放射免疫测定的基本原理和技术

自1960年Berson和Yalow发明放射免疫测定法以来,此类技术的应用极为广泛,发展极为迅速。有人推测,凡是一切具有活性的生物物质均可用此种方法测定。其应用范围已遍及许多基础与临床的重要学科领域,如内分泌学、生化学、肿瘤学、传染病学、针麻机理等。 由于反应过程中所使用的特异性结合剂的不同,方法上的差异,曾用不同的名称和类型(表1)。     

心钠素放射免疫测定

心钠素又称心房利钠多肽(ANP),是心脏产生和分泌的一种多肽激素,可释放到血浆。ANP 具有很强的利钠、利尿,扩张血管和降低血压的作用。ANP 对防治高血压和心肾疾病也有重要意义。ANP 的发现揭示心脏不仅是一个循环器官,而且是一个内分泌器官。ANP 放免测定法的建立为心血管,内分泌、肾脏等基础和临床研究,心血管疾病的诊断、分型和治疗及探讨 ANP 的分泌、生理作用,代谢和调节提供一种灵敏可靠的指标。     

甲胎蛋白的固相放射免疫测定技术

<正> 1959年,诺贝尔生理学—医学奖金获得者——Yalow,R.S首先把同位素示踪技术与免疫反应结合起来,建立了胰岛素的放射免疫测定(RIA),使免疫学测定技术的灵敏度整整提高了一个数量级,进入了毫微克到微微克水平。接着竞争性蛋白质结合分析,放射受体分析等多种竞争性放射分析技术相继出现。1967年Catt等建立了涂管固相     

血浆醛固酮放射免疫测定

从1970年Mayes和Bagard等介绍血浆醛固酮的放射免疫测定以来,其它测定方法也陆续有所报道,但这些方法除对血浆样品用有机溶剂提取外,大多还需再进行一次纸层析、柱层析或薄板层析纯化,以去除其它甾体激素的干扰。虽有人用醛固酮-γ-酯-BSA作抗原或用免疫纯化法来提高特异性,但都较繁琐。我们在尿醛固酮放射免疫测定的基础上,进一步采用高比放射性的[1,2,6,7-~3H]醛固酮作标记抗原,同时改变实验系统的条件,建立不经层析的、高灵敏的血浆醛固酮放免测定方法。     

唾液皮质醇放射免疫测定

皮质醇的分泌释放有昼夜节律变化,单次血浆皮质醇测定仅可用于初步筛选病人,要准确估价病情和深入研究下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的内分泌功能,常需多次抽血,这些检查必须在医院内实施。多次静脉穿刺给医务人员和病人带来诸多不便,且因应激可在一定程度上影响测定结果,血浆总皮质醇浓度亦并不代表具有生物活性的游离皮质     

血浆睾酮放射免疫测定

本文介绍测定人血浆睾酮(T)的RIA(放射免疫分析)法,用混合酸酐法制备T-牛血清清蛋白结合物,以其为抗原制备T-抗血清,用1％活性碳分离免疫复合物与游离T,该方法的T的最小检测量为0.07pmol/L,批内系数分别为4.77％和1.64％,外加T标准品回收率为100.4％。测定158例正常人血浆T浓度,60岁以上男性明显低于60岁和批间变异以下者,女性更年期和绝经期明显低于育龄期,而月经各周期中T浓度无明显差异。     

血浆雌三醇放射免疫测定

血浆雌三醇放射免疫测定,在临床上对了解胎盘功能、胎儿在宫内发育程度,以及高危妊娠的监护等有一定意义。现将我们建立的测定方法介绍如下: 抗原的制备为了使雌三醇半抗原具有免疫性,须用化学方法制成雌三醇(E_3)与牛血清白蛋白(BSA)的结合物,方可免疫动物使之产生抗体。如要雌三醇抗血清具有高度特异性,就须先将雌三醇转变成雌三醇-6-(O-羧甲基)肟,再和BSA结合,制备出雌三醇-6-牛血清白蛋白抗原,才能用以产生效价高、特异性强的抗血清(图1)。本实验的熔点测定用毛细管法来校正,红外光谱用岛津IR-27G鉴定。     

尿醛固酮放射免疫测定

醛固酮是体内调节水盐代谢的主要激素。测定体液中醛固酮含量,对诊断原发性醛固酮增多症有其特殊意义。对高血压、肾脏疾病、肝硬化、心脏病、妊娠、水肿等其它疾病的诊断及研究都有一定的重要性。现将我们建立的尿醛固酮放射免疫测定法报告如下: 方法和结果一、抗原制备: (一) 醛固酮-C_3-羧甲基肟的制备:将35毫克醛固酮(英国Koch Light公司生产)和25毫克羧甲基羟胺溶于3毫升0.5％醋酸钠甲醇溶液,用NaOH/CH_3OH溶液调节pH至9,在室温搅拌反应2小时。吹氮气使反     

生长抑素的放射免疫测定

本工作制备了具有滴度高(1:32000)、亲和力大(最小检出量为3pg、IC_(50)为26pg、亲和常数为1.2×10~(11)L/M)和特异性强的抗生长抑素血清。建立了生长抑素的放射免疫测定法,按效点系统评分法记分,本法     

