纳络酮对脑创伤致急性肺损伤中对内皮素的影响

目的　研究纳络酮治疗脑创伤致急性肺损伤大鼠中对内皮素的影响 .方法　成年 Wistar大鼠随机分为对照组 (n= 10 )、脑创伤组 (n=4 0 )和纳络酮治疗组 (n=10 ) .采用Feeney脑创伤模型 ,观察脑创伤后大鼠不同时间点肺组织的病理改变 ,放免法测定血浆和肺组织 ET- 1含量变化及应用纳络酮对其的影响 .结果　脑创伤大鼠出现程度不同的急性肺损伤的病理改变 ,尤以伤后 6 h为重 .血浆和肺组织 ET- 1含量明显增高 (2 0 1.7± 6 3.7vs 2 1.8± 1.9,P<0 .0 1;190 .2± 6 5 .6 vs 17.5± 0 .8,P<0 .0 1) ,伤后 6 h达峰值 ,72 h仍持续性升高 .治疗组肺组织病理改变明显减轻 ,血浆和肺组织ET- 1尽管于伤后 72 h仍高于对照组 (30 .4± 3.1vs2 1.8±1.9,P<0 .0 1;2 5 .6± 1.8vs17.5± 0 .8,P<0 .0 1) ,但明显低于创伤组 (30 .4± 3.1vs 96 .4± 18.8,P<0 .0 1;2 5 .6± 1.8vs 6 0 .4± 19.0 ,P<0 .0 1) .结论　脑创伤可致程度不同的急性肺损伤 ,ET- 1可能在其发病过程中起重要作用 ,纳络酮对急性肺损伤有一定的治疗作用 .     

野百合碱诱导肺动脉高压模型大鼠血浆ET-1和NO水平的变化

目的:探讨野百合碱(MCT)诱导肺动脉高压(PH)模型大鼠血浆内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)水平的变化。方法:成年雄性SD大鼠20只随机分为正常对照组(n=10)和MCT模型组(n=10)。通过腹腔注射MCT建立肺动脉高压大鼠模型,用放免测定法和比色分析法分别测定血浆中ET及NO的含量。结果:在注射MCT3周后,平均肺动脉压对照组为(18.13±4.33)mmHg,模型组为(31.65±8.52)mmHg(P<0.01),血浆ET明显升高(61.08±9.46vs95.92±15.78),NO下降(115.32±27.15vs52.24±8.71)(P<0.01)。结论:野百合碱引起肺动脉高压的作用机制可能与其改变内皮素、一氧化氮血管活性物质含量有关。     

低剂量睾酮对心衰雄性大鼠血清白介素-10水平的影响

目的:观察低剂量十一酸睾酮(TU)对心肌梗死后慢性心力衰竭(HF)雄性大鼠血清白介素-10(IL-10)水平的影响。方法:对120只健康雄性SD大鼠随机行冠状动脉结扎(n=105)或假手术(PS,n=15)。6周后将存活的44只模型鼠随机分为2组:心力衰竭+TU治疗组(HF+TU组,n=22)给予TU 5 mg/kg.2周肌肉注射;心力衰竭组(HF组,n=22),给予安慰剂。用药12周后测定血清睾酮(T)及IL-10浓度。结果:HF组雄鼠血清T水平明显低于PS组(153.91±77.45 vs 475.28±161.37 ng/d1,P<0.05),HF+TU组T浓度与PS组无显著性差异(415.50±59.22 vs 475.28±161.37 ng/dl,P>0.05)。HF组较PS组血清IL-10浓度明显下降(4.90±1.32 vs 7.30±2.14 pg/ml,P<0.05)。HF+TU组较HF组血清IL-10浓度显著升高(6.55±2.11 vs4.90±1.32 pg/m1,P<0.05)。HF+TU组与PS组血清IL-10浓度无显著性差异(6.55±2.11 vs 7.30±2.14 pg/m1,P>0.05)。结论:低剂量睾酮可提高心肌梗死后慢性心衰雄性大鼠血清IL-10水平。     

