血清中不同基因型丙型肝炎病毒RNA含量的测定

目的了解血清中不同基因型丙型肝炎病毒HCVRNA的含量。方法用实时荧光定量RTPCR和逆转录型特异性引物PCR同时检测21例费城酒精依赖丙肝患者的血清HCVRNA拷贝数并分析HCV基因型。结果21份血清标本中,有17份为HCVRNA阳性。这些阳性血清的HCVRNA含量波动范围在104.60～106.20拷贝/ml。检测到1a和1b两种HCV基因型,其中1a型7例,RNA平均滴度为105.28±0.75拷贝/ml,1b型(9例)RNA平均滴度为105.28±0.28拷贝/ml。结论定性和定量检测结果有极佳的一致性,酒精依赖丙肝基因型1a和1b血清中HCV含量无显著性差异。     

肝炎基因诊断芯片对丙型肝炎病毒基因分型检测的初步研究

目的 研究丙型肝炎病毒（HCV）基因分型诊断芯片的制备和其对丙型肝炎患者血清HCVRNA基因分型诊断的准确性。方法 根据丙型肝炎病毒5′端非编码区末端（5UTR）和C区设计引物和特异性探针,将设计的20条特异性寡核苷酸探针用核苷酸合成仪合成后,配制成浓度为50μmol/ml的点样液,用点样仪点到特殊处理的玻片介质上,制成丙型肝炎病毒基因分型诊断芯片,收集HCVRNA阳性的丙型肝炎患者血清60份作为实验组,健康人血清60份作为对照组,用荧光定量PCR仪对两组血清进行HCVRNA定量检测,实验组血清HCVRNA含量均大于500拷贝/ml,对照组血清HCVRNA含量均小地500拷贝/ml,两组血清进行HCVRNA分离纯化,逆转录反应,巢式PCR扩增后,分别用基因芯片,HCVRNA核酸序列测定法（美国Li-Cor核酸序列测定仪）进行双盲丙型肝炎基因分型检测。结果 实验组血清基因诊断芯片检测均为阳性;基因分型;1b型46例,3a型3例。3b型3例,2a型2例,2b型2例,混合型1b 2a2例。1b 3b型2例;核酸序列测定分型1b型50例,3a型3例,3b型3例,2a型2例,2b型2例;基因诊断芯片检测和核酸序列测定检测的基因分型结果符合率为93.3%。对照组血清基因芯片检测匀阴性。结论 肝炎病毒基因诊断芯片可以用于检测血清HCVRNA,并进行基因诊断分型,准确率较率。     

献血者血清抗-HCV阳性与ALT活性的关系

目的 分析献血者血清抗-HCV抗体及丙型肝炎病毒核酸（HCVRNA）含量与ALT的关系。方法 采用ELISA法检测抗-HCV抗体。阳性标本用荧光PCR试剂盒测定HCVRNA，分析ALT活性与HCVRNA水平的关系。结果 83份抗-HCV抗体阳性标本经PCR检测后有37份标本含HCVRNA，HCVRNA拷贝量与ALT活性呈正相关，且标本的HCVRNA含量越多，ALT活性也越高（P〈0．01）。结论 献血者中筛查ALT并结合PCR技术，能减少HCV经血传播的危险。     

丙型肝炎病毒感染的不同人群HCV RNA定量研究

目的　了解丙型肝炎病毒感染的不同人群血清 HCV RNA水平 ,比较定性和定量 PCR结果 ,探讨 HCV含量与血清 AL T的相关性 .方法　采用荧光定量 PCR和逆转录巢式定性 PCR同时检测 136例丙型肝炎病毒感染者血清 HCV RNA,并测定定量 PCR (+ )者血清 AL T.用相关系数分析 HCV RNA含量与血清 AL T的关系 .结果　定性 PCR阳性率为 80 .88% ,定量 PCR阳性率为 77.94% .两者相对符合率为 94.12 % .定量 PCR(+ )血清 (10 6例 ) HCV RNA含量在 10 7.0 4～ 10 1 0 .96拷贝· L- 1 .无症状献血员 HCV RNA含量显著低于慢性丙型肝…     

