侵袭性骨肿瘤凋亡相关癌基因蛋白(c-Myc、c-Fos、Bcl-2)的表达

目的：了解侵袭性骨肿瘤凋亡相关癌基因蛋白表达情况。方法：利用免疫组织化学方法对５种共１２４例侵袭性骨肿瘤凋亡相关癌基因蛋白（ｃ－Ｍｙｃ、ｃ－Ｆｏｓ、Ｂｃｌ－２）的表达进行观察。结果：发现在几种骨肿瘤中ｃ－Ｍｙｃ和ｃ－Ｆｏｓ表达较普遍，但不同骨肿瘤间ｃ－Ｍｙｃ和ｃ－Ｆｏｓ表达，差异均有非常显著性意义（Ｐ值＜０．００５）。Ｂｃｌ－２的表达仅见于部分恶性肿瘤病例，良性骨肿瘤均不表达。恶性骨肿瘤三种癌基因蛋白表达阳性率均高于良性骨肿瘤，差异有非常显著性意义（Ｐ值＜０．００５）。结论：凋亡相关基因ｃ－Ｍｙｃ和ｃ－Ｆｏｓ的异常活动在骨肿瘤的发生、发展过程中可能起着相当重要的作用。而Ｂｃｌ－２的表达可作为良、恶性骨肿瘤鉴别的一个参考指征。     

P170,bcl—2在复发性骨肿瘤中的表达

目的：探讨骨肿瘤复发前后在细胞的多药耐药性和凋亡方面的变化。方法：应用免疫组化和流式免疫学方法测定Ｐ１７０、ｂｃｌ－２蛋白在８例骨肿瘤复发前后的１６个标本中的表达，男６例，女２例。年龄平均３０６岁。良性肿瘤２例，恶性肿瘤６例。结果：２例良性肿瘤在复发前后Ｐ１７０、ｂｃｌ－２蛋白表达无明显差异。６例恶性肿瘤中，原发仅２例Ｐ１７０为阳性，复发后５例为阳性；复发后ｂｃｌ－２含量明显高于原发（Ｐ＜００５）。结论：恶性骨肿瘤复发后细胞的多药耐药性和增殖能力有增强的趋势。     

胃肠道间质瘤中P16基因甲基化和P16蛋白表达的临床意义

目的探讨胃肠道间质瘤（GIST）中P16基因启动子区甲基化状态和P16蛋白在GIST中的表达及其意义。方法对62例随访资料完整的GIST患者，应用甲基化特异性聚合酶链反应法和免疫组化EnVisionTM法，检测瘤组织中P16基因启动子区甲基化状态和P16蛋白的表达。结果本组进展性疾病（PD）21例，非PD41例。Fletcher分级：极低度侵袭危险性（I级）13例；低度侵袭危险性（Ⅱ级）12例；中度侵袭危险性（Ⅲ级）19例；高度侵袭危险性（Ⅳ级）18例。P16甲基化19例，非甲基化43例。P16蛋白阳性细胞数小于50％20例，50％～75％15例，大于75％27例。在Fletcher分级中，P16基因启动子甲基化和P16蛋白表达差异有统计学意义（分别为P〈0．05和P〈0．01）；Ⅳ级中P16基因启动子甲基化占50％．P16阳性细胞数小于50％者占65％。P16蛋白表达阳性不同强度之间PD值比较差异有统计学意义（P〈0．01）；P16阳性细胞数小于50％者PD占95％；而50％以上者组间PD值比较，P〉0．05；差异无统计学意义。P16阳性细胞数小于50％者的肿瘤组织P16甲基化占75％，而P16阳性细胞数大于50％者P16甲基化仅占10％，两组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论在GIST组织中，P16蛋白低表达、P16基因启动子甲基化预示肿瘤预后差。     

骨巨细胞瘤P21蛋白的表达及意义

目的 探讨骨巨细胞瘤组织中Ras癌基因的蛋白产物P21的表达及生物学意义。方法 采用ABC免疫组织化学方法对69例骨巨细胞瘤组织中P21蛋白表达进行研究。结果 骨巨细胞瘤组织中P21蛋白阳性表达率为48％,其中病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级P21蛋白阳性表达率分别为43％、44％、86％,Ⅲ级阳性表达率明显高于Ⅰ级和Ⅱ级(P< 0.05);Enneking外科分期1、2、3期阳性表达率分别为33％、36％和73％,3期阳性表达率极显著高于1期和2期(P<0.01)。结论 Ras癌基因产物P21蛋白表达活性在良恶性骨巨细胞瘤中的表达有明显差异,可作为恶性骨巨细胞瘤的标志物;Enneking外科分期3期P21蛋白阳性表达率明显高于1期和2期,说明P21蛋白阳性表达与骨巨细胞瘤的侵袭性有密切关系。     