氯吡格雷对异种移植心脏急性血管性排斥反应的影响

目的观察氯吡格雷对豚鼠-大鼠非协调性异种移植心脏急性血管性排斥反应的影响。方法采用颈部异位心脏移植模型,分2组:对照组(n=10)以眼镜蛇毒因子预处理;实验组(n=8)以眼镜蛇毒因子加氯吡格雷联合预处理。观察比较移植物存活时间、病理变化及细胞凋亡情况。结果移植物病理表现均为急性血管性排斥反应改变。实验组经氯吡格雷预处理的移植物P选择素表达积分减少[(1.66±0.32)vs(2.52±0.22),P<0.05),凋亡指数降低[(11.5±2.8)vs(15.6±3.9),P<0.05),移植物平均存活时间明显长于对照组[(50±4)hvs(41±2)h,P<0.05)。结论氯吡格雷可延长非协调性异种移植物存活时间,减轻异种移植免疫损害。     

表皮生长因子防治急性胰腺炎大鼠肠道细菌易位

目的:探讨表皮生长因子对急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障功能的保护作用.方法:SD大鼠32只,采用3.5 mg*L-1牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射建立急性胰腺炎模型后,随机分为对照组(n=16)及治疗组(n=16),对照组给予全肠外营养支持,治疗组给予相同配方的全肠外营养支持,并予表皮生长因子皮下注射.于治疗后第1及第5天处死大鼠,检测肠道通透性、吸收功能、空肠黏膜蛋白、DNA含量以及肠管细菌易位率.结果:在术后第5天,治疗组动物肠道通透性显著低于对照组[(3.4±0.7) vs (7.5±0.9) mg*L-1, P<0.01];空肠黏膜蛋白及DNA含量显著高于对照组[(2.65±0.23) vs (1.12±0.18) mg*cm-1, (0.25±0.07) vs (0.12±0.04) mg*cm-1,P<0.01];肝脏及脾脏细菌培养阳性率显著低于对照组(37.5％ vs 100％, 25％ vs 100％, P<0.05).结论:表皮生长因子对急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障具有保护作用.     

雷公藤多甙对实验性自身免疫性脑脊髓炎核因子-κB和IL-2的影响

目的探讨雷公藤多甙(TWP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)Lewis大鼠核因子-κB(NF-κB P65)和IL-2的影响。方法雄性Lewis大鼠随机分为正常对照组(n=10)、TWP治疗组(n=10)及模型组(n=10)。用髓鞘蛋白(MBP)免疫雄性Lewis大鼠制作EAE模型。观察TWP对大鼠发病率、神经功能评分、发病时间和组织病理改变的影响,采用免疫组织化学法检测发病急性期脑组织NF-κB表达的情况,ELISA法检测血浆中IL-2的水平。结果与EAE模型组相比,TWP治疗组神经功能评分降低(3.36±0.64 vs 2.10±0.43,P<0.05),但发病率无明显差异,平均发病时间推迟[(10.13±0.76)d vs(12.22±0.81)d,P<0.05],脑和脊髓的病灶数目也减少(26.21±0.72 vs 12.41±0.56,P<0.05),血清中IL-2的含量减少[(62.56±8.53)pg/ml vs(41.46±6.56)pg/ml,P<0.05],脑组织NF-κB P65阳性细胞数减少(72.46±2.41 vs 32.56±1.56,P<0.05)。结论 TWP能有效干预Lewis大鼠EAE的发病,改善病理变化,其机制可能与下调NF-κB及IL-2表达有关。     

