EBV—BHRF1基因阳性与阴性细胞株与3种诱导调亡因素抵抗性差异的研究

目的 观察ＥＢＶ－ＢＨＲＦ１基因阵性与阴性细胞株对３种诱导细胞凋亡因素的抵抗力差异。方法 ＰＣＲ扩增ＥＢＶ－ＢＨＲＦ１基因片段诱导后经电镜及电泳ＤＮＡ检测细胞凋亡。结果 分别从Ｂ９５－８、Ｒａｊｉ及人低分化鼻咽癌细胞株（ＳＵＮＥ－１）ＤＮＡ中扩增出ＥＢ病毒的ＢＨＲＦ１全基因片段，而Ｋ５６２、ＹＡＣ细胞株则不含该基因片段。分别经上述３种方法处理后，前３种细胞株的形态及ＤＮＡ电泳行为未发生明显改变，而     

BHRF1表达对鼻咽癌细胞抗凋亡能力的影响

目的了解ＥＢ病毒（ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｖｉｒｕｓ）基因ＢＨＲＦ１（ＢａｍＨＩＨｒｉｇｈｔｗａｒｄｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅＩ）表达对鼻咽癌细胞抗凋亡能力的影响。方法构建表达ＢＨＲＦ１重组载体并转入鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞中，以检测癌细胞在６０Ｃｏ照射后生物学行为的改变。结果ＢＨＲＦ１表达可抑制增殖细胞核抗原的表达，促使癌细胞的细胞周期重新分布，癌细胞对辐射的敏感性下降，生存能力增强。结论ＢＨＲＦ１的表达可增强ＣＮＥ２细胞抵抗放射线诱发细胞凋亡的能力。     

BHRF1表达对~(60)Co照射后CNE2细胞周期分布的影响

目的：了解ＢＨＲＦ１基因表达对６０Ｃｏ照射后ＣＮＥ２细胞周期分布的影响。方法：构建ＢＨＲＦ１高表达载体并转入ＣＮＥ２细胞中，通过检测癌细胞增殖细胞核抗原（Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）表达和在６０Ｃｏ照射后不同时期细胞周期分布的改变。结果：ＢＨＲＦ１可抑制细胞ＰＣＮＡ的表达及降低Ｓ期的百分率；经６０Ｃｏ照射后，ＢＨＲＦ１ＣＮＥ２细胞的凋亡率较低（Ｐ＜００１），Ｓ期细胞数下降不明显（Ｐ＞００５）；在辐射后的２４小时到７２小时，其Ｓ期和Ｇ２期细胞百分率先后升高。结论：ＢＨＲＦ１基因的表达可抑制细胞的增殖并增强其抵抗辐射诱发的细胞凋亡的发生。     

8-Br-CAMP诱导入食管癌细胞凋亡的研究

目的：本文主要研究人食管癌１０９细胞株经８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ诱导后细胞凋亡的发生。方法：用ＴＵＮＥＬ法观察诱导后细胞凋亡情况。结果：人食管癌１０９例细胞株自发凋亡率为１０．３％，经８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ诱导后倾向细胞增加。结论：８－Ｂｒ－ｃＤＮＡ具有促进人食管癌细胞凋亡倾向的效应。     

BHRF1表达对鼻咽癌细胞凋亡能力的影响

目的 了解ＥＢ病毒（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒｖｉｒｕｓ）基因ＢＨＲＦ１（ＢａｍＨＩ－ＨｒｉｇｈｔｗａｒｄｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅＩ）表达对鼻咽癌细胞抗凋亡能力的影响。方法 构建表达ＢＨＲＦ１重组载体并转入鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞中,以检测癌细胞在＾６０Ｃｏ照射后生物学行为的改变。结果 ＢＨＲＦ１表达可抑制增殖细胞核抗原的表达,促使癌细胞的细胞周期重新分布,癌细胞对辐射的敏感性下降,生存能力增强,结     

放射诱导HL-60细胞凋亡的流式细胞计量术分析

目的　定性和定量地分析放射诱导ＨＬ６０ 细胞凋亡。　方法　以人类白血病细胞系ＨＬ６０ 为材料，应用光学显微镜和电子显微镜及琼脂糖电泳定性分析６０ Ｃｏ 放射线诱导ＨＬ６０ 细胞凋亡的发生，应用ＤＮＡ流式细胞计量术和末端转移酶（ＴｄＴ） 介导的缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ） 的流式细胞定量检测ＨＬ６０ 细胞凋亡。　结果　（１） 放射后ＨＬ６０ 出现细胞体积缩小，染色质固缩致密化、边缘化，染色体断裂，凋亡小体和细胞膜保持完整等形态学特征。（２） 琼脂糖电泳表现为特征性ＤＮＡ“梯谱”。（３）流式细胞计量术发现放射诱导ＨＬ６０ 细胞凋亡在照射后６ｈ 已较明显，而且细胞凋亡百分比随着照射剂量增加而增加。ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡百分比值比ＤＮＡ流式细胞分析的方法得到的值要小，但差异无显著意义。　结论　流式细胞计量术结合细胞形态学检查和（ 或） 琼脂糖电泳能较好、简便、迅速地分析放射诱导ＨＬ６０ 细胞凋亡     

