某地区地中海贫血的分子流行病学调查

目的调查广东韶关地区α、β地中海贫血基因型及构成比。方法采用Gap-PCR检测--SEA、-α3.7、-α4.2三种常见的α地贫基因,PCR-RDB检测17种常见的β地贫基因。结果共检出地贫基因携带者1579例,其中α地贫982例(35.68%),8种基因型。β地贫597例(21.69%),13种基因型。αβ复合型地贫54例(1.96%)。结论广东韶关地区α地贫以αα/--SEA为主,β地贫以CD41-42(-TCTT)、IVS-Ⅱ-654(C-T)为主,为进行遗传咨询和制定地中海贫血预防措施提供了科学依据。     

2506例不孕不育患者地中海贫血基因分型分析

目的 调查某院生殖医学中心就诊的不孕不育患者中地中海贫血基因的携带情况、基因突变类型及构成比,制定有效可行的地中海贫血防治计划,有效降低地中海贫血的发病率,为达到“优孕”的目的提供参考.方法 采用聚合酶链反应(PCR)法、跨越断点PCR方法和导流杂交技术对某院就诊地中海贫血血液学筛查阳性的不孕不育患者进行地中海贫血基因分析.结果 2 506例疑似病例中检出942例地中海贫血基因携带者,检出率为37.59％;其中654例为α地中海贫血基因携带者,占69.43％,检出11种α地中海贫血基因型,以--SEA/αα(72.32％)、-α3.7/α α(15.75％)和-α 4.2/α α(3.67％)三种缺失型α地中海贫血基因最常见;β地中海贫血基因携带者占28.77％,15种β地中海贫血基因突变类型中共检出13种,突变频率较高的前3位依次为IVS-2-654(38.75％)、CD41-42(29.89％)、CD17(10.70％);复合型地中海贫血基因携带者占1.80％,检出12种复合型地中海贫血基因类型,以-α3.7/α α复合CD17/N最多见,占23.53％.结论 安徽医科大学解放军174临床学院生殖医学中心就诊的不孕不育患者地中海贫血发生率较高,α地中海贫血以缺失型-SEA/αα基因型最为常见,β地中海贫血则以IVS-2-654 (C-T)位点的突变最为常见.应加强对不孕不育患者地中海贫血血液学筛查和基因诊断,以预防重型地中海贫血患儿的出生,达到“优孕”的目的.     

广东省清远地区地中海贫血基因分型情况分析

目的了解和分析本地区地贫基因型的分布情况,为临床提供依据,防止和降低重型地贫儿的出生率。方法α-地中海贫血基因分型检测应用跨跃断裂点PCR(GAP-PCR)的技术原理进行检测,即在待检的缺失基因片段两端设计引物进行扩增,再通过琼脂糖凝胶电泳,根据电泳片段大小判断检测样品的基因型。β-地中海贫血基因检测采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术,按照碱基互补配对原则,通过分子杂交和显色反应,从而确定待检样品的基因型。结果 778例疑为地中海贫血患者标本,共检出地贫731例,检出率为94%。其中α-地贫基因缺失539例,占73.7%,缺失类型主要以αα/--SEA(--SEA缺失杂合子)为主,共检出485例,占阳性率的66%;-α3.7/αα(-α3.7缺失杂合子)检出27例,占阳性率的3.7%;αα/-α4.2(-α4.2缺失杂合子)检出8例;-α3.7/--SEA(-α3.7、--SEA双重缺失杂合子)检出8例,其他基因型较少检出;β-地贫基因突变192例,占26.3%,突变类型主要以CD41-42位点的单突变杂合子为主,检出87例,占阳性率的11.9%,单突变纯合子2例;其次为IVS-Ⅱ-654位点的单突变杂合子,检出53例,占阳性率的7.3%;其余突变类型依次为CD17、-28、CD71-72、CD43的单突变杂合子,双突变杂合子8例。患者中婴幼儿225人次,检出地贫186例,检出率82.6%;婚检和孕检553人次,检出地贫545例,检出率98.6%。结论本地区的地贫检出率较高,主要以α-地贫基因缺失为主,其中又以婚、孕检人群为主。由此可见对婚、孕检人群进行地贫基因检测可以更好的防止和降低重型地贫儿的出生率,从而减轻社会和家庭的负担,实现优生优育。     

