胃癌患者术前外周血鸟苷酸环化酶C mRNA表达与术后复发的关系

目的 探讨胃癌患者术前外周血鸟苷酸环化酶C信使RNA(guanylate cyclase C,GC-C mRNA)表达与术后复发的关系。方法 收集60例胃癌患者术前外周血和同期门诊15例肠上皮化生、21例异型增生患者以及20例健康体检者外周血标本,应用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测GC-C mRNA的表达,并分析其与临床病理参数及胃癌术后复发的关系。结果 健康体检者外周血中未检测到GC-C mRNA表达,肠上皮化生和异型增生患者外周血GC-C mRNA表达阳性率分别为9.5%(2/15)和20.0%(3/21);而胃癌患者术前外周血阳性率为48.3%(29/60),高于健康体检者及肠上皮化生、异型增生患者(P<0.05)。胃癌患者术前外周血GC-C mRNA表达与肿瘤Laurén分型、临床TNM分期、浸润深度、淋巴结转移和分化程度等均有关(P<0.05,P<0.01)。GC-C阳性胃癌患者术后1~4年的累计肿瘤复发率分别为41.4%、79.3%、96.6%和100.0%;GC-C阴性患者术后1~4年的累计肿瘤复发率分别为16.1%、41.9%、67.7%和80.6%,且GC-C阳性患者术后中位复发时间短于GC-C阴性患者。两组患者术后1~4年的累计肿瘤复发率、中位复发时间和总体生存期差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 胃癌患者术前外周血GC-C mRNA阳性者预后更差,且更易出现术后短期复发。     

胃癌患者外周血中CK-19的表达及其临床意义

目的检测胃癌患者外周血中CK－19和MUC－1的表达,确定其作为早期胃癌微转移分子标志物的可能性;讨论CK—19mRNA对早期胃癌微转移的临床诊断意义。方法研究对象共分为三组,其中2009年3月～2012年3月期间于陕西省安康市中心医院住院的96例初治胃癌患者作为实验组．30例胃良性疾病患者和30例健康人的外周血分别作为对照组。采用RT—PCR法检测实验组及对照组的外周血中CK－19tuRNA及MUC～1mRNA的表达情况并评估目的基闪的表达与临床特征的相关性,对结果进行统计学分析．选取也合适的标本进行PT－QPCR实验。RT—QPCR法检测44例早期胃癌患者外周血中CK－19mRNA的表达量,通过绘制ROC曲线．探索诊断效果最好的临界值并计算AUC。结果①实验组和埘照组中CK－19mRNA阳性表达牢分别为53．13％（51／96）、1．67％（1／60）．差异有高度统计学意义（P〈0．01）,且胃癌组中CK－19mRNA的阳件表达与肿瘤分期和和分化程度有关;胃癌组和对照组中MUC－1mRNA阳性表达率分别为61．46％（59／96）、51．67％（31／60）,差异无统计‘学意义（P〉0．05）。②本实验结果统计的临界值为0．2358,灵敏度为95．45％,准确度为77．37％;AUC为0．897。结论RT—QPCR法检测外周血中的CK－19mRNA,适合作为诊断早期胃癌微转移的重要参考指标。     

胃癌患者外周血CK20 mRNA表达及其临床意义

目的:探讨胃癌患者外周血CK20 mRNA表达及临床意义。方法:应用Taq Man定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测58例胃癌患者(其中50例化疗2周期后复查CK20 mRNA)、20例健康对照者外周血CK20 mRNA表达;患者平均随访2年。结果:胃癌患者外周血CK20 mRNA阳性率为46.55%(27/58),显著高于健康对照组,二者差异有统计学意义(P<0.001);单因素分析胃癌患者外周血CK20 mRNA表达与远处转移(P<0.05)和临床分期相关(、期之间比较P<0.05);多因素Logistic回归分析表明:远处转移是影响胃癌患者外周血CK20 mRNA表达的独立因素;化疗2周期后CK20mRNA阳性率无显著下降,但近期疗效无效的患者外周血CK20 mRNA阳性率显著高于近期疗效有效的患者(P<0.05)。平均随访2年后,CK20 mRNA阳性患者与阴性患者的1年生存率分别为34.78%和64.29%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:外周血CK20 mRNA可作为检测胃癌患者肿瘤细胞微转移的分子标志;定期监测胃癌患者外周血CK20 mRNA表达有助于评估化疗疗效和预测预后。     

