异体腹主动脉桥接周围神经缺损的实验研究

采用经－３０℃和室温下反复冻融的大鼠异体腹主动脉桥接大鼠１０ｍｍ长的坐骨神经缺损，同时用经相同处理方法的异体坐骨神经和异体腹腔静脉桥接组作为对照，分别观察１个月和５个月后，结果证实异体腹主动脉桥接组再生神经远端有髓纤维总数、有髓纤维再生率及神经传导速度均优于异体神经及异体静脉组。实验结果表明：异体腹主动脉是良好的修复神经缺损的材料。     

不同冷冻温度和保存时间对同种异体神经移植后神经功能影响的研究

目的研究并探索一种最合适保存同种异体神经的冷冻温度和时间，以获最小的排斥反应和最好的神经再生。方法取１００只大白鼠，分实验组和对照组。实验组：按异体神经的保存时间分成２０分钟、１周和３周组；各组根据保存的温度再分成－１９６℃、－８０℃及－４０℃组，每组各为１０只大白鼠。对照组：１０只大鼠，新鲜异体神经不作处理即行神经移植。各组分别于术后６周和１２周观察神经电图变化。结果随着保存温度的降低与时间的延长，同种异体神经移植后，运动诱发电位的潜伏期缩短；诱发电位的峰值、振幅积分增加；运动神经传导速度加快。结论经冷冻保存的同种异体神经移植后，神经近断端再生轴突能通过并长入远断端。冷冻温度以－１９６℃为好，保存时间以３周为佳     

狗神经异体移植实验

文献报道异体神经用降低抗原性的方法处理后移植，轴突可以再生，所用方法有酒精浸泡、冻融、冷冻等［１３］，但这类实验中移植段不超过３ｃｍ，更长的移植段是否行尚不清楚。本实验研究狗５ｃｍ坐骨神经异体移植的效果，神经处理方法是冻融或加免疫抑制剂浸泡。材料和方法选用２１只成年杂种狗分５组，每只狗一侧坐骨神经进行移植，另一侧做正常对照。（１）自体移植，３只狗，把切除的５ｃｍ坐骨神经原位缝合；（２）异体未处理神经移植，３只狗，移植则仅从只１只狗取下的坐骨神经；（３）异体冻融处理神经移植，５只狗，神经取下浸入…     

人参皂甙Rb1冷保存大鼠坐骨神经修复周围神经缺损的实验研究

[目的]探讨人参皂甙Rb1(Ginsenoside Rb1,G-Rb1)冷保存大鼠坐骨神经对同种异体移植后受体神经再生的影响。[方法]3个月龄SPF级雄性Wistar大鼠和SD大鼠分别作为供体和受体。切取供体大鼠双侧坐骨神经15 mm长,随机在G-Rb1溶液(0、50、200 mg·L-1)中4℃保存4周(A4、B4、C4组)和6周(A6、B6、C6组),Western-blot检测供体神经Bcl-2表达,Calcein-AM染色LSCM观察冷保存6周供体神经生物活性。用冷保存6周的供体神经(A6、B6、C6组)修复对应的受体(A、B、C组)坐骨神经10 mm缺损,术后分期行大体观察、坐骨神经功能指数检测,第20周行电生理检测、再生神经组织学观察。[结果]Western-blot检测Bcl-2表达,冷保存4周时,B4组高于A4、C4组(P0.05),冷保存6周时,B6、C6组高于A6组,且B6组高于C6组,差异均有统计学意义(P0.05)。Calcein-AM染色LSCM观察,B6、C6组荧光强度与A6组比较,B6组与C6组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。移植术后各期坐骨神经功能指数,20周电生理检测、再生有髓神经纤维数目、髓鞘厚度,B、C组与A组比较,B组与C组比较,差异有统计学意义(P0.05);术后20周透射电镜显示,A组再生有髓纤维少、髓鞘薄,结缔组织增生明显,B、C组有髓纤维较多、髓鞘厚,无明显结缔组织增生。[结论]G-Rb1对冷保存大鼠坐骨神经具有保护作用,G-Rb1冷保存的坐骨神经能改善同种异体移植后神经再生效果。     

