低声压超声调控微泡空化对大鼠Walker-256肿瘤血管效应的初步研究

目的 探讨低声压超声调控的微泡空化对大鼠Walker-256肿瘤产生的血管效应.方法 健康雄性SD大鼠26只,双侧大腿内侧细胞接种法移植Walker-256肿瘤52个,利用随机数字表法进行分组后,分别给予不同强度的治疗声压,即假照组(n=6)、200 kPa组(n=12)、400 kPa组(n=10)、600 kPa组(n=12)、800 kPa组(n=12).超声治疗占空比1％,治疗时间5 min.各不同声压治疗组中半数肿瘤在超声辐照同时经尾静脉注射0.1 mL脂质微泡.治疗前后分别进行超声造影,利用Adobe Photoshop软件对图像进行灰阶定量分析,得到肿瘤造影峰值平均灰阶值.治疗结束后获取肿瘤标本行病理检查.结果 假照组和各实验组在治疗前后的超声造影分析结果显示,肿瘤造影峰值平均灰阶值差异无统计学意义(P＞0.05),但病理检查发现600 kPa组肿瘤组织血浆外渗和轻度水肿,800 kPa组肿瘤组织明显出血、水肿.结论 低声压超声联合微泡对大鼠Walker-256肿瘤的血流灌注影响不大,但600 ～ 800 kPa声压可引起血管通透性的增加.     

树突状细胞疫苗对大鼠Walker-256肿瘤抑制作用

目的建立Walker-256大鼠种植瘤模型，探讨树突状细胞（DC）疫苗抑制肿瘤生长的机制。方法从大鼠骨髓细胞中利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素4（IL-4）在体外定向诱导分化出DC，液氮冻融法提取Walker-256肿瘤细胞抗原后刺激DC制备负载抗原的DC疫苗。ELISA法检测培养液中IL-12的浓度。雌性SD大鼠，皮下注射Walker-256肿瘤细胞制备种植瘤模型，成瘤大鼠按照体重配对，分为肿瘤治疗组和肿瘤对照组。10只体重分别相对应的雌性SD大鼠作为正常对照组。肿瘤治疗组大鼠皮下注射负载抗原的DC细胞悬液，肿瘤对照组和正常对照组大鼠皮下注射等量PBS。分别检测大鼠血IL-12浓度和肿瘤最大径。结果得到大量具备典型光镜和电镜形态特征的DC，表达大鼠DC特异性标志OX62、OX6。负载抗原前后DC产生IL-12的水平存在明显差异（P〈0．05）。肿瘤治疗组大鼠肿瘤最大径显著小于肿瘤对照组（P〈0．01）。肿瘤对照组与正常对照组比较，IL-12明显下降（P〈0．05），肿瘤治疗组与肿瘤对照组比较，IL-12明显上升（P〈0．01）。肿瘤治疗组的肿瘤最大径与IL-12呈显著负相关（r=-0．826，P〈0．01）。结论增强Th1介导的抗肿瘤细胞免疫可能是树突状细胞疫苗抑制肿瘤生长的机制之一。     

Walker-256大鼠移植性肝癌模型探讨

目的 Walker-256细胞质肝内接种制备大鼠移植性肝癌模型.方法 取体重150～180g雄性Spraque-Dawley (SD)大鼠72只,随机分为实验组和对照组:实验组(n=60)肝内接种Walker-256细胞质;对照组(n=12)肝包膜下注射相同剂量的生理盐水,1周后观察肿瘤大小、并进行病理学检测.结果 实验组大鼠共有15只大鼠死亡,而移植瘤肝癌模型出瘤率为100% (45/45),大多数大鼠伴有肺以及腹腔转移,并且均经过病理学证实.结论 Walker-256细胞质肝内接种可以成功建立适宜临床研究的肝癌模型.     

大鼠Walker-256移植性肺癌模型的建立

目的 建立大鼠Walker-256移植性肺癌模型,探讨应用Walker-256癌细胞建立大鼠移植性肺癌模型的可行性.方法 SD大鼠经尾静脉注射高、中、低三种不同细胞浓度的大鼠Walker-256细胞悬液,观察大鼠的生存时间、体重变化、移植性肺癌模型的成模率,其他脏器转移情况及病理形态学变化情况.结果 注射癌细胞后14 d,模型组大鼠均出现体重下降、摄食减少等体征,与正常对照组比较体重明显降低(P＜0.05);注射癌细胞后21d,高浓度组大鼠开始出现死亡;高、中、低三组不同细胞浓度的移植性肺癌成模率分别为100％、80％、30％,模型组大鼠肝脏系数和肺脏系数均高于正常对照组.病理结果显示,模型组大鼠肺部可见明显的癌症病灶,而其他脏器未发现明显异常.结论 注射高浓度Walker256癌细胞(3×105个细胞/只)能成功复制移植性肺癌模型,为移植性肺癌模型的建立和应用提供实验依据.     