实时荧光定量PCR检测大肠癌患者外周血鸟苷酰环化酶C基因及其临床意义

目的:建立人鸟苷酰环化酶C(GC-C)含量实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测的新方法,观察大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC)GC-C mRNA表达水平并探讨其临床意义.方法:在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本(30例健康献血员、11例大肠良性病变和37 例大肠癌)中GC-C mRNA准确含量,并以GC-C mRNA和β2微球蛋白 mRNA含量的比值作为评价GC-C表达水平的指标.结果:本法检测GC-C mRNA含量的线性范围为101 ～109 pg/ml,样本批内和批间变异系数(CV)值分别为6.87%～11.12%和8.86%～15.19%.30例健康献血员和11例大肠良性病变样本的PBMC中均未检出GC-C mRNA表达,大肠癌患者外周血GC-C mRNA的检出率为83.8%(31/37).大肠癌患者外周血PBMC GC-C mRNA表达水平为0.88±0.06,与Duke分期、淋巴结转移和肝转移密切相关,与年龄、性别、肿瘤大小等无关.结论:GC-C mRNA RFQ-PCR检测外周血大肠癌细胞具有较好的检测灵敏度、特异性和重复性,GC-C mRNA表达水平可能对指导大肠癌Duke分期、判断淋巴结转移和肝转移、指导术后综合治疗均有一定价值.     

胃癌患者外周血肿瘤细胞的检测及其临床意义

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤。术后常出现肿瘤的复发和转移。复发和转移除与肿瘤本身的大小、分期、组织学类型及治疗方法有关外，有人设想这些患者可能在术前其外周血、骨髓或淋巴结就存在少量的肿瘤细胞或者手术期间由于手术操作挤压出现肿瘤细胞的播散。由此提出了     

CK20mRNA在胃癌患者外周血中的表达及及其临床意义

目的：研究胃癌患者外周血中CK20mRNA表达以判断癌细胞有无血行播散。方法：采用巢式逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）的方法,对胃癌30例,原发性肝细胞肝癌5例、对照组（非癌肿）10例患者手术前、后不同时间外周血中肿瘤细胞的靶基因CK20mRNA进行检测。结果：对照组（非癌肿）10例及原发性肝细胞肝癌5例手术前、后外周血中CK20mRNA均为阴性表达。胃癌组30例,外周血中CK20mRNA手术前阳性表达率26．7％（8／30）,手术后48小时阳性表达率则为33．3％（10／30）。胃癌外周血中CK20mRNA的阳性表达率与细胞病理分化程度无关,与UICC病理贫苦无关,但与肝脏转移有关。结论：胃癌患者外周血中CK20mRNA的阳性表达可作为癌细胞血行播散的标志;有助于判断胃癌的预后;有助于鉴别原发性肝细胞肝癌和胃癌肝转移。胃癌手术中应采用“不接触肿瘤的游离技术”以养活癌细胞的播散。     

热休克蛋白90在胃癌患者外周血中的表达及其临床意义

本研究通过对比胃癌者和健康志愿者在血清热休克蛋白90(HSP90)含量方面的差异、评价血清HSP90胃癌诊断价值、分析胃癌患者血清HSP90表达与胃癌临床病理特征关系,以探讨HSP90对胃癌患者的诊断价值。结果发现胃癌组血清HSP90显著高于健康志愿者,工作特征曲线下面积0.754,约登指数最大值0.429,灵敏度80.00%、特异性62.86%,而血清HSP90与胃癌患者性别、年龄、肿瘤直径、临床分期、浸润深度、组织分化、淋巴结转移等均无显著相关,由此可见,血清HSP90对于胃癌诊断有一定参考价值,但与肿瘤分期、转移度等无相关。     