胎兔周围神经同种异体移植的实验研究

目的：设计同种异体神经移植的实验模型，探讨其临床应用的可能性。方法：选妊娠２８天的青紫蓝兔为供体，４８只大耳白兔为受体。取供体胎兔的坐骨神经，经超低温冷冻与液氮处理，复温后桥接于受体１侧正中神经缺损段，为实验组。另１侧取自体神经移植，为对照组。术后２周、３个月进行免疫学与神经电生理检测；电镜观察和形态定量学分析。结果：术后两组均无急性排异反应。神经传导速度，再生神经单位面积髓鞘数，平均灰度值及单位面积髓鞘密度值等，两组差异均无显著意义（Ｐ＞０．０５）。结论：胎兔神经能够代替自体神经移植。     

冷冻异体神经移植应用转化生长因子β1质粒的研究

目的探讨对经反复冻融处理的冷藏异体神经移植,局部使用转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)质粒的效果. 方法健康成年不同窝Wistar大鼠40只随机分为两组,每组20只,将坐骨神经在梨状肌孔下5 mm处切除2.0 cm,神经缺损用预制反复冻融于-196℃冷冻的异体神经2.0 cm移植修复.实验组在局部肌肉及神经两断端注射TGF-β1质粒,对照组注射等量生理盐水.分别于6周和12周对每组10只大鼠取材,切片、染色并进行轴索计数和统计学分析. 结果 6周时实验组轴索间基本无水肿,再生神经数量接近正常;对照组神经移植段轴索间有轻度水肿,再生神经较少.12周时实验组整个神经移植段基本被再生轴突充满,有髓纤维排列整齐,轴突和髓鞘发育良好,再生轴突数为98.6±4.8/μm2;对照组神经纤维排列整齐,轴突和髓鞘发育较实验组差,轴突数为75.8± 5.1/μm2,差异有统计学意义(P<0.01). 结论反复冻融冷藏保存的异体神经其抗原性降低,具有修复神经缺损的可能性.局部使用TGF-β1质粒可发挥免疫抑制作用,降低宿主的免疫排斥反应.     

胎儿神经移植修复感觉神经缺损

为观察经深低温冷冻胎儿神经移植修复人体感觉神经缺损的效果，用胎龄为１６周～２４周的坐骨神经和正中神经，经－８０℃冷冻后修复指总神经、指神经等神经缺损２２例（３６条）。移植胎儿神经最短２ｃｍ，最长１２ｃｍ。本组患者均获得随访，随访时间为７个月～５年。结果表明，优Ｓ＋３８条，良Ｓ３１５条，占６３．９％；可Ｓ＋２６条，Ｓ２４条，占２７．８％；差Ｓ０３条，占８．３％。认为，胎儿神经抗原性弱，深低温冷冻可进一步降低其抗原性，对修复５ｃｍ以内感觉神经缺损疗效较好，是较理想的异体神经移植材料；二甲亚砜可防止冷冻对神经组织的损害     

大鼠坐骨神经内注射-氧化氮供体致轴突组织学改变的观察

目的：观察一氧化氮(NO)供体对大鼠外周神经轴突的作用，探讨其是否能够在神经溶解术中发挥作用。方法：选择78只雌性PVG大鼠，分为实验组和对照组，以在体神经内微注射实验方法，将三种半衰期不同的NO供体(DETA NONOate，DPTA NONOate和Spermine NONOate)及生理盐水分别注入大鼠左侧坐骨神经的神经束膜下，于注射后的不同时间(1天、2天、3天、7天和14天)取出注射部位的坐骨神经，经组织学处理后做成树脂包埋块，以超薄切片机切片，然后在高倍显微镜下观察并计数神经横断面的变性轴突数目。结果：在本实验条件下，应用三种NO供体的低浓度，都不能引起大鼠坐骨神经轴突的改变；将DETA NONOat浓度加倍则可导致轴突脱髓鞘和沃勒变性，但对有髓鞘纤维和无髓鞘纤维并无选择性作用。结论：在本实验条件下，NO供体导致外周神经轴突脱髓鞘和变性的作用与其浓度呈正相关，但对感觉神经纤维并无选择性溶解的作用。     