大鼠Walker-256、小鼠H22肿瘤模型建立及应用

目的研究大鼠Walker-256及小鼠H22两种肿瘤模型的成瘤性和稳定性,并探讨其应用。方法建立大鼠Walker-256及小鼠H22两种皮下肿瘤模型,1周后观察其出瘤率和肿瘤大小,观察并绘制肿瘤生长曲线,实验结束后进行病理学检测。结果1周后两种鼠肿瘤模型出瘤率分别为98.57%、97.14%（P〉0.05）;肿瘤直径分别为（9.61±2.90）mm、（8.25±1.89）mm（P〉0.05）;大鼠Walker-256模型有肿瘤自然消退现象,而小鼠H22模型肿瘤生长稳定且少数出现肺转移;病理学检测支持上述现象。结论小鼠H22皮下肿瘤模型较大鼠Walker-256模型稳定,可用于抗肿瘤疗效评价。     

化疗栓塞对大鼠Walker-256肝肿瘤移植模型微血管密度、VEGF和bFGF表达的影响

目的：用大鼠Walker-256肝肿瘤移植模型研究化学栓塞对肿瘤微血管密度（MVD）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）和成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响。 方法：60只大鼠肝肿瘤模型在种植后第14天随机分成3组，分别经肝动脉注入超液态碘油0.5 mL(A组）、超液态碘油0.5 mL加5-Fu 20 mg•kg^-1（B组）和生理盐水0.5 mL (对照组)。于术后第7天取肝脏标本，免疫组化法检测肿瘤组织MVD、VEGF和bFGF的表达，同时分析VEGF表达强度与MVD的相关性。结果：各组MVD 差异无显著性（P>0.05）；A组和B组瘤内VEGF阳性率和平均染色强度明显高于对照组（P<0.05, P<0.01），而A组与B组之间差异无显著性（P>0.05）。VEGF表达强度与MVD呈显著正相关（r=0.451，P<0.01）。bFGF阳性率和平均染色强度各组差异无显著性（P>0.05）。 结论:化疗药物栓塞后残存瘤组织具有丰富的血供，提高了残存肿瘤组织VEGF的表达，VEGF和MVD可能在术后肿瘤血供的重建中起重要作用。     

大鼠Walker-256肝癌模型肝动脉造影的实验研究

为探讨大鼠Ｗａｌｋｅｒ－２５６肝癌模型肝动脉造影的影像学特征，采用隧道植入法建立大鼠肝脏Ｗａｌｋｅｒ－２５６癌肉瘤模型，用自制导管进行动脉插管，研究模型肿瘤的病理及肝动脉造影的ＤＳＡ影像学特征。结果表明，该模型较好地模拟人肝癌的生长方式及肝动脉造影下的影像表现，为肝癌介入治疗提供了理想的动物模型。     

芝类提取物改善Walker-256腹水大鼠免疫功能

目的 探讨芝类提取物(GLE)对Walker-256腹水大鼠免疫功能的影响及其机制.方法 根据不同处理方法将60只Wistar大鼠随机分为6组:对照组、模型组、低剂量GLE组、中剂量GLE组、高剂量GLE组和顺铂组,每组10只.采用Walker-256大鼠腹水癌细胞接种法造模后,高、中、低剂量GLE组大鼠分别给予GLE 0.84、1.68、3.36 g/(kg·d)灌胃,每天2次,每次2mL,连续14 d;顺铂组大鼠给予0.004 g/(kg·d)顺铂(溶于生理盐水)腹腔注射,每周1次.对照组(未造模大鼠)和模型组均给予生理盐水灌胃,每天2次,每次2mL,连续14 d.观察各组大鼠的一般情况,测定腹水质量,称量计算大鼠脾、胸腺和肾脏器指数,检测肾功能;流式细胞术检测各组大鼠胸腺和骨髓的细胞周期、外周血T淋巴细胞亚群分布和自然杀伤(NK)细胞数;血清免疫因子蛋白芯片检测对照组、模型组和中剂量GLE组大鼠血清免疫细胞因子的水平.结果 GLE可有效减少大鼠腹水质量(P＜0.05).与对照组相比,模型组和顺铂组均出现胸腺、脾和肾损伤,给予中、高剂量GLE干预后大鼠胸腺指数、肾指数提高,血肌酐和尿素氮值降低(P＜0.05);模型组和顺铂组大鼠胸腺和骨髓细胞发生G0/G1期阻滞,给予GLE干预后G0/G1期阻滞减少、G2/M和S期细胞比例升高(P＜0.05).与模型组相比,给予GLE干预使大鼠外周血中CD4+细胞比例、CD4+/CD8+细胞比值和NK细胞比例均增加,CD8+细胞比例降低(P＜0.05).中剂量GLE组大鼠血清中干扰素γ(IFN-γ)、白介素(IL)-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达与模型组相比均升高(P＜0.05).结论 GLE可有效减少Walker-256腹水大鼠腹水生成,改善大鼠免疫功能,且与顺铂相比无肾脏损害.     