冠心病患者外周血中lncRNA-ANRIL的表达水平及其临床意义

目的:研究冠心病患者外周血中lncRNA-ANRIL的表达水平及其临床意义。方法:选取2016年2月-2018年2月于本院心内科住院的冠心病病人231人作为冠心病组,此外纳入447名健康自愿者作为对照组,取两组病人外周血,RtPCR法测定外周血中lncRNA-ANRIL的表达及9p21基因区域3种单核苷酸:rs1333049、rs564398、rs2811712以及CDKN2A、CDKN2B的相对表达量,分析各变量的相关性,分析ANRIL的表达于冠心病诊断中的敏感性与特异性。结果:ROC曲线示:ANRIL（外显子1-2）、ANRIL（外显子17-18）在诊断冠心病方面均具有统计学意义（均P＜0.01）;lnc RNA-ANRIL（外显子1-2）与CDKN2A、CDKN2B表达均呈正相关（均P＜0.05）,lncRNA-ANRIL(外显子17-18)与CDKN2A的表达呈正相关（P＜0.000 1）。冠心病组单核苷酸rs1333049等位基因G显著低于对照组（P＜0.05）;冠心病组rs133049等位基因G与ANRIL(外显子1-2)、ANRIL（外显子17-18）的表达均呈正相关（r=0.340 2/0.312 4,均P＜0.05）;冠心病组ANRIL(外显子1-2)与ANRIL（外显子17-18）的相对表达量均明显小于对照组（均P＜0.01）,结论:ANRIL可能通过调控CDKN2A/B的表达影响冠心病的发生发展,ANRIL的表达可能受染色体9p21区域单核苷酸rs1333049表达的影响,外周血ANRIL的表达可以作为早期诊断冠心病的特异性指标。     

胃癌患者外周血淋巴细胞CD44的表达及临床意义

目的研究胃癌患者细胞表面黏附分子CD44在外周血淋巴细胞中的表达及临床意义。方法根治术的胃癌患者49例。外周血淋巴细胞中CD44的表达应用流式细胞免疫学方法检测,并与正常对照(n=25)进行比较。结果胃癌患者外周血淋巴细胞中CD44的表达均明显高于正常对照[(437.1±16.3)vs(353.3±18.1),P<0.01],手术后2周(381.9±18.7)和12个月(381.5±21.6)表达降低,但仍高于对照(P<0.05)。胃癌Ⅲ~Ⅳ期CD44的表达明显高于Ⅰ~Ⅱ期[(479.1±24.6)vs(423.2±19.5),P<0.05],胃癌有转移患者CD44表达均高于无转移[(462.1±19.2)vs(428.4±19.6),P<0.01],但不同组织类型的CD44表达无显著性差异(P>0.05)。结论胃癌患者外周血淋巴细胞中CD44的表达水平明显高于正常对照,且手术后可以明显下降,其表达水平与胃癌的进展情况及有无转移、预后有一定关系。     

鸟苷酸环化酶C和尾型同源盒转录因子2蛋白在胃癌及癌前病变组织中的表达

目的 检测鸟苷酸环化酶C(GC-C)和尾型同源盒转录因子2(CDX2)蛋白在胃癌及癌前病变中的表达,并探讨两者与胃癌生物学行为的关系.方法 免疫荧光检测GC-C和CDX2蛋白在23例肠上皮化生、9例异型增生、30例胃癌及相应远癌胃组织中的表达,Western印迹检测两者在30例胃癌及相应远癌胄组织中的表达.结果 GC-c和CDX2蛋白在肠上皮化生(均为9例阳性)、异型增生(均为5例阳性)和胃癌(分别为17例、18例阳性)组织中表达阳性率均显著高于远癌胃组织(均无表达);两者在肠型胃癌中的表达均高于弥漫型(均P＜0.05),与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、淋巴结转移等因素无关;GC-C和CDX2蛋白在肠上皮化生和胃癌中两者的表达呈正相关(Spearman秩相关系数r=0.4524、0.3845).结论 GC-C和CDX2蛋白的异常表达与肠型胃癌发生发展有关,检测其变化可能有助于胃癌早期诊断.     

