凋亡相关基因及其与喉癌关系的研究进展

细胞凋亡也称为程序性细胞死亡,是指在生理或病理条件下,由基因调控的细胞主动程序化死亡过程。细胞凋亡途径的缺陷导致许多疾病(神经退行性疾病、恶性肿瘤等)出现[1]。细胞凋亡功能障碍是恶性细胞的共同特征,同时也被认为是肿瘤对化疗药物形成耐药性的因素[2]。喉癌是一种侵袭性致死性的恶性肿瘤,对多种凋亡刺激因子具有一定抵抗作用,其不良预后与凋亡抑制相关[3-4]。本文旨在通过综述细胞凋亡相关基因对喉癌发生、发展及预后的影响,为研发抗喉癌的新型药物提供科学依据。现就几种重要的喉癌细胞凋亡相关基因的研究进展作一综述。     

靶向survivin基因的RNAi诱导喉癌Hep 2细胞凋亡的研究

目的通过构建RNAi表达载体,转染喉癌细胞株Hep 2,观察其对survivin表达的抑制作用。方法构建针对survivin基因的干扰载体,用脂质体转染喉癌细胞Hep 2,分析干扰载体对survivin表达的抑制情况,检测细胞凋亡。结果survivin在喉癌细胞Hep 2中呈高表达,其基因序列与GenBank序列对比一致,干扰载体pGensil/survivin能抑制survivin的表达,抑制率为68%,并诱导了喉癌细胞的凋亡。结论针对survivin的小分子RNA可以有效抑制喉癌细胞Hep 2中survivin蛋白的表达,并促进喉癌细胞凋亡。     

肝癌及其癌旁组织中细胞凋亡抑制蛋白survivin的表达

目的：分析细胞凋亡抑制蛋白survivin在原发性肝癌（HCC）及其癌旁组织中的表达,探讨其在肿瘤血管形成和抵抗肿瘤血管内皮细胞凋亡中的作用。方法：采集HCC癌组织、癌旁组织和正常肝组织标本,通过免疫组织化学方法分析survivin蛋白表达阳性率与HCC病理参数的关系,采用流式细胞术分析survivin蛋白在不同组织中的表达水平,用荧光定量PCR方法分析不同组织中survivin基因的表达水平。结果：survivin蛋白在肝癌组织中表达水平与门静脉癌栓的形成有关联（P<0.05）,与肿瘤大小、包膜、甲胎蛋白（AFP）水平及HCC病理分期均无关联（P＞0.05）;流式细胞术结果,肝癌组织中survivin蛋白表达水平高于癌旁组织和正常肝组织（P<0.05）,癌旁组织中survivin蛋白表达水平高于正常肝组织,但差异无统计学意义（P＞0.05）;荧光定量PCR检测,survivin基因只在肝癌组织中表达,在癌旁组织和正常肝组织中无表达,其表达水平组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：细胞凋亡抑制蛋白survivin在肝癌组织中表达水平较高,但在癌旁组织中检测不到其基因的表达,survivin蛋白可能是通过旁分泌作用从肝癌病变处进入癌旁组织细胞中发挥抑制细胞凋亡的功能。     

喉癌细胞周期各时相的细胞凋亡检测及意义

目的:探讨细胞周期各时相的细胞凋亡在喉癌发生、发展及预后中的作用。方法:结合387例喉鳞癌患者的随访资料,应用流式细胞仪(FCM)双参数分析和脱氧核苷酸原位末端标记(TUNEL)技术,检测15例声带息肉和387例喉鳞癌细胞周期各时相的细胞凋亡。结果:喉鳞癌组细胞凋亡明显低于声带息肉组(P<0.05),而且主要由G0G1期细胞凋亡的下降所引起;细胞周期各时相的细胞凋亡和肿瘤的临床分型、临床分期及T分级无显著性相关;高分化鳞癌和中分化鳞癌的细胞凋亡未见显著性差异,但是低分化鳞癌S期、G2M期和总的细胞凋亡指数明显增加(P<0.05);5年内死亡组与复发转移组的S期、G2M期和总的细胞凋亡指数明显增加(P<0.05);5年内死亡组与复发转移组G0G1期的细胞凋亡指数明显高于存活5年以上组和未复发转移组(P<0.05),而与声带息肉组无明显差异。结论:G0G1期细胞凋亡的明显下降是喉癌发生过程中的一个早期事件;总的细胞凋亡指数的变化并不能准确反应喉癌的预后;在综合考虑细胞凋亡与细胞周期因素的条件下,S期、G2M期和总的细胞凋亡指数的明显增加可以作为喉癌恶性度高、预后不良、需要辅助治疗的客观指标。     