蛋白芯片、抗体检测及RT-PCR技术研究不同HCV感染人群的病原学差异

目的采用多种不同的检测方法探讨静脉吸毒人群与非静脉吸毒人群中丙型肝炎病原学的差异。方法89份静脉吸毒人员血清及40份非静脉吸毒HCV感染者血清分别应用分片段蛋白质芯片、酶联免疫吸附试验(ELISA)及荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)进行检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体及RNA,比较两种不同人群中HCV感染的病原学差异及三种检测方法在以上两种样本中检测结果的差异。结果在静脉吸毒人群中HCV感染率为88.76%(79/89),感染者血清HCVRNA载量较非吸毒HCV感染者血清HCVRNA载量高,前者为1×103.10拷贝/毫升,后者为1×102.26拷贝/毫升(t=1.986,P=0.049)。应用HCV分片段蛋白芯片技术检测的敏感性为98.23%。结论静脉吸毒人群中HCV感染率较高,感染者中血清HCVRNA载量较非静脉吸毒者高。研究显示,蛋白芯片技术是一种高效的检测技术,具有临床应用价值。     

丙型肝炎病毒RNA与血清标志物的关系

目的 :探讨血清HCVRNA含量与丙氨酸氨基转氨酶 (ALT)、HCV抗体的关系。方法 :采用荧光定量 聚合酶链反应 (FQ PCR)检测 75例HCV抗体复检阳性无偿献血者、9例丙型肝炎患者的HCVRNA含量 ,并与HCV抗体、ALT的检测结果比较。结果 :75例献血者中 ,HCV抗体 (+ )、ALT(-)组HCVRNA阳性率高于HCV抗体 (+ )、ALT(-)组。在 9例丙型肝炎患者中 ,ALT与HCVRNA含量呈正相关 ,且相关性显著 (r =0 72 ,P <0 0 5 )。结论 :在HCV感染的人群中 ,ALT的高低可间接反应HCV在体内的状态 ,这对安全输血和诊断有重要意义     

不同基因型丙型肝炎病毒RNA定量分析

目的　根据定量 PCR检测结果 ,了解血清不同基因型 HCV- RNA的含量 .方法　采用荧光定量 PCR和逆转录巢式定性 PCR同时检测 16 6例丙肝患者的血清 HCV- RNA,再进行酶切分型 .计算各型 HCV- RNA平均含量 .结果　定量 PCR阳性血清 (131例 ) HCV- RNA含量在 1× 10 4 .0 4～ 1×10 8.1 1拷贝· m L- 1 .HCV- 型 (10 6例 )、HCV- 型 (18例 )和 / 混合型 (3例 ) RNA平均滴度分别为 1× 10 6 .88± 2 .0 1拷贝· m L- 1 ,1× 10 5.79± 1 .82 拷贝· m L- 1 和 10 5.50± 1 .6 2 拷贝· m L- 1 .结论　定性和定量检测结果有很好的一致性 .HCV- 型病毒含量显著高于 HCV- 型 .     

荧光定量聚合酶链反应检测乙肝病毒DNA的临床意义

目的　研究荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)检测血清中乙型肝炎病毒 (HBV)DNA的临床意义。方法　用FQ -PCR诊断试剂盒 ,以完全闭管式的PCR和荧光探针技术相结合所产生的实时检测定量PCR方法 ,检测了 489份临床血清标本。结果　 132例HBsAg、HBeAg、抗 -HBc均阳性的标本 ,HBVDNA也全部阳性 ,平均HBVDNA拷贝数为 2 .83× 10 8·ml-1。 85例HBsAg、抗 -HBe和抗 -HBc均阳性的标本 ,检出HBVDNA 6 1例 (72 % ) ,平均拷贝数 7.9× 10 5·ml-1;HBV血清标志物均阴性的 74例标本 ,HBVDNA也全阴。结论　FQ -PCR可以检测HBV的感染和复制情况     