探讨胃癌患者外周血中循环肿瘤细胞的临床意义

目的探究胃癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)的临床意义。方法选取2015年2月至2016年2月期间来我院就诊胃癌患者(n=65)以及胃病患者(n=66)作为研究对象,分别作为胃癌组以及参照组,于清晨抽取全部研究对象5mL静脉血,通过Cell Tracks Auto Prep系统进行相关检测,完成对分析病情特征、阳性率的相关指标。结果本次研究中,胃癌组的阳性率70.77%(46/65)明显高于参照组4.54%(3/65),对比结果存在明显差异(P0.05);在脉管侵犯、分化程度等各方面均不存在明显差异(P0.05)。结论 CTCs检测应用于胃癌患者的检测过程中,具有较高的阳性率,可将其作为微转移检测的有效措施,具有较高的应用价值。     

环状RNA hsa_circ_0079557在胃癌中的表达及其临床意义

目的: 探讨hsa_circ_0079557在胃癌中的表达水平和临床价值。方法： 收集5对胃癌组织及癌旁组织,高通量测序技术检测后结合circbase等数据库中胃癌数据分析,锁定差异表达的部分环状RNA。用qRT-PCR检测62对胃癌标本中hsa_circ_0079557表达,分析其与临床病理特征的关系;检测并分析hsa_circ_0079557在胃癌细胞（SGC-7901、BGC-823、HGC-27和MGC-803）和胃黏膜上皮GES-1细胞、胃癌患者和健康体检者血清中表达差异。siRNA敲减hsa_circ_0079557后,用细胞克隆形成实验、平板划痕实验、细胞周期流式实验分别检测胃癌细胞（HGC-27和MGC-803）增殖和迁移能力及细胞周期改变,蛋白印迹测定细胞周期蛋白依赖激酶3（cyclin dependent kinase 3,CDK3）表达水平。结果： qRT-PCR结果显示,hsa_circ_0079557在胃癌组织中表达水平明显高于癌旁组织,且其表达水平与肿瘤TMN分期相关（P均<0.05）;hsa_circ_0079557在胃癌细胞中表达水平明显高于胃黏膜上皮细胞（P＜0.05）;hsa_circ_0079557在胃癌患者血清中水平明显高于健康体检者（P＜0.05）且术前明显高于术后（P＜0.01）;hsa_circ_0079557敲减后HGC-27和MGC-803细胞增殖、MGC-803细胞迁移能力下降,HGC-27和MGC-803细胞CDK3表达水平下降（P＜0.05）。胃癌细胞株中hsa_circ_0079557敲减使细胞多阻滞于G₀-G₁期。结论： hsa_circ_0079557在胃癌组织中呈高表达,其可作为胃癌潜在的早期诊断及预后生物标志物。     

调节性T细胞在胃癌患者外周血的表达及临床意义

目的 研究胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)的表达,并探讨该群细胞频数的变化与肿瘤临床分期的相关性,从而探讨在胃癌肿瘤免疫过程中Treg细胞对免疫效应细胞的调节作用,探讨其在胃癌发病机制中的作用.方法 采用流式细胞术检测39例胃癌患者外周血淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+及CD4+CD25+调节性T细胞的表达,并以30例健康人作为对照.结果 胃癌患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平明显低于正常对照组,CD4+CD25+和CD8+水平显著增高,胃癌临床分期越晚CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平越低,CD4+CD25+和CD8+水平越高,在临床Ⅰ、Ⅱ期患者与临床Ⅲ、Ⅳ期患者之间存在显著差异,差异有显著统计学意义.结论 胃癌患者机体免疫功能低下,胃癌患者外周血中CD3+、CD4+ T细胞数量下降,而Treg细胞的数量较正常人明显增高,使T细胞不能有效地清除肿瘤,与胃癌的发病有关.     

胃癌患者外周血骨桥蛋白检测的临床意义

目的：探讨外周血骨桥蛋白（osteopontin,OPN）作为胃癌肿瘤标志物检测的临床意义。方法：应用酶联免疫吸附试验（ELISA）和放射免疫分析技术（RIA）检测63例胃癌患者手术前后外周血OPN和癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）的质量浓度,对照组为40例正常健康志愿者。结果：胃癌患者外周血OPN和CEA检测的敏感性分别为69.8%和57.1%,特异性分别为92.5%和87.5%,联合检测的敏感性为77.8%。OPN和CEA的质量浓度与胃癌的临床分期、淋巴结和器官转移有关,与胃癌的组织学分型及大小无关。治疗前后两种标志物的质量浓度具有显著差异。结论：OPN是一种较为理想的胃癌肿瘤标志物,与CEA联合检测能提高胃癌诊断的敏感性。     