放射免疫测定前列腺特异抗原的技术探讨

目的对前列腺特异性抗原（ＰＳＡ）作方法学鉴定，并对检测的若干影响因素进行探讨。方法采用放射免疫法作ＰＳＡ定值质检血清的检测并在不同实验条件下对结果的影响进行观察。结果本法灵敏度为０．２２ｎｇ％，回收率９７．３％～１０２．６％，平均回收率９９．８％，非特异性结合率（ＮＳＢ）平均为３．６％，批内平均变异系数ＣＶ５．４％，批间平均变异系数ＣＶ８．２％，健全性实验结果良好。新鲜血清分离后应当日内检测，因故可置－２０℃保持。ＰＡＳ的碘标记抗原溶液务必分装冻存，避免反复冻融，实验表明其使用期至少在３０～４０天。结论系列实验的结果充分表明这不仅有利于实验条件的控制，更重要的是提高了检验质量的保证。     

前列腺素放射免疫测定技术学习班在京举办

前列腺素(简称PG)的研究是二十年来生物科学和医学科学领域中有重要意义的一项进展。最近几年对PG的广泛研究表明,PG分布甚广、含量甚微、代谢迅速,具有多种多样的生物学作用,在医学各个领域的应用上有着广阔的前途。由中国科学院动物研究所、中国医学科学院基础医学研究所、中国人民解放军总医院生化实验室组成的协作组,经过三年多的努力,建立了三种前列腺素放射免疫测定方法,1979年12月进行技术鉴定,代表们一致认为,本方法灵敏度高,准确性好,精密     

放射免疫测定血浆皮质醇正常值及节律变化

皮质醇是理糖皮质激素的主要成份,对机体生理功能的调节及维持有其重要作用。由于血浆中含量微少及干扰因素的存在,以往虽已有多种测定方法,或由手续繁锁或由不够精确而未能广泛应用。近年     

血浆醛固酮放射免疫测定及其临床应用

首先制备了醛固酮肟蛋白结合物,其克分子比为35:1。用它免疫家兔,获得高滴度抗血清,其亲和常数为10~9～10~(10)升/克分子。并用此抗体建立了血浆醛固酮放射免疫测定法。本方法的特异性、灵敏度、精密度及准确性较好。正常卧位基础值8.37±2.92毫微克/100毫升;立位2小时后为13.64±7.51毫微克/100毫升。所得醛固酮的结果与临床情况相符。当它与     

血清苯妥英钠放射免疫测定及其临床应用

本文介绍37例癫痫患者服用苯妥英钠后血清苯妥英钠放射免疫测定的结果,中位数为19.5μg/ml,症状控制与服药剂量的大小及血清中的浓度有关,因此对临床用药具有一定的指导意义。     

血清低浓度AFP放射免疫测定及其临床意义

采用AFP(RIA)药盒,用零标准品将20ng/ml标准品作倍比稀释得10ng/ml与5ng/ml两个新的标准品。灵敏度测定表明该药盒最小可测值低于4ng/ml。350例正常成人测定结果均低于5ng/ml。作者分别以<20ng/ml(目前通行的正常界限)和<5ng/ml(本实验正常范围)作为诊断阈值,对677例各种肝脏良、恶性疾病的AFP测定结果进行评价,并对3例PHC术后病人作长期低浓度AFP监测。结果表明以5ng/ml为正常阈值有利于PHC的早期诊断和术后复发监测。     

唾液泌乳素的放射免疫测定

本文应用放免分析方法测定70例孕妇和患者血清和唾液的泌乳索(PRL)值,用福林-酚试剂法测定唾液总蛋白含量,对唾液容量与PRL 含量的关系作了线性检验。结果发现,唾液总蛋白含量与唾液PRL 含量显著相关(P<0.01),唾液容量与PRL 含量线性相关(P<0.01)。4例垂体肿瘤患者术后血清PRL 值下降,唾液PRL 值亦下降。但在70例测定值中,血清PRL 值与唾液PRL 值无相关。我们认为:唾液中含有PRL 这一激素。唾液PRL 的测定在个体PRL 水平的追踪上有一定的意义。     

血浆变肾上腺素放射免疫测定

利用脱氧肾上腺素抗体与变肾上腺素强交叉反应建立起灵敏、简单的血浆变肾上腺素放射免疫测定法。经方法考验,标准曲线的精密度为3.7±1.4%,最小检出量小于2pg/管;批内、批间误差分别为3.8～6.3%和7.6～11.6%,平均回收率为90%左右;加入不同量的血浆与测得变肾上腺素具有线性关系。正常人卧位血浆变肾上腺素浓度为65.6±56.4(13～147)pg/ml。血浆与尿中变肾上腺素呈显著正相关r=0.747(n=97 p<0.01游离);r=0.747(n=97 p<0.01总)。速尿和冰水冷应激未使变肾上腺素明显升高,但狗在麻醉状态下人为增加颅内压后变肾上腺素明显变化,血浆变肾上腺素可作为交感神经活性和嗜铬细胞瘤诊断的指标。     

C—肽的放射免疫测定及其临床意义

用放射免疫分析法测定了70例糖尿病(DM)人及24例正常人的血清C-肽释放试验的结果,认为C-肽含量测定可准确反映糖尿病人,尤其应用胰岛素治疗的DM病人胰腺β细胞功能,对DM分型和选择治疗方案有重要意义。是胰岛移植最可靠的监测指标之一。