鼓槌石斛化学成分的研究

目的 研究鼓槌石斛的化学成分,为阐明其活性成分,开发其资源提供科学依据。方法 采用胶柱层析法进行分离,根据光谱数据鉴定结构。结果 从中分得10个化合物,分别为：erianin(Ⅰ）,chrysotobibenzy(Ⅱ),chrysotoxene(Ⅲ),confusarin(Ⅳ),erianthridin(Ⅴ),dendroflorin(Ⅵ),chrysotoxone(Ⅶ),dengibsin(Ⅷ）和β-sitosterol(Ⅸ）,daucosterol(Ⅹ)。结论 化合物Ⅴ为首次从石斛属植物中分得,化合物Ⅵ为首次从该植物中分得。     

鼓槌石斛及其研究进展

简要介绍了鼓槌石斛的种属分布、原植物特征、采集、鉴定、功用等，还总结了鼓槌石斛化学成分、药理作用的研究进展。鼓槌石斛主要含有苄类、菲类、芴酮类等化合物，其中包括四种首次发现的新化合物。初步药理研究表明，这些化学成分具有抗肿瘤活性及耐药性等。     

野生鼓槌石斛引种和栽培技术

鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxumLindl为兰科石斛属附生植物,以鲜茎或干燥茎入药,是我国民间习用药用石斛种类之一。鼓槌石斛除了具有生津益胃、清热养阴之功效外,传统上还用于治疗热病伤津、口干烦渴、病后虚热、阴伤目暗等。鼓槌石斛主要分布于我国云南南部至西南部。附生在海拨500~1 700 m的中海拨地区疏林中大树上或岩石上。随着鼓槌石斛的药用需求量增大,国内野生资源日趋减少。为防止重蹈像兰科石斛属其他植物,如流苏石斛....     

鼓槌石斛特异性PCR分子鉴定

目的 研究能够特异性鉴别鼓槌石斛的PCR引物,并优化PCR检测体系,确立一种快速、准确鉴别鼓槌石斛的方法.方法 从GenBank数据库中下载石斛属rDNA ITS序列170余条,运用MEGA 5.0对所有序列进行同源性比较,找出各变异位点,在非保守区设计1对特异性引物.对35份石斛属植物DNA模板进行特异性引物PCR扩增,显示阳性者为鼓槌石斛.结果 将退火温度升至58℃时,鼓槌石斛能被该引物特异性地扩增出来,而其他石斛属植物均为阴性,且该引物的灵敏度可达到0.69 ng/μL.结论 建立一种特异性鉴别鼓槌石斛的方法,运用该特异性引物可实现从同源物种中快速、准确地鉴定出鼓槌石斛,具有特异性好,操作简便、高效、准确等优点.     

鼓槌石斛生长发育规律研究

目的掌握鼓槌石斛在栽培条件下的生长发育规律。方法定株丛、定时期对鼓槌石斛生根、开花结果、植株生长进行观察。结果人工条件下,从播种到出瓶炼苗,需要近一年的时间;一定的湿润条件能促进新根的快速萌发生长;鼓槌石斛的盛花期为4月初至4月中旬;茎的长度生长时间仅有60~70d,此后不再生长,同时,叶片的数量也不再增加,但可保持数年不落。结论鼓槌石斛生长发育的研究结果为其生产栽培提供科学依据。     

柱前衍生-HPLC法测定不同产地流苏石斛16种游离氨基酸含量及其聚类分析

目的建立同时测定流苏石斛中16种游离氨基酸的方法,并分析不同产地流苏石斛中游离氨基酸含量及聚类分析。方法采用柱前衍生化-HPLC建立流苏石斛中16种游离氨基酸的含量测定方法,通过R语言聚类热图、SPSS聚类分析对不同产地流苏石斛进行聚类分析。结果结果表明,该方法准确可行,专属性强,可同时测定流苏石斛中16种游离氨基酸含量,两种聚类方法结果均表明流苏石斛具有明显的产地聚类特性,以云南产流苏石斛游离氨基酸含量最高。结论柱前衍生化-HPLC法适用于流苏石斛中16种游离氨基酸的同时测定;不同产地流苏石斛游离氨基酸含量差异较大,可为流苏石斛质量评价、优良种质及栽培基地选择等提供依据。     