人骨髓基质细胞脑移植改善大鼠缺氧缺血性脑损伤

目的观察人骨髓基质细胞(BMSCs)移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用,探讨BMSCs脑移植治疗HIBD的可行性。方法36只新生大鼠随机分为对照组、HIBD组和移植组(均n=12)。HIBD组和移植组大鼠7日龄时结扎左侧颈总动脉后吸入8%氧气2h制成HIBD模型。对照组仅分离左颈总动脉,不予结扎和缺氧。分离培养人BMSCs,损伤后3d将BMSCs立体定位脑移植到移植组大鼠左侧感觉运动皮层。3～4周龄时,观察大鼠行为学和组织学的改变,并用免疫荧光检测移植细胞的存活情况。结果缺氧缺血后3周,HIBD组海马DG区和皮层单位面积内神经元数目较正常组减少[海马DG区:(39.2±5.6)个vs(51.1±3.9)个,P<0.001;皮层:(12.3±3.0)个vs(17.8±3.0)个,P<0.001]。BMSCs移植后海马DG区和皮层单位面积内神经元数目[海马:(44.9±3.1)个,皮层:(17.5±3.1)个]较HIBD组增加(P<0.01)。与对照组比较,HIBD组在T迷宫、感觉运动功能测试中表现出明显的不足。BMSCs脑移植组各项行为学测试成绩较HIBD组均有明显改善。免疫荧光显示移植后3周,BMSCs在脑内存活。结论BMSCs脑移植可以改善新生鼠HIBD。     

心梗大鼠离体心脏的动作电位和不应期电生理研究

目的对比观察正常大鼠和心梗大鼠离体心脏动作电位和有效不应期的特点。方法用离体灌流吸附电极记录单向动作电位,常规电生理方法测量最大动作电位幅度(APA)、复极90%(MAP90)、复极50%(MAP50)、复极20%(MAP20)、有效不应期(ERP)。结果(1)和正常大鼠相比,心梗大鼠离体心脏左心房电生理参数MAP90(56.3±2.7vs.64.5±8.7,P<0.05)显著延长,ERP MAP90(0.89±0.2vs.0.78±0.3,P<0.05)减小,基础周期为250ms;右心室的电生理参数MAP90(67.6±14.1vs.134.1±26.7,P<0.001),ERP(55.0±3.53vs.69.0±8.9,P<0.05)明显延长,ERP MAP90(0.79±0.1vs.0.60±0.1,P<0.05)减小,基础周期为250ms;左心室的电生理参数MAP90(87.2±15.7vs.168.8±31.2,P<0.001)也呈显著延长,ERP(59.0±4.2vs.90.0±17.7,P<0.001),ERP MAP90(0.65±0.081vs.0.54±0.090,P<0.05)呈显著减小基础周期为250ms;(2)与正常大鼠相比,心梗大鼠的MAP90离散度[(LVMAP90-RVMAP90)(17.0±6.5vs.51.4±28.7,P<0.001)]、ERP离散度[(LVERP-RVERP)(4.0±2.2vs.20.0±7.9)P<0.001]显著增加,基础周期为250ms。结论心梗大鼠心脏不同部位的MAP的复极时间都显著性延长,MAP90和ERP离散度增加,这些电生理特点是促进折返形成、造成心律失常的主要原因。     

重型颅脑损伤合并脑性耗盐综合征患者39例血浆脑型利钠肽浓度的变化

目的:探讨重型颅脑损伤合并脑性耗盐综合征患者血浆利钠肽浓度变化,分析二者之间关系。方法:选取重型颅脑损伤合并脑性耗盐综合征39例、单纯重型颅脑损伤患者34例、健康体检正常者40例分为脑性耗盐综合征组、非脑性耗盐综合征组、对照组,入院当日、第5天、第10天、第15天抽血经化学发光方法测定血浆利钠肽、血钠浓度,并行经颅多普勒超声检查,测定大脑中动脉(VmMCA)、大脑前动脉血流速度(VmACA)。结果:重型颅脑损伤合并脑性耗盐综合征患者5d血浆利钠肽水平升高,3组比较1129.1±3.5vs245.2±2.6vs157.2±2.4(P<0.05),经颅多普勒测定脑血流速度明显加快(VmMCA139.2±2.1vs78.3±1.8vs53.4±2.9,P<0.05;VmACA142.1±1.5vs74.8±2.7vs59.2±1.8,P<0.05),持续约10d左右时间,2周后恢复正常水平,与血钠水平波动一致。结论:脑性耗盐综合征组,血浆利钠肽浓度明显升高,提示血浆利钠肽水平与脑性耗盐综合征发生有关。     

