游离指肪酸对大鼠瘦素体基因表达及蛋白酷氨酸磷酸化的影响

目的：观察游离脂肪酸是否会对大鼠肝脏,骨骼肌及胰腺组织瘦素（leptin) 受体的蛋白及基因表达以及酪氨酸磷酸化产生一定的影响,方法：用静脉注射法制备高游离脂肪酸大鼠模型,处死后取肝脏,骨骼2肌及胰腺组织,提取蛋白后用Western印迹法检测瘦素受体的蛋白水平,用RTPCR法检测瘦素受体RNA含量的变化,应用免疫沉淀法检测瘦素受体的酪氨酸磷酸化程度,结果：高游离脂肪酸组大鼠肝脏,骨骼肌和胰腺组织瘦素受体的蛋白水平与对照组大鼠相比无明显差异（P＞0．05）,经RT－PCR结果分析表发现,高游离脂肪酸组大鼠肝脏,骨骼肌和胰腺组织瘦素受体的RNA水平与对照组大鼠相比无明显差异（P＞0．05）,高游离脂肪酸组大鼠肝脏,骨骼肌和胰腺组织瘦素受体的酷氨酸磷酸化程度与对照组大鼠相比有显著差异（P＜0．05）,瘦素受体的酷氨酸磷酸化程度显著降低,提示游离脂肪酸抑制了大鼠肝脏,骨骼肌组织的瘦素受体的酷氨酸残基的磷酸化,崦高游离脂肪酸组大鼠胰腺组织的瘦素受体的酷氨酸磷酸化程度与对照组大鼠相比没有显著差异（P＞0．05）,结论：游离脂肪酸可显著降低大鼠肝脏及骨骼肌组织瘦素受体的酪氨酸磷酸化程度,提示游离脂肪酸的抑制了大鼠肝脏,骨骼肌组织纱受体的酷氨酸残基的磷酸化,游离脂肪酸可通过对大鼠肝脏及骨骼肌瘦素受体的磷酸化程度产生一定的抑制作用,从而进一步引起胰岛素抵抗。     

核因子-κB圈套寡核苷酸对核因子-κB活性及创伤炎症反应大鼠肝脏功能损害的影响

目的 探讨核因子(NF)-κB圈套寡核苷酸(ODN)对NF—κB活性及创伤炎症反应大鼠肝脏功能损害的影响。方法 利用电泳迁移率改变实验(EMSA)，测定合成的环状哑铃形圈套ODN对NF—κB的DNA结合能力的竞争抑制作用；利用NF—κB反应性报告细胞株HEK-不稳定增强型绿色荧光蛋白(d2EGFP)，观察圈套ODN瞬时转染对报告基因表达的影响。Wistar大鼠96只，随机分为对照组、创伤性炎症组、圈套ODN组和无关ODN组。利用EMSA检测各组肝脏组织NF—κB的DNA结合活性，用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测大鼠肝脏组织TNF—α、白细胞介素-6(IL-6)mRNA水平，酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测大鼠肝脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF—α)、IL-6的蛋白水平。结果 设计的环状哑铃形圈套ODN对NF—κB的DNA结合能力具有竞争抑制作用，1μg／ml和2μg／ml圈套ODN瞬时转染HEK—d2EGFP，可明显抑制p65蛋白诱导的d2EGFP表达。大鼠创伤性炎症后3h，肝脏NF—κB活性开始升高，伤后12h达高峰。肝脏组织TNF—α、IL-6mRNA水平和蛋白水平也明显上升，与NF—κB的活性改变一致。圈套ODN治疗后，大鼠肝脏组织TNF—α、IL-6的表达明显下降，肝脏功能明显好转，而无关ODN则没有治疗效果。结论 设计的靶向NF—κB的环状哑铃形圈套ODN可通过特异性抑制NF-κB活性，有效阻止创伤性炎症大鼠肝脏炎症介质TNF—α、IL-6的释放，从而改善肝脏功能。     

