甲状腺乳头状癌细胞线粒体DNA D环区的突变

目的研究线粒体DNAD环（D—loop）区在甲状腺乳头状癌中的突变情况。方法对35例甲状腺乳头状癌患者的癌组织和外周血淋巴细胞抽提线粒体DNA，再行PCR产物直接测序的方法对线粒体D环区的两个高变区（HVR—I和HVR-Ⅱ）进行突变检测。结果在35例甲状腺乳头状癌患者中有2例发现突变，突变率为5．7％。突变位点5个，都在HVR-Ⅱ区，均为同质性突变，其中2个属于微卫星不稳定，其余3个属于碱基替代突变。研究同时发现2个尚未报道的新的多态位点（nt324：C→G，ntl6092：T→A）。结论与其他上皮来源肿瘤相比，线粒体DNAD环区在甲状腺乳头状癌中的突变率不高，其与甲状腺乳头状癌发生的关系仍有待于进一步研究。     

线粒体DNA突变与糖尿病相关性耳聋

线粒体（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ，ＭＴ）是高等动物细胞内含有ＤＮＡ的细胞器，是进行氧化磷酸化反应的部位和为细胞提供能量的主要场所，近几年来，人们发现线粒体ＤＮＡ突变可引发脑，心脏，骨骼肌，内分泌腺等器官病变，造成多种疾病，其中，线粒体ＤＮＡ突变与其耳聋的关系正受国内外耳鼻喉学术界的关注，为探索耳聋的奥秘提供了一种新的思路。     

喉癌线粒体DNA拷贝数的临床意义

目的探讨喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）线粒体DNA（mitochondrialDNA,mtDNA）拷贝数异常与TNM分期和分化程度的关系.方法选取32例喉癌、相应癌周组织石蜡标本,显微切割分离癌及癌周组织,分别提取总DNA.以ND1和β-actin为目的基因,进行SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增,并对不同TNM分期和分化程度LSCC的mtDNA拷贝数进行比较分析.结果LSCC Ⅰ和Ⅱ期癌周、癌组织平均（β-actin/ND1 DNA）比分别为0.269和0.274,Ⅲ和Ⅳ期癌周、癌组织平均（β-actin/ND1 DNA）比为0.168和0.157.癌周组织低、中、高分化的平均（β-actin/ND1 DNA）比分别为0.184、0.237、0.239;癌组织分别为0.175、0.201、0.226.结论LSCC癌组织Ⅲ和Ⅳ期的mtDNA拷贝数显著高于Ⅰ和Ⅱ期,mtDNA拷贝数与肿瘤分化程度成负相关,mtDNA拷贝数的变化在肿瘤的发病机制中可能是一个早期事件.     

线粒体DNA突变与耳聋

自1962年发现世界上首例线粒体疾病患者以来，人类已经发现了很多种由于线粒体功能障碍而导致的疾病。近十年来已经明确了几个与耳聋有关的线粒体突变。由于人类线粒体的唯一功能是通过氧化磷酸化参与人体化学能量的产生．因此线粒体突变干扰能量的产生进而导致全身神经肌肉功能障碍就不足为奇了．引起听力损害也只是它的特征之一。然而。令人惊奇的是遗传的线粒体突变被发现也是非综合征性耳聋的原因之一．获得性线粒体突变已被提出是老年性聋的原因之一。本文在对线粒体遗传作一简单回顾之后，将对与耳聋有关的线粒体突变的轮廓作一描述。这些线粒体突变的临床表达依赖于环境暴露程度及多种核编码修饰基因。本文同时阐明预防和治疗线粒体聋的策略将依赖于个体环境暴露因素的明确及回避．以及明确与其相关的核修饰基因的作用机制。     