氧化砷对K562细胞增殖和凋亡的作用及其机制的初步研究

目的：研究氧化砷（Ａｓ２Ｏ３）对Ｋ５６２细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法：以细胞形态、细胞生长及活力测定,流式细胞仪分析细胞周期相关ＤＮＡ含量并以基因组ＤＮＡ电泳等方面观察Ａｓ２Ｏ３对Ｋ５６２细胞的作用,要用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法就其作用机制进行初步探索。结果：在Ａｓ２Ｏ３作用下Ｋ５６２细胞生长受抑伴随活力下降;基因组ＤＮＡ电泳出现”梯“状条带流式细胞仪检测出”凋亡峰“。实验进一步表明Ａｓ２Ｏ３可降低该细胞ｂｃｒ／ａｂｌ融合蛋白的含量,但不影响ＣＭＬ特异性ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因的ｍＲＮＡ水平。结论：Ａｓ２Ｏ３有抑制Ｋ５６２细胞增殖和诱导该细胞凋亡的作用。初步研究结果表明,Ａｓ２Ｏ３导致ｂｃｒ／ａｂｌ融合蛋白降低,可能参与了作用机制。     

鼻咽癌中EB病毒基因组状态研究

用多聚酶链反应扩增Ｅｐｓｔｉｎ－Ｂａｒｒ病毒的Ｂａｍ ＨＩ Ｗ片段，在２０例低分化鼻咽癌活检组织中，检测出ＥＢＶ ＤＮＡ片段；裸鼠低分化ＮＰＣ移植瘤株ＳＵＮＴ－１从第３４代持续存在ＥＢＶ ＤＮＡ，其相应体外细胞株ＳＵＮＥ－１第１至６２代仍阳性。     

IL-6受体在人白血病细胞膜上的表达及亲和力

目的：研究各种白血病细胞膜ＩＬ－６Ｒ的表达、密度及亲和力,为深入探讨对ＩＬ－６／ＩＬ－６Ｒ系统介导ＩＬ－６－ＰＥ４０外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法：采用放射性配基结合实验（ＲＢＡ）并结合Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图法,系统分析ＩＬ－６Ｒ在８种极具代表性的人类白血病细胞系Ｕ９３７,ＨＬ－６０,ＫＧ１,ＴＦ１,Ｋ５６２,ＣＥＭ,ＨｕＴ２８和Ｒａｊｉ上的表达密度及亲和力,同时应用流式细胞术（ＦＡＣＳ）检测ＩＬ－６Ｒ的α和β亚单位在这些白血病细胞上的表达。结果：ＲＢＡ表明,粒、单、红白血病细胞系ＩＬ－６０,Ｕ９３７,ＫＧ１和ＴＦ１表面存在着高亲和力ＩＬ－６Ｒ,平均ＩＬ－６Ｒ密度／细胞分别为２５０２个,２８７４个,２３１９个及９３２９个,而淋系白血病细胞系ＣＥＭ,ＨｕＴ２８和Ｒａｊｉ以及慢粒Ｋ５６２     

二乙酰二脱水卫矛醇在体内外的抗瘤作用及其机制

目的：观察二乙酰二脱水卫柔醇（ｄｉａｃｅｔｙｌｄｉａｎｈｙｄｒｏｇａｌａｃｔｉｔｏｌ,ＤＡＤＡＧ）在体内外的抗肿瘤作用,探讨其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡的关系。方法：建立小鼠脑内接种艾氏腹水癌模型,观察ＤＡＤＡＧ体内抗瘤作用;ＭＴＴ法观察ＤＡＤＡＧ对人早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０和人红白血病细胞株Ｋ５６２的生长抑制作用,ＤＮＡ电泳和流式细胞仪分析ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞凋亡的情况。结果：ＤＡＤＡＧ１０ｍｇ／ｋｇ ｉｐ,每天１次,连续给药７天,可显著延长小鼠中位生存时间;对ＨＬ－６０和Ｋ５６２均有生长抑制作用,药物作用７２ｈ的ＩＣ５０分别为３．７ｍｇ／Ｌ和２５．５ｍｇ／Ｌ;作用ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞后电泳显示有凋亡细胞特有的“梯状”条带,ＤＮＡ直方图出现亚Ｇ１峰。结论：ＤＡＤＡＧ抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡有关。     