不孕不育患者地中海贫血基因分布特征及HbA、HbA2、MCV、MCH参数分析

目的 了解不孕不育患者地中海贫血(地贫)基因携带情况和分布特征,分析红细胞参数在地贫诊断中的应用价值.方法 对受检者进行血常规、血红蛋白电泳和地贫基因检测(PCR+膜杂交法),同时设置本院同期体检健康者作为对照组,分析受检者不同类型地贫基因携带情况和分布特征,分析不同类型地贫基因携带者HbA、HbA2、MCV、MCH的变化情况.结果 3 106例受检者中,共检出α和β地贫基因携带者299例,占比9.63％,其中α地贫196例,β地贫102例,复合型地贫1例,最常见类型为--SEA/α α、CD41-42(-TCTr)和IVS-2-654(C→T).血红蛋白电泳检测结果显示,α地贫、β地贫及健康对照组HbA含量分别为(97.75±0.19)％、(94.07±0.25)％和(97.15±0.13)％,与健康对照组相比,差异均有统计学意义;HbA2含量分别为(2.25±0.21)％、(5.09±0.33)％和(2.85±0.14)％,与健康对照组相比,差异均有统计学意义.血常规检测结果显示,α地贫、β地贫及健康对照组MCV分别为(73.56±5.35) fl、(64.68±3.18)n和(87.47±4.29) fl,与健康对照组相比,差异均有统计学意义;MCH含量分别为(23.37±1.53) pg、(20.42±1.27) pg和(30.25±2.04) pg,与健康对照组相比,差异均有统计学意义.结论 不孕不育患者地贫基因携带占比9.63％,最常见类型为--SEA/αα、CD41-42(-TCTr)和IVS-2-654(C→T);在不同类型地贫携带者中,HbA、HbA2、MCV、MCH均有不同程度变化,可在一定程度上作为地贫的筛查指标.     

175例儿童地中海贫血的基因诊断分析

目的 探讨深圳地区儿童α和β地中海贫血（简称地贫）的基因表型特征。方法 对有不同程度贫血或黄疸的儿童以红细胞休克-管定量法进行地贫筛查，并对检出的部分地贫患儿共175例进行基因分析，即采用跨断裂点（gap-PCR）PCR技术和PCR反向斑点杂交技术（PCR／RDB）分别对α地贫和β地贫进行基因检测。结果 全部病例中α地贫70例，占40．0％，其中标准型α地贫（即α地贫）54例，基因型为α α/--^SEA，HbH病16例；β地贫105例，占60．0％，共检出9种基因突变类型。其中重型β地贫14例，占β地贫患儿的13．3％。几种常见β地贫基因频率依次为CD41-42（-CTTT）0．430，IVS-2nt654（C→T）0．316，CDl7（A→T）0．105，TATA box nt-28（A→G）0．053，CD43（G→T）0．035等。结论 深圳地区儿童地贫基因频率与广东省其他地区大致相似。人群中儿童地贫检出率较高，广泛开展遗传咨询和地贫的产前基因诊断，对指导优生优育具有重大意义。     

某省户籍孕妇地中海贫血的产前筛查及产前诊断的实验研究

目的探讨贵州省户籍孕妇地贫的分子缺陷情况,探索可用于临床一线的地贫产前筛查指标和产前诊断技术,并将其应用于贵州省地贫孕妇的产前筛查和产前诊断中,以降低我省重症地贫患儿出生率,提高人口质量。方法选择在贵州省人民医院进行产前检查孕18周以前的贵州省户籍孕妇1089例,分析红细胞指标(RBC、Hb、MCV、MCH)和血红蛋白电泳(Hb A2)值,异常者纳入疑似病例;筛查出双方均有地贫表型阳性的夫妇,提取基因组DNA,gap-PCR法同时检测-α3.7、-α4.2和--SEA/αα3种最常见的α-地贫缺失突变类型,RDB法检查中国最常见的17种β-地贫突变基因和3种α-地贫突变基因,确定基因型;双方确定为同型地贫的夫妇,经知情同意后,孕妇于16~24周行羊膜穿刺抽取羊水20 m L,常规提取胎儿基因组DNA,用上述基因检测方法检测胎儿是否地贫。如胎儿为轻型地贫,可向孕妇提出合理化建议。如胎儿为中重型地贫,建议孕妇终止妊娠;分娩后取胎儿组织提基因组DNA,检测地贫基因型以进一步证实产前诊断的结果。结果 1红细胞指标和血红蛋白电泳初步筛查地贫孕妇78例,初筛阳性率7.16%(78/1089);基因诊断确诊53例,筛查阳性确诊率67.9%(53/78)。2两种地贫孕妇的RBC均高于正常孕妇(P<0.01)。3两种地贫的Hb、MCV、MCH均低于正常孕妇(P<0.01)。4α-地贫孕妇的Hb高于β-地贫孕妇(P<0.01),而Hb A2低于β-地贫孕妇(P<0.01)。5α-地贫20例,发生率1.84%(20/1089),β-地贫33例,发生率3.03%(33/1089)。6本实验中贵州户籍孕妇α-地贫最常见的基因型是--SEA/αα,β-地贫最常见的基因型是17/N。7 7例孕妇羊水穿刺检测胎儿地贫基因,6例与胎儿脐血检测结果一致(1例仍在妊娠)。结论 1孕早中期的孕妇进行红细胞指标和血红蛋白电泳检查可以初步筛查地贫并初步区分地贫类型。2贵州省户籍孕妇β-地贫发生率较α-地贫发生率高,β-地贫最常见的基因型是17/N,α-地贫最常见的基因型是--SEA/αα。3地贫羊水基因诊断符合率高,我省孕妇可以将地中海贫血的筛查作为常规产前检查。     