定量聚合酶链反应检测血清中HCV RNA^＋

目的：探讨定量聚合酶链反应用于检测丙型肝炎病毒HCV含量变化的意义。方法：用信号引物能量转移定量聚合酶链反应（PCR），检测68例丙型肝炎患者血清HCVRNA水平。结果：其HCVRNA含量范围103～1011拷贝／ml，急性丙肝106.83±3.72拷贝／ml，慢性丙肝106.54±2.67拷贝／ml，而无症状携带者104.95±2.16拷贝／ml。血清HCVRNA水平同ALT水平呈相关。结论：丙肝病毒感染后HCV复制水平与肝损害相关，定量检测HCVRNA的水平变化是预测和评价干扰素疗效的重要指标。     

荧光探针定量PCR在检测HBV-DNA的应用

目的　用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)方法准确地定量检测血清中的HBV DNA数量和免疫指标 ,以指导临床。方法　用FQ PCR方法和酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法分别检测 184份临床血清标本的HBVDNA和免疫指标。结果　用 (ELISA)作对照 ,经FQ PCR检测 ,HBeAg(+)组 (82份 )的阳性率为 10 0 % ,HBV DNA阳性拷贝数范围在 10 5～ 10 10 /ml;HBeAb(+)组 (5 2份 )的阳性率为 5 5 8% ,HBV DNA阳性拷贝数范围在 10 4～ 10 7/ml;HBsAb(+)组 (2 0份 )的阳性率为 15 % ,HBV DNA阳性拷贝数范围在 10 4～ 10 5/ml;对照组 (30份 )的阳性率为 0。HBeAg(+)组血清中HBV DNA含量 (10 7 2± 1 13 )显著高于HBeAb(+)组 (10 5 8± 1 4)和HBsAb(+)组 (10 4 67± 0 58)。结论　FQ PCR检测HBV DNA具有较高的灵敏度和特异性 ,且能准确定量 ,FQ PCR可以检测HBV的真实感染和复制情况 ,对乙型肝炎临床诊断 ,治疗及疗后观察有重要意义。     

丙型肝炎病毒感染及其抗原表达与细胞凋亡的关系

目的：细胞模型上研究表明，ＨＣＶ抗原能抑制细胞凋亡。本研究在体内研究水平进一步探讨ＨＣＶ抗原表达对细胞凋亡的影响。方法：采用原位细胞凋亡、免疫组织化学及其双染色等技术，对７０例肝细胞癌（ＨＣＣ）和１０例慢性肝炎的组织标本进行研究。结果：ＨＣＶ感染或组织ＨＣＶ抗原表达阳性的患者中，细胞凋亡指数与阴性患者无显著性差异。而仅有纤维化的慢性肝炎组织较伴有肝硬变的癌周组织的凋亡指数显著升高（２０２７±２４１ｖｓ８４７±３２４，Ｐ＜００１）。在分布上，慢性肝炎组织中细胞凋亡与抗原分布一致，与炎症反应密切相关，而癌周组织中两者常不一致。结论：在组织水平上ＨＣＶ抗原表达对细胞凋亡的影响相对复杂。感染早期，ＨＣＶ抗原主要通过炎症反应而促进细胞凋亡。感染后期则主要表现为抑制细胞凋亡     