运动训练对大鼠骨骼肌和肝脏金属硫蛋白诱导和金属离子代谢的影响

观察了耐力游泳训练对大鼠骨骼肌和肝脏金属硫蛋白(Metallothionein,MT)诱导性的影响,以及训练大鼠力竭性游泳后,MT和锌、铜、铁、锰、钙、镁等金属离子含量的动态变化,探讨了它们之间的关系。结果显示耐力性游泳训练可使大鼠骨骼肌和肝脏MT的基础水平升高。训练大鼠力竭性游泳后,骨骼肌和肝脏中诱导合成的MT的峰值提前出现,表明运动训练可加快MT的诱导合成。MT较高的基础水平和快速的诱导合成,可能是训练促进运动恢复的生理机制之一。训练大鼠力竭性游泳后,骨骼肌锌、铜、锰和肝脏锌、铜、锰、铁的变化趋势与MT的变化趋势较为一致,表明MT可能参与了这些金属离子的代谢。MT可能通过调节金属离子代谢,在机体的运动恢复中发挥重要作用。     

预热处理对大强度运动后大鼠肝脏HSP70和SOD、MDA、GSH、GPT的影响

目的:观察预热处理对运动后大鼠肝脏热休克蛋白(HSP)70表达和抗氧化能力的影响。方法:72只雄性Wistar大鼠随机分为9组:安静对照组(C)、热处理即刻组(H0)、热处理恢复24h组(H24)、预热处理恢复24h后再离心运动即刻组(HE0)、预热处理恢复24h后再离心运动后恢复24h组(HE24)、预热处理恢复24h后再离心运动恢复48h组(HE48)以及常温离心运动后即刻组(E0)、常温离心运动后24h组(E24)、常温离心运动后48h组(E48)。采用免疫印迹等方法对大鼠肝脏HSP70蛋白表达及SOD、MDA、GSH、GPT进行测定。结果:H0组大鼠肝脏HSP70蛋白表达水平为133%,与C组相比有增加趋势;H24组HSP70蛋白表达水平增加到175%,与C组相比有显著性差异(P<0.05)。E0组、E24组、E48组大鼠肝脏HSP70蛋白表达水平均显著高于C组(P<0.05),呈逐渐增高趋势。HE0组大鼠肝脏HSP70蛋白表达水平达到138%,也显著高于C组(P<0.05);但HE24组下降至89%,显著低于E24组(P<0.05);HE48组明显增加,达到224%,显著高于C组(P<0.05),亦高于E48组的176%,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:预热处理明显使肝脏HSP70表达增加,并有延迟表达现象。预热处理会导致GSH明显下降,但对MDA和SOD影响较小或没有影响。预热处理不能缓解离心运动后GSH明显下降的趋势。     

长期递增负荷跑台运动和营养补充对大鼠肝脏组织形态和EPO水平的影响

目的:观察长期递增负荷跑台运动和营养补充对大鼠肝脏组织形态、EPO水平的影响,为探讨运动性贫血发生的机理和防治方法提供依据.方法:雄性Wistar大鼠30只,随机均分为3组:对照组、运动组、运动 营养补充组.运动方式为11周递增负荷跑台训练,营养补剂为铁复合剂.应用组织学光镜、酶联免疫吸附法(ELISA)观察3组大鼠肝脏组织形态、EPO水平.结果:运动组大鼠肝脏组织肝细胞结构模糊、多数肝细胞表现出浑浊肿胀或一定程度的水样变性,而运动 营养组肝脏形态基本正常.运动 营养组肝脏组织匀浆液EPO活性水平分别高于对照组、运动组.     

非酒精性脂肪性肝病发生中Perilipin和ADRP表达变化实验研究

目的：探讨高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）形成过程中，肝组织Perilipin（脂滴包被蛋白）和ADRP（脂肪分化相关蛋白）的表达变化及意义。方法：建立大鼠高脂饮食NAFLD模型并设正常对照组，观察时间点为建模后4w、8w和12w，观察大鼠肝组织病理变化，检测血浆游离脂肪酸及甘油三酯水平，免疫组织化学染色法检测肝组织中Perilipin和ADRP蛋白水平。结果：成功制作大鼠NAFLD实验模型，与正常组相比，NAFLD组大鼠血浆FFA水平和TG水平从第4w起显著升高（P〈0．01），NAFLD组大鼠肝组织Perilipin蛋白表达水平显著低于正常组（P〈0．01），ADRP蛋白表达水平显著高于同期正常组（P〈0．01）。Perilipin及ADRP表达与FFA及TG具有显著相关性。结论：高脂饮食可制作NAFLD大鼠模型，Perilipin和ADRP与NAFLD的形成有关。     

