Aspergillus ficuum产果聚糖酶体系的分析

采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对Aspergillusficuum产果聚糖酶体系进行了分离 ,获得8条谱带 ;进一步运用薄层色谱 (TLC)和高效液相色谱 (HPLC)法进行分析 ,发现 8条谱带中有 3条属于外切菊粉酶 ,2条属于内切菊粉酶 ,证明了Aspergillusficuum能同时产内切菊粉酶和外切菊粉酶 .     

菊粉和低聚果糖可增加钙的吸收利用

菊粉和低聚果糖作为功能性食品成分的开发在国外已作了较多的研究。功能性食品的目的是要维持机体良好健康状况和降低疾病的危险性。通过用益生源、益生菌调节胃肠道活动是发展功能性食品有效的途径之一。益生菌是通过膳食供给的活的微生物 ,它们能通过影响肠道而对宿主产生有益的作用。最常用作益生菌的菌株主要是双歧杆菌和乳酸杆菌。目前 ,益生菌主要被用于发酵奶制品如酸奶中。益生源是不消化的食品成分 ,它们通过选择性地刺激一种或有限几种肠道细菌的生长或活力而对宿主产生有益的作用。目前 ,最常用作益生源的食品成分是菊粉和低聚果…     

低聚果糖合成酶──果糖转移酶的部分酶学性质研究

研究从土壤中筛选得到的黑曲霉ＡＳ００２３菌株所产的β－果糖转移酶的一些酶学性质。该酶的最适ｐＨ为５．０，最适温度为５０℃，有较好的热稳定性和较宽的ｐＨ（３．５～１０）适宜范围；并研究了１２种化学物质对酶活的影响和底物的特异性。结果显示，钴离子对该酶有一定的激活作用；底物分子越大其反应速度越慢。该酶的米氏常数Ｋ＿ｍ＝４７ｍｍｏｌ，葡萄糖是酶反应的竞争性抑制剂，其Ｋ＿ｉ＝３３０ｍｍｏｌ．当５０％（Ｗ／ｖ）蔗糖与酶在ｐＨ５．０和５０℃作用１６ｈ时，得到５２％（产物／总糖）低聚果糖。     

菊粉酶的酶学特性与分子生物学

菊粉酶是一类能水解菊粉生产果糖和果聚糖的酶.目前,已有许多关于各种霉菌、酵母和细菌生产菊粉酶的报道.但这些不同微生物来源的菊粉酶在生物物理、生物化学性质方面存在着相当大的差异.本文对菊粉酶的酶学性质、基因和基因工程的最新研究成果进行了综述.     

含有低聚果糖洗护发产品的去屑和控油临床评价

目的:观察受试者使用含有低聚果糖洗护发产品后的去屑和控油效果。方法:专业人员使用sebumeter SM815检测受试者头皮不同区域的皮脂,使用数码智能头发分析系统和相机EOS60d拍摄受试者头皮皮脂和头屑状况,受试者本人评价头皮皮脂、头屑和瘙痒程度。结果:使用该洗护发产品8天和16天后,头皮不同区域的皮脂分泌明显降低,头屑显著减少,头皮瘙痒明显缓解(P0.05,P0.01)。结论:含有低聚果糖的洗护发产品具有明显的去屑和控油效果。     

黑曲霉AS0023果糖转移酶和转化酶的酶学特性

研究了从黑曲霉AS0 0 2 3分离和纯化的果糖转移酶 (FTS)和转化酶 (INV)的酶学特性 .FTS专一催化果糖转移反应 ,INV专一催化水解反应 ;FTS和INV的最适 pH和温度分别是 5.8和 50℃ ,4 .4和 55℃ ;用 1mmol/L的Hg2 处理 ,FTS完全失活而INV仍维持 72 %的活性 ;这两种酶的酶动力学常数明显不同 ,以蔗糖为底物时 ,FTS和INV的Km 值分别为 4 4 .3 8mmol/L和 3 5.67mmol/L ;果糖是FTS和INV的竞争性抑制剂 ,其Ki 值分别为 3 5.4 4mmol/L和 1 0 5mmol/L ,而葡萄糖只是FTS的竞争性抑制剂 .     

