2型糖尿病大鼠胫骨牵引过程中骨再生与修复

目的:观察2型糖尿病对大鼠胫骨牵引成骨过程中骨形成的影响。方法:实验于2006-08/11在中南大学湘雅三医院中心实验室完成。①实验分组:雄性ZDF大鼠为实验组、Zucker正常大鼠为对照组,每组各10只,均饲以高脂饮食(脂肪65g/L)。②实验方法:检测大鼠体质量、血糖、尿糖和尿酮,以观察糖尿病变化情况。制备牵引成骨模型,1周后,所有大鼠接受左胫骨中上段低能横行截骨,安置延长外固定架。第2天起开始每天延长胫骨,牵引速率为0.2mm/次,2次/d,持续14d。③实验评估:利用放射学和组织学等方法,分别测定血液生化指标、骨折两端髓腔内脂肪细胞、胫骨牵引骨痂中新生骨量。结果:纳入雄性ZDF大鼠和Zucker正常大鼠各10只,均进入结果分析。①各组大鼠血液生化指标的变化:实验组大鼠血糖及尿糖显著高于对照组,对照组大鼠血糖保持在正常生理范围,两组大鼠尿酮检测均为阴性。与对照组比较,实验组大鼠血清胰岛素显著偏高(P<0.05),而血清骨钙素显著降低(P<0.01)。②骨髓脂肪细胞定量分析结果:实验组大鼠左胫骨骨折两端髓腔内脂肪细胞百分比均明显高于对照组大鼠。③骨内膜新生骨与骨膜新生骨的面积:实验组大鼠左胫骨延长间隙内新生骨的面积及密度均明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。组织学检查亦显示其延长间隙中骨内膜成骨和骨膜成骨显著降低(P<0.01)。结论:2型糖尿病可引起骨再生与修复障碍,这可能与其骨折两端骨髓腔内脂肪细胞形成增多导致成骨细胞的增殖、分化障碍有关。     

重组碱性成纤维细胞生长因子/I型胶原复合材料修复兔半月板无血运区软骨损伤

背景:单独应用重组碱性成纤维细胞生长因子对无血运区半月板损伤的愈合无明显影响,考虑主要与其在体内易被吸收和降解等有关.近年来Ⅰ型胶原作为生物性载体的应用逐渐增多.目的:观察重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合材料修复兔半月板软骨损伤的效果.方法:选用健康新西兰大白兔36只,首先在兔半月板上造成统一的无血运区损伤模型.随机分为空白对照组、重组碱性成纤维细胞生长因子组和重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组.术后2,6,12周分批处死实验动物,进行大体形态观察和组织学检查.结果与结论:重组碱性成纤维细胞生长因子组对无血运区损伤愈合无明显影响,但对半月板边缘滑膜中成纤维细胞有明显的促增殖作用;重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组表现为纤维软骨样组织愈合,但其愈合组织与正常半月板组织仍有差异.结果表明应用重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合型材料治疗半月板无血运区的损伤是一种有效的治疗方法.     