顺铂诱导的喉癌细胞凋亡及其对细胞周期的影响

目的 探讨顺铂对喉癌Ｈｅｐ２细胞株诱导细胞调恨的作用,为抗肿瘤药物的筛选和用药方式提供理论依据。方法 体外培养的Ｈｅｐ２细胞与不同浓度顺铂作用２小时,利用充式细胞仪,荧光显微镜和ＤＮＡ凝胶电泳技术,研究不同时间细胞凋亡的发生,形态学改变和对细胞周期的影响。     

凋亡相关基因(Bcl-2)蛋白在喉癌组织中的表达及其临床意义

目的了解13,2,1-2基因蛋白在喉癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法对组织中的Bcl-2基因蛋白的表达进行了观察,其中喉癌40例,喉癌旁组织20例,喉正常黏膜组织12例。同时与临床相关资料进行了对比研究。结果喉癌组织中Bcl-2基因蛋白表达明显高于喉正常黏膜。Bd-2基因蛋白表达与颈淋巴结转移呈正相关,与临床分期和病理学分级无关。结论Bcl-2基因蛋白过量表达在喉癌的发生发展中起重要作用,可以作为判断喉癌生物学特性的参考指标。     

膀胱癌中ICE表达及其与细胞凋亡的关系

探讨白细胞介素 - 1β转化酶 (ICE)在膀胱癌发病中的作用。方法 :应用免疫组化方法检测ICE在2 1例正常膀胱组织 ,6例膀胱乳头状瘤和 72例膀胱移行细胞癌组织中表达 ;应用原位凋亡检测TUNEL法测定膀胱癌中细胞凋亡指数。结果 :膀胱癌ICE表达显著减少 ,但与肿瘤病理分期、分级、复发之间均无相关性。膀胱癌中ICE强阳性表达者 ,凋亡指数增高。结论 :ICE异常表达参与膀胱癌发生过程 ,但其不是膀胱癌有价值的独立预后指标。     

喉癌细胞周期和细胞凋亡的同步检测及意义

目的：检测喉鳞癌细胞的细胞周期变化和细胞周期各时相细胞凋亡情况,探讨细胞周期的变化和细胞周期各时相的细胞凋亡在喉癌发生、发展及预后中的作用。方法： 应用流式细胞仪双参数分析结合脱氧核苷酸原位末端标记（TUNEL）技术,检测15例声带息肉和387例喉鳞癌细胞周期和细胞周期各时相的细胞凋亡。结果：与声带息肉组比较,喉鳞癌组在G₀G₁期细胞构成比增加,但差异无显著性（P>0.05）,S期和G₂M期细胞构成比无明显变化,其细胞凋亡指数明显低于声带息肉组（P<0.05）,而且主要是由于G₀G₁期细胞凋亡的下降所引起;低分化鳞癌较高、中分化鳞癌G₂M期细胞构成比显著性增加,S期、G₂M期和总的细胞凋亡指数反而明显增加（P<0.05）;5年内死亡组与复发转移组的G₂M期构成比显著性增加,S期、G₂M期和总的细胞凋亡指数明显增加（P<0.05）;存活5年以上组和未复发转移组G₂M期细胞构成比下降明显,G₀G₁期和总的细胞凋亡指数亦较声带息肉组明显下降（P<0.05）。结论：肿瘤G₂M期细胞比例显著性增加,S期、G₂M期和总的细胞凋亡指数的明显增加可以作为喉癌恶性度高、预后不良、需要辅助治疗的客观指标。     

草苁蓉多糖提取物诱导人喉癌Hep2细胞凋亡的实验研究

目的:探讨草苁蓉多糖提取物(BRP)对人喉癌Hep2细胞的抗瘤作用。方法:采用高通量色谱仪分析多糖提取物成分,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡蛋白,western blot检测细胞凋亡相关蛋白变化。结果:高通量色谱分析仪发现BRP成分单一,BRP对细胞的抑制率呈时间和浓度依赖性。细胞周期分析发现BRP使细胞滞留于G0/G1期。与对照组相比,不同浓度的BRP(100⁴00μg/ml)明显诱导细胞的凋亡。Western blot结果发现BRP作用后,pro-caspase-3,procaspase-8和pro-caspase-9蛋白分裂增加,同时死亡受体DR5和Bax表达增加,而Bcl-2表达减少。结论:研究发现BRP主要通过使Hep2细胞周期变化和凋亡来抑制细胞的生长,其途径主要包括线粒体内部途径和死亡受体外部途径来完成。     

