多重聚合酶链反应检测生殖支原体感染

目的 建立一种敏感快速的多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）用于检测生殖支原体（Ｍｇ）。方法 性病门诊患者５１１例，正常对照５６人，分泌物（女性为宫颈，男性为尿道拭子）标作用ＮＰ－４０裂解液一步法制备模板ＤＮＡ，设计Ｍｇ种属特异性引物及功能性结蛋白基因引物，先进行标准株的特异性与敏感性试验，然后进行临床标末的ＰＣＲ扩增反应。结果两对引物良好的特异性，对Ｍｇ标准株模板敏感性可达１０＾－６μｇ，临床标本检测，广     

PCR检测HBV-DNA不同试剂和方法的比较

本文对目前部分市售的ＨＢＶＰＣＲ试剂进行了灵敏度和检测率的测定，并在检测ＨＢＶ低水平感染中，用ＰＣＲ和斑点杂交作了比较。结果不同公司试剂盒的ＨＢＶ－ＤＮＡ最低检测浓度从０．１ｆｇ到１ｐｇ不等，同一公司不同批号的ＨＢＶ－ＤＮＡ最低检测浓度也从１００ｆｇ到１００ａｇ不同，差达１０３～１０４倍。ＰＣＲ和斑点杂交在三组不同乙肝标志组中的阳性检测率为ＨＢｓＡｇ（＋）ＨＢｅＡｇ（－）抗ＨＢｅ（－）组：ＰＣＲ７０％，斑点杂交４６．４％；ＨＢｓＡｇ（＋）ＨＢｅＡｇ（－）抗ＨＢｓ（＋）组：ＰＣＲ３５．７％，斑点杂交２．９％；ＨＢｓＡｇ（－）抗ＨＢｅ（＋）抗ＨＢｓ（＋）／ＨＢｃ（＋）组：ＰＣＲ１６．６％，斑点杂交３．３％。三组检测率均Ｐ＜０．０１。因此，目前市售的ＨＢＶＰＣＲ试剂必须标化，ＰＣＲ更适合于检测ＨＢＶ低水平的感染     

乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞及血清内HBV－DNA的检测及其意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测急性和慢性乙肝患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率为６３．８％。其中，急肝患者阳性率为７８．６％；慢迁肝患者为５６．３％；慢活肝患者为５７．１％。ＰＢＭＣ中ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ和ｅ抗原有一致性，但ＨＢｅＡｇ阴性者中也有部分患者的ＰＢＭＣ中有ＨＢＶ－ＤＮＡ存在。本法消除了血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＰＢＭＣ自身ＤＮＡ的干扰，并且与传统分子杂交方法相比，工作量大大减少。     

用8—羟基喹啉作掩蔽剂2—（8‘—羟基喹啉—5’—磺酸—7‘—偶氮）—变色 …

目的：建立２－（８‘－羟基喹啉－５’－磺酸－７’－偶氮）－变色酸（８Ｑ５ＳＡＣ）血清钙测定法。方法 以８Ｑ５ＳＡＣ作显色剂，８－羟基喹啉掩蔽镁，在三乙酸胺缓冲介质中以分光光度法测定血清钙。结果：方法学线性范围０－４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，平均回收率１００．８５％，批内ＣＶ０．８４％￣１．２４％，批间ＣＶ１．５２％￣１．５６％，与ＯＣＰＣ法对照，ｒ＝０．９９５，Ｐ〉０．５，与ＭＴＢ法对照，ｒ＝０．９８９，     

抗钙调素自身抗体测定方法的建立及应用

自人脑提取钙调素（ＣａＭ），制备兔抗人ＣａＭ抗体，建立了检测抗ＣａＭ自身抗体的间接酶联免疫吸附试验方法，批内、批间误差变异系数均＜９．０％，抗ＣａＭ阳性血清用ＣａＭ吸收后吸光度值下降９０％。抗ＣａＭ抗体活性用Ｕ／ｍｌ表示，正常对照（ｎ＝１００）为７．５６±２．６８Ｕ／ｍｌ，以ｘ＋２ｓ为正常上限，＞１２．９２Ｕ／ｍｌ为阳性。各种自身免疫病患者抗ＣａＭ的水平与阳性率依次为系统性红斑狼疮（ｎ＝３２）：２６１５±１１．７Ｕ／ｍｌ，５１．１％；类风湿性关节炎（ｎ＝２８）：１３．６１±９．７Ｕ／ｍｌ，２１．４％；桥本甲状腺炎（ｎ＝２５）：５９．０７±９８．４Ｕ／ｍｌ，６０．０％；甲状腺机能亢进（ｎ＝３４）：３７．７６±８４．７Ｕ／ｍｌ，４７．１％；肝炎（ｎ＝４３）：２３．１７±６．７Ｕ／ｍｌ，４４．２％。均显著高于正常对照（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。抗ＣａＭ抗体与抗核抗体常同时存在，但与抗甲状腺球蛋白、抗甲状腺微粒体自身抗体无显著相关关系（Ｐ＞０．０５）。     