胸腺内注射异基因抗原诱导鼠神经移植免疫耐受的实验研究

目的探讨小鼠胸腺内注射异基因抗原在同种异体异基因坐骨神经移植免疫耐受中的作用。方法自供体小鼠C57BL／6的脾细胞中提取MHC抗原注人受体鼠Balb／c小鼠胸腺内，于2周后移植供体鼠坐骨神经。48只Balb／c小鼠随机分为4组，A组（胸腺内注射组）、B组（自体神经移植组）、C组（冷冻异体神经移植组）、D组（异体神经移植加用免疫抑制剂组）。于3周后进行电生理学、组织学、免疫学检测。结果A组运动神经传导速度（38．23m／s）与D组（36．39m／s）相比无显著性差异（P〉0．05），组织学、电镜、免疫学（混合淋巴细胞培养及迟发性超敏反应）检测结果均证实B组分别优于A组、D组和C组。结论胸腺内注射异基因MHC抗原可诱导大鼠对异体坐骨神经移植的特异性免疫耐受。     

95%乙醇浸泡异体肌腱移植的实验研究

目的：研究用９５％乙醇浸泡处理后的异体肌腱移植对肌腱愈合的影响。方法：选用ＳＤ大鼠８０只，随机分为３组。乙醇浸泡异体肌腱组：切除大鼠跟腱全长，用９５％乙醇浸泡处理的异体肌腱桥接于腱缺损处。新鲜异体肌腱组：用新鲜异体肌腱移植于腱缺损处。自体肌腱组：用自体肌腱移植于腱缺损处，作为对照组。各组分别于术后２、３、４、６周观察肌腱形态学和组织学的变化；术后半年进行肌腱拉力试验。结果：乙醇浸泡处理的异体肌腱有明显降低组织抗原性的作用，移植后对肌腱愈合无明显影响，拉力和对照组相似。结论：乙醇浸泡处理后的异体肌腱可应用于临床     

酒精保存的硬脊膜桥接周围神经缺损的实验研究

本文报道用酒精保存的异体硬脊膜桥接大鼠10mm坐骨神经缺损,术后1～4个月行光镜、电镜、电生理、计算机图像分析等检测证实,异体硬脊膜能成功地修复10mm的大鼠坐骨神经缺损,再生神经成熟良好,恢复传导功能,其修复神经缺损的效果明显优于带蒂的骨骼肌桥接,硬脊膜能较快地被宿主组织取代而与神经外膜无明显分界。异体硬脊膜有可能作为新的神经修复材料而应用于临床。     

受体血浆冷存异体神经桥接神经制损的形态学研究

目的 研究用受体血浆冷冻处理的异体神移植,以提高神经再生效果。方法 选用１６条家铬的双侧正中神经（３２条）,作成双侧正中神经缺损３ｃｍ的模型。（１）实验组：左前肢用受体血浆冷冻处理的同种异体神经缝接于神经缺损处。（２）对照组：右肢缺损处用冷冻处理的同种异体神经桥接。两组于术后７、２１、９０、１８０ｄ不同时间点,分别进行组织学观察和图像分析仪测定。结果 术后随时间的延长,实验组社经纤维再生数量明显较     

放射辐照对异体神经移植组织学改变的影响

目的 探索放射辐照对异体神经移植组织学改变的影响。方法 将１８只ＳＤ大白鼠随机均分为三组：自体对照组、异体对照组、辐射处理组。应用放射辐照方法处理异体神经后进行移植。术后１２周移植神经和胫前肌ＨＥ染色,移植神经Ｓ－１００蛋白及波形蛋白免疫组化和甲苯胺蓝染色,观察其组织学变化和计数单位面积内阳性轴突数和再生的有髓神经纤维数量。结果 放射性照处理后的移植神经,纤维组织增生和炎性细胞浸润较少,胫前肌生长良好,再生有髓神经纤维增多（与异体对照组比较,Ｐ〈０．０５）,单位面积内的阳性轴突数明显增多（Ｐ〈０．０５）。结论 放射辐照处理可降低异体神经的抗原性。     