来曲唑治疗大鼠子宫内膜异位症模型异位病灶的作用机制

目的 研究来曲唑治疗大鼠子宫内膜异位症的作用机制.方法 采用子宫内膜自体移植法进行子宫内膜异位症建模,2015年3月,选择30只建模成功的大鼠,根据随机数字表法分为来曲唑组和对照组,各15只.曲唑组大鼠每日给药来曲唑灌胃,给药剂量为0.26 mg/kg,1次/d;对照组灌胃等体积的0.9%NaCl注射液.采用免疫组织化学法对异位病灶组织中细胞间黏附因子(ICAM-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测病灶中白细胞介素6(IL-6)mRNA、肿瘤因子(TNF)αmRNA,NF-κB mRNA,细胞色素芳香化酶(P450 arom)mRNA,环加氧酶2(COX-2)mRNA的表达.结果 治疗后来曲唑组子宫异位内膜体积较对照组显著降低[(158±23)mm3 vs(28±3)mm3],差异有统计学意义(P<0.05).来曲唑组雌二醇、孕酮水平均显著低于对照组[(30.5±1.6)ng/L vs(38.6±1.9)ng/L,(60±6)μg/L VS(37±3)μg/L],差异有统计学意义(P<0.05);来曲唑组大鼠睾酮、促卵泡生成素和促黄体生成素水平均显著高于对照组[(523±65)ng/L vs(1982±271)ng/L,(5.13±0.18)U/L vs(6.42±0.23)U/L,(4.71±0.28)U/L vs(5.91±0.31)U/L],差异有统计学意义(P<0.05).来曲唑组大鼠异位子宫内膜组织中的ICAM-1、MMP-9和VEGF的表达水平均显著低于对照组[(23.6±2.3)vs(40.8±2.9),(22.7±1.8)vs(39.6±2.8),(28.4±1.8)vs(45.3±1.9)],差异有统计学意义(P<0.05).来曲唑组IL-6 mRNA,TNF-αmRNA和NF-κB mRNA表达水平均显著低于对照组[(0.281±0.021)vs(0.805±0.012),(0.434±0.011)vs(0.981±0.013),(0.403±0.014)vs(0.972±0.015)],差异有统计学意义(P<0.05).来曲唑组大鼠异位病灶中P450arom mRNA和COX-2 mRNA表达量显著低于对照组[(0.257±0.024)VS(0.465±0.022),(0.364±0.024)vs(0.471±0.031)],差异有统计学意义(P<0.05).结论 来曲唑对子宫内膜异位症模型大鼠异位病灶具有明显的抑制作用,其作用机制可能是来曲唑能够降低ICAM-1、MMP-9、VEGF、IL-6 mRNA、TNF-αmRNA和NF-κB mRNA等细胞因子的转录水平以及降低P450arom和COX-2等催化酶水平抑制雌激素合成有关.     

β-肾上腺素能激动剂对急性肺损伤大鼠肺泡液体的清除效应

目的探讨β-肾上腺素能激动剂(多巴酚丁胺)对内毒素诱导急性肺损伤肺泡液体清除的效应。方法内毒素静脉注射复制大鼠急性肺损伤模型。清洁级雄性SD大鼠32只随机分为正常对照组、急性肺损伤组、多巴酚丁胺对照组和多巴酚丁胺治疗组。单核素示踪技术测定1h肺泡液体清除率(AFC)。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织α、β、γ钠通道(rENaC)mRNA表达。结果急性肺损伤组AFC显著低于正常对照组(14·0%±1·2%vs21·0%±3·9%,P<0·05)。多巴酚丁胺对照组AFC显著高于正常对照组,多巴酚丁胺治疗组AFC(20·0%±3·9%)显著高于急性肺损伤组(均P<0·05)。急性肺损伤组和多巴酚丁胺治疗组肺组织α、β-rENaC mRNA表达显著高于正常对照组和多巴酚丁胺对照组(1·40±0·40、0·70±0·8、1·38±0·13、0·71±0·17vs1·01±0·14、0·58±0·12,均P<0·05)。多巴酚丁胺治疗组和多巴酚丁胺对照组γ-rENaC mRNA表达显著高于急性肺损伤组和正常对照组(0·90±0·19、0·97±0·15vs0·69±0·10、0·70±0·32,均P<0·05)。结论β-肾上腺素能激动剂通过上调γ-rENaC的表达,增加急性肺损伤肺泡液体清除。     

