三种尿毒素诱导高级氧化蛋白产物的生成

目的 探讨尿毒症患者体内长期积蓄的高水平尿毒素是否会通过参与高级氧化蛋白产物（AOPP）的生成而介导蛋白质的氧化损伤。 方法 以丙二醛(10 mmol/L)、马尿酸(20 mmol/L)和对甲酚(10 mmol/L)为尿毒素代表。人血清白蛋白(HSA)、健康人和尿毒症患者血浆用20 mmol/L的PBS(pH 7.4)统一调整到质量浓度为50 g/L，随后分别加入尿毒素至指定浓度。对照组内不加任何尿毒素。37℃分别温育0.5 h和24 h后，分别测定各组的AOPPs、蛋白巯基及二酪氨酸浓度。高效液相色谱（HPLC）法用于观察蛋白质的交联聚集情况。 结果 与对照组相比，尿毒素组的AOPP浓度平均增加了121.5％(P < 0.05)。尿毒素尚可降低蛋白巯基浓度，降低幅度平均达14.7％(P < 0.05)；同时蛋白二酪氨酸水平增至119.2％(P < 0.05)。HPLC结果表明尿毒素可以时间依赖性方式显著诱导高分子量AOPP(HMW-AOPPs)的生成，平均增幅为148.4％～333.3％(P < 0.05)。 结论 小分子类尿毒素可通过时间依赖性方式诱导HMW-AOPPs的生成而介导蛋白质的氧化损伤。除了髓过氧化物酶(MPO)-H2O2-Cl-通路的激活之外，尿毒素的介导损伤也是较为重要的体内AOPP生成机制之一。     

芬太尼在麻醉诱导期对丙泊酚药代动力学的影响

临床上丙泊酚常与芬太尼等麻醉性镇痛药物合用以减少气管插管产生的血液动力学反应 ,但两者间是否存在协同作用尚存在争论[1 ,2 ] 。本文采用高效液相荧光检测法观察应用芬太尼对麻醉诱导期丙泊酚药代动力学的影响 ,为临床正确选择丙泊酚剂量提供依据。资料与方法一般资料　选择 1 3例行消化道癌症手术的病人 ,ASAⅠ～Ⅱ级 ,年龄 6 1～ 6 7岁 ,男 1 0例 ,女 3例 ,随机分为试验组 (F组 ,6例 )及对照组 (P组 ,7例 )。F组给予丙泊酚前5min先静脉注射芬太尼 4 μg/kg ,P组则单次静脉注射丙泊酚 ;两组丙泊酚的用药量为 2mg/kg ,30s注射完毕 ,…     

中成药中非法添加西地那非的质量标准研究

目的提高中成药中非法添加西地那非的检出方法。方法采用XTerraRMSC18柱（4.6mm×100mm,3.5μm）,以醋酸铵（0.01mol/L）-乙腈-甲醇（55：10：35）为流动相,流速为0.35mL/min,经高效液相色谱分离,以多反应监测测定。结果本方法在0.2～10.0μg/mL内线性良好（r=0.9999）;检出限0.5ng/mL;方法回收率为90.1%;RSD=1.44%。结论本方法操作简单,结果准确,可以检测出药物中添加的微量西地那非,并且可以准确定量。     