HCV RNA水平对HCV/HIV合并感染自然进程的影响

目的 探讨HCV RNA PCR水平对丙型肝炎病毒（HCV）/人类免疫缺陷病毒（HIV）合并感染自然进程的影响.方法 采用实时荧光定量PCR方法检测HCV RNA,比较初次就诊高效反转录病毒治疗（HAART）前的HCV/HIV合并感染（HCV/HIV组）、HCV单纯感染（HCV组）、HIV单纯感染（HIV组）患者的HCV RNA、HIV RNA、CD4＋T淋巴细胞计数、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、透明质酸酶（HA）、层粘连蛋白（LN）、甘胆酸（CG）、Ⅲ型胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（CⅣ）、年龄等指标.结果 HCV/HIV组与HCV组和HIV组CD4＋T淋巴细胞计数分别为139.75±91.586、647.16±363.379、288.0±219.6个/微升（P＜0.01）.与HCV组患者的发病年龄分别为37±15和52±13岁（P＜0.01）.HCV RNA分别为6.0417±0.93524和5.2553±1.62773log/ml（P＜0.05）;CⅣ分别为105.30±24.630和95.41±52.889ng/ml（P＜0.05）;CG分别为1444.98±1721.597、139.00±165.640μg/ml （P＜ 0.01）;PCⅢ分别为285.52±244.558、159.82±86.928ng/ml（P＜ 0.01）;ALT分别为104.42±107.90、46.22±32.589U/L（P ＜0.01）.与HIV组HIV RNA分别为4.8±0.9和4.1±1.0log/ml（P ＜0.01）.结论 HCV/HIV合并感染可以加重和加快HCV、HIV疾病的自然进程.高水平的HCV RNA是HCV/HIV合并感染患者的HCV、HIV疾病自然进程的危险因素之一.     

HCV对HBV干扰作用的研究

应用ＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ技术，分析ＨＣＶ ＲＮＡ阳性及阴性标本的ＨＢＶ ＤＮＡ及ＨＢｓＡｇ的感染状况，以探讨ＨＣＶ对ＨＢＶ的干扰作用。结果发现当ＨＢｓＡｇ阳性时，无论ＨＣＶ ＲＮＡ是否阳性，ＨＢＶ ＤＮＡ的阳性率分别为５３．８５％和５９．０９％无明显差异，（Ｐ〉０．０５）；当ＨＢＶ ＤＮＡ阳性时，两驵ＨＢｓＡｇ的转阴率分别为３３．３３％和２３．５３％，无明显差异，（Ｐ〉０．０５）。实验表明ＨＣＶＣＦ     

丙型肝炎病毒基因Ⅱ型感染对干扰素治疗的反答反应

对31例丙肝病人进行基因分型及干扰素治疗。其中27例HCV基因Ⅱ型感染病人治疗结束时的应答率为92．6％（生化）及63％（病毒）,一年的稳定应答率为26％（生化及病毒学）,不应答率为8．4％,结论：国人HCVⅡ型感染对扰素治疗有良好的近期应答,如何提高稳定应答率,减少复发是临床研究应注意的问题。     

晚期血吸虫病患者合并HCV感染及与HBV感染的关系

采用酶联免疫吸附法检测４６１例各期血吸虫病患者血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）标志物，并采用逆转录聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测１０２例晚期血吸虫病（晚血）患者血清丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）．结果表明，晚血患者血清抗ＨＣＶ检出率为７．５％，显著高于急性血吸虫病（急血）．慢性血吸虫病（慢血）患者２．Ｏ％及对照人群１．８％．３０６例晚血患者血清抗ＨＣＶ和／或ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性３８例（１２．４％），其中ＨＣＶ与ＨＢＶ合并感染６３．２％（２４／３８），ＨＣＶ单一感染３６．８％（１４／３８），９２例合并与未合并ＨＣＶ感染的ＨＢｓＡｇ阳性晚血患者，ＨＢｅＡｇ阳性率差异无显著性（Ｐ＞０．０５）．揭示，晚血患者ＨＣＶ感染率高，并多以与ＨＢＶ合并感染形式存在，ＨＣＶ感染对ＨＢＶ复制无明显抑制作用．     