2型糖尿病大鼠骨髓腔内过氧化物酶体增殖物激活受体γ和核心结合因子α1mRNA表达与骨折的愈合

背景:骨髓间充质干细胞成骨分化与成脂分化方向对骨再生和修复的影响足目前的研究热点,过氧化物酶体增殖物激活受体γ特别是过氧化物酶体增殖物激活受体γ 2和核心结合因了α 1对骨髓间充质干细胞分化方向有调控作用.目的:分析2型糖尿病大鼠骨髓腔内过氧化物酶体增殖物激活受体γ和核心结合因子α 1的表达变化与骨折愈合障碍的关系.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-08/12在中南大学第二附属医院中心实验室完成.材料:选用雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为2组,对照组10只,实验组20只,分别给予普通饲料、高糖高脂饲料喂养.方法:大鼠喂养8周后断尾法取血,实验组腹腔注射链脲佐菌素30 mg/kg,对照组沣射等量枸橼酸盐缓冲液.注射2周后断尾法取血,建立大鼠左胫骨牵引成骨模型.行左胫骨中上段骨干横行截骨,安置特制延长外固定架,牵引14 d.主要观察指标:行X射线摄片比较2组大鼠牵引间隙内骨痂的形成;在组织学水平观察牵引骨痂内微骨柱及初始基质前沿形成及骨折两端髓腔内脂肪细胞形成,并计算骨折两端髓腔内脂肪细胞与骨髓腔面积百分比;以反转录-聚合酶链反应法检测双侧股骨骨髓腔内过氧化物晦体增殖物激活受体γ和核心结合因子α 1 mRNA的表达.结果:实验组大鼠高糖高脂饲料喂养8周后,总胆固醇、三酰甘油及窄腹胰岛素浓度均高于对照组(P<0.05～0.01);实验组大鼠腹腔注射链脲佐菌素2周后:空腹血糖、总胆周醇及三酰甘油浓度高于对照组(P<0.05-0.01),说咧2型糖尿病建立成功.X射线摄片显示,实验组大鼠骨折断端之间牵引骨痂形成明显减少,骨痂组织学检查表现为微骨柱基质排列紊乱,初始基质前沿浅染.组织学检查显示,实验组大鼠骨折两端髓腔内脂肪细胞及脂肪细胞占骨髓腔面积百分比高于对照组(P<0.01).反转录一聚合酶链反应法检测显示,实验组大鼠双侧股骨骨髓腔内过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA表达上调(P<0.05),核心结合因子α 1 mRNA表达下调(P<0.05).结论:2型糖尿病大鼠骨折愈合障碍可能与2型糖尿病条件下骨髓腔内过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA表达增加及核心结合因子α 1mRNA的表达受抑制有关.     

重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合材料修复兔半月板无血运区软骨损伤

背景：单独应用重组碱性成纤维细胞生长因子对无血运区半月板损伤的愈合无明显影响,考虑主要与其在体内易被吸收和降解等有关。近年来Ⅰ型胶原作为生物性载体的应用逐渐增多。目的：观察重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合材料修复兔半月板软骨损伤的效果。方法：选用健康新西兰大白兔36只,首先在兔半月板上造成统一的无血运区损伤模型。随机分为空白对照组、重组碱性成纤维细胞生长因子组和重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组。术后2,6,12周分批处死实验动物,进行大体形态观察和组织学检查。结果与结论：重组碱性成纤维细胞生长因子组对无血运区损伤愈合无明显影响,但对半月板边缘滑膜中成纤维细胞有明显的促增殖作用;重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组表现为纤维软骨样组织愈合,但其愈合组织与正常半月板组织仍有差异。结果表明应用重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合型材料治疗半月板无血运区的损伤是一种有效的治疗方法。     

2型糖尿病大鼠骨折愈合障碍与体内晚期糖基化终末产物的变化

背景：近年来,晚期糖基化终末产物在骨组织领域的作用日益受到重视,而糖代谢紊乱是引起晚期糖基化终末产物增加的主要原因之一。 目的：观察2型糖尿病大鼠体内晚期糖基化终末产物表达的变化,并探讨其与糖尿病骨折愈合障碍的关系。方法：30只SD大鼠随机均分为2组,实验组制备2型糖尿病模型,对照组正常饲养。糖尿病模型制备成功后,所有大鼠建立左胫骨骨折牵引成骨模型,胫骨延长0.3 mm/d,持续14 d。 结果与结论：牵引结束后,X 射线摄片显示实验组糖尿病模型大鼠骨折断端之间牵引骨痂形成较对照组明显减少;骨痂组织学检查表现为微骨柱排列紊乱,初始基质前沿浅染。ELISA 法检测实验组血清和双侧骨痂组织中晚期糖基化终末产物水平较对照组明显升高（P 〈0.01）,骨钙素明显降低（P 〈0.01）。提示2型糖尿病大鼠骨折牵引骨痂生成障碍,而骨组织中晚期糖基化终末产物水平增高可能是导致2型糖尿病骨折愈合障碍的原因。     