成骨细胞条件培养液对BMSCs诱导分化作用研究

目的 探讨大鼠成骨细胞条件培养液对同种大鼠BMSCs的成骨诱导分化作用,为骨组织工程种子细胞的获得寻找一种新方法 . 方法 健康1周龄SD大鼠10只,雌雄不限,体重20～30 g,采用贴壁法和酶消化法分别获得BMSCs和成骨细胞,并进行鉴定.无菌条件收集第1～5代成骨细胞培养液上清,与完全培养基1:1混合,制备成骨细胞条件培养液,与第2代BMSCs共培养为诱导组,相同代次BMSCs与完全培养液共培养为对照组.倒置相差显微镜下观察共培养后BMSCs形态变化,MTT法检测BMSCs生长情况,免疫组织化学染色检测共培养后BMSCs的ALP、Col Ⅰ、骨钙素(osteocalcin,OCN)蛋白的表达,采用RT-PCR检测Col Ⅰ、OCN mRNA的表达. 结果 诱导组共培养7 d BMSCs体积变大,细胞由长梭形展开为扁平形和多边形,并带有突起;9 d细胞呈集落状生长.细胞生长曲线示BMSCs数量随培养时间延长而增加,对照组增殖能力较诱导组强;诱导培养4～7 d,对照组细胞数量与诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05).诱导组培养12 d,ALP染色呈阳性表达;18 d 出现钙结节;21 d Col Ⅰ和OCN呈阳性表达;对照组均呈阴性表达.RT-PCR检测示诱导组培养21 d有Col Ⅰ、OCN mRNA表达,对照组未见表达. 结论 体外大鼠成骨细胞条件培养液有明显的诱导同种大鼠BMSCs向成骨样细胞分化的作用.     

三氧化二砷诱导肝癌细胞株凋亡的实验研究

目的明确三氧化二砷对人肝癌细胞体外生长的影响,并探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝法、^3H-TdR掺入法、TUNEL法、透射电镜观察及流式细胞术,观察不同浓度的三氧化二砷对体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721的生长活力、细胞凋亡、DNA合成能力的影响。结果三氧化二砷能显著地抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长,并且具有时间和剂量依赖性;发生作用后,细胞生长有明显的凋亡特征性改变;细胞DNA合成能力下降。结论三氧化二砷能有效地抑制体外肝癌细胞生长,其机制可能与抑制肝癌细胞DNA合成及诱导肝癌细胞凋亡有关。     

雪旺细胞浆神经营养蛋白高效液相分离纯化及其生物活性研究

目的　分离纯化雪旺细胞浆神经营养蛋白并研究其生物活性。方法　取 30 0只出生后 1～ 3天SD大鼠双侧坐骨神经 ,纯化培养 ,收集雪旺细胞 ,超声粉碎 ,超速离心 ,不同孔径分子筛滤膜 (PM10、30、5 0 )超滤浓缩 ,收集分子量 10～ 30 ku,30～ 5 0 ku和 >5 0 ku三种组份胞浆蛋白浓缩液 ,分别加入体外无血清培养的 E14SD胎鼠脊髓运动神经元培养液中 ,用 MTT酶标法检测证实 10～ 30 ku和 >5 0 ku两组份蛋白有神经营养活性。再通过Diol- 15 0高效液相分子层析进一步从雪旺细胞胞浆中纯化分离出分子量为 2 6 ku和 5 8ku两种胞浆蛋白 ,并对其神经生物活性进行研究。结果　 2 6 ku和 5 8ku雪旺细胞胞浆蛋白能维持体外无血清培养的脊髓运动神经元存活 ,其最佳生物活性浓度为 2 0 ng/孔。结论　雪旺细胞胞浆内含有分子量为 2 6 ku和 5 8ku的运动神经营养蛋白     

聚唾液酸的水解与唾液酸的纯化

在HPLC分析唾液酸质量分数的基础上,选择盐酸作为大肠杆菌发酵液中聚唾液酸的水解用酸.在85℃水浴.盐酸浓度为0.1mol/L的条件下,水解2h,水解率平均可达95%以上.水解液中和过滤后,用离子交换色谱分离与冷冻干燥得到唾液酸产品.质谱及HPLC分析证实所得产品中主要成分是N 乙酰神经氨酸,其纯度达96.4%.     