Pim-3质粒构建体在大鼠活体肝组织的表达和活性的研究

目的 构建大鼠Pim-3绿色荧光蛋白（GFP）表达质粒并观察其在活体肝组织的表达和活性。方法采用逆转录-PCR的方法获取目的cDNA,重组质粒经酶切鉴定和测序;大鼠活体基因肝靶向性转染通过尾静脉流体力学注射法完成,肝细胞凋亡的诱导采用腹腔内注射内毒素和D-半乳糖胺（D-GaIN）来实现。动物分为A、B、C和D组（即正常、对照、空质粒和重组质粒组,每组8只）;肝组织GFP表达通过荧光显微镜、Pim-3表达通过逆转录（RT）-PCR方法检测;肝细胞凋亡采用缺口末端标记技术（TUNEL）分析和半胱天冬酶-3活性检测。结果成功构建GFP表达质粒pEGFP-N2／Pim-3;重组质粒和空质粒DNA通过流体力学注射法被成功转染人大鼠活体肝组织内;4组Pim-3的相对表达水平分别为0．06±0．02、0、0、0．49±0．15。D组与其他3组差异均有统计学意义（均P〈0．01）;4组肝细胞的凋亡指数（AI）分别为：（3．1±0．7）％,（72．5±6．1）％、（69．8±5．7）％和（4．9±1．2）％;肝组织半胱天冬酶-3活性分别为（60±15）、（147±55）、（142±50）和（76±27）pmol·min ·mg^-1,D组与B、C两组间差异有统计学意义（均P〈0．01）。结论 构建的重组体质粒pEGFP-N2／Pim-3能在大鼠活体肝组织内有效表达,并发挥其对肝细胞凋亡的抑制效应。     

参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤干预作用的实验研究

目的研究参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的干预作用。方法建立新生大鼠HIBD模型,把实验分成两部分(1)观察缺氧缺血后3、7、14和28d各组新生大鼠的体重变化以及各组28d内生存率。(2)流式细胞术测量缺氧缺血前2h,缺氧缺血后2h、12h、24h、3d、7d、14d和28d各时间点新生大鼠海马CA1区神经元的凋亡率,每组实验随机分为4组(每组20只)假手术组,生理盐水对照组,参附预处理组,参附治疗组。结果缺氧缺血后3、7、14和28d,生理盐水对照组大鼠体重的增长均明显小于假手术组(7d8.8g±2.1gvs14.0g±2.9g,均P<0.01),且明显小于参附预处理组(7d11.7g±3.3g,P<0.01或P<0.05),缺氧缺血后7、14、28d生理盐水对照组大鼠体重的增长均明显小于参附治疗组(7d10.9g±2.7g,P<0.01或P<0.05)。各组的体重明显小于假手术组。生理盐水对照组存活率为60%(12/20),参附预处理组存活率为90%(18/20),参附治疗组存活率为85%(17/20),生理盐水对照组存活率明显低于其他各组(P<0.05),其余各组存活率差异无统计学意义(均P>0.05)。缺氧缺血后2h生理盐水对照组、参附治疗组、参附预处理组海马神经元凋亡率开始升高,于缺氧缺血后24h凋亡率达到峰值后开始下降,缺氧缺血后14d降到正常。参附治疗组和参附预处理组海马神经元凋亡情况明显好于生理盐水对照组(24h16.0%±4.2%vs11.9%±2.3%vs18.1%,P<0.05或P<0.01)。结论参附注射液减少了新生大鼠缺氧缺血后神经元凋亡的发生,改善了新生大鼠HIBD后的生长发育,提高了其生存率。     