临床研究

目的探讨As2O3在肝动脉化疗栓塞（TACE）中诱导恶性肿瘤细胞凋亡作用与生存素之间的相关性。方法将肝脏左、右叶分别移植VX2肿瘤模型的16只日本大耳白兔,随机平均分成2组．移植瘤术后3周,经肝动脉插管分别给予超液化碘油（UFLP）1ml加As2O32mg（实验组）和UFLP1ml（对照组）。给药3周后,所有动物均处死,分别取得肿瘤组织、瘤旁组织和正常肝脏组织进行末端脱氧核苷酸转移酶一生物素dUTP切口末端标记法（TUNEL）染色观察凋亡肿瘤细胞,免疫组化染色检测生存素蛋白的表达。结果实验组肿瘤组织中有大量呈黄色的凋亡细胞,癌旁组织及正常组织中未观察到凋亡细胞;对照组肿瘤组织、癌旁组织及正常组织均未发现细胞核内有黄色颗粒的凋亡细胞。对照组肿瘤组织生存素蛋白表达率为100％（16／16）,其中强阳性12例,弱阳性4例,癌旁及正常组织中生存素蛋白表达率为0。实验组肿瘤组织生存素蛋白表达为37．5％（6／16）,其中强阳性2例,弱阳性4例,癌旁及正常组织中生存素蛋白表达率同样为0。两组肿瘤组织中生存素蛋白表达率差异有统计学意义（P〈0．05）。同时,两组癌组织与癌旁和正常组织中生存素蛋白表达率差异有统计学意义（P〈0．01）。结论As2O3通过抑制肿瘤细胞内生存素蛋白表达促进肿瘤细胞凋亡。     

铁调素调节蛋白研究进展及其在航天医学中的作用

铁调素调节蛋白(HJV)是调节铁调素表达的关键上游分子,在骨骼肌、肝脏和心脏中呈现组织特异性高表达。肝脏中的HJV作为骨形态发生蛋白(BMP)的协同受体调节铁调素的表达,对机体铁稳态至关重要。骨骼肌中HJV的表达对全身铁代谢并无影响,但与肌细胞成肌分化相关,并可作为转化生长因子-β1(TGF-β1)的辅助受体防治肌肉萎缩。HJV在血液、脑等其他组织器官中的作用也逐渐得以研究阐明。失重及缺氧状态下HJV的变化很可能与航天员太空飞行时贫血的发生与组织氧化应激有关。综述了HJV在肝脏、骨骼肌,血液等组织中的主要功能作用,同时结合失重及低压缺氧状态下铁代谢变化的国内外研究,对HJV在太空飞行或模拟失重引起全身生理或病理性变化中可能发挥的作用进行了展望。     

谷氨酰胺对缺血再灌注肝脏热休克蛋白70基因表达的影响

目的探讨谷氨酰胺（Gln）对缺血再灌注肝脏热休克蛋白70（HSP70）基因表达的影响及其对肝脏的保护作用。方法雄性Wistar大鼠120只,随机分为3组（n=40）：假手术组（1组）、生理盐水组（2组）和谷氨酰胺组（3组）。术前3组大鼠连续5天腹腔注射Gln,2组仅给予等量的生理盐水。2、3组采用Pringle＇s法阻断入肝血流,35分钟后开放复流,1组仅行麻醉、开腹。分别于阻断前及再灌注后2、4、24小时,取血及肝组织,测定血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及肝组织丙二醛（MDA）的含量,采用RT-PCR法检测肝组织HSP70mRNA的表达。结果再灌注后2、4、24小时,3组MDA、ALT、AST、LDH及TNF-α水平与2组相比均显著降低（P〈0．05）,而3组肝组织HSP70mRNA表达显著高于2组和1组（P〈0．05）。结论Gln能够促进肝组织HSP70基因的表达,减轻肝缺血再灌注损伤,抑制炎症因子释放。     

模拟快速上浮脱险对大鼠肝脏糖皮质激素受体mRNA表达的影响

目的观察模拟200m快速上浮脱险对大鼠肝脏糖皮质激素受体（GR）转录水平表达的影响，探讨这一应激方式对机体的损伤机制。方法sD大鼠30只，随机分为5组：正常对照组6只，模拟快速上浮脱险后1、2、4、24h各6只。用RT—PCR方法检测大鼠肝脏GRmRNA表达水平。结果GRmRNA在大鼠肝脏中多量表达；模拟快速上浮脱险后其表达水平迅速降低（P〈0．01），以后随时间延长逐渐恢复，24h基本恢复至正常。结论模拟快速上浮脱险可一过性下调肝脏GRmRNA表达。     