大鼠肝包膜下移植Walker-256制备肝癌模型

目的通过原位移植的方法制备大鼠肝癌动物模型。方法取大鼠肿瘤细胞Walker-256制备为浓度1×10^8个／ml,分别于Wistar大鼠肝包膜下接种0．04ml。观察大鼠肝脏实体瘤的生长情况及肺转移的发生率。结果肝包膜下接种细胞悬液7d可见较小肿瘤块生长;14d开始出现肺转移,并伴有肠系膜、生殖系统的转移;21d肺转移率达100％。肝肿瘤组织HE染色结果可见肿瘤组织呈条索及团块状排列,排列紊乱,癌细胞索之间由血窦相连,癌肿边缘的肝组织受压萎缩。肺组织切面有多个散在的圆形或卯圆形实化灶。HE染色结果可见腺体样或乳头状结构,核染色深,核仁、核膜比较清楚。     

大鼠肝包膜下接种Walker-256瘤株肺转移的观察

近年来随着研究的深入 ,肝癌的治疗已取得重大进展 ,但肿瘤细胞转移仍是治疗失败的主要原因。在肝癌肝外转移中肺转移最为常见。目前 ,在肝癌肺转移的动物模型中 ,除裸鼠外 ,尚无转移率较高的大鼠模型。本实验通过采用 Walker-2 5 6大鼠肝包膜下接种的方法复制移植性肝癌 ,模拟肝癌肺转移 ,发现大鼠肝包膜下接种 Walker- 2 5 6细胞悬液 7d后肺转移率为 10 0 %。现将观察结果报告如下。1　材料和方法1.1　细胞悬液及瘤块制备　 SD雄性大鼠 72只 (体质量15 0～ 2 0 0 g) ,6周龄 SD幼鼠 1只 ,均由第二军医大学动物实验中心提供 ;Walker- 2 5…     

大鼠骨髓间充质干细胞移植对Walker-256肝癌生长影响的实验研究

目的 评价大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)移植对Walker-256肝癌生长的影响.方法 从大鼠腹水瘤株中提出并培养Walker-256细胞,采用商接肝内注射法制备大鼠肝癌模型.实验分2个实验组(MSC与肿瘤细胞混合移植组、MSC静脉移植组)和一个对照组,每组15只.所有实验动物均在术后第3、6、9、12天进行MR成像并测量肿瘤横断位最大层面而积的变化,第12天成像后取病理进行常规HE染色以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、nm23、增殖细胞核抗原(PCNA)、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法免疫组化分析.结果 MRI显示所有实验动物在术后第3、6天均末见明显肿瘤形成,第9天可见肿瘤结节生长,两个实验组肿瘤在第9、12天横断位最大层面面积均大于对照组(F=4.21,P<0.05;F=8.52,P<0.01).免疫组化结果 表明两个实验组肿瘤VEGF表达均明显高于对照组(F=9.58,P<0.01),nm23基因蛋白表达均低于对照组(F=4.61,P<0.05),MSC混合移植组PCNA表达高于对照组[d'(1,0.05)>=0.34,d'(1,0.01)>=0.63,P<0.05],MSC静脉移植组PCNA表达与对照组差异无统计学意义[d'(1,0.05)>=0.32,d'(1,0.01)>=0.48,P>0.05],2个实验组肿瘤凋亡指数与对照组差异均无统计学意义(F=1.25,P>0.05).结论大鼠MSC移植能影响Walker-256肝癌VEGF、nm23以及PCNA的表达,有利于肿瘤的生长.     

