血水草生物碱杀灭钉螺的研究

目的探讨血水草生物碱在实验室不同温度下杀灭钉螺的效果.方法在实验室配制不同浓度的血水草生物碱溶液,观察在20、25、30℃时浸泡24、48、72、96 h的钉螺死亡率;观察杀螺卵效果;观察钉螺上爬率.结果浸泡72 h钉螺死亡率为100%的血水草生物碱溶液的浓度及温度分别为:1.25 mg/L、30℃;2.5、5、10 mg/L均为25℃.5 mg/L时能明显抑制钉螺上爬.螺卵在5 mg/L溶液浸泡72 h孵出率为0～10%.结论血水草生物碱有较好杀灭钉螺的效果,是一种有研究价值的植物灭螺剂.     

血水草生物碱杀灭日本血吸虫尾蚴实验

目的 探讨血水草生物碱杀灭日本血吸虫尾蚴的效果。方法 配制不同浓度的血水草生物碱水溶液，分别吸取各种浓度的药液100μl于载玻片上，观察不同时间尾蚴存活情况及小鼠感染情况。结果 药物浓度为2．5，5mg/L，接触药物60min，血吸虫尾蚴死亡率分别为97．71％和100％，药物浓度10，20mg/L，接触药物30min，血吸虫尾蚴无感染性。结论 血水草生物碱确有一定的杀灭血吸虫尾蚴的效果。     

血水草杀螺成分-血水草生物碱(ECA)的提取

目的 从血水草中提取杀螺有效成分—血水草生物碱(ECA)。方法 采用70％乙醇渗漉提取，用减压浓缩、酸解、盐析等方法纯化，提取ECA原粉。结果 ECA原粉的提取率为1.009％．结论 本提取方法可靠，设备及工艺流程简单，提取条件易控制，且成本低，便于开发应用。     

血水草生物碱联合氯硝柳胺杀螺增效作用研究

目的探讨血水草生物碱(ECA)与氯硝柳胺的联合杀螺增效作用。方法采用室内浸杀法,将不同浓度的氯硝柳胺溶液分别与不同浓度的ECA溶液复配成混合溶液,在25℃恒温条件下浸泡钉螺24、48h和72h,观察钉螺死亡情况。结果0.5mg/LECA分别与不同浓度的氯硝柳胺等量混合后,浸杀灭螺24、48、72h时,氯硝柳胺LC50由单独浸杀时的0.159、0.037、0.028mg/L降为合用后的0.100、0.029、0.016mg/L;而与1mg/LECA合用后,LC50则为0.083、0.025、0.009mg/L,其LC50均降低,增效比(SR)均>1;1.0mg/LECA与氯硝柳胺合用72h时,其SR为3.01。结论0.5、1.0mg/LECA与氯硝柳胺混合后对钉螺有较强的联合杀螺效果,对氯硝柳胺杀螺有增效作用。     

血水草总生物碱灭钉螺的初步探讨

血水草 (Eomecon Chionantha Hance)别名水黄连、土黄连、广扁线等 ,系罂粟科血水草属植物 ,主要分布于我国长江流域、华东、华南、西南大部分省区 ,野生草本 ,资源丰富。民间常用其根茎捣烂外敷治疗痈疖 ,取鲜汁滴眼治疗急性眼结膜炎 [1]。在血水草的抗菌作用研究中 ,发现其抗菌有效成分为生物碱[2 ] 。 1 995～ 1 998年 ,我们用血水草总生物碱进行杀螺试验 ,现报告如下。1　材料与方法1 .1　血水草生物碱　用采自湖南桃江县人形山的血水草根状茎及根洗净 ,切碎晒干 ,碾成粗末 ,按参考文献 [2 ]方法制备总生物碱及盐酸白屈菜红碱 (简称结…     

血水草生物碱对钉螺生殖腺超微结构的影响

目的观察血水草生物碱对钉螺生殖腺的影响,探讨血水草生物碱杀灭钉螺的作用机理.方法用血水草生物碱浸泡钉螺48 h,解剖钉螺,取雌、雄生殖腺以常规方法制作电镜切片,用日立H-600型透射电镜观察组织结构变化.结果血水草生物碱浸泡后,钉螺卵细胞明显萎缩,精原细胞固缩.结论血水草生物碱对钉螺的生殖腺造成严重损伤.     