不同采收期鼓槌石斛中酚类化合物的测定

石斛为名贵中药，具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等功能。石斛资源极其紧缺。鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxum Lindl．主要分布于我国云南、广西、四川等地，资源比较丰富，常作为石斛的代用品。因此对其进行了一系列研究，从中分离得到联苄、菲及芴酮等具有一定的抗肿瘤活性的酚类化合物。     

鼓槌石斛种质资源调查研究

目的:收集和保存鼓槌石斛种质资源,为筛选优良种质奠定基础材料。方法:采用文献查阅、访问和实地调查相结合的方法,对鼓槌石斛种质资源的分布、植物学性状及利用现状进行了调查,并对种质进行了收集。结果:野生鼓槌石斛种质资源在植物形态上如茎的大小、叶的形状、花唇瓣的颜色等方面存在明显差异,近10年来,调查地区鼓槌石斛野生资源蕴藏量严重下降。结论:野生鼓槌石斛种质资源生物学存在多样性,其中不乏高产种质资源。     

鼓槌石斛化学成分的研究Ⅲ

目的:研究鼓槌石斛的化学成分。方法:采用硅胶及Sephadax LH-20凝胶柱色谱法分离化合物,运用波谱学方法确定结构。结果:从鼓槌石斛中分离得到10个化合物,分别为(+)-syringare sinol(1),5α,8-αepidioxy-24(R)-methycholesta-6,22-dien-3-βol(2),trans-3-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)-acrylic acid octacosyl ester(3),defusin(4),3,4-dihydroxy-benzoic acid(5),3,4-dimethoxy-benzoic acid(6),vanillic acid(7),3,4-dimethoxy-benzoic acid methyl ester(8),3,5-dibromo-2-amino-benzaldehyde(9),heptadecanoic acid 2,3-dihydroxy-propyl ester(10)。结论:化合物1,2及6~10均为首次从鼓槌石斛中分离得到。     

鼓槌石斛组织培养研究

目的 :建立鼓槌石斛快速繁殖体系。方法 :组织培养 ,虫荧光素 荧光素酶生物发光法及苯酚 硫酸法。结果 :胚在光照及黑暗条件下均可以萌发 ,但苗的生长需要光照条件 ,MS,1/2MS ,B₅,N₆培养基对苗的生长均比较适宜 ,0.5mg·L^-1NAA与 1mg·L^-16-BA利于鼓槌石斛组培幼苗的生长与分化。三磷酸腺苷 (adenosine triphosphate ,ATP)在鼓槌石斛培养时发生节律性变化。组培苗多糖含量 7.254% ,原植物为 2.833%。结论 :光照对胚的萌发没有影响 ,分化出幼苗后 ,培养基中的激素、氮源及有机元素对苗的生长及分化有较大的影响 ,因此要及时将苗转移到附加NAA与 6-BA的MS ,1/2MS ,B₅,N₆培养基中。ATP可作为鼓槌石斛培养时的动态指标 ,反应其发育过程中对营养和能量的需求。组培苗的多糖高于原植物。     

鼓槌石斛快繁育苗技术的研究

目的 寻找鼓槌石斛快繁育苗的有效途径。方法 采用组织培养和野生自然栖息的鼓槌石斛诱导高位腋芽萌发等途径进行探索。结果 在组织培养中,改良1/2MS培养基对原球茎形成效果最好,调整不同浓度的N、P、K及外源激素对诱导鼓槌石斛原球增殖、生根壮苗极为明显;外源激素对诱导鼓槌石斛的高位腋芽萌发无明显效果,高位芽萌发与茎株生理年龄和营养状况有关。结论 人工种植鼓槌石斛采用现代生物技术组培和腋芽繁殖是目前快繁育苗的最有效途径,不仅育苗量大、周期短,且生长快、成活率高,两条途径对于鼓槌石斛的产业化发展有重要意义。     