脑瘫患儿CT改变与巨细胞病毒感染关系的初步研究

用多聚酶链反应法（ＰＣＲ）检测７４例脑瘫患儿尿中巨细胞病毒ＤＮＡ（ＣＷＶ－ＤＮＡ），ＣＭＶ－ＰＣＲ阳性率为５４．１％，同时行ＣＴ检查，其中４７例（６３．５％）异常，在ＣＴ异常组中ＣＭＶ－ＰＣＲ阳性率为６３．８％，而ＣＴ正常组阳性率为３６．５％，两者比较差异有显著性。（Ｐ＜０．０５）。示ＣＭＶ感染可能与婴儿脑损伤有关，且在一部分患儿可引起解剖性损伤。     

改良凝胶吸附法制备的凝血酶原复合物

采用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ凝胶从人血浆中吸附制备经Ｓ／Ｄ病毒灭活处理后的ＰＣＣ制品，ＤＥＡＥ洗脱液经Ｓ／Ｄ处理（０．３％磷酸三丁脂和１％Ｔｗｅｎ８０，６～８ｈ，２４℃）后，使所加入具有感染剂量（＞１０６）的标志病毒ＶＳＶ、Ｓｉｎｄｂｉｓ、ＨＩＶ均被有效灭活；ＰＣＣ制品中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的比活性（Ｕ／ｍｇ）分别为０．７９９±０．３４９、０．３４３±０．２５２、０．７４７±０．３４８、０．５８０±０．１９９（ｎ＝７），均比传统ＰＣＣ提高１．５～２．５倍（其中ＦⅨ∶Ｃ的比活性提高有显著性，ｔ＝３．１０５，Ｐ＜０．０１），同时也优于国内同类制品（ｔ＝２．３６０，Ｐ＜０．０５），对其杂蛋白（ＡＴ－Ⅲ、Ｆｎ、ＰＫＡ、Ｐｌｇ、ⅧＲ∶Ａｇ抗Ａ、抗Ｂ凝集素）的分析也反映出ＰＣＣ纯度有所提高。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＩＥ、ＣＩＥ电泳图谱及ＨＰＬＣ层析图谱证实上述结果，ＰＣＣ中ＴＮＢＰ残留量≤１０μｇ／ｍｌ，Ｔｗｅｅｎ８０残留量≤１００μｇ／ｍｌ，均在安全范围内。     

自身免疫病患者血清胞间粘附分子检测的意义探讨

目的了解进行性硬皮病（ＰＳＳ）、类风湿性关节炎（ＲＡ）、系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）血清可溶性细胞间粘附分子（ｓＩＣＡＭ）１和３的水平及与病情的关系。方法用进口酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）试剂盒分别检测活动期ＰＳＳ、ＲＡ、ＳＬＥ患者与正常人血清ｓＩＣＡＭ－１以及ＰＳＳ、ＲＡ患者、正常人血清ｓＩＣＡＭ－３的含量，比较其水平的差异。结果正常对照组（２０例）ｓＩＣＡＭ－１和ｓＩＣＡＭ－３水平分别为２０２．３５±７４．１２μｇ／Ｌ和３６．１８±１４．６８μｇ／Ｌ；ＰＳＳ组患者（３０例）分别为４１３．９２±１４４．５３μｇ／Ｌ和４７．５０±２６．６８μｇ／Ｌ；ＲＡ组患者（２５例）分别为４０５．８８±１８１．１６μｇ／Ｌ和２９．２５±１１．６４μｇ／Ｌ；ＳＬＥ组患者（１９例）ｓＩＣＡＭ－１的水平为３８９．０６±２４１．９４μｇ／Ｌ。各患者组的ｓＩＣＡＭ－１水平与正常对照组比较差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）；ＰＳＳ、ＲＡ组患者与正常对照组ｓＩＣＡＭ－３测值相互间差异无显著性，但ＰＳＳ与ＲＡ组患者间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论ｓＩＣＡＭ－１与自身免疫病的活动性呈一致性，ｓＩＣＡＭ－３在不同的自身免疫病有不同的表现     