连续生产低聚果糖的最佳操作参数

以海藻酸钙为载体包埋黑曲霉AS0 0 2 3孢子 ,培养后得到固定化增殖细胞 .将此固定化增殖细胞填入填充床反应器中以用于连续化生产低聚果糖 .研究了连续操作时的最佳工艺参数 .结果表明 ,在D 3 .5cm× 50cm的小型夹套层析柱上 ,最佳操作参数为 pH 6.5,50℃ ,体积流量 1 .3mL/min ;扩大到D 5.5cm× 1 0 0cm中型填充床反应器中 ,确定其最佳操作参数为 pH 6.5,50℃ ,体积流量 6.0mL/min ;在此条件下所得产品中低聚果糖质量分数达 53 % ,并且连续反应 1 7d低聚果糖质量分数保持在 50 %以上 .     

固定化黑曲霉增殖细胞生产低聚果糖的研究

黑曲霉孢子经海藻酸钙包埋３３ｈ后得到的固定化增殖细胞其酶活性达到最高，机械强度仍保持较高水平（为起始时８０％），最适ｐＨ为５．０，与游离酶相同，最适温度为５５℃，比游离酶高５℃；有害离子对其影响较小，其Ｋｍ（以蔗糖为底物）为８２ｍｍｏｌ．将固定化增殖细胞装入填充式反应柱，产品中低聚果糖含量在５０％～５５％，操作一个月活性保持不变。     

添加低聚果糖对慢性肾脏病小鼠肠道菌群与肾脏功能的影响

目的:分析慢性肾脏病小鼠的肠道菌群的组成和丰度,探究低聚果糖对慢性肾脏病进展的影响。方法:应用经典的5/6肾切除小鼠构建慢性肾脏病模型,使用低聚果糖对慢性肾脏病小鼠进行干预治疗。运用16SrDNA高通量测序检测小鼠粪便中的微生物。结果:在三组小鼠的粪便样本中共检测出11个门,18个纲,49个目,87个属。三组间在门水平有7个门差异存在统计学意义。低聚果糖治疗后,群落的丰富度、多样性和遗传多样性显著改善。患有慢性肾脏病的小鼠补充低聚果糖后,血清白蛋白、体重显著增高,血清肌酐、尿素氮显著下降。结论:在慢性肾脏病小鼠的饮食中增加低聚果糖可使肠道微环境向健康的趋势发展,并且可有效改善CKD小鼠的营养状态和炎症。     

内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及酶学性质

利用A¨KTA UPC-900快速蛋白液相色谱系统(FPLC)从黑曲霉发酵粉中分离纯化出内切β-葡聚糖苷酶。分离纯化后的酶比活力提高了8.1倍,回收率为7.5%。经SDS-PAGE电泳分析该内切酶的相对分子质量为26 400。酶学试验研究表明:该酶的最适反应温度为55℃,最适pH为4.8,Lineweaver-Burk法求得动力学参数,Km和Vmax分别为6.838×10-3mg/mL、2.906×10-2(mL.min)/mg。并确定了FPLC层析缓冲液的离子强度为4.8 mmol/L时分离效果达到最佳。     

黑曲霉VVTP84生产果糖转移酶

从产果糖转移酶的 11株菌株中筛选出一株黑曲霉VVTP84菌 .该菌株在含蔗糖的培养基中 ,最佳摇瓶发酵时间为 30h ,pH值为 7.0 ;当蔗糖质量浓度在 2 5 0g/L以内时 ,产酶与蔗糖质量浓度呈正相关 ;MgSO4 ·7H2 O和KH2 PO4 的添加量分别以控制在 1.5 g/L和 1.0 g/L为宜     

曲霉CJ22-326内切壳聚糖酶的分离纯化和性质

使用75%乙醇沉淀、CM SepharoseFF离子交换色谱、SephacrylS 200凝胶过滤色谱和PhenylSepharoseCL 4B疏水色谱分离纯化技术,对曲霉CJ22 326发酵液中的内切壳聚糖酶进行分离纯化和性质研究.结果表明,纯化后的内切壳聚糖酶ChiB经SDS PAGE凝胶电泳鉴定为单带,其相对分子质量为27700.采用SephacrylS 200凝胶过滤色谱测定的相对分子质量为27800.ChiB作用最适温度为65℃,最适pH值为6.0,75℃保温1h还残留40%酶活.1mmol/LMn2+对ChiB有强烈激活作用,2mmol/LCu2+,Ag+,Hg2+,Cd2+,Fe3+有强烈抑制作用.ChiB作用的最适底物为脱乙酰度95%的胶体壳聚糖.     