线粒体DNA突变与感音神经性聋

线粒体ＤＮＡ(ｍｔＤＮＡ)突变与多种综合征、全身性疾病及老年退行性疾病有关[1] 。近年的研究显示感音神经性聋也是多种ｍｔＤＮＡ突变的唯一表现[2 ,3] 。本文综述ｍｔＤＮＡ突变引起的各种感音神经性聋及其研究进展。1　线粒体ＤＮＡ基因结构和特点线粒体ＤＮＡ (ｍｔＤＮＡ)是唯一存在于人体细胞质中的ＤＮＡ分子。每个ｍｔＤＮＡ分子编码、合成线粒体蛋白质必须的两类ｒＲＮＡ(12Ｓ和 16ＳＲＮＡ)、2 2种ｔＲＮＡ及 13个与细胞氧化磷酸化 (ＯＸＰＨＯＳ)有关的多肽链亚单位[1,4 ] 。ｍｔＤＮＡ为母系遗传 ,具有遗传异质性 ,ｍｔＤＮＡ…     

无综合征耳聋与线粒体DNA1555^A→C突变

目的：分析４个无综合征耳聋家系是存在线粒体ＤＮＡ１５５５＾Ａ→Ｃ的突变。方法：以ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法进行线粒体ＤＮＡ１５５５＾Ａ→Ｃ突变筛查。结果 仅１个无综合征耳聋家系中的５个成员有４个存在该突变。结论：线粒体ＤＮＡ１５５５＾Ａ→Ｃ点突变与部分无综合征耳聋有一定关系。     

无综合征耳聋与线粒体DNA1555A→G突变

目的 :分析 4个无综合征耳聋家系是否存在线粒体 DNA15 5 5 A→ G的突变。方法 :以 PCR- RFL P方法进行线粒体 DNA15 5 5 A→ G突变筛查。结果 :仅 1个无综合征耳聋家系中的 5个成员有 4个存在该突变。结论 :线粒体DNA15 5 5 A→ G点突变与部分无综合征耳聋有一定关系。     

线粒体DNA突变与遗传性耳聋

耳聋是耳鼻咽喉科的常见病．严重影响人们的健康和生活质量．其中相当一部分由遗传因素引起。关于遗传性耳聋的总发病率在我国还没有可靠的统计资料。在发达国家，60％的耳聋因遗传缺陷引起。新生儿中听力障碍群体发病率约为1/1000．其中一半是遗传因素所致。随着分子生物学技术在耳聋研究中的应用．发现线粒体DNA(mitochondrial DNA．mtDNA)突变与遗传性耳聋有密切关系。     

线粒体DNA突变与非综合征感音神经性聋

目的 分析非综合征感音神经性聋（non-syndromic sensorineural hearing loss,NSSNHL)患者及听力正常者中3种线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA)突变的发生频率，探寻mtDNA突变在NSSNHL发病中的可能作用。方法 收集年龄从3－84岁的61例散发的NSSNHL病例，6－68岁的19例听力正常人外周血，提取白细胞DNA，结合应用中断法聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR)及引物交换PCR方法检测mtDNA^4977缺失，应用PCR方法及限制性片段长度多态性分析检测mtDNA^1555A→G和mtDNA3243A→G点突变，PCR产物以全自动激光荧光测序仪做序列分析。结果 （1）耳聋组及对照组的mtDNA^4977缺失检出率（缺失例数／总例数）分别为68．85％（42／61）及5．26％（1／19）；（2）所有样本均未检出mtDNA^1555A→G及mtDNA^3243A→G点突变。结论 NSSNHL组mtDNA^4977缺失发生频率明显高于听力正常组，提示mtDNA^4977缺失可能是NSSNHL患者发病的一个重要的作用因素；mtDNA^1555A→G点突变，mtDNA^3243A→G点突变在NSSNHL患者中不常见。     

线粒体DNA突变与非综合征感音神经性聋

目的分析非综合征感音神经性聋(non-syndromic sensorineural hearing loss,NSSNHL)患者及听力正常者中3种线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变的发生频率,探寻mtDNA突变在NSSNHL发病中的可能作用.方法收集年龄从3～84岁的61例散发的NSSNHL病例,6～68岁的19例听力正常人外周血,提取白细胞DNA,结合应用中断法聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及引物交换PCR方法检测mtDNA4977缺失,应用PCR方法及限制性片段长度多态性分析检测mtDNA1555A→G和mtDNA3243A→G点突变, PCR产物以全自动激光荧光测序仪做序列分析.结果①耳聋组及对照组的mtDNA4977缺失检出率(缺失例数/总例数)分别为68.85%(42/61)及5.26%(1/19);②所有样本均未检出mtDNA1555A→G 及mtDNA3243A→G点突变.结论 NSSNHL组mtDNA4977缺失发生频率明显高于听力正常组,提示mtDNA4977缺失可能是NSSNHL患者发病的一个重要的作用因素;mtDNA1555A→G点突变、mtDNA3243A→G点突变在NSSNHL患者中不常见.     