奥美定中丙烯酰胺单体含量的分析

目的　探讨奥美定的配制材料注入兔体内 1年 ,丙烯酰胺单体含量的变化。方法　将 4只日本大耳兔分为A(2只 )、B(2只 )两组 ,A组以 10ml/kg奥美定的配制材料注入大耳兔体内 ,B组以 2ml/kg奥美定的配制材料注入大耳兔体内 ,至 12个月时取出 ,用高效液相色谱法分析丙烯酰胺单体含量。结果　奥美定中丙烯酰胺单体含量 <1.10× 10 -6g/ g ,而注入兔体内后取出的奥美定的配制材料中丙烯酰胺单体含量为 1.18× 10 -5～ 4 .88× 10 -5g/ g。结论　注入大耳兔体内的奥美定 12个月时丙烯酰胺单体含量较未注入的奥美定有所升高 ,但仍低于或接近国外同类材料中丙烯酰胺单体含量 ,因此是安全无毒性的     

Wagner SL 翻修型股骨柄在人工髋关节翻修术中的疗效分析简

目的探讨采用WagnerSL翻修型股骨柄在人工髋关节翻修中的方法及疗效。方法自2006年3月至2012年3月,采用Wagner自锁式无骨水泥固定型翻修股骨柄对31例患者（共31髋）行人工髋关节翻修术。其中男性16例,女性15例;年龄41～75岁,平均63．2岁。髋关节翻修术距离初次人工全髋置换的时间是1—20年,平均65．3个月。翻修原因：无菌性假体松动25例,髋关节假体周围感染6例,均为第一次翻修。结果31例均获得了随访,随访时间为0．5—6年,平均为2．7年。患者手术后切口均为I期愈合,无下肢深静脉血栓及坐骨神经损伤等并发症出现。在随访期间没有出现假体松动和感染,假体周围可以看到明显骨长入。有9例患者出现了不同程度的假体下沉,但均无明显的髋部疼痛症状,因此未做特殊处理。末次随访时,Harris评分由（36．24±8．27）分提高到（83．78±4．92）分,MedeD’Aubigne评分由（2．54士5．38）提高到（13．42士3．26）分,VAS疼痛评分由（7．32士0．72）分减低到（1．26±0．61）分,与手术前比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论使用WagnerS“L”型翻修股骨柄进行人工髋关节翻修术后,近期疗效满意,能明显地缓解疼痛,改善了髋关节的功能。     

Wagner SL股骨假体治疗复杂股骨近端骨折的疗效观察

目的探讨Wagner SL股骨假体治疗复杂股骨近端骨折的疗效。方法自2009-01—2015-05采用Wagner SL股骨假体治疗60例复杂股骨近端骨折,记录手术时间及出血量,采用髋关节功能Harris评分进行评价。结果手术时间45~200(95±27)min,术中出血400~1 500(600±240)ml,术后输血2~10 U悬浮红细胞。所有患者切口均一期愈合,术后假体位置佳。共50例获得随访2~68(34±19)个月,术前Harris评分35~75(58±10)分,末次随访Harris评分65~93(81±9)分,假体无明显松动,假体周围无透亮带、下沉。结论采用Wagner SL股骨假体治疗复杂股骨近端骨折疗效满意,值得临床推广。     

Results of Wagner SL revision stem with impaction bone grafting in revision total hip arthroplasty

Background:

As the number of total hip arthroplasties (THAs) performed increases, so do the number of required revisions. Impaction bone grafting with Wagner SL Revision stem is a good option for managing bone deficiencies arising from aseptic osteolysis. We studied the results of cementless diaphyseal fixation in femoral revision after total hip arthroplasty and whether there was spontaneous regeneration of bone stock in the proximal femur after the use of Wagner SL Revision stem (Zimmer, Warsaw, IN, USA) with impaction bone grafting.

Materials and Methods:

We performed 53 hip revisions using impaction bone grafting and Wagner SL Revision stems in 48 patients; (5 cases were bilateral) for variety of indications ranging from aseptic osteolysis to preiprosthetic fractures. The average age was 59 years (range 44-68 years). There were 42 male and 6 female patients. Four patients died after surgery for reasons unrelated to surgery. 44 patients were available for complete analysis.

Results:

The mean Harris Hip Score was 42 before surgery and improved to 86 by the final followup evaluation at a mean point of 5.5 years. Of the 44 patients, 87% (n=39) had excellent results and 10% (n=5) had good results. The stem survival rate was 98% (n=43).