重组慢病毒载体转染羊骨髓间充质干细胞及成骨基因表达量的变化简

背景：碱性成纤维细胞生长因子具有促进骨髓基质细胞分裂增殖作用,而骨形态发生蛋白2在诱导新骨形成方面有重要的研究意义。目的：分析骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子基因单独和联合转染对体外培养的骨髓间充质干细胞的增殖和骨向分化的影响,比较Ⅰ型胶原蛋白、骨钙蛋白、骨桥蛋白等非特异性成骨基因于转染前后骨髓间充质干细胞相对表达量的差别,为构建组织工程骨的种子细胞做理论依据。 方法：构建碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2慢病毒载体,分别转染羊骨髓间充质干细胞,得到碱性成纤维细胞生长因子组、骨形态发生蛋白2组、联合组、对照组细胞,提取RNA后采用实时定量PCR的方法检测Ⅰ型胶原蛋白、骨钙蛋白、骨桥蛋白等非特异性成骨基因的mRNA水平相对表达量的变化。 结果与结论：对照组、碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2及联合组4组间非特异性成骨基因表达量存在明显差异（P ＜0.05）,且碱性成纤维细胞生长因子和骨形态发生蛋白2具有交互作用（P ＜0.05）,碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2联合组的Ⅰ型胶原蛋白和骨钙蛋白基因表达量明显高于其他3组,且差异有显著性意义（P ＜0.05）;但是骨桥蛋白基因中差异无显著性意义（P ＞0.05）。体外实验结果显示联合转染组中的Ⅰ型胶原蛋白、骨钙蛋白、骨桥蛋白等非特异性成骨基因mRNA水平相对表达量较多,该组细胞的成骨功能最强,适合作为组织工程骨的种子细胞。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对转化生长因子β1诱导体外血管外膜成纤维细胞表型的改变

背景:近年来的研究表明,血管外膜成纤维细胞在血管损伤后新生内膜的增生中起重要作用,但对于引起血管外膜成纤维细胞表型转化的机制尚不十分清楚.目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferators-activated receptor,PPAR)γ激动剂对转化生长因子β1诱导体外血管外膜成纤维细胞表型改变,同时检测对Ⅰ胶原蛋白表达的作用.设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,于2007-07/2008-10在上海交通大学医学院附属第九人民医院组织工程实验室完成.材料;鼠龄2个月的健康雄性SD大鼠,体质量约120 g,用于体外培养大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞;转化生长因子β1由美国GenWay Biotech公司提供;罗格列酮粉剂为北京高盟化工有限公司产品.方法:实验分为3组:转化生长因子β1诱导组:以不同质量浓度的转化生长因子β1(3,5,10,15 μg/L)诱导成纤维细胞48 h;罗格列酮干预组:用不同浓度的PPAR-γ激动剂罗格列酮(5,10,30,50 μmol/L)干预成纤维细胞45 min后,加入转化生长因子β1 10 μg/L共同培养48 h:对照组:不添加任何干预措施.主要观察指标:①免疫组织化学α-平滑肌肌动蛋白检测不同浓度转化生长因子β1、罗格列酮干预后成纤维细胞的表型改变.②蛋白免疫印迹检测成纤维细胞中平滑肌α2肌动蛋白及Ⅰ型胶原蛋白的表达.结果:不同质量浓度转化生长因子β1诱导成纤维细胞48 h后,与对照组相比,5μg/L转化生长因子β1可明显刺激成纤维细胞表型改变及细胞中平滑肌α2肌动蛋白和Ⅰ型胶原蛋白的表达,10μg/L转化生长因子β1刺激细胞表型改变及平滑肌α 2肌动蛋白和Ⅰ型胶原蛋白的表达最明显(P<0.05),随后转化生长因子β1再增加至15μg/L,与10μg/L转化生长因子β1浓度组相比,其刺激细胞表型改变及平滑肌α2肌动蛋白和Ⅰ型胶原蛋白的表达不再增加(P>0.05).不同浓度罗格列酮干预10 μg/L转化生长因子β1诱导的成纤维细胞48 h后,与对照组相比,30 μmol/L可明显抑制成纤维细胞表型改变及细胞中平滑肌α2肌动蛋白和Ⅰ型胶原蛋白的表达(P<0.05).结论:PPAR-γ激动剂罗格列酮能抑制转化生长因子β1诱导体外血管外膜成纤维细胞表型改变及平滑肌α2肌动蛋白和Ⅰ型胶原蛋白的表达.     