喉鳞状细胞癌组织线粒体基因D-310区碱基的多态性

目的〓〖HTK〗探讨喉鳞状细胞癌组织中线粒体基因D310区碱基序列多态性及其临床意义。〖HTW〗方法〓〖HTK〗提取11例喉鳞状细胞癌组织总DNA,利用聚合酶链反应（PCR）对线粒体基因包含D310区的D-LOOP区部分序列进行扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳并直接测序,观察该区碱基序列的改变。〖HTW〗结果〓〖HTK〗D310区多态性表现为多聚C保守片段胞嘧啶碱基数量的改变,发生率为8/11(72.73%)。5/8（62.50%）的标本突变是同质性的,3/8(37.50%)标本为异质性突变。共检测到6种不同的序列改变,以单个胞嘧啶的插入最常见,约占全部序列改变的50%。〖HTW〗结论〓〖HTK〗在喉鳞状细胞癌组织,D310区具有明显多态性,是突变的多发区域之一。     

线粒体基因组单倍型类群与喉鳞状细胞癌的相关性研究

目的检测常见线粒体基因组（mtDNA）单倍型A、B、C、D、F、G、M在正常人群及喉癌患者中的分布频率,探讨mtDNA单倍型与喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC）发病的相关性。方法选取2013年12月~2015年12月80例LSCC患者作为实验组,同期选取健康体检者74例作为对照组（normal control, NC）,提取两组病例的全血DNA,经PCR-扩增、基因测序,划分单倍型及其子单倍型,计算mtDNA单倍型及其子单倍型在不同组的分布频率,运用SPSS 20.0统计学软件进行统计分析,P<0.05为有统计学意义。结果mtDNA单倍型B及D4在LSCC组的分布频率高于NC组(P﹤0.05),且与临床分期无关（P>0.05）。结论mtDNA单倍型B和D4可能是LSCC的风险因素,可以作为LSCC发病的基因筛查参考指标。     

喉癌的形态特征与黏膜下肿瘤侵袭的相关性

目的了解不同部位、不同T分级及不同形态的喉癌组织黏膜下浸润程度,探讨肿瘤黏膜下浸润程度对喉癌手术切缘的影响。方法收集43例喉癌患者的整块手术切除标本,沿肿瘤长轴垂直切开标本并制作切片,低倍镜下观察并测出喉癌组织在黏膜下潜性浸润距离。比较不同部位、不同T分级及不同形态的喉癌组织黏膜下浸润情况。结果结合肿瘤的外观形态特征及肿瘤浸润程度,在以往肿瘤大体分型的基础上,将喉癌归类为外生型、溃疡浸润型和混合浸润型。43例喉癌标本中,外生型10例,溃疡浸润型8例,混合浸润型25例。喉癌T1～T2级与T3～T4级之间有统计学差异;喉癌外生型、溃疡浸润型和混合浸润型,前者分别与后两型比较,均有显著性差异。结论除喉癌的黏膜病变外,肿瘤的黏膜下浸润程度对确定喉癌原发灶的外科切缘也有重要的指导意义。喉癌原发灶T分级越晚,肿瘤黏膜下浸润程度越重。外生型喉癌的黏膜下浸润程度轻,溃疡浸润型、混合浸润型喉癌黏膜下浸润程度重。局部晚期的溃疡浸润型、混合浸润型喉癌应慎行喉部分切除术。     