不同浓度Walker-256癌性腹水腹腔接种对大鼠免疫功能的影响

目的观察不同浓度肿瘤腹水接种后，Wistar大鼠腹水产生的情况与其本身免疫功能的关系。方法24只大鼠被接种不同浓度的Walker-256肿瘤腹水0．3ml，另外12只大鼠腹腔注入生理盐水0．3ml作为对照组，8d后观察各组大鼠产生腹水的数量及细胞免疫及体液免疫功能各指标。结果高浓度腹水接种后产生腹水的大鼠只数少于稀释后接种的大鼠只数，各组免疫指标均具有统计学意义，P〈0．05，其中高浓度腹水接种组免疫功能最好，稀释后接种的大鼠免疫功能最差。结论不适当地增加含肿瘤腹水的浓度并不能增加产生腹水的可能性，相反确有可能激活大鼠本身的细胞和免疫功能消灭腹水内肿瘤细胞，使得产生腹水的可能性降低。     

乳腺肿瘤超声造影与微血管密度相关性的研究

目的探讨超声造影在乳腺肿瘤鉴别诊断方面的应用价值。方法术前对55例乳腺肿瘤患者进行超声造影检查,应用时间-强度曲线分析软件分析定量参数(峰值强度、曲线下面积),术后应用免疫组织化学方法对手术标本进行抗CD34因子免疫组织化学染色,测量肿块微血管密度计数,与超声造影的峰值强度、曲线下面积对照,分析二者的相关性。结果乳腺恶性肿瘤组织中抗CD34标记的微血管量与超声造影后的定量参数(峰值强度、曲线下面积)呈显著正相关。结论超声造影可间接判断乳腺肿瘤血管生成的活性,可作为术前鉴别乳腺良、恶性肿瘤的有效手段。     

重组人血管内皮抑素联合TACE抗大鼠Walker-256细胞移植性肝癌血管生成的作用

目的 探讨重组人血管内皮抑素(rh-ES)联合肝动脉化疗栓塞术(TACE)对大鼠移植性Walker-256肝癌模型血管内皮生长因子(VEGF)表达和微血管密度(MVD)影响,评价rh-ES与TACE联合治疗对抑制大鼠移植性肝癌模型血管生成的疗效.方法 建立Wistar大鼠Walker-256肝癌模型,1周后随机分成治疗...     

肿瘤微血管研究及进展

肿瘤的生长、浸润、转移是依赖于血管的新生,与肿瘤相关的血管生长因子是促进肿瘤血管生长的基础,也是肿瘤代谢的关键途径。如能有效控制肿瘤血管的生成。就可能使原发的甚至转移的肿瘤,期望能控制在浸润前期。     

口腔癌肿瘤微血管密度的研究

探讨口腔癌肿瘤微血管密度改变在口腔癌发生发展中的作用。方法对６０例口腔癌的组织切片采用抗ＣＤ５４单抗进行免疫组织化学染色,计取肿瘤ＭＶＤ。结果ＴＮＭ临床分期Ⅲ,Ⅳ期病例的ＭＶＤ明显高于Ⅰ,Ⅱ期病例;肿瘤细胞分化程度高的病例ＭＶＤ明显高于中低分化病例;有淋巴结转移病例的ＭＶＤ明显高于封锁林巴结转移病例。     

大鼠中枢神经毁损方法的研究与比较

用６种方法毁损大鼠中枢神经，并观察其表现和后果，运动皮质毁损后大鼠表现为软瘫，短期内步态恢复；用无水乙醇毁损运动皮质的大鼠均于术后１ｄ内死亡；用青霉素毁损运动皮质的大鼠均在术后４ｈ内持续抽搐，死亡；大脑中动脉栓事的大鼠术后有步态异常，但术后死亡率较高     

大鼠中枢神经毁损方法的研究与比较

用６种方法毁损大鼠中枢神经,并观察其表现和后果。运动皮质毁损后大鼠表现为软瘫,短期内步态恢复;用无水乙醇毁损运动皮质的大鼠均于术后１ｄ内死亡;用青霉素毁损运动皮质的大鼠均在术后４ｈ内持续抽搐、死亡;大脑中动脉栓塞后的大鼠术后有步态异常,但术后死亡率较高;电毁损锥体束的大鼠术后一周内有明显步态异常,且死亡率较低。提示电毁损锥体束可作为制作大鼠痉挛性瘫痪模型的一种优选方案