bcr-abl融合基因抑制K562细胞凋亡的研究

目的研究ｂｃｒａｂｌ融合基因在慢性粒细胞白血病细胞（ＣＭＬ）凋亡调控中的作用。方法用人工合成的与ｂｃｒａｂｌｍＲＮＡ（ｂ３ａ２型）融合点碱基序列互补的反义寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯＤＮ）作用于体外培养的ＣＭＬ细胞株Ｋ５６２细胞,观察Ｋ５６２细胞凋亡的情况。结果ｂｃｒａｂｌ融合基因表达受抑后,Ｋ５６２细胞凋亡显著增加。结论ｂｃｒａｂｌ融合基因可抑制ＣＭＬ细胞凋亡,这可能是ＣＭＬ发病的主要机制。     

反义寡聚脱氧核苷酸对白血病K562细胞株生物特性的影响

目的：探讨反义核酸对白血病Ｋ５６２细胞株的影响。方法：用人工合成的ｂｃｒ３／ａｂ１２反义寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯ－ｂ）及无义寡聚脱氧核苷酸（Ｎ－ＯＤＮ）处理人急性红白血病细胞株Ｋ５６２细胞系，以观察Ｋ５６２细胞的生长及其ｂｃｒ３／ａｂ１２癌基因的表达。结果：ＡＳＯ－ｂ能抑制体外培养的Ｋ５６２细胞的生长（抑制率为５３．８３±１０．７８，Ｐ＜０．０５），集落形成（４０μＭ的ＡＳＯ－ｂ的抑制率为８８．９，Ｐ＜０．０５），ＤＮＡ及Ｐ２１０蛋白的合成（１２ｈ抑制率分别为７９．６８±１３．５３，６０．３３，Ｐ＜０．０５）；而对照组对Ｋ５６２细胞则无明显的影响。结论：提示ｂｃｒ３／ａｂ１２癌基因是维持Ｋ５６２细胞恶性生长表型的主要因素，也为慢性髓系白血病的治疗指出了新的方向。     

鼻咽癌裸鼠移植瘤及其相应体外细胞株的建立与特性研究

从新鲜鼻咽活检组织建立了一株鼻咽癌（ＮＰＣ）裸鼠移植瘤株（ＳＵＮＴ一１）及其相应的体外传代上皮细胞株（ＳＵＮＥ一１）。证实ＳＵＮＴ一１和ＳＵＮＥ一１为典型低分化鳞癌细胞，染色体分析二者均为人类肿瘤核型。以ＰＣＲ技术检测ＳＵＮＴ一１的Ｐ１～Ｐ１８和ＳＵＮＥ一１直到第６１代培养的细胞中的ＥＢＶ一ＤＮＡ均为阳性。用原位溶细胞电泳技术（Ｉｎｓｉｔｕｌｙｉｎｇｇｅｌ）ＥＢＶ探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析，亦显示相应的ＥＢＶＤＮＡ区带。ＥＢＶ基因组为线性特征，且在ＳＵＮＴ一１Ｐ１８和ＳＵＮＥ一１Ｐ５３细胞的电镜检查中均发现直径为９６一１００ｎｍ的ＥＢＶ样颗粒。用不对称ＰＣＲ一ＳＳＣＰ检测，显示有Ｐ５３第８外显子突变。带ＥＢＶ基因的ＮＰＣ瘤株及相应的上皮细胞株建立，为从分子水平、细胞水平上研究肿瘤的发生发展过程，以及治疗等方面提供了丰富的和更切合人体肿瘤的材料和模型。     

鼻咽癌中p53基因突变的研究

目的：探讨鼻咽癌中ｐ５３基因突变情况。方法：用非同位素不对称ＰＣＲ－单链构象多态性技术（ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ），分析了鼻咽癌活检组织、细胞株和裸鼠移植瘤中ｐ５３基因第５、６、７和８外显子（ｅｘｏｎ）的基因突变，并对其中ｅｘｏｎ８突变的ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１进行ＤＮＡ测序。结果：在２０例鼻咽癌活检组织中没有发现突变；但在鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２、ＳＵＮＥ－１和瘤株ＳＵＮＴ－１中存在第８外显子突变，而ＨＫ１为第５外显子突变。ＤＮＡ测序发现ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１的突变点在ｅｘｏｎ８的密码子（ｃｏｄｏｎ）２８０上，由ＡＧＡ（精氨酸）→ＡＣＡ（苏氨酸）。结论：ｐ５３基因突变热点的ｅｘｏｎ５、６、７和８可能在鼻咽癌变过程中没有重要意义，而在裸鼠移植瘤和细胞株建立过程中起重要作用。ＥＢＶ由于和鼻咽癌的关系密切，在鼻咽癌中可能存在ＥＢＶ编码蛋白与ｐ５３结合或蛋白表达被ＥＢＶ抑制等其他途径使ｐ５３失活。     