胃癌患者外周血中CK20表达的研究

目的探讨胃癌患者外周血中CK20的表达与微转移的关系。方法采用荧光RT—PCR技术进行胃癌患者外周血CK20表达检测。结果57例胃癌患者外周血中检出CK20表达的有23例，检出率为40．4％。结论采用RT—PCR技术检测外周血中CK20的表达可以监测癌症微转移的发生，适于临床推广。     

胃癌组织中C—Ha—rasP21表达及其临床意义

本文应用鼠抗人C-Ha-ras基因产物P21的抗体和免疫组织化学技术,检测了20例胃癌组织中C-Ha-rasP21的表达,根据石蜡切片中阳性染色细胞的染色强度(S_1)和阳性染色细胞占总细胞的百分比(psi),判定细胞中P_21的表达水平.结果表明,癌细胞中C-He-ras P_21表达水平和胃癌发生、演化密切相关,随着胃癌临床病程的进展.肿瘤细胞中C-Ha-ras P_21表达水平逐步升高.本文提示应用免疫组织化学方法检测胃癌组织中C-Ha-ras P_21的表达水平,可预测胃癌细胞的生物学行为和指导临床治疗.     

胃癌组织中mTOR的表达及其临床意义

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹检测30例胃癌组织及正常胃黏膜上皮组织中mTOR mRNA及蛋白的表达,并分析其表达与胃癌临床病理学特征的关系。结果 mTOR mRNA在胃癌组织中的阳性表达率和表达水平均显著高于正常胃黏膜上皮组织(P<0.05),且mTOR mRNA的表达随分化程度的降低而显著增高(P<0.05),有淋巴结转移者较无淋巴结转移者显著增高(P<0.05)。mTOR蛋白在胃癌组织中的阳性表达率及相对表达值均显著高于正常胃黏膜上皮组织(P<0.05),并且其在胃癌组织中的表达值随分化程度的降低而增高(P<0.05),有淋巴结转移者较无淋巴结转移者mTOR蛋白的表达值显著增高(P<0.05)。结论 mTOR的表达可能与胃癌的发生发展有关,其对判断胃癌的生物学行为具有一定的意义。     

胃癌组织中Survivin的表达及其临床意义

目的：探讨Survivin蛋白在胃癌组织中的表达极其意义。方法选取正常胃黏膜组织、癌旁组织及胃癌组织各40例,均取材于该院2015年1月—2016年1月胃肠外科行胃癌切除术后的组织,采用免疫组化染色超敏2步法(SP染色)检测各组标本中Survivin的表达。灰度值越高,表示Survivin表达越少。结果 Survivin在胃癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中的表达呈逐渐降低趋势[(204.68±11.46)vs(270.50±12.20)vs(424.32±13.78),P﹤0.05],Survivin蛋白表达与胃癌淋巴结转移、TNM分期及组织学类型相关[(199.52±12.22)vs(214.63±13.40)、(198.71±12.44)vs (206.76±11.98)、(214.43±14.65)vs(192.38±11.29)(P<0.05)]。与胃癌患者性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)。结论Survivin在胃癌中过度表达,其表达与胃癌的临床病理特征紧密相关,这对于胃癌的早期诊断、治疗及预后判断具有重要意义。     

胃癌组织中PCNA和细胞色素C蛋白的表达及其临床意义

目的：研究胃癌组织中增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞色素C(CytC)蛋白的表达、相互关系及其临床意义。方法：应用免疫组织化学S-P法,检测59例胃癌组织及10例正常胃黏膜组织中PCNA和Cyt C蛋白的表达。 结果：10例正常胃黏膜组织中,PCNA和Cyt C蛋白表达率分别为20.0%（2/10）和10.0%（1/9）,胃癌组织中PCNA和CytC蛋白的表达率分别为86.4%和78.0%,胃癌组织表达率高于正常胃黏膜组织（P<0.05 或P<0.01）。在不同年龄、不同肿瘤大小的胃癌患者中PCNA和CytC的表达率比较差异无显著性（P>0.05）,低分化患者PCNA的表达率高于高分化患者（P<0.05）,低分化和中分化患者CytC蛋白表达率均低于高分化患者（P<0.01）,胃癌组织中PCNA蛋白与Cyt C蛋白的表达频数差异无显著性（P>0.05）。结论：PCNA蛋白的高表达及Cyt C的低表达与胃癌的发生发展有关,提示二者在胃癌的发生和发展过程中分别通过不同途径来发挥生物学作用。