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EBV—BHRF1基因阳性与阴性细胞株与3种诱导调亡因素抵抗性差异的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察EBV-BHRF1基因阵性与阴性细胞株对3种诱导细胞凋亡因素的抵抗力差异。方法 PCR扩增EBV-BHRF1基因片段诱导后经电镜及电泳DNA检测细胞凋亡。结果 分别从B95-8、Raji及人低分化鼻咽癌细胞株(SUNE-1)DNA中扩增出EB病毒的BHRF1全基因片段,而K562、YAC细胞株则不含该基因片段。分别经上述3种方法处理后,前3种细胞株的形态及DNA电泳行为未发生明显改变,而 相似文献
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目的:了解BHRF1基因表达对60Co照射后CNE2细胞周期分布的影响。方法:构建BHRF1高表达载体并转入CNE2细胞中,通过检测癌细胞增殖细胞核抗原(Proliferatingcelnuclearantigen,PCNA)表达和在60Co照射后不同时期细胞周期分布的改变。结果:BHRF1可抑制细胞PCNA的表达及降低S期的百分率;经60Co照射后,BHRF1CNE2细胞的凋亡率较低(P<001),S期细胞数下降不明显(P>005);在辐射后的24小时到72小时,其S期和G2期细胞百分率先后升高。结论:BHRF1基因的表达可抑制细胞的增殖并增强其抵抗辐射诱发的细胞凋亡的发生。 相似文献
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目的:本文主要研究人食管癌109细胞株经8-Br-cAMP诱导后细胞凋亡的发生。方法:用TUNEL法观察诱导后细胞凋亡情况。结果:人食管癌109例细胞株自发凋亡率为10.3%,经8-Br-cAMP诱导后倾向细胞增加。结论:8-Br-cDNA具有促进人食管癌细胞凋亡倾向的效应。 相似文献
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目的 定性和定量地分析放射诱导HL60 细胞凋亡。 方法 以人类白血病细胞系HL60 为材料,应用光学显微镜和电子显微镜及琼脂糖电泳定性分析60 Co 放射线诱导HL60 细胞凋亡的发生,应用DNA流式细胞计量术和末端转移酶(TdT) 介导的缺口末端标记法(TUNEL) 的流式细胞定量检测HL60 细胞凋亡。 结果 (1) 放射后HL60 出现细胞体积缩小,染色质固缩致密化、边缘化,染色体断裂,凋亡小体和细胞膜保持完整等形态学特征。(2) 琼脂糖电泳表现为特征性DNA“梯谱”。(3)流式细胞计量术发现放射诱导HL60 细胞凋亡在照射后6h 已较明显,而且细胞凋亡百分比随着照射剂量增加而增加。TUNEL法检测细胞凋亡百分比值比DNA流式细胞分析的方法得到的值要小,但差异无显著意义。 结论 流式细胞计量术结合细胞形态学检查和( 或) 琼脂糖电泳能较好、简便、迅速地分析放射诱导HL60 细胞凋亡 相似文献
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目的:研究氧化砷(As2O3)对K562细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法:以细胞形态、细胞生长及活力测定,流式细胞仪分析细胞周期相关DNA含量并以基因组DNA电泳等方面观察As2O3对K562细胞的作用,要用Western印迹和Northern印迹法就其作用机制进行初步探索。结果:在As2O3作用下K562细胞生长受抑伴随活力下降;基因组DNA电泳出现”梯“状条带流式细胞仪检测出”凋亡峰“。实验进一步表明As2O3可降低该细胞bcr/abl融合蛋白的含量,但不影响CML特异性bcr/abl融合基因的mRNA水平。结论:As2O3有抑制K562细胞增殖和诱导该细胞凋亡的作用。初步研究结果表明,As2O3导致bcr/abl融合蛋白降低,可能参与了作用机制。 相似文献
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鼻咽癌中EB病毒基因组状态研究 总被引:6,自引:3,他引:3
用多聚酶链反应扩增Epstin-Barr病毒的Bam HI W片段,在20例低分化鼻咽癌活检组织中,检测出EBV DNA片段;裸鼠低分化NPC移植瘤株SUNT-1从第34代持续存在EBV DNA,其相应体外细胞株SUNE-1第1至62代仍阳性。 相似文献