影响血水草生物碱灭螺效果相关因素的研究

目的探讨影响血水草生物碱（ECA）实验室和现场灭螺效果的相关因素。方法在实验室配置不同浓度的ECA溶液,20、25、30℃浸泡钉螺,观察浸泡24、48、72、96h钉螺死亡率;同时在现场观察不同浓度ECA在不同时间的浸泡灭螺效果。结果实验室浸泡灭螺试验结果显示,在不同浓度、时间和温度下钉螺死亡率有明显差异（P〈0.01）;在温度为30℃、浓度为1.25mg/L,或温度为25℃、浓度为2.5、5、10mg/L时,浸泡72h钉螺死亡率达100%。现场灭螺试验结果显示,在水温为26～28℃,浓度为10mg/L和20mg/L时,浸泡72h钉螺死亡率分别为84%和92%。logistic回归分析显示,浓度、作用时间及温度均为ECA灭螺效果的影响因素。结论影响ECA灭螺效果的因素包括浓度、温度和作用时间;随着浓度增加和浸泡时间的延长,灭螺效果增强。     

血水草生物碱对钉螺神经系统超微结构的影响

目的通过观察血水草生物碱对钉螺神经节的影响,探讨血水草生物碱杀灭钉螺的作用机理。方法用血水草生物碱浸泡钉螺48 h,解剖钉螺,取神经节,以常规方法制作电镜标本,用日立H-600型透射电镜观察组织结构变化。结果血水草生物碱浸泡后,钉螺神经细胞胞体变小,核变小,线粒体及内质网形态结构均出现异常。结论血水草生物碱对钉螺的神经系统能够造成严重损伤,进而导致其死亡。     

长江洪水中日本血吸虫尾蚴分布及其对人群血吸虫感染的影响

目的阐明长江洪水中日本血吸虫尾蚴分布及其对人群血吸虫感染的影响。方法采用哨鼠测定法,观察洪水中血吸虫尾蚴分布及其漂移扩散范围。通过对距阳性螺地带不同距离人群血吸虫感染情况,分析水体尾蚴分布对人群血吸虫感染的影响。结果长江洪水中血吸虫尾蚴主要分布在距阳性螺点2000m以内的区域,人群血吸虫感染率与距阳性螺点的距离呈负相关关系(rs=-0.976,P<0.01),居住在距阳性螺1000m以内者人群血吸虫感染率显著高于1000m以外人群(χ2=6.145,P=0.013)。结论长江洪水中尾蚴分布及人群血吸虫率与距阳性螺点的距离呈负相关关系。     

日本血吸虫幼虫在钉螺体内发育有效积温的研究

目的　研究日本血吸虫幼虫在钉螺体内发育成熟所需的热量 (发育有效积温 )。方法　现场采集无血吸虫感染的钉螺 ,以钉螺∶毛蚴为 1∶2 0比例进行实验感染 ,感染后常规饲养 ,以逸蚴法确定感染性钉螺 ,根据变温动物发育积温和有效积温的计算公式 (Q =∑Tn、K =N(T -C) ) ,计算血吸虫在钉螺体内发育的尾蚴开放积温和发育有效积温。结果　在 2 1～30℃之间 ,血吸虫在钉螺体内尾蚴开放的最低积温为 12 0 0日度 ,最高积温为 3480日度 ,平均积温为 2 2 0 2 75± 378 86日度。血吸虫在钉螺体内的发育有效积温常数为 84 2 91日度 (95 %可信区间为 6 99 2 8～ 986 5 4日度 )。结论　日本血吸虫在钉螺体内要完成发育至成熟的尾蚴 ,所需的有效积温 (环境温度在 15 17℃以上的累积温度 )必须达到 84 2 91日度。     