凋亡抑制因子Survivin在喉癌中的表达及其意义

目的:检测凋亡抑制因子Survivin在喉癌组织中的表达及其与喉癌的临床、病理特性之间的关系。方法:取石蜡包埋喉鳞状细胞癌标本33例,声带息肉21例,应用免疫组化SABC法检测Survivin在喉癌和声带息肉组织中的表达。结果:Survivin在喉癌组织中的表达率为63.6%,在声带息肉组织中的表达率为28.6%,二者有统计学差异(P<0.05)。而Survivin的表达与喉癌的临床分期、组织学分级、淋巴结转移和患者年龄、性别等无关。结论:凋亡抑制因子Survivin在喉癌组织中高表达,在声带息肉中低表达,与喉癌的发生、发展密切相关。     

喉黏膜白斑和喉鳞状细胞癌中survivin表达的意义

目的 探讨survivin蛋白在喉黏膜白斑和喉鳞状细胞癌中的表达情况及其意义。方法 通过免疫组化法对28例喉黏膜白斑、46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织和16例正常喉黏膜中survivin的表达情况进行检测。结果 发现survivin蛋白在喉黏膜白斑、喉癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为46．43％（13／28）、71.74％（33／46）、33．33％（8／24）；在正常黏膜组织中没有表达，喉癌组中的阳性表达率分别显著高于正常组织、癌旁组织、喉黏膜白斑中的表达率。中重度不典型增生喉黏膜白斑组的阳性表达率（66．67％）显著高于轻度不典型增生的阳性表达率（23．08％），发生了恶变的5例喉黏膜白斑组织中survivin蛋白均为阳性表达，但与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级没有关联。结论 survivin在中重度不典型增生喉黏膜白斑组织和喉癌组织中过度表达，参与了喉癌的形成，是喉癌形成的一个早期事件，可望成为预测喉癌癌前病变发展成恶性肿瘤的一个诊断工具。     

survivin基因在人原发性肝癌组织中的表达及其意义

目的： 探讨survivin基因在人原发性肝癌发生发展中的作用及可能的机制。方法：应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测15例原发性肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织及肝正常组survivin基因及相关基因c-myc、p53、STAT3和VEGF的mRNA表达水平，应用Western blotting法及免疫组织化学染色法检测上述组织中survivin基因的蛋白表达水平及其定位。结果： 肝癌组织及癌旁组织中survivin基因mRNA的表达量均显著高于正常肝组织（P<0.01）, 肝癌组织中survivin基因mRNA的表达量明显高于癌旁组织（P<0.01），肝癌及癌旁组织中c-myc、 STAT3、VEGF基因mRNA的表达量均显著高于正常肝组织（P<0.01），而p53基因mRNA的表达量显著低于正常肝组织（P<0.01）。肝癌组织及癌旁组织中survivin基因的蛋白表达水平均显著高于正常肝组织（P<0.01），且肝癌组织中survivin基因的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）。结论:survivin基因的异常表达在肝癌的发生发展中起促进作用，可作为治疗的理想靶点。     

凋亡抑制基因survivin在喉鳞状细胞癌中的表达

目的　探讨凋亡抑制基因survivin在喉鳞癌中的表达及临床意义。方法　应用免疫组织化学SP方法检测4 5例喉鳞癌及10例正常喉黏膜组织中survivin基因的表达。结果　喉鳞癌组织中,Survivin的表达率为80 % ,显著高于正常喉黏膜组织的表达率2 0 % (P <0 .0 5 )。Survivin蛋白表达与喉鳞癌的TNM分期及淋巴结转移有关(P均<0 .0 5 )。结论　survivin在喉鳞癌的发生发展中起重要作用,可能成为喉鳞癌基因治疗的新靶点。     

肝癌组织survivin的表达及其与HBV感染的关系

目的:研究肝癌组织中的survivin的表达与HBV感染的关系. 方法:应用免疫组化法检测原发性肝癌组织45例,癌旁肝硬化组织25例,肝硬化组织18例,肝炎组织5例,正常肝组织10例中survivin的表达,同时检测原发性肝癌中HBsAg的表达. 结果:在45例肝癌组织中survivin阳性34例(75.5%),阳性率高于癌旁肝硬化组织(44.4%),肝硬化组织(0),肝炎组织(0)和正常肝组织(0,P＜0.001). 肝癌中survivin的表达在Edmondson分级Ⅲ～Ⅳ级高于Ⅰ～Ⅱ级(P=0.014),而在年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、是否有门脉转移方面无统计学差异(P＞0.05),survivin与HBsAg的表达呈正相关(P=0.014). 结论:肝癌组织中survivin高表达说明其在肝癌发生发展中起重要作用,同时HBV感染对于survivin表达上调有一定作用.     