^125碘—辣根过氧化物酶追踪手术后神经轴浆流的实验研究

目的 研究^125碘－辣根过氧化物酶（^125I-HRP）追踪术后神经轴浆流的可行性；为临床应用放射性同位素研究神经再生提供实验依据。方法 24只SD磊鼠，按手术先后顺序分为两组。（1）实验组：于从骨结节远端0．8cm处切断大鼠右侧坐骨神经后立即行端端缝合术。术后4周，从右侧小腱三头肌内注射^125I－HRP。（2）对照组：将^125Ｉ－ＨＲＰ注射到大鼠右侧小腱三头肌内。于注射^125I－HRP24h后，实验组取神经缝合口近段0．8cm神经干，对照组取石侧坐骨结节远端的坐骨神经0．8cm；两组同时切取该段神经周围肌肉和左侧相应部位坐骨神经干，进行^125碘放射性强度的Г－计数。结果 对照组，注射侧坐骨神经干的^125碘放射性强度是其它组织的30倍以上。实验组，注射侧坐骨神经的6125碘放射性强度是其周围肌肉和对侧坐骨神经的6倍和7倍。两组注射侧坐骨神经的^125碘放射性强度和其它组织相比，均有显著性意义（P＜0．01）。结论 ^125I-HRP注入肌肉被神经末梢摄取后，经轴浆逆流可以通过神经缝合口到达神经近段，应用Г－计数器可探测神经组织中的^125碘放射性强度。     

氨哮素对神经切断再缝合后肌肉功能恢复的影响

研究氨哮素对神经切断再缝合后肌肉功能恢复的影响。显露大鼠左侧坐骨神经根部，切断后再缝合；实验组给予内含氨哮素的合成饲料，对照组给予一般合成饲料。８０天后检测比目鱼肌和趾长伸肌的肌湿重，蛋白质含量，肌张力和肌纤维截面积。结果：实验组比目鱼肌和趾长伸肌的总蛋白质含量，肌湿重，肌张力以及纤维截面积均较对照组有显著增加。     

化学去细胞同种异体神经移植的实验研究

目的探讨化学去细胞同种异体神经的免疫学特性及其修复灵长类动物神经缺损的能力。方法(1)分别获取SD大鼠的坐骨神经和猕猴的正中神经,经4.0%TritonX-100和72mM脱氧胆酸钠溶液重复消化处理,制备SD大鼠和猕猴的化学去细胞神经。在Wistar近交系大鼠的皮下植入化学去细胞同种异体神经和新鲜SD近交系大鼠的神经,检测植入部位组织内T淋巴细胞及其亚群的浸润程度。(2)用化学去细胞同种异体神经移植修复猕猴5cm长的正中神经缺损,通过功能观察、神经电生理检测、神经再生组织学、S-100免疫组织化学染色和运动终板染色观察神经移植后的效果。结果化学去细胞异体神经植入体内后,移植神经周围组织浸润的CD3+、CD4+和CD8+细胞数量明显少于新鲜同种异体神经移植的对照组。去细胞同种异体神经可以修复猕猴5cm长的周围神经缺损,在移植术后5个月患肢功能均有不同程度的改善。移植术后6个月神经电生理检测显示,刺激可以通过移植段神经到达远端的效应器,在神经支配区肌肉可以记录到运动诱发电位,跨过移植神经段的传导速度已达(40.5±6.8)m/s。神经再生组织学检查显示有再生的神经纤维通过移植段神经,在去细胞异体神经移植段内分布纵行排列的雪旺细胞,在支配区肌肉可以检测到重建的运动终板。结论化学去细胞同种异体神经的抗原性明显降低,可修复高等哺乳类动物的周围神经损伤。     