重组人骨形态发生蛋白2与碱性成纤维细胞生长因子联合促进兔骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子表达及其成骨潜能

背景:了解在体外或体内环境下,应用重组人骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子,能否达到既加强成骨又促进血管内皮细胞生长因子表达的双重作用。目的:观察兔骨髓基质细胞经重组人骨形态发生蛋白2与碱性成纤维细胞生长因子刺激后,其血管内皮细胞生长因子表达及成骨潜能的变化。方法:取兔双侧股骨骨髓基质细胞,采用骨髓基质细胞体外培养技术,单独或联合以重组人骨形态发生蛋白2、碱性成纤维细胞生长因子刺激细胞。细胞培养5d后,进行细胞形态、增殖情况、碱性磷酸酶活性、成骨结节、血管内皮细胞生长因子阳性细胞率等项目的检测。结果与结论:联合先后应用重组人骨形态发生蛋白2、碱性成纤维细胞生长因子在细胞计数、碱性磷酸酶活性、矿化面积百分率、血管内皮细胞生长因子阳性细胞率4个检测项目上优于同时应用重组人骨形态发生蛋白2或碱性成纤维细胞生长因子以及单独应用重组人骨形态发生蛋白2或碱性成纤维细胞生长因子。结果表明合理的联合使用重组人骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子,不仅可促进骨髓基质细胞的快速增殖及向成骨细胞转化,还可促进促血管内皮细胞增生的重要介质血管内皮细胞生长因子的表达。     

不同鼠龄大鼠成纤维细胞生长因子及相关基因在牵引成骨局部的表达

背景：成纤维细胞生长因子及相关基因表达在骨再生和修复过程中起着重要的作用。目的：通过对不同鼠龄大鼠在同样条件下牵引成骨的比较,进一步验证成纤维细胞生长因子及相关基因在成骨局部的表达水平与年龄的关系,及其在大鼠胫骨牵引成骨过程中对新骨形成的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007—01／03在中南大学附属三医院中心实验室完成。材料：健康雄性SD大鼠20只,3月龄和12月龄各10只,分为青年组和老年组。方法：所有大鼠接受左胫骨中上段低能截骨,安置体外延长固定架。第2天起开始每天进行胫骨延长,速率为0．2mm,2次,d,共14d。第15天,处死大鼠,采集胫骨标本。主要观察指标：以X射线片定量分析新骨密度和新骨面积;以组织学定量分析骨内膜成骨和骨膜成骨;以反转录一聚合酶链反应分析成纤维细胞生长因子及相关基因的表达。结果：青年组大鼠牵引区的新生成骨面积和新生骨密度,以及骨内膜成骨和骨膜成骨百分比均显著高与老年组大鼠（P〈0．05或0.01）;成纤维细胞生长因子及相关基因在老年组大鼠的表达水平明显低于青年组。结论：老年大鼠骨形成障碍可能与局部生长因子表达降低,从而导致成骨细胞功能低下密切相关。     

重组人骨形态发生蛋白2与碱性成纤维细胞生长因子联合促进兔骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子表达及其成骨潜能

背景：了解在体外或体内环境下,应用重组人骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子,能否达到既加强成骨又促进血管内皮细胞生长因子表达的双重作用。目的：观察兔骨髓基质细胞经重组人骨形态发生蛋白2与碱性成纤维细胞生长因子刺激后,其血管内皮细胞生长因子表达及成骨潜能的变化。方法：取兔双侧股骨骨髓基质细胞,采用骨髓基质细胞体外培养技术,单独或联合以重组人骨形态发生蛋白2、碱性成纤维细胞生长因子刺激细胞。细胞培养5d后,进行细胞形态、增殖情况、碱性磷酸酶活性、成骨结节、血管内皮细胞生长因子阳性细胞率等项目的检测。结果与结论：联合先后应用重组人骨形态发生蛋白2、碱性成纤维细胞生长因子在细胞计数、碱性磷酸酶活性、矿化面积百分率、血管内皮细胞生长因子阳性细胞率4个检测项目上优于同时应用重组人骨形态发生蛋白2或碱性成纤维细胞生长因子以及单独应用重组人骨形态发生蛋白2或碱性成纤维细胞生长因子。结果表明合理的联合使用重组人骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子,不仅可促进骨髓基质细胞的快速增殖及向成骨细胞转化,还可促进促血管内皮细胞增生的重要介质血管内皮细胞生长因子的表达。     

Secoisolariciresinol diglucoside from flaxseed delays the development of type 2 diabetes in Zucker rat.