黑曲霉原生质体的制备、再生及转化条件

为了建立原生质体介导的黑曲霉转化系统，研究了菌龄、酶系统、渗透压稳定剂、酶解时间对葡萄糖淀粉酶生产菌株黑曲霉CICIMF0410原生质体形成与再生的影响。结果表明，培养4d的幼嫩菌丝体最适于制备原生质体；综合考虑原生质体形成与再生的情况，作者选用1mol／L山梨醇为最适渗透压稳定剂，1g／dL蜗牛酶-1g／dL纤维素酶-0．1g／dL溶壁酶为最适裂解酶组合，30℃酶解2．5～3h，最适合的原生质体的再生培养基为含0．6mol／LMgSO4的TZ培养基。在PEG和CaCl2存在条件下，以潮霉素B为选择性标记，质粒pBC-Hygro转化原生质体，每微克DNA可获得4～5个转化予。     

米曲霉腺苷酸脱氨酶的产酶条件

通过实验获得了米曲霉 3.80 0固态发酵产腺苷酸 (AMP)脱氨酶的适宜培养基 ,麸皮为主原料 ,成分质量分数为蔗糖 2 % ,鱼粉 2 % ,(NH4 ) 2 SO4 0 .1% ,吐温 80 0 .1% ,含水量 5 0 % .最佳的培养条件为 :2 5 0mL的三角瓶装 2 0 g培养基 ,在 2 8～ 30℃培养 6 0h .发酵结束称取一定量的麸曲加 10倍质量的蒸馏水 ,调节 pH 6 .0 ,在 35℃条件振荡水浴 2h .酶的浸提液经盐析、透析、DEAE柱层析分离后 ,可收集到较单一的活性峰酶 .     

宇佐美曲霉木聚糖酶的纯化和性质

采用缓冲液浸提、硫酸铵盐析、Phenyl—Sepharose CL-4B疏水层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析等分离纯化手段，从宇佐美曲霉E001固态发酵曲中分离出木聚糖酶组分，再经DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换层析进一步纯化，获得了两种电泳纯木聚糖酶XynⅠ和XynⅡ．分别采用SDS-PAGEG-75凝胶过滤层析测得XynⅠ、XynⅡ相对分子质量，两种酶均为单体蛋白质；等电聚焦电泳测得两种酶的等电点（pI）；测定了XynⅠ、XynⅡ的酶动力学常数；序列测定XynⅡN末端15个氨基酸残基的．     

米曲霉RIBl28耐酸性木聚糖酶的研究

通过RBB-Xylan筛选平板和固体培养方法获得了产木聚糖酶菌株米曲霉(Aspergillus     

黑曲霉496-1菌株植酸酶的分离纯化及酶学性质

黑曲霉(A.niger)496 1菌株所产胞外植酸酶,经透析浓缩、DEAE cellulose离子交换层析及SephadexG 75,Sephacryl100凝胶过滤,获得了2个植酸酶,其相对分子质量分别为64200及41100.该2个植酸酶的最适pH分别为6.0和3.0,最适温度分别为55℃和40℃.初步确定一个是中性植酸酶,另一个为酸性植酸酶.     

同步糖化发酵菊芋生产酒精中黑曲霉菌株的选育

使用以菊粉为惟一碳源的培养基从自然界中分离出6株产菊粉酶较强的菌种，其中黑曲霉SL-08还可以最大程度地提高塞尔雏亚酵母Z—06的发酵活力和耐酒精能力，通过紫外和亚硝基胍诱变，得到菌株SL-09，酶活提高近两倍。以菊芋粉为底物，利用黑曲霉SL-09和塞尔雏亚酵母Z-06采用同步糖化与发酵法，30℃发酵60h，使发酵醪酒精体积分数达到19．0％，转化率为理论转化率的86％。