芍药苷对大鼠放射性肝纤维化的保护作用和机制研究

目的探讨芍药苷对大鼠放射性肝纤维化的保护作用及机制。方法建立雄性SD大鼠放射性肝纤维化实验动物模型,将大鼠随机分为正常对照组、模型组、芍药苷治疗组(20、40、80 mg·kg-1),每组10只。除正常对照组外,其余各组均制备成放射性肝纤维化模型,造模后各组每天给予相应药物灌胃。于照射后第26周末处死大鼠,检测大鼠血清中AST、ALT的活性,ELISA法测血清中TGF-β1、HA、PC-Ⅲ、LN含量;光镜下观察肝脏HE染色、MASSON染色病理改变;碱水法检测大鼠肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)含量,免疫组化法测肝脏组织TGF-β1、Smad3/4/7蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肝脏损伤和胶原纤维增生明显,其血清中AST、ALT活性明显升高,血清中TGF-β1、HA、PC-Ⅲ、LN含量明显增加,大鼠肝脏组织中Hyp含量增加,另外大鼠肝脏组织中TGF-β1、Smad3/4/7蛋白表达增加。与模型组比较,芍药苷治疗组可明显抑制大鼠血清中AST、ALT活性的升高,降低血清中TGF-β1、HA、PC-Ⅲ、LN的含量,降低肝脏组织中Hyp含量,减轻肝脏损伤程度及胶原纤维增生程度;芍药苷治疗组可减少大鼠肝脏组织中TGF-β1和Smad3/4/7蛋白表达。结论芍药苷具有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与其阻断TGF-β1/Smad信号传导通路有关。     

松花粉对酒精性肝损伤的保护功能研究

目的研究松花粉对酒精性肝损伤的保护作用。方法采用酒精复制大鼠肝损伤模型，测定肝组织的丙二醛（MDA）、甘油三脂（TG）及还原型谷光甘肽（GSH）含量；并观察肝脏的病理组织学改变。结果受试样品大鼠肝组织的MDA、TG含量均低于肝损模型组；而GSH含量高于肝损模型组；各剂量组大鼠肝脏病理改变评分值均低于肝损模型组。结论松花粉对酒精性肝损伤具有保护功能。     

大鼠肝脏撞击伤动物模型的制备及评价

目的建立一种新型大鼠肝脏钝性撞击伤模型,并进行评价。方法健康SD大鼠42只,随机分为3组(n=14)。通过增加了T型二次打击头的改良型生物撞击机,用轻、中、重3种质量的钢球分别撞击1组大鼠,复制出3组损伤程度不同的大鼠肝脏钝性撞击伤模型,即轻度致伤组、中度致伤组、重度致伤组。各组再按观察指标不同,随机平分为A组和B组。测定大鼠A组致伤前后生命体征变化及自然存活数,B组致伤前后血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)含量及致伤后腹腔内出血量。所有大鼠死亡后均进行损伤分级并进行评分。结果各组平均股动脉压致伤后均低于致伤前(P0.01),且致伤后平均股动脉压随损伤程度的增加而降低(P0.01或P0.05);各组AST、ALT含量致伤后均明显高于致伤前(P0.01或P0.05),致伤后各组AST、ALT含量均随损伤程度的增加而增高(P0.01或P0.05);各组腹腔出血量随损伤程度的增加而增多(P0.01或P0.05);各组肝脏损伤评分随损伤程度的增加而增高(P0.01)。结论各组大鼠肝脏损伤程度随钢球质量的增加而加重,分级明显。该大鼠肝脏创伤模型建模过程简单,具有稳定的肝脏损伤的伤情特点,可重复性好,损伤程度均一并可分级调节,费效比低,是一种比较理想的动物实验模型。     

氡慢性染毒致大鼠癌前病变的发生及肺组织 RAGE和S100A6蛋白的表达

目的 观察氡慢性染毒致大鼠肺组织的病理改变,以及晚期糖基化终产物受体(RAGE)和钙结合蛋白A6(A6, S100A6)蛋白的表达。方法 Wistar雄性健康大鼠整体暴露于多功能生态氡室,染毒时间约27个月,染毒结束后观察健康对照组和染毒组大鼠肺组织的病理改变,同时提取大鼠肺组织总蛋白,检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、RAGE和S100A6的表达情况。结果 在饲养及染毒过程中,健康对照组和染毒组大鼠各死亡2只,病理切片显示为心衰水肿表现,为自然死亡。存活大鼠病理切片显示肺组织呈充血水肿,炎性反应细胞浸润及肺气肿表现,其中1只大鼠出现肺泡上皮细胞的严重增生性改变,为癌前病变的一种形式。以β-actin为内参,肺组织蛋白表达检测显示,染毒组大鼠PCNA呈高表达(对照组0.0067±0.009,染氡组0.174±0.091),肺组织呈增生性改变,RAGE和S100A6蛋白在染毒组大鼠也呈现高表达(RAGE对照组0.0041±0.006,染氡组0.4372±0.291;S100A6对照组0.069±0.055,染氡组0.493±0.049),其高表达可能与肺组织的癌前病变有关。结论 氡慢性染毒可致大鼠肺组织发生癌前病变,并且诱发RAGE和S100A6蛋白的高表达。     