日本血吸虫尾蚴细胞的传代培养及抗原性检测

目的 探索体外培养日本血吸虫尾蚴细胞的增殖与传代技术。 方法 无菌收集日本血吸虫活尾蚴5 000～10 000条,置于含有10％胎牛血清的RPMI 1640培养基中,用组织刀快速割切尾蚴使成组织碎裂物,加入250 U蟹胶原酶在26℃下孵育30 min,然后离心去酶,加入含有青霉素(100 U/ml)、链霉素(O.1 mg/ml)、两性霉素B(0.25μg/ml)和适量促细胞生长物的RPMI 1640改良培养基中作原代培养,当贴壁细胞增殖长满瓶底时,以1:2的接种率进行传代培养;获取第5代培养细胞作ELISA检测血吸虫病患者血清中抗体。 结果 在原代培养的第3天可见尾蚴组织的周围有呈单个存在或索状排列的发亮细胞,第10天可见单层细胞形成,第14天贴壁细胞长满瓶底并作传代培养;在传代培养中可见细胞呈均匀生长,每7～14 d传代一次;用第5代培养细胞作抗原,检测31例患者的阳性率为90.3％,检测30名正常人血清的假阳性率为6.7％。 结论 日本血吸虫尾蚴细胞体外传代培养至第5代,可用于免疫学研究。     

日本血吸虫幼虫在钉螺体内发育起点温度的研究

目的　研究环境温度对血吸虫幼虫在钉螺体内生长发育进程的影响程度。　方法　采集无血吸虫感染的钉螺,以钉螺与毛蚴1∶20比例感染,感染后置于30℃、27℃、24℃、21℃和18℃环境中饲养,计算钉螺体内血吸虫的尾蚴开放前期和发育速度,分析尾蚴开放前期和发育速度与环境温度间的相关关系。　结果　21℃、24℃、27℃、30℃时血吸虫的尾蚴平均开放前期分别为(128.89±16.05)d、(95.00±21.03)d、(71.93±12.74)d和(62.74±14.19)d。尾蚴开放前期与环境温度的回归方程为y=730.68x-0.8918(r=0.9976,P<0.01)。血吸虫发育速度与环境温度的回归方程为y=0.0235ln(x)-0.0639(r=0.9973,P<0.01)。从此方程中推算出日本血吸虫幼虫在钉螺体内的发育起点温度为15.17℃±0.43℃。　结论　环境温度降低,钉螺体内血吸虫幼虫发育速度减慢。     

照射致弱尾蚴免疫兔血清筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库

目的从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中获得日本血吸虫新的蛋白编码基因,为防治血吸虫病提供候选疫苗和治疗药物靶点.方法制备致弱尾蚴免疫兔血清作为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,挑取阳性克隆,测序并进行生物信息学分析.结果共筛选出8个阳性克隆,长度分布于0.6～3.0kb.随机选取4个阳性克隆进行PCR扩增及测序,获得2个日本血吸虫新基因:整合酶相似蛋白编码基因和蛋白磷酸酶1催化亚单位编码基因.前者长度为636 bp,含一个462 bp完整开放阅读框(ORF);后者1 879 bp,含一个984 bp完整ORF.两者GenBank的登录号分别为:AY855919、AY879341.结论致弱尾蚴免疫兔血清可作为筛选日本血吸虫新基因的有效探针;发现了2个日本血吸虫新基因.     

不同工艺提取麻疯树籽油及其杀灭血吸虫尾蚴效果

目的 目的 观察不同工艺提取的麻疯树籽油杀灭血吸虫尾蚴的效果, 以筛选制备麻疯树籽油的最佳工艺及配方。方 方 法 法 采用6种不同工艺提取的麻疯树籽油, 进行杀灭血吸虫尾蚴即时接触试验。采用麻疯树籽油及其与不同添加剂制成 的制剂, 进行昆明小鼠血吸虫尾蚴即时接触感染试验, 观察其抗血吸虫感染的减虫率。结果 结果 95%乙醇回流、 料液比1∶8、 2 h提取工艺出油率达30.7%。即时接触试验6种麻疯树籽油30 min内将尾蚴全部杀灭。即时接触感染试验麻风树籽油原 液减虫率达70.97%, 添加苯甲酸苄酯减虫率为58.87%, 单一添加月桂氮酮减虫率达77.42%, 添加苯甲酸苄酯、 邻苯二甲酸 二丁酯、 月桂氮酮减虫率达100%。结论 结论 95%乙醇回流、 料液比1∶8、 2 h提取工艺为麻疯树籽油最佳提取工艺。麻疯树籽 油有较好的血吸虫尾蚴杀灭作用。