生长抑素受体2基因转染抑制胰腺肿瘤细胞生长机制的探讨

目的探讨生长抑素受体2(SSTR2)基因转染抑制体内胰腺肿瘤生长的效果及其机制.方法利用lipofectAMINE将人类SSTR2全长 cDNA转染导入胰腺癌细胞株PC-3中,G418筛选出阳性克隆;免疫组织化学SABC法和RT-PCR检测生长抑素受体2的稳定表达.分别将表达生长抑素受体2的PC-3细胞 (实验组) 和空载体对照组及阴性对照组的PC-3细胞异种移植到无胸腺小鼠体内.TUNEL法测定这些细胞形成的胰腺肿瘤细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学SP法测定凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达,以及肿瘤微血管密度(MVD).另外,比较3组裸鼠之间胰腺肿瘤的大小和重量.结果实验组胰腺肿瘤细胞AI(3.39%±0.84%)显著高于空载体对照组(0.69%±0.08%)和阴性对照组(0.68%±0.09%)(P<0.05).与空载体对照组和阴性对照组相比,实验组Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax蛋白的表达则显著升高(P<0.05);实验组MVD(6.3±1.7)显著低于空载体对照组(12.6±1.7)和阴性对照组(13.5±1.9)(P<0.05).另外,实验组胰腺肿瘤的大小和重量也显著低于空载体对照组和阴性对照组(P<0.05).空载体对照组与阴性对照组之间未观测到任何有差异的指标(P>0.05).结论大多数人胰腺癌细胞中缺失SSTR2基因,生长抑素受体2在胰腺癌细胞中的再表达能诱导肿瘤凋亡,抑制肿瘤新生血管形成,最终明显抑制胰腺肿瘤的生长,而凋亡可能通过Bcl-2蛋白的下调及Bax蛋白的上调来调节.     

应用fMRI研究非糜烂性反流病和糜烂性食管炎患者酸灌注时脑激活模式的差异

目的 探索食管内脏高敏感性形成的脑机制.方法 2005年9月至2007年6月随机选择31例非糜烂性反流病(NERD)患者、13例糜烂性食管炎(EE)患者和12名正常对照者参与实验,并将NERD患者分为感知过敏组(NERD-H)21例和感知正常组(NERD-N)10例.利用血氧水平依赖脑功能磁共振成像(BOLD-fMRI)技术对比研究食管酸灌注时NERD-H组、NERD-N组、EE患者及正常对照者大脑功能活动区域定位、MR-BOLD信号激活及消退模式的差异.结果 NERD-H组酸灌注时激活的脑区包括单侧或双侧第二躯体感觉皮质(S Ⅱ)、初级躯体感觉皮质(S Ⅰ)、前额叶皮质(右侧为主)、框额皮质、岛叶皮质、楔前叶、杏仁体、腹侧纹状体、运动区/辅助运动区及小脑半球,且以双侧大脑激活为主.NERD-H组上述感兴趣区(ROI)区的fMRI峰值影像强度和最大磁共振(MR)信号增加幅度明显高于NERD-N组和正常对照组(均P＜0.01),前扣带回激活信号值(562±104)明显低于正常组(587±126,P＜0.05),但显著高于EE组(535±91,P＜0.05).酸灌注刺激后,NERD-H组初始影像潜伏期、峰值影像潜伏期(1.7 min±0.9 min、4.5 min±1.3 min)均明显短于NERD-N组(4.0 min±1.1 min、6.8 min±1.6 min,均P＜0.01)和正常对照组(5.4 min±1.7 min、7.2 min±1.5 min,均P＜0.01).NERD-H组双侧SⅡ、右前额皮质信号消退失活幅度(26.5%±5.4%、20.3%±3.0%)均明显高于NERD-N组(8.2%±2.2%、16.4%±3.6%,均P＜0.05)和EE组(11.9%±4.8%、11.7%±3.1%,均P＜0.01),而正常对照组前扣带回的MR信号消退失活幅度(16.9%±2.5%)明显高于NERD-H组、EE组(11.8%±2.8%、6.4%±1.0%,均P＜0.05).结论 在食管内脏高敏感状态下,中枢神经系统处理整合、处理食管痛敏传入信息功能异常.     