As_2O_3对兔移植性肝脏肿瘤模型生存素表达调控的实验研究

目的 探讨As2O3在肝动脉化疗栓塞(TACE)中诱导恶性肿瘤细胞凋亡作用与生存素之间的相关性.方法 将肝脏左、右叶分别移植VX2肿瘤模型的16只13本大耳白兔.随机平均分成2组,移植瘤术后3周,经肝动脉插管分别给予超液化碘油(UFLP)1 ml加As2O32 mg(实验组)和UFLP 1 ml(对照组).给药3周后.所有动物均处死,分别取得肿瘤组织、瘤旁组织和正常肝脏组织进行末端脱氧核苷酸转移酶-生物素dUTP切口末端标记法(TUNEL)染色观察凋亡肿瘤细胞,免疫组化染色检测生存素蛋白的表达.结果 实验组肿瘤组织中有大量呈黄色的凋亡细胞,癌旁组织及正常组织中未观察到凋亡细胞;对照组肿瘤组织、癌旁组织及正常组织均未发现细胞核内有黄色颗粒的凋亡细胞.对照组肿瘤组织生存素蛋白表达率为100%(16/16),其中强阳性12例,弱阳性4例,癌旁及正常组织中生存素蛋白表达率为0.实验组肿瘤组织生存素蛋白表达为37.5%(6/16),其中强阳性2例,弱阳性4例,癌旁及正常组织中生存素蛋白表达率同样为0.两组肿瘤组织中生存素蛋白表达率差异有统计学意义(P<0.05).同时,两组癌组织与癌旁和正常组织中生存素蛋白表达率差异有统计学意义(p<0.01).结论 As2O3通过抑制肿瘤细胞内生存素蛋白表达促进肿瘤细胞凋亡.     

束缚应激后大鼠肝脏PPARβ/δ mRNA和蛋白表达的变化

目的观察束缚应激后大鼠血甘油三脂（TG）、血糖和肝脏过氧化物酶体增殖物激活型受体（PPAR）β/δmRNA和蛋白的变化,初步探讨应激对糖脂代谢的影响及发生机制。方法健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组（C）、束缚1 w组（R1）、束缚2 w组（R2）和束缚4 w组（R4）,分别不给予应激及给予束缚应激1、2和4 w。实验结束后取大鼠血清及肝组织,全自动生化仪测定血TG和血糖水平,分别用RT-PCR和Western blot法检测肝脏PPARβ/δ的mRNA和蛋白表达水平。结果 R1、R2、R4组大鼠血清TG分别为（0.97±0.28）、（0.88±0.16）、（0.94±0.23）mmol/L,均明显高于C组的（0.59±0.09 mmol/L（P〈0.01）;血糖分别为（6.25±0.69）、（6.30±1.10）、（6.12±0.85）mmol/L,均明显高于C组的（5.18±0.54）mmol/L）（P〈0.01）。与C组相比,R1、R2、R4组肝脏PPARβ/δmRNA和蛋白表达均降低（P〈0.05或P〈0.01）。结论束缚应激后,大鼠血清TG、血糖水平升高,这种变化可能与肝脏PPARβ/δ表达降低有关。     

烧伤后大鼠骨骼肌组织泛素及泛素化蛋白表达的变化研究

为研究烧伤大鼠骼肌组织泛素（ubiquitin)及泛素化蛋白表达的变化规律，探讨烧伤后骨骼肌蛋白降解的分子机制，采用大鼠30％Ⅲ度烫伤模型，分为伤后2、6、12和24h组，每组设正常对照组，于伤后不同时间点分别测定大鼠骨骼肌孵育液中伸趾长肌蛋白降解率以及伸趾长肌组织中泛素及泛素化蛋白的表达变化。结果发现，大鼠烧伤后伸趾长肌蛋白降解率增强，尤其是肌纤维蛋白降解增强明显（P＜0．01），伤后12h增加185％，24h增加153％；伸趾长肌泛素及泛素化蛋白的表达在烧伤后各时相点均显著增加（P＜0.01)，尤以12h和24h为明显，表达增加的泛素化蛋白主要为高分子量蛋白。提示烧伤后大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢与泛素及泛素化蛋白的高表达关系密切。     