stat-3与survivin在乳腺癌的表达及其意义

目的:通过检测信号转导与激活因子3(stat-3)与生存素(survivin)在乳腺癌组织中的表达,探讨它们在乳腺癌发生及发展中的意义。方法:应用免疫组织化学法,检测51例乳腺癌和25例癌旁乳腺组织中stat-3和survivin表达。结果:stat-3在乳腺癌中的表达阳性率高于癌旁乳腺组织(P<0.001);stat-3表达在淋巴结转移组中高于无淋巴结转移组(P<0.05)。stat-3表达与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、临床分期、雌孕激素受体和c-erbB-2均无明显关系(P>0.05)。survivin在乳腺癌中的表达高于癌旁乳腺组织(P<0.001);survivin表达与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、临床分期、淋巴结转移、雌孕激素受体和c-erbB-2均无明显关系(P>0.05)。survivin表达阳性者35例中stat-3表达阳性34例,两者表达呈正相关关系(P<0.05)。结论:stat-3、survivin可能相互协同通过抑制细胞凋亡,在乳腺癌发生、发展中起重要作用。     

survivin和caspase-3在胃癌中的表达以及与凋亡的关系

目的 :评价胃癌组织中survivin和caspase 3的表达情况以及与细胞凋亡的关系。　方法 :采用免疫组化的方法 ,对 6 0例无术前放、化疗史的胃癌患者的手术标本进行survivin和caspase 3检测 ,并用原位末端标记法标记凋亡细胞。　结果 :survivin主要在癌组织中表达 ,caspase 3在正常粘膜的表达高于癌组织 ,survivin的表达强度与组织学分级及临床病理分期有关 (P <0 .0 1 )。caspase 3的表达强度随组织分化程度增高而增强 ;而在不同临床病理分期间无显著差异 (P >0 .75 )。胃癌组织中survivin与caspase 3的表达无直线相关关系 ,survivin阳性组凋亡指数明显低于阴性组 (P <0 .0 0 5 ) ,survivin阴性、caspase 3阳性组平均凋亡指数最高为 1 .5 3%。　结论 :survivin的表达与胃癌分化程度及病理分期密切相关 ,可作为提示预后的重要指标。survivin作为凋亡抑制蛋白显著抑制癌组织的细胞凋亡 ,但不能完全抑制caspase 3的表达     

MCM7在甲状腺乳头状癌组织中的表达及与survivin和P27蛋白的关系分析

目的 分析微小染色体维持蛋白7(minichro-mosome maintenance protein7,MCM7)、survivin和P27蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达及MCM7与survivin、P27蛋白的相关性。方法 选取我院外科手术切除的60例甲状腺乳头状腺癌、40例甲状腺腺瘤、40例结节性甲状腺肿病理组织及20例甲状腺正常的死亡尸体解剖的甲状腺组织,采用免疫组织化学法检测MCM7、survivin、P27蛋白的表达。分析甲状腺乳头状癌组织MCM7、survivin、P27蛋白表达与患者临床资料的关系及MCM7与survivin、P27蛋白的相关性。结果 甲状腺乳头状癌MCM7、survivin阳性表达明显高于其他组织,P27蛋白阳性表达明显低于其他组织(P<0.05);肿瘤直径>1 cm、TNM分期Ⅲ～Ⅳ、淋巴结有转移的MCM7阳性表达率明显高于肿瘤直径≤1 cm、TNM分期Ⅰ～Ⅱ、淋巴结无转移,TNM分期Ⅲ～Ⅳ、淋巴结有转移的survivin阳性表达率明显高于TNM分期Ⅰ～Ⅱ、淋巴结无转移(P<0.05);甲状腺乳头状腺癌组织MCM7表达与survi...     

结肠癌组织survivin表达的意义

目的:检测结肠癌组织中凋亡抑制蛋白survivin的表达,分析survivin与结肠癌临床特征的关系. 方法:采用免疫组织化学技术检测46例结肠癌组织和癌旁结肠组织中survivin的表达. 结果:46例结肠癌组织中survivin基因表达28例,癌旁结肠组织中无survivin基因的表达. Survivin的表达与结肠癌的发病年龄、性别、分化程度无关(P>0.05),而与结肠癌的转移有关联性(P<0.05). 结论:在结肠癌中survivin的表达能促进结肠癌的发生发展和转移.