａｓ基因的表达。结果 ＶＥＧＦ的表达率为６４．４％（２９／４５）,ｐ５３的表达率为４８．９％（２２／４５）,ｒａｓ表达率为５３．３％（２４／４５）,经连续切片对比分析表明,在ＶＥＧＦ表达较高的区域,ｐ５３,ｒａｓ的表达亦较强,但Ｘ＾２检验仅提示ｐ５３     

睾丸癌组织中K—ras基因点突变和ras基因产物P21表达的评价

睾丸癌组织中Ｋｒａｓ基因点突变和ｒａｓ基因产物Ｐ２１表达的评价丁强张元芳孙逊邹宇ｒａｓ基因家族分Ｈｒａｓ、Ｋｒａｓ和Ｎｒａｓ三种基因。点突变是ｒａｓ基因激活的主要方式。ｒａｓ基因第１２、１３和６１位密码子突变在人类正常细胞恶性转化过程中起着重...     

应用ras基因突变检测诊断胰腺癌

为提高胰腺癌的早期诊断率，作者采用多聚酶链反应－限制性酶切片段长度多态性技术，对６８例怀疑胰腺及其邻近器官有占位性病变的患者行细针穿刺活检，标本进行ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变检测，应用于胰腺癌的临床诊断。结果显示：４４例胰腺癌中４２例有ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变，阳性率达９５．４％，而２４例慢性胰腺炎、壶腹癌、胰岛素瘤等均无ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变。本研究结果提示胰腺ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变检测是诊断和鉴别诊断胰腺癌的有效方法。     

ras、p53基因突变和蛋白表达与尿路上皮肿瘤预后的关系

目的　研究ｒａｓ、ｐ５３ 基因突变和蛋白表达及ＤＮＡ 倍体异常与尿路上皮肿瘤预后关系。　方法　应用ＰＣＲＳＳＣＰ和流式免疫荧光法检测５２ 例尿路上皮肿瘤Ｋｒａｓ 和ｐ５３ 基因突变及蛋白表达和ＤＮＡ 含量变化。　结果　Ｋｒａｓ、ｐ５３ 基因突变分别为５ 例（９ ．６ ％ ） 和２２ 例（４２ ．３ ％ ） ;ｒａｓ ｐ２１ 、ｐ５３ 蛋白阳性表达分别为３６ 例（６９ ．２ ％ ） 和３３ 例（６３ ．５ ％ ） ;异倍体和二倍体肿瘤分别为２２ 例（４２ ．３ ％ ） 和３０ 例（５７ ．７ ％ ） ;ＤＮＡ 倍体异常、ｐ５３ 基因突变及ｒａｓ ｐ２１ 和ｐ５３ 蛋白表达与肿瘤病理分级、分期及预后密切相关（ Ｐ＜ ０ ．０１） ;异倍体肿瘤其ｐ５３ 基因突变、ｒａｓ ｐ２１ 和ｐ５３ 蛋白表达率均明显高于二倍体肿瘤（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。　结论　ＤＮＡ 倍体异常、ｐ５３ 基因突变及ｒａｓ ｐ２１ 和ｐ５３ 蛋白表达对尿路上皮肿瘤预后判断有重要意义。     

阴茎癌组织中K—ras基因点突变和ras基因产物P21表达的探讨

应用聚合酶链反应结合单链构象多态性分析及免疫组化方法研究２８例阴茎癌Ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子突变和ａｓ基因产物Ｐ２１蛋白的表达情况。结果显示２８例阴茎癌发现３例存在Ｋ－ｒａｓ基因第１２位点突变，１２例标本有Ｐ２１蛋白阳性表达，而癌旁组织Ｐ２１表达阴性，并且Ｐ２１阳性表达率与阴茎癌分化程度和临床分期有关。