应用PCR检测4种消毒剂对HBV—DNA的灭活效果

我们应用聚合酶键反应（PCR）技术，检测碘伏、高锰酸钾、来苏尔和84消毒液对HBV－DNA的灭活效果。报告如下。材料与方法一、材料碘伏，南京大学消毒剂厂生产（批号19931204）。高锰酸钾，广东梅县锰化厂生产（批号19920201）。来苏尔，南昌医药比工厂生产（批号19921024）。84消毒液，南昌健宝防疫用品厂生产（批号19930720）。HBV－DNAPCR试剂盒，由南通宏达生物技术有限公司提供（批号19930509HBV－DNA强阳性血清，采集于住我院的慢性乙型肝炎患者。中和剂：碘伏用2．5％硫代硫酸钠，高锰酸钾用0．2％硫酸亚铁该，来苏尔用2％…     

聚合酶链反应对单—抗HBc阳性的飞行员血清HBV—DNA的检测

用聚合酶链反应对单－抗ＨＢｃ阳性的飞行员血清ＨＢＶ携带情况进行了调查，首先用ＥＬＩＳＡ法对１８９份血清检测了ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ和抗ＨＢｃ。ＨＢｓＡｇ阳性率为４．７６％（９／１８９），抗ＨＢｓ１７．９９％（３４／１８９），抗ＨＢｃ２４．８７％（４７／１８９），聚合酶链反应检测单－抗ＨＢｃ阳性血１９份，抗ＨＢｓ阳性／抗ＨＢｃ阳性血２０份。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３１．５８％（６／１９）和５％（１／     

无症状HBsAg携带者血清标志的模式及e系统的探讨

通过对214名无症状HBsAg携带者血清HBsAg滴度分布、血清标志模式及e系统与血清HBsAg滴度的关系进行分析,发现HBsAg滴度高的(>1:128)占携带者的50%以上,携带者中传染性较强的HBeAg阳性携带者占一半多,无症状HBsAg携带者血清标志模式中HBsAg、抗HBc、HBeAg三项阳性者占57%;HBsAg、抗HBc、抗HBe三项阳性占24.3%;单纯的HBsAg阳性者仅占1.9%;血清HBeAg出现机率与HBsAg滴度成正相关(r=0.958,P<0.005);抗HBe出现机率与HBsAg滴度成负相关(r=-0.930,P相似文献   

乙肝病毒前S1抗原、乙肝病毒血清标志物和HBV—DNA联合检测的临床应用

目的探讨乙肝病毒前S1抗原（PreS1）、乙肝病毒标志物（HBVM）与乙肝病毒DNA（HBV—DNA）检测三者之间的关系，判断乙肝病毒在体内的复制情况。方法对550例乙型肝炎患者血清，用ELISA方法检测PreS1、两对半标志物，用荧光定量PCR方法定量检测HBV—DNA并分析3者之间的关系。结果HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）的模式中，PreS1与HBV-DNA检出率分别为5213％与88．4％，HBsAg（＋）、HbeAb（＋）、HBcAb（＋）的模式中PreS1和HBV—DNA检出率分别为31．1％和47．5％，HBsAg（＋）、HBcAb（＋）的模式中PreS1和HBV-DNA检出率分别为47.3％和63．4％。结论PreS1能较好的反映HBV病毒感染及复制情况，可作为一种新的HBV血清标志物和监测指标，三者联合检测互相补充，更有助于临床疾病的诊治。     

PCR法检测患者血清中念珠菌的临床应用研究

在化疗后的肿瘤患者、器官移植者以及其他原因引起的免疫缺陷患者中，深部念珠菌感染已经成为一种重要的医院感染。念珠菌感染患者的预后比一般细菌感染者要差，所以，快速、早期诊断念珠菌感染和及时的抗念珠菌治疗十分重要。以PCR为核心的分子生物学方法是早期、敏感的诊断方法，可用于检测全血和血清标本。我们采用PCR法分别鉴定全血和血清标本中的念珠菌感染，探讨了使用血清标本鉴定念珠菌感染的可行性。     

用原位聚合酶链反应检测肝癌石蜡包埋组织中的HBV—DNA

为研究乙型肝炎病毒(HBV)感染和肝细胞癌(HCC)之间的关系,我们建立了原位聚合酶链反应(ISPCR)并检测26例HCC石蜡包埋组织中的HBV—DNA。结果显示,HBV DNA在肝癌组织和癌旁肝组织的阳性率分别为84.6％(22/26)、91.3％(21/23)。ISPCR技术既显示了PCR技术的高敏性和特异性,又能在细胞内定位,是研究HBV与HCC关系的一项有价值的技术。     