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IL-6受体在人白血病细胞膜上的表达及亲和力 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究各种白血病细胞膜IL-6R的表达、密度及亲和力,为深入探讨对IL-6/IL-6R系统介导IL-6-PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法:采用放射性配基结合实验(RBA)并结合Scatchard作图法,系统分析IL-6R在8种极具代表性的人类白血病细胞系U937,HL-60,KG1,TF1,K562,CEM,HuT28和Raji上的表达密度及亲和力,同时应用流式细胞术(FACS)检测IL-6R的α和β亚单位在这些白血病细胞上的表达。结果:RBA表明,粒、单、红白血病细胞系IL-60,U937,KG1和TF1表面存在着高亲和力IL-6R,平均IL-6R密度/细胞分别为2502个,2874个,2319个及9329个,而淋系白血病细胞系CEM,HuT28和Raji以及慢粒K562 相似文献
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二乙酰二脱水卫矛醇在体内外的抗瘤作用及其机制 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:观察二乙酰二脱水卫柔醇(diacetyldianhydrogalactitol,DADAG)在体内外的抗肿瘤作用,探讨其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡的关系。方法:建立小鼠脑内接种艾氏腹水癌模型,观察DADAG体内抗瘤作用;MTT法观察DADAG对人早幼粒白血病细胞株HL-60和人红白血病细胞株K562的生长抑制作用,DNA电泳和流式细胞仪分析HL-60和K562细胞凋亡的情况。结果:DADAG10mg/kg ip,每天1次,连续给药7天,可显著延长小鼠中位生存时间;对HL-60和K562均有生长抑制作用,药物作用72h的IC50分别为3.7mg/L和25.5mg/L;作用HL-60和K562细胞后电泳显示有凋亡细胞特有的“梯状”条带,DNA直方图出现亚G1峰。结论:DADAG抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡有关。 相似文献
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反义寡聚脱氧核苷酸对白血病K562细胞株生物特性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨反义核酸对白血病K562细胞株的影响。方法:用人工合成的bcr3/ab12反义寡聚脱氧核苷酸(ASO-b)及无义寡聚脱氧核苷酸(N-ODN)处理人急性红白血病细胞株K562细胞系,以观察K562细胞的生长及其bcr3/ab12癌基因的表达。结果:ASO-b能抑制体外培养的K562细胞的生长(抑制率为53.83±10.78,P<0.05),集落形成(40μM的ASO-b的抑制率为88.9,P<0.05),DNA及P210蛋白的合成(12h抑制率分别为79.68±13.53,60.33,P<0.05);而对照组对K562细胞则无明显的影响。结论:提示bcr3/ab12癌基因是维持K562细胞恶性生长表型的主要因素,也为慢性髓系白血病的治疗指出了新的方向。 相似文献
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鼻咽癌裸鼠移植瘤及其相应体外细胞株的建立与特性研究 总被引:12,自引:7,他引:12
从新鲜鼻咽活检组织建立了一株鼻咽癌(NPC)裸鼠移植瘤株(SUNT一1)及其相应的体外传代上皮细胞株(SUNE一1)。证实SUNT一1和SUNE一1为典型低分化鳞癌细胞,染色体分析二者均为人类肿瘤核型。以PCR技术检测SUNT一1的P1~P18和SUNE一1直到第61代培养的细胞中的EBV一DNA均为阳性。用原位溶细胞电泳技术(Insitulyinggel)EBV探针Southernblot分析,亦显示相应的EBVDNA区带。EBV基因组为线性特征,且在SUNT一1P18和SUNE一1P53细胞的电镜检查中均发现直径为96一100nm的EBV样颗粒。用不对称PCR一SSCP检测,显示有P53第8外显子突变。带EBV基因的NPC瘤株及相应的上皮细胞株建立,为从分子水平、细胞水平上研究肿瘤的发生发展过程,以及治疗等方面提供了丰富的和更切合人体肿瘤的材料和模型。 相似文献