8—Br—cAMP诱导人食管癌细胞凋亡的初步观察

目的 研究人食管癌１０９细胞株经８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ诱导后细胞凋亡的发生。方法 用ＴＵＮＥＬ法观察诱导后细胞凋亡情况。结果 食管癌１０９细胞株自发凋亡率为１０．３％，经８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ诱导后凋亡倾向细胞增加。结论 ８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可具有促进人食管癌细胞凋亡的倾向。     

IL-2活化脐血细胞抗白血病效应的实验研究

探讨ＩＬ┐２活化脐血细胞的抗白血病效应。方法利用ＩＬ┐２作用于脐血细胞，以使其活化，然后再与带有标志基因ＮｅｏＲ和ＬａｃＺ的ＨＬ┐６０及Ｋ５６２细胞共培养，应用Ｘ┐ｇａｌ组化染色法观察其对白血病细胞系的抑制和杀伤作用。结果活化脐血细胞在生长、集落形成方面与未活化脐血细胞无显著性差异（Ｐ＜０．０５）。在采用经ＩＬ┐２活化的脐血细胞与基因标记ＨＬ┐６０及Ｋ５６２培养体系中，经３天的共培养，携带基因标记的白血病细胞系明显受到抑制和杀伤作用，蓝染细胞率显著下降（ＨＬ┐６０培养前后分别为３４．６７±５．０１，１９．８３±３．３１，Ｋ５６２分别为３４．１７±３．７６，２０．５±３．７３）。结论ＩＬ┐２活化脐血细胞具有一定的抗白血病效应     

阿糖胞苷及VM26体外诱导原代培养急性非淋巴细胞白血病细胞凋亡

目的　探讨Ａｒａ－Ｃ及ＶＭ２６治疗白血病的机制。方法　应用细胞形态学检查、二苯胺法ＤＮＡ片段化定量及ＤＮＡ 凝胶电泳方法研究阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）、ＶＭ２６诱导原代培养的急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）细胞凋亡结果　原代培养的ＡＮＬＬ细胞体外孵育２４ ｈ,空白组细胞ＤＮＡ 片段率仅为（１５．１±３．３）％ ,加Ａｒａ－Ｃ５０ μｇ／Ｌ组和ＶＭ２６ １０ ｍ ｇ／Ｌ,ＤＮＡ片段率均显著增高,分别达（４１．８±１９．１）％ 和（４６．８±１８．７）％ （Ｐ＜ ０．０１,ｎ＝ １１）。两种药物诱导ＤＮＡ片段化均呈剂量和时间依赖性。光镜下见两种药物均诱导ＡＮＬＬ细胞出现典型的细胞凋亡形态改变。ＤＮＡ 电泳显示典型的ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ。结论　Ａｒａ－Ｃ及ＶＭ２６ 能诱导ＡＮＬＬ细胞出现凋亡,诱导白血病细胞凋亡可能是其抗白血病作用的主要机制之一。     

CEE－IAEA临床剂量质量控制体模的介绍

ＣＥＥ－ＩＡＥＡ临床剂量质量控制体模的介绍郑恭俭Ｄ．Ｋ．ＮＧＵＹＥＮＡ．ＢＲＩＯＩＥＲＪ．ＣＨＡＶＡＵＤＲＡ１９９１年６月国际原子能机构（ＩＡＥＡ）向法国ＧＵ－ＳＴＡＶＥＲＯＵＳＳＹ研究所提供了一个由美国物理学家Ｗ．ＮＡＮＳＯＮ制作的梯形水模。用其进...     

8-Br-cAMP诱导人食管癌细胞凋亡的初步观察

目的研究人食管癌１０９细胞株经８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ诱导后细胞凋亡的发生。方法用ＴＵＮＥＬ法观察诱导后细胞凋亡情况。结果食管癌１０９细胞株自发凋亡率为１０．３％,经８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ诱导后凋亡倾向细胞增加。结论８—Ｂｒ－ｃＡＭＰ可具有促进入食管癌细胞凋亡的倾向。     

增强子结合蛋白家族一个新基因的3′-非编码区序列对肝癌细胞7721生长的影响

目的观察所获得的增强子结合蛋白家族一个新基因ＨＰ８的３′┐非编码区（３′ＵＴＲ）对肝癌细胞生长的影响。方法将３′ＵＴＲ序列亚克隆至真核表达载体ｐＢＫＣＭＶ中，运用磷酸钙沉淀法转染肝癌细胞７７２１。结果观察到细胞的生长受到较明显抑制。结论表明该基因参与真核细胞转录调控，结合以前的实验结果（该基因在肝癌细胞中普遍高表达），提示该基因与细胞生长调控密切相关