Previous research has suggested that type 1 diabetes mellitus may be due to oxidative stress. The role of oxidative stress in type 2 diabetes is not known. Secoisolariciresinol diglucoside (SDG) antioxidant, obtained from flaxseed, has been reported to prevent type 1 diabetes in a rat model. However, its effectiveness in type 2 diabetes is not known. An investigation was made of the effects of SDG isolated from flaxseed (40 mg/kg body wt, orally in drinking water) on the development of diabetes in Zucker diabetic fatty (ZDF)/Gmi-fa/fa female rats, a model of human type 2 diabetes, to determine whether this type of diabetes is due to oxidative stress and whether SDG could prevent the development of diabetes. A total of 10 Zucker lean control and 26 ZDF rats were used in this study. Incidence of diabetes was 100% in untreated and 20% in SDG-treated ZDF rats by the age of 72 days (P <.01). The rats that did not develop diabetes by 72 days of age in the SDG-treated group developed diabetes later on (age 72 to 99 days) except for 10% of the rats that did not develop diabetes for the duration of the study (101 days of age), suggesting that SDG retarded the development of diabetes. Diabetes was associated with an increase in oxidative stress as suggested by an increase in serum malondialdehyde (P <.01). Also, diabetes was associated with an increase in serum total cholesterol and triglycerides (P <.05) and glycated hemoglobin A(1C) (P <.05). ZDF rats treated with SDG that did not develop diabetes by 70 days of age had no increase in oxidative stress, serum total cholesterol, and glycated hemoglobin. These results suggest that type 2 diabetes is associated with an increase in oxidative stress and that SDG is effective in retarding the development of diabetes.     

阿卡波糖与预混人胰岛素联合治疗2型糖尿病42例

目的：观察在预混人胰岛素基础上联合阿卡波糖治疗是否能强化血糖控制并减少胰岛素用量。方法：将84例2型糖尿病人随机分为两组，甲组单用预混人胰岛素治疗，乙组联合预混人胰岛素与阿卡波糖治疗，共观察3个月，分别检测两组治疗前后空腹及餐后2h血糖、糖化血红蛋白，计算观察终点时各患者胰岛素用量及3个月中两组各发生低血糖的总人次，并进行统计学比较。结果：两组治疗后血糖水平、糖化血红蛋白均较治疗前有明显下降；乙组餐后2h血糖及糖化血红蛋白下降较甲组更加明显，且胰岛素用量少于甲组，低血糖发生次数亦减少。结论：在预混人胰岛素基础上联合阿卡波糖能使血糖得到更好的控制并能减少胰岛素用量。     

鸡冠花黄酮对糖尿病大鼠骨形成蛋白表达及肾小管重吸收功能的干预作用

背景鸡冠花黄酮类化合物是一种植物性雌激素,具有多种生理功能,且无毒副作用,对骨质疏松的治疗和预防都具有良好干预效果.目的探讨鸡冠花黄酮化合物对糖尿病大鼠骨形成蛋白、尿无机盐以及溶菌酶含量的影响.设计随机区组分组设计,设立对照实验.单位新乡医学院药物研究室.材料实验于2003-09/12在新乡医学院完成.选用健康雌性SD大鼠24只.按区组随机法分组法将大鼠分为3组正常对照组,糖尿病模型组,糖尿病+鸡冠花黄酮组,每组8只.方法①糖尿病+鸡冠花黄酮组和糖尿病模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg,48～72 h后尾静脉采血,测定全血血糖,血糖≥16.7 mmol/L确定为糖尿病大鼠,血糖未达16.7 mmol/L者立即腹腔补注链脲佐菌素60 mg/kg.造模后糖尿病+鸡冠花黄酮组给予鸡冠花黄酮100 mg/(kg·d)灌胃,正常对照组仅注射等量生理盐水.②各组干预10周后,采用原子吸光光度法测定大鼠尿钙含量,火焰分光光度法测尿钠、钾含量.③采用过氧化物酶标记的链霉卵白素法按照说明书进行骨形成蛋白2免疫组织化学测定,用HPIAS-2000图像分析仪对各组骨形成蛋白2免疫组织化学表达进行定量分析.④采用微量溶菌酶比色法测定反映肾小管的重吸收功能的溶菌酶含量.⑤组间差异比较用t检验.主要观察指标各组干预10周后,大鼠尿钙、钠、钾及溶菌酶含量及骨形成蛋白2免疫组织化学表达比较.结果SD大鼠24只均进入结果分析.①糖尿病模型组大鼠的尿钙、钠含量明显高于正常对照组,尿钾显著低于正常对照组(P＜0.05～0.01).糖尿病+鸡冠花黄酮组大鼠尿钙含量明显低于糖尿病模型组(P＞0.05).②糖尿病+鸡冠花黄酮组和正常对照组大鼠骨组织骨形成蛋白2表达明显高于糖尿病模型组,尿溶菌酶含量明显低于糖尿病模型组(P＜0.05～0.01).结论糖尿病大鼠骨组织骨形成蛋白2表达明显下降,补充鸡冠花黄酮类化合物后动物骨骨形成蛋白2表达升高,糖尿病大鼠的尿钙和尿钠的排出显著降低,肾小管的重吸收功能提高.     