广州市番禺区城镇人群α和β地中海贫血的基因型分析

目的:分析本地区人群地中海贫血的分子遗传学特征,为有效诊断和预防中重型患者提供客观依据。方法:对2009年1月1日～2011年12月31日来本院门诊和住院部的就诊者进行地中海贫血(地贫)筛查,以血常规MCV(平均红细胞体积)和/或血红蛋白电泳进行初筛,阳性者进行基因分析。α基因检测缺失型和非缺失型的缺陷、β基因检测17种点突变。结果:α地贫基因型以--SEA/αα为主;α地贫2在轻型携带者(α地贫1+α地贫2)中占26.9%;非缺失型的基因缺陷占α地贫2的26.8%。β地贫中β41-42/β的比例最高,其次为β654/β、β-28/β和β17/β。281名β地贫携带者中有40人检出复合α基因的突变。结论:α地贫2和非缺失型α地贫在本地区的比例较高,应注意HbH的诊断和咨询。初筛为β地贫者应进行α基因检测。     

1031例广州市育龄人群地中海贫血基因诊断分析

目的了解广州市育龄人群中地中海贫血基因突变类型和频率,为优生优育提供参考和指导。方法采用血液学初步筛查地中海贫血高危人群,高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）鉴别地贫亚型,GAP-PCR和反向斑点杂交技术（Reversedotblot,RDB）诊断d、13地贫基因。结果1249例初筛阳性受检者确诊为地贫1031例,其中α地贫700例,阳性率为7．80％;β地贫288例,阳性率为3．21％;α复合β地贫43例,阳性率为0．48％。结论广州市地中海贫血发生率较高,以——WEA和CD41～42基因型最常见,其α、β地贫基因型分布符合广东省的基本特点,对育龄人群进行地贫筛查和基因诊断对提高当地人口素质有重要意义。     

MLPA与基因测序技术检测联用检测地中海贫血基因缺陷分析

目的对深圳地区地中海贫血(简称:地贫)人群及正常人群进行HBA、HBB基因突变的筛查,旨在提高地贫基因确诊率,发现传统基因诊断技术易漏检的地贫相关基因突变类型。方法选取2009年4月～2010年10月送检本实验室疑似地中海贫血基因缺陷血样100例,采用MLPA技术和基因测序技术联合检测。结果 (1)成功检测出β合并α地贫双重杂合子;(2)β地贫中,41-42杂合子基因型占53.57%,β合并α地贫双重杂合子,占28.6%,α1地贫中一SEA/αα基因型占96.9%;(3)α2地贫以αcs/αα、α3.7/αα和αWS/αα基因型居多;(4)进一步经MLPA检测后另发现α地贫缺失型及β地贫β基因缺失型占12%。结论联合应用MLPA技术、PCR技术和基因测序技术,可以提高地中海贫血基因缺陷检测的准确率,为本病家系成员的遗传咨询和产前基因诊断提供准确的依据。     

某区208例地中海贫血基因检测结果的分析

目的检测208例就诊者α,β-地中海贫血基因,探讨渝北区儿童、孕妇和其他人群α,β-地中海贫血的基因突变类型和频率。方法采用PCR+膜反向点杂交技术(RDB)检测缺失型α-地贫(--SEA、-α3.7、-α4.2)、2种突变型α-地贫(CS、QS)及11种突变型β-地中海贫血(41-42M、CD_(43)、IVS-II-654、CD_(17)、CD_(14-15)、-28、-29、CD_(71-72)、βE、IVSI-1、CD_(27-28))。结果208例就诊者中地中海贫血基因变异总变异率达到29.81%(62/208)。其中α-地贫基因变异率12.50%(26/208),β-地贫基因变异率15.38%(32/208),αβ复合型地贫基因变异率为0.48%(1/208)。儿童25.64%(20/78),孕妇29.57%(34/115),其他人群53.33%(8/15)。结论渝北区儿童α-地中海贫血和β-地中海贫血基因变异率较高,应开展地贫基因筛查,特别把好婚、孕、产检三道关口地贫基因筛查,防止重型地中海贫血患儿的出生,提高人口素质。     