野生鼓槌石斛株丛调查报告

选择保存较完好的野生鼓槌石斛株丛,测量假鳞茎的长度和假鳞茎最大处的直径,并根据假鳞茎顶端明显的脱叶痕及实际叶片数,统计假鳞茎的叶片数,结果:自然条件下,鼓槌石斛常有“一母带一笋”的生长发育方式形成株丛;而且子假鳞茎比母假鳞茎逐一增大。通常鼓槌石斛从种子萌发到有一定产量及有性繁殖,需要约7~10年的时间。     

菌根栽培对铁皮石斛小分子化学成分的影响

研究菌根栽培对铁皮石斛指纹图谱及6种化学成分含量的影响，为铁皮石斛菌根栽培技术的推广应用提供科学依据。收集浙江金华等4个地区菌根栽培和常规栽培的17个铁皮石斛样品，用HPLC指纹图谱评价样品的相似度，用HPLC测定6种化学成分的含量。研究结果显示：指纹图谱有15个共有峰，通过对照品指认了5个共有峰，分别是柚皮素、4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄、3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄、3′,4-二羟基-3,5′-二甲氧基联苄(gigantol)和3,4-二羟基-4′,5-二甲氧基联苄(DDB-2);菌根栽培和常规栽培样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度分别为0.733～0.936和0.834～0.942,菌根栽培对指纹图谱的影响与种植地区、栽培种质和菌剂用量等因素相关；样品中6种化学成分的含量差异较大，DDB-2的含量最高，质量分数为69.83～488.47μg·g^-1;上海崇明和江苏泰州的菌根栽培样品有5～6种成分的含量提高，福建漳州和浙江金华的菌根栽培样品仅有1～2种成分的含量提高。以上结果表明，菌根栽培未改变铁皮石斛小分子化学成分的轮廓，对联苄等化学成分的含量...     

叠鞘石斛与药典收载石斛品种鞣质含量对比

目的:对叠鞘石斛与药典收载品种金钗、鼓槌和流苏石斛的鞣质含量进行对比研究。方法:以没食子酸为对照,对不同品种石斛药材中鞣质含量进行测定。结果:对叠鞘石斛及药典收载品种的鞣质含量进行了测定,金钗石斛含量最高,叠鞘石斛与流苏石斛含量较为接近。结论:建立的方法稳定、可靠、重复性好,可作为石斛药材中鞣质的含量测定方法。     

重唇石斛化学成分研究

目的研究兰科石斛属植物重唇石斛Dendrobiumhercoglossum的化学成分。方法采用各种柱色谱及制备液相色谱分离纯化,经波谱数据鉴定化合物结构。结果从重唇石斛全草的醋酸乙酯提取物中分离得到10个化合物,其结构分别鉴定为3,4,α-三羟基-5,3′-二甲氧基联苄(1)、4,α-二羟基-3,5,3′-三甲氧基联苄(2)、4,5-二羟基-3,3′,α-三甲氧基联苄(3)、4,3′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄(4)、4,4′-二羟基-3,5,3′-三甲氧基联苄(5)、N-反式桂皮酸酰对羟基苯乙胺(6)、原儿茶酸(7)、香草醇(8)、1-正十六烷酸甘油酯(9)、丁香脂素(10)。结论化合物1为新化合物,命名为重唇石斛素A,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。     

叠鞘石斛中联苄类成分的定性定量分析

 目的建立叠鞘石斛中联苄类成分的定性、定量分析方法。方法运用薄层色谱法对叠鞘石斛中联苄类成分石斛酚(gigantol)和杓唇石斛素(moscatilin)进行定性分析,采用高效液相色谱法测定石斛酚的含量,以Shim-pack CLC-ODS柱为固定相,流动相乙腈-0.2%甲酸(35∶65),检测波长280 nm,柱温25℃。结果石斛酚在0.196～12.54μg内峰面积与进样量呈良好的线性,r=0.999 9;平均回收率100.6%;RSD3.01%。结论通过10批不同来源的叠鞘石斛的鉴别和含量测定,证明方法灵敏,准确可靠,重复性好。在不同采收期的叠鞘石斛中,石斛酚的含量在春季4,5月份和秋季10,11月份相对高于其他月份。     