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鼻咽癌中p53基因突变的研究 总被引:9,自引:2,他引:9
目的:探讨鼻咽癌中p53基因突变情况。方法:用非同位素不对称PCR-单链构象多态性技术(aPCR-SSCP),分析了鼻咽癌活检组织、细胞株和裸鼠移植瘤中p53基因第5、6、7和8外显子(exon)的基因突变,并对其中exon8突变的SUNE-1和SUNT-1进行DNA测序。结果:在20例鼻咽癌活检组织中没有发现突变;但在鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、SUNE-1和瘤株SUNT-1中存在第8外显子突变,而HK1为第5外显子突变。DNA测序发现SUNE-1和SUNT-1的突变点在exon8的密码子(codon)280上,由AGA(精氨酸)→ACA(苏氨酸)。结论:p53基因突变热点的exon5、6、7和8可能在鼻咽癌变过程中没有重要意义,而在裸鼠移植瘤和细胞株建立过程中起重要作用。EBV由于和鼻咽癌的关系密切,在鼻咽癌中可能存在EBV编码蛋白与p53结合或蛋白表达被EBV抑制等其他途径使p53失活。 相似文献
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目的 研究人食管癌109细胞株经8-Br-cAMP诱导后细胞凋亡的发生。方法 用TUNEL法观察诱导后细胞凋亡情况。结果 食管癌109细胞株自发凋亡率为10.3%,经8-Br-cAMP诱导后凋亡倾向细胞增加。结论 8-Br-cAMP可具有促进人食管癌细胞凋亡的倾向。 相似文献
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探讨IL┐2活化脐血细胞的抗白血病效应。方法利用IL┐2作用于脐血细胞,以使其活化,然后再与带有标志基因NeoR和LacZ的HL┐60及K562细胞共培养,应用X┐gal组化染色法观察其对白血病细胞系的抑制和杀伤作用。结果活化脐血细胞在生长、集落形成方面与未活化脐血细胞无显著性差异(P<0.05)。在采用经IL┐2活化的脐血细胞与基因标记HL┐60及K562培养体系中,经3天的共培养,携带基因标记的白血病细胞系明显受到抑制和杀伤作用,蓝染细胞率显著下降(HL┐60培养前后分别为34.67±5.01,19.83±3.31,K562分别为34.17±3.76,20.5±3.73)。结论IL┐2活化脐血细胞具有一定的抗白血病效应 相似文献
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目的 探讨Ara-C及VM26治疗白血病的机制。方法 应用细胞形态学检查、二苯胺法DNA片段化定量及DNA 凝胶电泳方法研究阿糖胞苷(Ara-C)、VM26诱导原代培养的急性非淋巴细胞白血病(ANLL)细胞凋亡结果 原代培养的ANLL细胞体外孵育24 h,空白组细胞DNA 片段率仅为(15.1±3.3)% ,加Ara-C50 μg/L组和VM26 10 m g/L,DNA片段率均显著增高,分别达(41.8±19.1)% 和(46.8±18.7)% (P< 0.01,n= 11)。两种药物诱导DNA片段化均呈剂量和时间依赖性。光镜下见两种药物均诱导ANLL细胞出现典型的细胞凋亡形态改变。DNA 电泳显示典型的DNA Ladder。结论 Ara-C及VM26 能诱导ANLL细胞出现凋亡,诱导白血病细胞凋亡可能是其抗白血病作用的主要机制之一。 相似文献
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郑恭俭 《中华放射肿瘤学杂志》1994,(2)
CEE-IAEA临床剂量质量控制体模的介绍郑恭俭D.K.NGUYENA.BRIOIERJ.CHAVAUDRA1991年6月国际原子能机构(IAEA)向法国GU-STAVEROUSSY研究所提供了一个由美国物理学家W.NANSON制作的梯形水模。用其进... 相似文献
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目的研究人食管癌109细胞株经8-Br-cAMP诱导后细胞凋亡的发生。方法用TUNEL法观察诱导后细胞凋亡情况。结果食管癌109细胞株自发凋亡率为10.3%,经8-Br-cAMP诱导后凋亡倾向细胞增加。结论8—Br-cAMP可具有促进入食管癌细胞凋亡的倾向。 相似文献