HBV—DNA套式一次PCR方法的建立

应用乙型肝炎病毒ＤＮＡ Ｃ基因区的一对外引物（ＨＢＣ１和ＨＢＣ２，护增片段长度为５６６ ｂｐ）及一对内引物（ＨＢＣ３和ＨＢＣ４，护增片段长度为３０１ ｂｐ）对不同稀释度的ＨＢＶ－ＤＮＡ（ａｄｒ亚型）进行套式一次ＰＣＲ扩增，结果表明灵敏度可达到１０ａｇ水平。此方法快速、简便、灵敏、特异，与分子杂交的灵敏度相当。     

乙型肝炎患者不同血清标志物HBV DNA的表达及意义

 目的探讨血清HBV DNA水平与HBV标志物(HBVM)表现模式的相关性.方法血清HBV DNA定量检测采用PCR ELISA法,HBVM采用ELISA法.结果在HBVM阳性的366例血清中,有199例HBV DNA阳性,占54.4%.血清HB-/ml占65.2%;HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性者HBV DNA-HBc阳性者HBV DNA阳性率占95.2%,≥106 copiessAg、HBeAg、抗阳性率占29.1%,≥106 copies/ml占17.6%.结论血清HBVM阳性患者中约55.0%的血清HBV DNA阳性,且HBeAg阳性患者中HBV DNA含量及阳性率均明显高于抗-HBe阳性者;在抗-HBs、抗-HBc阳性或HBsAg阴性者血清内也有HBV DNA阳性者.     

肝病患者肝组织及血清HBV—DNA比较

肝组织HBV-DNA检测能直接反映HBV病毒的存在。我们采用PCR-溴化乙锭法对乙型肝炎68例及肝癌5例肝组织和血清HBV-DNA进行检测,并对其中51例在不同的e系统模式时HBV-DNA存在情况进行分析,以期探讨肝病患者肝细胞内HBV-DNA复制、感染情况。1　对象和方法1.1　对象　共收集乙肝68例及肝癌5例的肝穿组织及血清标本。其中男41例,女32例;年龄18～51岁,均为本院1995年12月至1998年9月的住院患者。急性肝炎22例,慢性肝炎35例,重症肝炎11例。临床诊断以1995年5月修订的病毒性肝炎防治方案(试行)为参考[1],并辅以病理诊断。1.2　试剂来源…     

聚合酶链反应检测HBV感染患者血清HBV DNA的临床意义

聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术是本世纪分子生物学重大进展之一，在体外可将特异ＤＮＡ序列呈百万倍扩增，具有高灵敏度和高特异性。随着该技术的不断改进和完善，其在ＨＢＶ感染研究中的应用也越来越多，大大丰富和更新了人们对ＨＢＶ感染的认识［１］。本文应用ＰＣＲ技术检测不同ＨＢＶ感染患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，旨在探讨急、慢性乙型肝炎及与ＨＢＶ感染相关的肝硬变和肝癌患者血清ＨＢＶＤＮＡ的存在情况及其与乙型肝炎病毒血清标志物（ＨＢＶＭ）在反映体内病毒复制方面存在的差异，…     

HBV－DNA套式一次PCR方法的建立

应用乙型肝炎病毒ＤＮＡＣ基因区的一对外引物（ＨＢＣ＿１和ＨＢＣ＿２，扩增片段长度为５６６ｂｐ）及一对内引物（ＨＢＣ＿３和ＨＢＣ＿４，扩增片段长度为３０１ｂｐ）对不同稀释度的ＨＢＶ－ＤＮＡ（ａｄｒ亚型）进行套式一次ＰＣＲ扩增，结果表明灵敏度可达到１０ａｇ水平。此方法快速、简便、灵敏、材异，与分子杂交的灵敏度相当。     

用PCR及Southern杂交方法对HBsAg阴性献血员HBV感染的检测

用ＰＣＲ与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交（ＳＢＨ）方法对７８例ＨＢｓＡｇ阴性献血员进行ＨＢＶ感染检测，结果２份标本经ＰＣＲ后直接在２５４ｎｍ紫外灯下观察就可见到特异扩增带，另有１２份标本经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转膜杂交后可观察到特异扩增带，总阳性率较原来ＨＢｓＡｇ检测提高１７．９％，说明ＰＣＲ－ＳＢＨ可以区分ＨＢｓＡｇ阴性但仍然存在ＨＢＶ潜伏感染的献血员，使用ＰＣＲ－ＳＢＨ方法检测的ＨＢＶ可以提高输血的安全性。     

PCR技术检测结核杆菌DNA临床分析

应用聚合酶链反应(PCR)技术对我院1993年结核科住院、门诊384份痰标本和29份胸水标本予以检测,并与集菌涂片抗酸染色法进行比较.阳性率分别高出16.93%和24.14%.两种方法比较差异显著(P<0.05).充分显示了PCR技术具有迅速、敏感、特异的优点,肯定了PCR技术在结核病防治工作中的价值.     