人骨形态发生蛋白2基因修饰自体骨髓间充质干细胞移植促进兔下颌骨牵张成骨实验的组织形态学观察

背景:如何提高牵张成骨过程中新骨形成的速度和质量,缩短牵张成骨治疗时间,减少并发症的发生是目前该领域的研究热点。目的:观察人骨形态发生蛋白2基因修饰自体骨髓间充质干细胞移植对兔下颌骨牵张成骨新骨形成的促进作用。方法:36只新西兰白兔随机摸球法分为3组。建立牵张成骨动物模型,在固定期第2天,实验组于牵张间隙注射人骨形态发生蛋白2基因修饰的自体骨髓间充质干细胞;对照组注射等量自体骨髓间充质干细胞;空白组注射等量生理盐水。结果与结论:在固定期2周及6周实验组牵张区骨小梁形成质量明显好于对照组和空白组。证实骨形态发生蛋白2基因修饰的自体骨髓间充质干细胞移植能有效促进兔下颌骨牵张成骨新骨形成。     

再生障碍性贫血患者T淋巴细胞早期激活及可溶性肿瘤坏死因子受体的研究

目的研究再生障碍性贫血 (再障 )患者外周血CD4 、CD8 T淋巴细胞早期激活标志CD6 9的表达及血清、骨髓中可溶性肿瘤坏死因子受体 1和 2 (sTNF R1和sTNF R2 )的水平及其意义。方法将外周血在 2 0 μg ml植物血凝素 (PHA)条件下进行全血细胞培养 ,于 0h和 4h分别用双色免疫荧光标记流式细胞术对CD4 、CD8 T淋巴细胞CD6 9的表达进行分析。用ELISA法检测血清和骨髓中sTNF R1和sTNF R2的水平。结果PHA刺激前重型再障 (SAA)患者CD4 、CD8 细胞CD6 9的表达率增高 [分别为 (8.96± 7.2 3) %和 (10 .6 7± 7.5 8) % ],慢性再障 (CAA)患者CD8 细胞CD6 9的表达率增高[(7.36± 5 .4 9) % ];PHA刺激后再障患者CD4 、CD8 细胞表达CD6 9明显增强 [SAA为 (71.73±11 91) %和 (6 1.74± 13.4 4 ) % ;CAA为 (5 9.35± 10 .15 ) %和 (4 8.78± 8.2 5 ) % ],CD4 细胞CD6 9的表达率高于CD8 细胞。SAA患者两种sTNF R水平均明显升高 [sTNF R1血清为 (12 5 8.5 8± 385 .6 9)ng L ,骨髓为 (16 5 0 .6 0± 6 6 5 .0 1)ng L ;sTNF R2血清为 (12 5 7.10± 2 95 .4 9)ng L ,骨髓为 (2 0 73.5 7± 5 6 1.17)ng L]。CAA患者骨髓两种sTNF R水平升高 [sTNF R1为 (10 94 .2 1± 2 91.93)ng L ,sTNF R2为 (15 0 2 .4 8±385 .5     

Renal injury, abnormal vitamin D metabolism and bone homeostasis in aged rats with insulin resistance or type 2 diabetes mellitus