Conclusion:

Short term results for revision THA with impaction bone grafting and Wagner SL revision stems are encouraging. However, it is necessary to obtain long term results through periodic followup evaluation, as rate of complications may increase in future.     

Wagner SL股骨柄治疗陈旧性或伴髋关节炎的股骨粗隆间骨折疗效观察

目的 :探讨Wagner SL股骨柄治疗陈旧性或伴痛性髋关节炎的股骨粗隆间骨折的临床疗效。方法 :自2006年1月至2009年12月对8例陈旧性粗隆间骨折及21例伤前有痛性关节炎的粗隆间骨折使用Wagner SL股骨柄行全髋关节置换并重建粗隆,其中男18例,女11例;年龄43~58岁,平均49岁。术后临床随访,根据Harris评分、肢体长度差异、髋关节活动范围以及髋外展肌力进行评价。影像学随访包括对股骨柄假体周围骨溶解、假体松动、透光线等进行评价。结果:29例患者均成功完成手术,未出现与髋关节置换手术相关的严重并发症。术后均获得随访,时间6~10年,平均8.2年。均无不可接受的大腿疼痛主诉。8例陈旧性粗隆间骨折患者术后首次行走时均有"手术侧肢体过长"抱怨,随时间推移,这种抱怨在明显减少。术后3个月X线片提示21例伤前痛性关节炎的粗隆间骨折愈合,平均术后6个月(3~8个月)X线片提示8例陈旧性粗隆间骨折患者的植骨块与粗隆有明显骨痂连接,末次随访时X线片均未提示假体明显下沉。髋关节活动度基本恢复正常,无髋外展无力。根据Harris评分方法,手术后6年以上对患髋关节进行评价,优18例,良9例,可2例。结论:Wagner SL股骨柄在治疗陈旧性或伴痛性髋关节炎患者粗隆间骨折的初次全髋关节置换中可取得优良的临床疗效,粗隆重建,有利假体和关节稳定,同时增加骨储备。     

高左旋多巴合成活性的重组大肠杆菌培养条件优化

对重组大肠杆菌进行培养条件的研究,得到细胞合成L-DOPA最佳培养条件为L-tyrosine0.2%、KH     

Suv39 H2在胆管癌组织中的转录表达及临床意义

目的探讨Suv39 H2与胆管癌发生的关系及其临床意义。方法用RT—PCR检测35例胆管癌组织及28例正常胆管组织Suv39 H2 mRNA表达,并与肿瘤分化程度、有无转移作对比研究。结果胆管癌中Suv39 H2 mRNA阳性表达率为71．43％（25／35）,正常胆管组织中阳性表达率为32．14％（9／28）,差异有统计学意义（P〈0．01）。胆管癌中Suv39 H2 mRNA阳性表达与分化程度、有无转移无关,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Suv39 H2参与胆管癌发生早期阶段。     

苦瓜愈伤组织的诱导及培养条件优化

利用不同的激素配比,对苦瓜幼苗的各个器官进行愈伤组织诱导,比较其生长情况。通过实验得出,IAA与6-BA搭配比2,4-D与6-BA搭配对苦瓜愈伤组织的诱导及生长要好。当6-BA质量浓度较高（4 mg/L）时,利于苦瓜愈伤组织的诱导。在优化培养条件时,在MS培养基的基础上添加103.125 mg/L的硝酸铵,100 mg/L的水解酪蛋白,蔗糖质量浓度为30 g/L,激素质量浓度为0.5 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L 2,4-D时,可使苦瓜愈伤组织快速增殖。     

Nonvisualization of the intravenous pyelogram—A poor prognostic sign in Wilms' tumor?

In a series of 49 consecutive cases of Wilms' tumor from a single institution, there was a 20% incidence of nonvisualization on the initial intravenous pyelogram. Even though nonvisualization was secondary to either gross or microscopic invasion of the renal vein or renal pelvis, this did not forecast a grim progosis. Seven of the nine patients with nonvisualization are presently alive and tumor-free at least 5 yr after resection. The only two deaths in this particular group were unrelated to the Wilms' tumor.