应用原位逆转录PCR 检测石蜡切片中HCV RNA

目的：检测石蜡包埋组织中的HCV RNA。方法：原位PCR是一种能够检测单拷贝、低拷贝（20bp）DNA或RNA序列的新技术，本研究应用原位逆转录PCR检测石蜡包埋人肝外胆管癌组织中的HCV RNA。结论和结论：（1）基因组DNA去除一定要彻底。（2）选择合适的逆转录酶。（3）用原位PCR仪专用的封片装置封好，以防扩增液流出。（4）无水乙醇后固定10min防止扩增产物扩散。（5）对于不同组织来源的DNA或RNA进行原位PCR扩增的次数不同，不是循环次数越多越好，次数增多有可能使扩增产物从细胞内溢出，增加非特异性。     

聚合酶链反应对单-抗HBc阳性的飞行员血清HBV-DNA的检测

用聚合酶链反应对单-抗HBc阳性的飞行员血清HBV携带情况进行了调查，首先用ELISA法对189份血清检测了HBSAg、抗HBs和抗HBc。HBsAg阳性率为4．76％（9／189），抗HBs17．99％（34／189），抗HBc24．87％（47／189），聚合酶链反应检测单-抗HBc阳性血19份，抗HBs阳性／抗HBc阳性血20份。HBV－DNA阳性率分别为31．58％（6／19）和5％（1／20），结果提示单-抗HBC阳性飞行员中存在低水平的HBV携带者；在招飞体检仅检测血清HBSAg，不能除外低水平的HBV感染者。     

定量聚合酶链反应检测HBV感染患者血清HBV DNA的临床意义

采用信号引物能量转换定量聚合酶链反应（PCR）检测104例不同HBV感染患者血清HBV DNA含量。结果：不同HBV感染患者HBV含量范围在10^4.49-10^9.93拷贝／ml，其中急性乙肝含量显著低于慢性乙肝、乙肝后肝硬变和原发性肝癌患者的含量（P＜0.05和P＜0.01)；HBeAg( )患者的含量显著高于HBeAg(-)／抗－HBe( )患者的含量（P＜0.001)；相关分析显示：血清HBV DNA含量与血清ALT水平无明显相关。结论：HBV感染的慢性化可能与血清HBV DNA含量高有关，肝损伤与血清HBV DNA含量无明显关系；e系统血清传换后，HBV并未停止复制，只是复制水平降低，应用定量PCR检测血清HBV DNA含量有助于HBV感染患者预后的判断和重新评价HBV感染的自然史及HBVM的临床意义。     

无症状HBsAg携带者中医辨证论治现状

无症状HBsAg携带者(简称ASC)是指无任何临床症状及体征,肝功能正常,HBsAg血症持续阳性6个月以上者。根据世界卫生组织公布的数据,全世界HBsAg携带者为3亿人,而我国占1.2亿人,为乙肝病毒感染的高发区。近年来对ASC转归的研究表明,少数HBsAg阳性者可自然转阴,临床上部分患急肝是ASC慢性病变急性发作的结果,ASC也可向慢迁肝、慢活肝甚至肝硬化转变,ASC发生原发性肝癌的危险性比正常人要高几倍至几十倍。     

应用分子杂交和免疫组化技术检测肝外组织中的HBV—DNA和HBV抗原

在9名肝炎死亡病例尸检时,采集了多种组织,以斑点分子杂交技术及Southern吸印法检测了HBV-DNA,以免疫组织化学技术检测了各种组织细胞内的HBsAg、HBcAg和HBeAg。检测结果显示除肝脏外,HBV-DNA和/或HBV抗原常见于一些重要的肝外脏器和组织,说明了HBV的泛嗜性,并且提示可能与有些病症有关。睾丸和前列腺中检测到HBV抗原和HBV—DNA值得重视,为通过性生活可以传播及通过父亲也可以垂直传播给新生儿提供了依据。HBeAg在肝外组织中的检测尚未见报道,本组资料显示在多种肝外组织细胞内都可检出,说明在肝外组织中,HBV的复制也可以是活跃的。HBeAg大多存在于细胞核内,其意义尚待进一步探讨。