肺功能在评估COPD患者运动能力及指导康复治疗方面的作用

目的：了解慢阻塞性肺病（ＣＯＰＤ）患基本肺功能对其运动能力的影响。方法：测量肺功能及运动试验时每千克体重最大氧摄取量（ＶＯ２ｍａｘ／ｋｇ）。结果：ＶＯ２ｍａｘ／ｋｇ＝１５．３７×ＤＬＣＯ（肺一氧化碳弥散量）＋２８．１１×ＥＦＶ１．０／ＶＣ（一秒量与肺活量比值）－７．５６×Ｓ（Ｒ＾２＝０．９５９ Ｐ〈０．０１Ｓ：男＝１女＝２）。结论：ＣＯＰＤ患运动能力降低,肺功能障碍是限制ＣＯＰＤ患运动能力的     

全自动凝血分析仪检测 ２ 种诱导剂诱导的血小板聚集 试验参考区间的建立

摘要：目的 基于全自动凝血分析仪血小板聚集试验通道，建立表观健康人群血小板最大聚集率（ＭＰＡＲ）的参考区间。方法 募集表观健康人 １３４ 例，采用 Ｓｙｓｍｅｘ ＣＮ３０００ 和 Ｓｙｓｍｅｘ ＣＳ５１００ 全自动凝血分析仪进行不同终浓度二磷酸腺苷（ＡＤＰ）和花 生四烯酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集试验检测。根据美国临床和实验室标准协会（ＣＬＳＩ）ＥＰ２８ Ａ３ｃ 文件，按照非参数法计算 ＭＰＡＲ 的参考区间。结果 不同终浓度 ＡＤＰ 和 ＡＡ 诱导的 ＭＰＡＲ 重复性为 ２．０３％ ～ ４．９２％。不同终浓度 ＡＤＰ 和 ＡＡ 诱导的 ＭＰＡＲ 在不同性别和年龄组之间差异均无统计学意义（Ｐ 均＞０．０５）。２ 个检测系统各自 ＡＤＰ 终浓度 ２ 和 ５ μｍｏｌ ／ Ｌ 之间、ＣＳ 系列 ＡＡ 终浓度 ０．５ 和 １．０ ｍｍｏｌ ／ Ｌ 之间 ＭＰＡＲ 差异均有统计学意义（Ｐ 均＜０．０５）。除 ＡＡ 终浓度 １．０ ｍｍｏｌ ／ Ｌ（Ｚ ＝ －２．３１９，Ｐ ＝ ０．０２０），余不同终浓度诱导的 ＭＰＡＲ 在 ２ 个系统间差异均无统计学意义（Ｐ 均＞０．０５）。ＡＤＰ 终浓度 ２、５ 和 １０ μｍｏｌ ／ Ｌ 诱导的 ＭＰＡＲ 生物参考区间在 ＣＮ３０００ 分别为 ４５．４％ ～ ９５．７％、７２．０％ ～ ９４．３％和 ７６．３％ ～ ９５．１％，在 ＣＳ５１００ 分别为 ４５．３％ ～ ９３．７％、 ７３．１％ ～ ９９．１％和 ７５．９％ ～ ９７．６％；ＡＡ 终浓度 ０．５ 和 １．０ ｍｍｏｌ ／ Ｌ 诱导的 ＭＰＡＲ 参考区间在 ＣＮ３０００ 分别为 ７２．１％ ～ ９５．７％和 ８１．０％ ～ ９５．９％，在 ＣＳ５１００ 分别为 ７７．１％ ～ ９６．９％和 ８１．１％ ～ ９９．５％。结论 本研究初步建立了 ＣＮ３０００ 和 ＣＳ５１００ 不同终浓度 ＡＤＰ 和 ＡＡ 诱导的血小板聚集试验 ＭＰＡＲ 参考区间。