汕尾市育龄人群中α、β地中海贫血基因型的分布调查

目的 了解汕尾市育龄人群中α、β地中海贫血基因型的分布情况.方法 采用整群抽样方法选择2013年1月1日至2013年12月31日各地区部分住院分娩和引产的孕产妇、配偶共计1200例作为研究对象,分别进行α-地中海贫血和β-地中海贫血调查.结果 在1200份血液标本中共计检测出6种α-地中海贫血基因型,共计62例,63个等位基因,α-地中海贫血基因携带率为5.25％（63/1200）.其基因型构成比：-a3.7/aa 31个,占总数的49.21％;-aSEA/aa 18个,占总数的28.57％;-a4.2/aa 7个,占总数的11.11％;-aTHAI/aa 2个,占总数的3.17％;--SEA/--SEA 3个,占总数的4.76％;--aCSa/aa2个,占总数的3.17％.有13例患者检测出携带β-地中海贫血基因,β-地中海贫血基因携带率为1.08％.基因类型共有5种,其构成比：IVS-2-654（C→T）和-28（A→G）各23.08％,CD41/42（-TCTT）30.77％,CD17（A→T）15.38％,βECD26（C→A）7.69％.结论 汕尾市区α-地中海贫血基因携带率和β-地中海贫血基因携带率从整个省份来讲相对较低,但分析自身数据来看携带率还是较高,主要发生在遗传背景较复杂的地区,并主要以本地人群为主.     

孕前优生健康检查中地中海贫血筛查的技术方案

目的探讨孕前优生健康检查中新婚待育夫妇地中海贫血筛查在出生缺陷干预应用中的意义,为预防和减少地贫病患儿的出生提供依据。方法双方均为潮汕平原地区户籍的孕前优生健康检查对象12092例,所有样品均采用MCV法进行初筛,以静脉血平均红细胞体积（MCV≤80fL）作为诊断地贫的阳性参考指标。再应用Gap—PCR和反向点杂交技术（RDB—PCR）对部分样品进行仪地贫基因和B地贫基因定型。结果在1679例（MCV≤80fL）血标本中检出7种α-地贫等位基因（染色体）942例,检出9种β-地贫等位基因（染色体）482例,计算上10413例MCV阴性α-地贫基因推算数205例和10413例MCV阴性-β地贫基因推算数46例,则潮汕平原地区人群α-基因携带率为9．49％（1147／12092）,β-基因携带率为4．37％（528／12092）。结论新婚夫妇地中海贫血系统筛查及基因诊断能及时发现各类地贫异常患者,对预防出生缺陷有着重要意义。     

诊断梅毒螺旋体感染中ELISA法的检验分析

目的 探讨诊断梅毒螺旋体感染中ELISA法的检验分析效果.方法 收集我院2014年8月至2015年8月入院的70例接受疑似梅毒螺旋体感染治疗的患者,分别对所有患者采用梅毒螺旋体ELISA试验(ELISA法)及快速血浆反应素试验(RPR法)进行检测,比较两种方法的检测结果以及诊断效能等.结果 临床确诊梅毒患者50例,非患者20例;患者RPR法检测阳性43例(61.4％),检测阴性27例(38.6％);患者ELISA法检测阳性47例(67.1％),检测阴性23例(32.9％);ELISA法灵敏度90.0％,漏诊率10.0％,特异度93.3％,误诊率6.7％,正确指数83.3％;RPR法灵敏度80.0％,漏诊率20.0％,特异度85.0％,误诊率15.0％,正确指数65.0％;ELISA法的灵敏度、特异度及正确指数均高于RPR法;ELISA法的漏诊率及误诊率均低于RPR法.结论 诊断梅毒螺旋体感染中ELISA法的检验分析效果显著,具有临床诊断借鉴意义.     

1826例育龄期妇女地中海贫血筛查结果分析

目的了解新兴县育龄期妇女中地海贫血的发生情况,充分认识地中海贫血筛查在婚检、孕检、产检的重要意义。方法对1826例育龄期妇女进行地中海贫血初筛,并应用法国Sebia全自动电泳分析系统进行血红蛋白电泳,通过检测Hb各组分的含量,初步分为属于α地贫或β地贫,再通过基因诊断确诊。结果1826例血标本中,检出地中海贫血及地中海贫血基因携带者203例,占11．12％。结论广东省云浮市新兴县属地中海贫血高发区,因此开展婚前、产前检查十分重要,对降低出生缺陷,提高出生人口素质,具有十分重要而积极的社会意义。