OBJECTIVE: The study aimed to explore the relationship among renal injury, abnormal vitamin D metabolism, and bone homeostasis in insulin resistance (IR) or type 2 diabetes mellitus (T2DM). DESIGN AND METHODS: The animal models of IR, T2DM, and T2DM treated with 1-alpha hydroxyvitamin D (1-alphaOHD) were established on 18-month-old male Wistar rats. Glucose infusion rates (GIR) and levels of urinary albumin (UA), serum 25-hydroxyvitamin D (25-(OH)D), serum 1,25-dihydroxyvitamin D (1,25-OH2D), and bone mineral density (BMD) in lumbar vertebrae and femoral bone were measured. RESULTS: Urinary albumin level in the rats with T2DM significantly increased, and there existed a significant and negative correlation between GIR and UA level in the rats with T2DM or IR. The levels of serum 25-OHD in all models were similar. The levels of serum 1,25-OH2D and BMD in the rats with IR were significantly higher than those in the rats with T2DM and were lower than those in normal control rats. In the aged rats with T2DM, administration of 1-alphaOHD had no effect on serum 25-OHD level although significantly increased the levels of serum 1,25-O2D and BMD. There existed a negative correlation between the levels of serum 1,25-(OH)2D and UA in the rats with T2DM or IR. CONCLUSIONS: In IR or T2DM, abnormal vitamin D metabolism is characterized by 1,25-OH2D deficiency and is related to renal injury, and there also existed bone loss. In T2DM, both 1,25-(OH)2D deficiency and bone loss can be reversed by 1-alphaOHD.     

骨钙素在2型糖尿病合并骨代谢异常患者中的表达水平

目的探讨骨钙素(OC)在2型糖尿病合并骨代谢异常患者中的表达情况。方法选取2017年5月至2018年11月辽宁省沈阳市第四人民医院收治的120例2型糖尿病患者为研究对象,根据骨密度结果分为2型糖尿病合并骨量正常组、2型糖尿病合并骨量异常组(骨量减少及骨质疏松者),每组60例,选取同期健康体检者60例纳入健康对照组。全部受试者均于清晨空腹采集静脉血检测OC、血钙(Ca)、血磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)、糖化血红蛋白(HbA1c)等水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)。结果3组研究对象血Ca、血P及ALP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与健康对照组比较,2型糖尿病合并骨量异常组及2型糖尿病合并骨量正常组OC水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。同时2型糖尿病合并骨量异常组OC水平明显低于2型糖尿病合并骨量正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。OC水平与HbA1c及HOMA-IR呈负相关(r=-0.67,P=0.004;r=-0.56,P=0.035),与HOMA-β呈正相关(r=0.46,P=0.024)。结论血糖代谢与骨代谢密切相关,2型糖尿病患者易合并骨代谢异常,骨形成下降是骨代谢特点之一,OC可作为2型糖尿病患者骨代谢异常发生、发展的参考因子。     

电穿孔介导基因治疗下颌骨牵引过程中血管内皮细胞生长因子的表达

背景:课题组前期实验已证明基因治疗能促进下颌骨牵引区新骨的生成。目的:探索电穿孔介导的基因治疗对兔下颌骨牵引成骨过程中血管内皮细胞生长因子表达的影响。方法:45只新西兰大白兔双侧下颌骨截骨,建立下颌骨牵引模型。牵引7d后将模型兔随机摸球法均分为pIRES-hVEGF165-hBMP2组、pIRES-hBMP2组、pIRES-hVEGF165组、空质粒载体pIRES组、生理盐水对照组,分别于牵引区注射相应质粒或生理盐水。各组动物均施加电穿孔刺激。结果与结论:血管内皮细胞生长因子主要在骨周围结缔组织成纤维细胞、血管内皮细胞、骨组织成骨细胞和骨细胞表达,也可见炎细胞如单核细胞表达。各组均在固定期第7天表达最强,14d下降,28d时表达较弱,但在各时点基因治疗组明显强于对照组。说明电穿孔介导的基因治疗能使血管内皮细胞生长因子持续表达,并使其表达时限延长,促进牵引区新生血管生成和新骨形成。     

脂联素对兔下颌快速牵张成骨的影响

背景:脂联素可参与骨代谢及成血管过程,但目前关于脂联素对牵张成骨有无促进作用尚不清楚。目的:通过建立兔下颌快速牵张动物模型,探讨局部应用脂联素对骨牵张新骨再生的影响。方法:16只新西兰大白兔随机摸球法均分为对照组及实验组,建立兔下颌单侧快速牵张模型,牵张速率为2mm/d。在牵张开始的1,3,5d,对照组及实验组分别于牵张间隙注入200μL磷酸盐缓冲液或含有2μg重组人脂联素的磷酸盐缓冲液。结果与结论:两组动物牵张间隙内均可观察到新骨生成,组织学及显微CT检查显示实验组的新骨生成与钙化明显高于对照组。实验结果显示局部应用脂联素可有效促进兔下颌快速骨牵张的新骨再生。