新疆少数民族和汉族聋哑学生GJB2基因和线粒体DNA 12SrRNA A1555G突变研究

目的 调查新疆地区聋哑学生GJB2基因和线粒体DNA 12SrRNAA1555G突变情况。方法收集本地区402例感音神经性聋患者基因组DNA,聚合酶链反应扩增线粒体DNA和GJB2基因目的片段,Alw26I限制性内切酶检测线粒体DNA12SrRNA A1555G点突变,对酶切阳性病例和全部GJB2基因PCR产物进行DNA测序。结果维吾尔族、回族和哈萨克族患者中检测到GJB2基因35deIG突变,突变携带率分别为5．2％、5．9％和15．4％;汉族和维吾尔族患者检测到GJB2基因235deIC突变,突变携带率分别为15．2％和7．1％;维吾尔族患者中发现GJB2基因两种新突变311del14和187deIG;9例患者检出线粒体DNA12SrRNAA1555G突变。结论GJB2基因突变在该地区耳聋人群中有较高携带率,新疆地区不同民族GJB2基因突变谱和热点突变存在差异,线粒体DNA12SrRNAA1555G突变是该地区常见聋病基因突变。     

GJB2 and mitochondrial DNA 1555A>G mutations in students with hearing loss in the Hubei Province of China

Objectives

The GJB2 and MTRNR1 1555A > G mutations are the prevalent causes of hearing loss worldwide. However, the mutation profiles of the two genes are dependent on the ethnic or geographic origins. Therefore, this study was to characterize the forms and frequencies of the two genes in 813 students with hearing loss in Hubei province, Central China.

Methods

Blood samples from 813 students were obtained with informed consent. Genomic DNA was extracted from peripheral blood leukocytes. The target fragments were amplified by polymerase chain reaction (PCR). Sequencing (or enzyme digestion) was applied to identify sequence variations.

Results

Ten different mutations were identified in GJB2 in 146 of the 813 (17.96%) patients and 11.81% (96/813) patients had homoplasmic mtDNA 1555A > G mutation.

Conclusions

This study demonstrated the high prevalence of GJB2 and mtDNA 1555A > G mutations in Central Chinese population. Therefore, it will be effective to perform GJB2 and mtDNA 1555A > G mutation analysis for genetic screening for hearing loss in this population.     

X线交叉互补修复基因3遗传变异与喉癌风险的相关性

目的　研究DNA修复基因XRCC3 Thr 241 Met（rs861539）遗传变异与喉癌风险的关系。方法　采用Multiplex SNaPshot技术（多重单碱基延伸反应技术）对60例喉癌患者和120名正常人进行基因分型,采用多因素Logistic回归模型计算各基因型携带者喉癌的发病风险,以及与吸烟交互对喉癌发病风险的影响。结果　XRCC3 241Met等位基因增加了喉癌发病风险,与XRCC3 241 Thr/Thr基因型携带者相比,至少携带一个241 Met等位基因的个体罹患喉癌的OR为4.27,95%CI 为1.49～12.18。结论　XRCC3Thr 241 Met单核苷酸多态是喉癌的遗传易感因素。     

甲状腺良性病变手术与喉返神经损伤

目的 探讨甲状腺良性病变的手术致喉返神经(recurrent laryngeal nerve,RLN)损伤的主要相关因素。方法回顾分析586例甲状腺良性病变的手术资料,探讨RLN损伤与手术方式、RLN在手术中是否预先分离保护的关系。结果586例手术病人发生RLN损伤者为34例,占5.80％,其中以甲状腺次全切除术RLN受损率最高,占88.24％(30/34);术中明确预先解剖出RLN并予以保护者,术后暂时声带麻痹的发生率为0.91％,无永久性声带麻痹。结论 甲状腺次全切除术RLN损伤率最高,可能与缝合殁体时RLN被误伤有关。术中先行游离RLN并予以保护,缝合甲状腺残体时,应尽量在食管沟平面以上注意保留后包膜的完整是减少医源性RLN损伤的重要措施。     

长链非编码RNA与喉癌的相关性

长链非编码RNA (lncRNA)属于非编码RNA中的一种,通过影响染色体的重塑、转录和转录后基因表达水平来调节机体功能.近年研究发现,lncRNA与肿瘤的发生、发展有关,并有多种lncRNA在喉癌中表达异常,其可能在喉癌的发病过程中发挥重要作用.本文就lncRNA在喉癌的发生、进展中的作用及机制研究现状进行综述,对其在喉癌的诊断、治疗以及预后方面的应用前景做一展望.