人白细胞介素10基因治疗大鼠重症急性胰腺炎实验研究

目的　观察人白细胞介素 10 (IL 10 )基因治疗大鼠重症急性胰腺炎 (SAP)的疗效。方法　SD大鼠随机分为正常对照组、SAP组、脂质体组、不包含或包含IL 10基因的真核表达质粒pcDNA3与阳离子脂质体复合物组 (n =2 0 )。采用胰腺被膜下均匀注射牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型。SAP诱发 0 5h后腹腔注射给药。采用双抗体夹心ELISA方法检测胰腺、肝脏和肺组织中IL 10浓度 ,并观察血淀粉酶、组织学、组织肿瘤坏死因子 (TNF)及一周死亡率的变化。结果　IL 10基因治疗 2 4h后胰腺、肝脏和肺组织IL 10浓度较SAP组显著升高 (P <0 0 5 ) ;血淀粉酶由 2 0 30 0U/L± 110 0U/L降至 680 0U/L± 70 0U/L(P <0 0 5 ) ;胰腺组织学评分由 4 1± 0 2减轻至 3 2± 0 3(P <0 0 5 ) ;胰腺、肝脏和肺组织TNF浓度显著降低 (P <0 0 5 ) ;一周死亡率由 90 %降至 30 % (P <0 0 5 )。而治疗对照组与SAP组相比无显著性差异。结论　阳离子脂质体介导的pcDNA3 IL 10基因治疗能够显著改善重症急性胰腺炎病情 ,降低死亡率     

促红细胞生成素保护神经元免受氯胺酮所致的损伤

目的 研究促红细胞生成素(EPO)是否可以保护神经元免受氯胺酮所致损伤.方法 原代培养神经元,分别加入不同浓度的氯胺酮、EPO后培养24 h.噻唑蓝(MTT)法检测神经元存活率,TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测凋亡神经元,荧光法测定半胱氨酸蛋白水解酶(caspase)-3活性,蛋白质印迹法检测磷酸化蛋白激酶B(pAkt)的表达.结果 1、10、30 μmol/L氯胺酮处理组神经元的存活率分别为(91±5)%、(42±6)%和(23±7)%,明显低于对照组(P＜0.05或0.01);10 μmol/L氯胺酮分别加0.3、1、3、10 U/mlEPO处理组神经元存活率分别为(73±6)%、(86±9)%、(78±8)%和(71±10)%,明显高于10 μmol/L氯胺酮组(P＜0.05或0.01).10 μmol/L氯胺酮组神经元凋亡增加,caspase-3相对活性为(280±60)%,明显高于对照组[(97±15)%,P＜0.01],而pAkt的表达减少.10 μmol/L氯胺酮+1 U/mlEPO组caspase-3相对活性为(130±30)%,明显低于10 μmol/L氯胺酮组,而pAkt表达增加.磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002拮抗了EPO的作用.结论 EPO可以保护神经元免受氯胺酮导致的损伤,其保护作用是通过促进pAkt表达实现的.     