腹水中乙型、丙型及庚型肝炎病毒的联合检测

观察小剂量血脂康、普伐他汀对高血脂病人的长期调脂作用。方法：多中心,１９５例高血脂病人,分血脂康组［每晚睡前口服血脂康２粒（含他汀类物质６ｍｇ）］与普伐他汀组（每晚睡前口服５ｍｇ）治疗６个月,比较治疗前、后血脂水平变化及两组间差异,用方差分析法检验及ｘ２检验。结果：血脂康与普伐他汀治疗６个月时,ＴＣ下降１６％及１７％,ＴＧ下降１３％及１５％,ＬＤＬ下降２３％及２１％;ＨＤＬ在血脂康组上升２％,在普伐他汀组上升１０ ％。两组均能有效降低 ＬＤＬ／ＨＤＬ。两组间比较普伐他汀升 ＨＤＬ作用较血脂康稍好（ Ｐ＝ ０．０５）。两组 ＴＣ、ＬＤＬ、ＬＤＬ／ＨＤＬ下降均有统计学意义。两组 ＴＧ下降及 ＨＤＬ升高无统计学意义,血脂康及普伐他汀组降 ＴＣ疗效分别为 ５４． ６％、 ６８． ４％;升 ＨＤＬ疗效分别为 ４９．１％、５３． ９ ％;降 ＴＧ为 ４６．２ ％、４０． ８ ％。两组疗效差异均无显著性。两组均未见严重副作用。结论：小剂量他汀类药物（如血脂康和普伐他汀）长期口服治疗成人血脂紊乱安全、有效。     

胃镜检查前HBV、HCV、HIV筛检指标的调查分析

目的了解胃镜检查人群中HBV、HCV、HIV的感染状况及其流行特点.方法应用酶联免疫试验(EIA)检测血清中HBsAg、抗-HCV、抗-HIV.结果胃镜检查人群HBsAg、抗-HCV、抗-HIV阳性率分别为10.7%、2.1%和0;活检者与非活检者HBsAg、HCV感染率分别为9.9%、3.9%;活检组与非活检组之间HCV感染率差异有显著性(P<0.05);上消化道癌症患者较非癌肿患者HCV感染率更高(P<0.01).结论胃镜检查者是肝炎病毒感染的高危人群.     

斑点免疫渗滤法检测丙肝IgG抗体试剂盒的研制

用基因工程重组的丙肝抗原包被于硝酸纤维素膜，建立了检测丙肝ＩｇＧ抗体的斑点免疫渗滤法。与ＥＬＩＳＡ试剂盒进行双盲式同步测定，二法检验结果差异无显著性。渗滤法简便快速，适用于各级医院，有很强的推广价值。     

12280例非感染科患者HCV抗体检测结果分析

目的 了解输血前和手术住院患者肝脏健康状况,避免和预防院内感染及医疗纠纷的发生。方法 用酶联免疫法进行乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和丙肝(HCV)检测。结果 在12280例输血前和手术非感染科住院患者中,HCV感染占1.03%,HBsAg和HCV同时感染占0.17%。结论 非感染科住院患者HCV感染率明显高于自然人群,说明进行HCV检测具有必要性和重要性。     

HIV和HCV感染者重叠感染HGV对病毒复制的影响

目的 :了解人免疫缺陷病毒 (HIV)感染者和丙型肝炎病毒 (HCV)感染者重叠感染庚型肝炎病毒 (HGV)的情况 ,探讨重叠感染病毒在体内的相互作用机理。方法 :用定量 PCR测定 HIV和 HCV感染者血浆中病毒载量 ,同时用 RT- PCR检测这些患者 HGV的感染情况 ,并对部分 HGV阳性者进行序列测定。结果 :317例 HIV患者中检出 HGV阳性 12 3例 ,阳性率为 38.8% ;91例 HCV患者中 HGV阳性 19例 ,阳性率为 2 0 .9% ,统计学分析有显著差异。进一步研究显示 ,HIV和 HGV重叠感染中 HIV病毒载量明显低于单独 HIV感染者 [(1.8± 0 .6 )× 10copies/ ml vs(1.9± 1.1)× 10 2 copies/ ml];而 HCV和 HGV重叠感染者中 HCV的病毒载量与单独 HCV感染者比较没有显著差异 [(1.5± 0 .6 )× 10 4copies/ ml vs(5 .4± 1.8)× 10 4copies/ ml]。序例分析表明 ,与 HIV或 HCV重叠感染的 HGV来源于同一病毒株。结论 :HIV感染者有很高的 HGV重叠感染率 ,而且 HGV感染能明显抑制 HIV在体内的病毒复制。