云南药用植物鼓槌石斛化学成分研究

目的:对云南鼓槌石斛化学成分进行研究,发现活性化合物。方法:采用95%乙醇提取活性化合物,经硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析进行分离纯化后,以波谱分析(核磁共振氢谱、碳谱和质谱)鉴定其结构。结果:从石油醚萃取部分分离得到7个化合物,结构确定为:stigmasterol(1),β-sitosterol(2),3,4-dihydroxy-benzoic acid(3),stigmast-4-en-3-one(4),ergosterol(5),moscatin(6),daucosterol(7)。结论:化合物4为首次从本植物中分离得到。     

铁皮石斛中芪类成分的分离及含量测定

目的分离制备铁皮石斛质量指标性成分,并建立其含量的高效液相测定方法。方法硅胶、Sephadex LH-20等色谱学方法分离纯化铁皮石斛,波谱学特征鉴定化合物的结构;高效液相色谱法测定3,4-二羟基-5,4’-二甲氧基联苄(DDB-1)的含量,Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.60 mm,5μm),以乙腈-水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为230 nm。结果共分离得到四个芪类化合物,分别为:3,4-二羟基-5,4’-二甲氧基联苄;3,4’-二羟基-5-甲氧基联苄;5-羟基-3,4’-二甲氧基联苄;4’-羟基-3’,5’-二甲氧基联苄。从中选取3,4-二羟基-5,4’-二甲氧基联苄(DDB-1)作为指标性成分,其在0.044~0.44μg范围内呈现良好的线性关系(R2=0.999 9);不同种植基地的DDB-1含量差异较大,不同采收月份(3月份到5月份)的铁皮石斛中DDB-1含量差异不太明显。结论本研究建立的含量测定方法准确、可靠、简便,可用于铁皮石斛中DDB-1含量测定,为铁皮石斛质量评价提供了参考依据。     

石斛不同种、不同药用部位中多糖含量测定

目的 测定不同种石斛及金钗石斛、马鞭石斛、叠鞘石斛、鼓槌石斛的不同药用部位中多糖的含量.方法 采用紫外-可见分光光度法.结果 不同种石斛茎中多糖含量为:球花石斛18.96 %,马鞭石斛24.89 %,金钗石斛20.49 %,报春石斛15.83 %,肿节石斛8.27 %,叠鞘石斛16.32 %,鼓槌石斛15.33 %,美花石斛28.28 %,兜唇石斛9.26 %;4种石斛不同药用部位多糖的含量:金钗石斛根15.36 %,茎20.49 %,叶22.30 %;马鞭石斛根17.56%,茎24.89 %,叶20.88 %;叠鞘石斛根9.48 %,茎16.32 %,叶17.42 %;鼓槌石斛根10.06 %,茎15.33 %,叶19.81 %.结论 该实验方法简便、快速、准确.各种石斛及其根茎叶中多糖含量均比较高,从资源的综合和可持续利用的角度考虑,建议可以全草入药;美花石斛、球花石斛、报春石斛、叠鞘石斛、鼓槌石斛、肿节石斛茎在进行药效研究的提前下,确认是否可以替代当前<中国药典>品种入药.     

石斛中联苄类化合物抗血管新生活性研究

目的 观察石斛中联苄类化合物对生长因子诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,探讨其构效关系.方法 MTT法检测联苄类化合物对HUVEC静息期和生长因子刺激期增殖的影响.结果 联苄类化合物抑制血管内皮生长因子诱导HUVEC增殖的活性依次如下:erianin,moscatilin>DC-18>gigantol>batatsin Ⅲ;抑制碱性成纤维细胞生长因子诱导HUVEC增殖的活性依次如下:erianin,moscatilin>gigantol>DC-18>batatsin Ⅲ;tristin对HUVEC静息期和生长因子刺激的增殖无影响.结论 联苄类化合物的母核可能是抗血管新生作用的药效团.