Clinical, brain electric earth map, endothelin and transcranial ultrasonic Doppler findings after hyperbaric oxygen treatment for severe brain injury

Objective　To analyze the effect and mechanism of hyperbaric oxygen (HBO) treatment for severe brain injury (SBI). Methods　Fifty-five patients were divided into a treatment group of 35 patients and a control group of 20 patients. We observed the alterations of clinical, brain electric earth map (BEAM), endothelin (ET) and transcranial ultrasonic Doppler (TCD) findings before and after HBO treatment as well as outcome. Results　In the treatment group, Glasgow coma scale, BEAM and outcome improved after HBO treatment; compared with that of the control group, it showed a significant difference. After one course of treatment, treatment group ET was reduced from 91.24±12.18?ng/L to 68.88±14.37?ng/L (P&lt;0.01); in control group, ET was reduced from 90.78±15.71?ng/L to 83.12±12.22?ng/L, with a statistically significant difference (P&lt;0.05). TCD records of MCA mean velocity (Vm) was reduced from 64.2±4.8?cm/s to 51.6±4.2?cm/s (P&lt;0.01), and a decrease in MCA systolic velocity (Vs) and pulse index (PI) values was statistically significant (P&lt;0.01). Conclusion　HBO treatment can improve the clinical, BEAM and outcome of severely brain injured patients, by decreasing acute stage ET and improving the blood velocity of MCA and decreasing cerebral vascular resistance. HBO treatment can reduce cerebral vascular spasms, cerebral ischemia and hypoxia. One of the important mechanisms of HBO treatment for severe brain injury is the lowering of intracranial pressure.     

利多卡因对慢性应激小鼠学习记忆功能障碍及神经病理变化的影响

目的观察利多卡因对慢性应激致小鼠学习记忆功能障碍和海马神经病理变化的影响。方法32只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水对照组、利多卡因对照组、慢性应激组和利多卡因治疗组,每组8只。利多卡因对照组和利多卡因治疗组每日腹腔内注射利多卡因,其他组给予生理盐水。慢性应激组和利多卡因治疗组每日进行复合应激刺激,连续21d,其他组不接受应激刺激。然后对小鼠进行Morris水迷宫测试;测试结束后进行灌注固定,取小鼠脑组织行尼氏染色,观察海马CA3区神经元的病理变化。结果（1）水迷宫测试：各组动物的潜伏期均随测试天数增多而缩短。测试第5天时的潜伏期慢性应激组明显长于两个对照组（均为P〈0．01）;利多卡因治疗组明显短于慢性应激组（P〈0．05）,而与两个对照组相比差异均无统计学意义。除慢性应激组外,各组动物的有效搜索策略百分比均随测试天数增加而升高,测试第5天时明显高于第1天（两个对照组均为P〈0．05,利多卡因治疗组为P〈0．01）。（2）海马CA3区神经病理检查：锥体细胞计数和尼氏体平均吸光度值慢性应激组均明显少于或低于两个对照组（均为P〈0．01）;利多卡因治疗组明显多于或高于慢性应激组（均为P〈0．01）,而与两个对照组相比差异均无统计学意义。结论慢性应激导致小鼠学习记忆功能障碍和海马CA3区神经元损害。利多卡因明显减轻了慢性应激引起的小鼠学习记忆功能障碍和海马CA3区神经元损害。     

Kiss-1与结肠癌SW480细胞增殖的关系

目的以结肠癌细胞SW480为模型,初步探讨Kiss-1基因过表达与结肠癌细胞增殖的关系。方法采用脂质体转染的方法将Kiss-1/pEGFP-N1重组质粒转染至SW480细胞,上调结肠癌细胞中Kiss-1的表达水平,经G418筛选出稳定表达株;根据细胞分为3组：阴性对照组（转染pEGFP-N1空载体）、实验组（转染pEGFPN1-Kiss1）及空白对照组（未转染）。Western blot检测转染后细胞中Kiss-1表达量的变化;采用CCK8试验分析Kiss-1对SW480细胞增殖的抑制效果。结果成功将pEGFP-N1-Kiss-1重组质粒转染至SW480结肠癌细胞,western blot检测出阴性对照组和空白对照组中显示Kiss-1低表达,实验组Kiss-1表达量增加,CCK8试验表明实验组细胞增殖率明显低于对照组（P〈0.05）。结论 Kiss-1可抑制结肠癌细胞的增殖率。