大鼠肝再生增强因子的基因克隆

目的 克隆大鼠再生增强因子（ALR）编码序列,并在原核细胞表达。方法 按文献报道大鼠再生增强因子核苷酸序列合成引物,从2周龄大鼠肝组织提取RNA,利用RT－PCR扩增大鼠肝再生增强因子基因编码区;将PCR扩增片断亚克隆到pBV221质粒,构建原核表达重组载体,导入到大肠杆菌后热诱导表达目的的蛋白。结果 从大鼠肝脏的RNA中扩增到长约400bp的ALRcDNA编码区基因,序列分析表明与文献报道一致;重组克隆经热诱导表面出分子量约15kD大小的蛋白质,与预期值一致。结论 从2周龄大鼠肝组织中成功克隆再生增强因子基因,并获得了原核细胞高效表达。     

高住高练对肥胖大鼠肝脏SREBP-1c表达的影响

目的:探讨高住高练对高脂饮食肥胖大鼠肝脏SREBP-1c表达的影响。方法:出生21天离乳SD雄性大鼠280只,肥胖造模成功后挑选160只,2周适应性训练后筛选130只,随机分为13组:对照组(同时视为低住低练0周组、低氧安静0周组和高住高练0周组),低住低练1、2、3、4周组,低氧安静1、2、3、4周组,高住高练1、2、3、4周组。用水平动物跑台进行有氧耐力运动,低住低练各组在常氧下进行速度为26 m/min、1 h/d、6 d/w的运动,分别持续1～4周;低氧安静各组每天在低氧下(氧浓度为13.6%,约相当于3500 m海拔高度)生活,自由活动,不安排训练,分别持续1～4周;高住高练各组每天在低氧下(氧浓度为13.6%)生活23 h,训练1 h,速度为21 m/min,6 d/w,分别持续1～4周(非训练日生活24 h)。对照组于正式实验开始前、安静组于相应周数后、运动组于最后一次训练后恢复24 h取材。分别采用实时荧光定量PCR技术和Western Blot技术检测大鼠肝脏SREBP-1c基因和蛋白表达。结果:相同训练模式不同周数之间比较,高住高练组大鼠肝脏SREBP-1c mRNA和蛋白表达在第1、2、4周较对照组均变化无统计学意义(P>0.05),第3周mRNA表达降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),第3周蛋白表达下降,与1、2周组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。相同周数不同训练模式之间比较,第1、4周,高住高练组肝脏SREBP-1cmRNA和蛋白表达与低住低练组和低氧安静组比较差异无统计学意义(P>0.05),第2周高住高练组SREBP-1c蛋白表达高于低住低练组(P<0.01),第3周高住高练组SREBP-1c mRNA和蛋白表达低于低氧安静组(P<0.05)。结论:3周高住高练抑制肥胖大鼠肝脏SREBP-1c mRNA和蛋白表达效果较好。     

脂联素在小鼠肝脏的高效稳定表达

目的：获得小鼠脂联素（adiponectin，ADPN）在肝脏的高效稳定表达，方法：构建含肝脏特异性启动子hAATp和增强子ApoEHCR的小鼠脂联素基因（mAd）的真核表达载体pAA-neo-mAd。以绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）为报告基因证明该载体在COS-7细胞中表达后，流体动力法（hydrodynamics-based procedure）通过尾静脉注射将其导入小鼠肝脏。通过肝脏mAdmRNA定量（半定量RT-PCR法）、免疫组织化学检测及血清脂联素水平测定（定量ELISA法）鉴定脂联素在肝脏的表达及表达效率。结果：肝组织RT—PCR的结果显示，注射后12h肝脏内即可检测到mAd mRNA的表达，且能持续表达6周以上。24h后血清脂联素水平显著升高，48h达到峰值，一直持续6周后仍明显高于正常水平。肝脏脂联素免疫组化染色呈阳性。结论：流体动力法能有效地将质粒载体pAA-neo-mAd导入小鼠肝脏，并能在小鼠肝脏高效稳定地表达重组小鼠脂联素。