气管放疗加深低温保存后同种异体移植的实验研究

目的：探讨气管大剂量放疗加深低温保存后，同种异体节段性气管移植的可行性。方法：健康杂种犬22种分两组，对照组（10只）供体气管不做任何处理，实验组（12只）供体气管放疗10万cGy后深低温（－196℃）保存，同种异体气管移植长度为6个气管软骨环（4cm），移植后两组动物均不使用免疫抑制剂。结果：对照组动物均于移植后2－3周因气管狭窄窒息死亡或处死，肉眼标本见移植段气管明显狭窄，挛缩，部分软骨脱落，放疗加深低温保存组动物于移植后1个月内无狭窄症状，部分动物于术后2个月出现不同程度的狭窄，气管内置管后临床症状缓解，半数实验组动物移植段气管无狭窄发生，内膜光滑，吻合端愈合良好，动物长期生存，结论：气管大剂量放疗加深低温保存方法可降低同种异体移植的免疫原性，经大剂量放疗加深低温保存的气管移植后可不使用免疫抑制剂，是一种有临床应用前景的方法。℃     

周围神经移植修复脊髓损伤的实验研究

目的：探讨自体坐骨神经移植修复脊髓损伤的可行性。方法：将58只雌性Wistar大鼠分为二组，实验组：采用显微外科技术，将50只大鼠于T13水平切除左半侧脊髓10mm，再取右侧坐骨神经10mm移植到脊髓缺损处，近端接脊髓，远端接马尾，分别于术后2、4、6、8、12、22周在光镜和电镜下观察移植处坐骨神经、吻合口远端马尾神经、左后肢坐骨神经再生情况，并用摄像机记录患肢功能恢复情况。对照组：8只大鼠，于13水平切除左半侧脊髓10mm，不移植坐骨神经，观察脊髓缺损远端马尾神经和左右肢坐骨神经再生情况。结果：对照组坐骨神经的轴突及髓鞘部分崩解，密度降低，无再生轴突形成。实验组术后4周电镜下偶见移植处坐骨神经髓鞘及轴突形成，术后8周光镜及电镜下可见较多细的有髓神经纤维，22周时接近正常；同时观察到左后肢坐骨神经再生；大鼠后肢功能部分恢复，肌力达3级。结论：大鼠脊髓损伤后有再生能力，周围神经移植修复脊髓损伤是可行的。     

同种异体神经复合体修复兔坐骨神经缺损的研究

目的 用种植胎兔雪旺细胞的去细胞同种异体神经复合体修复兔缺损的坐骨神经,观察坐骨神经再生及功能恢复.方法 健康成年新西兰白兔48只,体质量1.5-2.0 kg,随机分成2组.两组动物均切除一段坐骨神经,造成2.0 cm长的缺损.实验组:用种植胎兔雪旺细胞的同种异体神经复合体修复坐骨神经.对照组:仅用去细胞同种异体神经修复.术后4、8、16周进行大体观察、标本光镜和电镜观察且进行量化分析、肌湿重检测.结果 手术区局部均未出现明显的排斥反应,实验组足部溃疡愈合情况优于对照组,实验组再生神经纤维数目、有髓神经纤维轴突直径、髓鞘厚度4、8、16周分别为(906.25±30.68,1726.25±51.89,2825.13±22.79)、(5.35±0.62,5.46±0.38,5.59±0.80),(1.65±0.37,1.75±0.41,1.83±0.49)均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).小腿三头肌湿重于术后4周两组间差异无统计学意义(P>0.05),实验组术后8、16周分别为(5.62±0.99,7.38±0.26)恢复优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 种植雪旺细胞的去细胞同种异体神经复合体对神经再生及功能恢复有更好的促进作用.     

甘油处理的同种异体神经在临床的应用

目的：寻找一种制作简便，保存方便同时又无明显抗原性，具备完整神经内膜结构，并能长期保留的神经移植物。方法：将无菌条件下取得的同种异体神经在37℃条件下，依次在50％、70％、85％的甘油中各浸泡3h，再分装在盛有85％甘油容器中密封，置于5℃保存6周后备用。结果：10例患者，行甘油处理后的同种异体神经移植14条，长度为2．5－18cm，术后经过5－42个月的随访观察，获得满意效果。结论：同种异体神经通过甘油处理贮存6周后，用于桥接周围神经缺损，有明显效果，是一种值得进一步研究应用的神经移植材料。