BAK基因过表达对膀胱癌细胞的诱导凋亡作用及其分子机制

目的：探讨BAK基因过表达对膀胱癌的诱导凋亡效应及机制。方法：脂质体介导BAK基因转染膀胱癌EJ细胞1－7d后，逆转录聚合酶链反应检测BAK基因表达，细胞计数法检测癌细胞生长活性，DNA Ladder法、吖啶橙－溴化乙锭荧光染色法及原位末端转移酶标记技术检测癌细胞凋亡，免疫组织化学法检测癌细胞Caspase-3、Bcl-2,p53表达。结果：转染1－7d后，癌细胞BAK基因表达显著增强（P＜0．01），体外生长抑制20．66％－35．58％（P＜0．01），部分癌细胞呈现凋亡形态学变化，凋亡率为18．0％－20．6％（P＜0．01），癌细胞Caspase-3表达增强6．6倍（P＜0．01）Bcl．2和P53表达差异无显著性（P＞0．05）。结论：BAK基因表达能显著诱导膀胱癌细胞凋亡，其中Caspase-3激活是其作用机制之一。     

抑癌基因P16在胰腺癌癌旁组织中的表达及意义

目的：研究抑癌基因P16在胰腺癌癌旁组织中的表达及意义。方法：采用免疫组化LSAB法检测6例正常胰腺组织,20例胰腺癌及与其相对的癌旁组织中P16蛋白的表达率。结果：癌旁组织与正常胰腺组织中P16蛋白的表达率间比较差异显著（P＜0.05);胰腺癌组织中P16蛋白的表达率与癌旁组织中的表达率正相关（P＜0.05);癌旁组织中P16蛋白表达率与胰腺癌分化程度正相关。结论：P16蛋白在胰腺癌癌旁组织中表达的异常可能与胰腺癌易复发及治疗困难有关;通过检测其表达率可以初步判定肿瘤的恶性程度。     

侵袭性骨肿瘤凋亡相关癌基因蛋白（c—Myc,c—Fos,Bcl—2）…

了解侵袭性骨肿瘤凋亡相关癌基因蛋白表达情况。方法；利用免疫组织化学方法对５种共１２４例侵袭性骨肿瘤凋亡相关癌基因蛋白的表达进行观察。结果：发现在几种骨肿瘤中ｃ－Ｍｙｃ和ｃ－Ｆｏｓ表达较普遍，但不同骨肿瘤间ｃ－Ｍｙｃ和ｃ－Ｆｏｓ表达，差异的均有非常显著性意义。     

胃肠间质瘤中9p21区域杂合子丢失及P16蛋白表达研究

目的 探讨染色体9p21区域杂合子丢失（LOH）及相关的P16INK4A（CDKN2A）抑癌基因的表达与胃肠间质瘤（GIST）侵袭行为及预后的关系.方法 采用微卫星分析方法检测51例GIST标本中9p21区域D9S1751、D9S1846、D9S942和D9S1748 4个微卫星位点的LOH现象,并采用免疫组织化学技术,对D9S942位点相邻的CDKN2A抑癌基因产物P16蛋白的表达,分析P16蛋白表达缺失与GIST临床病理特征和预后的关系.结果 51例GIST标本中有2例9p21区域4个微卫星位点均为纯合子（无效信息）,其余49例9p21区域的LOH率：D9S1751为37.0%（10/27）、D9S1846为37.5%（12/32）、D9S942为42.1%（16/38）、D9S1748为24.2%（8/33）,总LOH率为63.3%（31/49）.P16蛋白在GIST标本中的阴性表达率为41.2%（21/51）,阳性率为58.8%（30/51）.高度与低或极低度侵袭风险组P16阴性表达率分别为60%（12/20）和23.5%（4/17）,差异有统计学意义（P＜0.05）.P16阴性与阳性表达组5年生存率分别为70.8%和92.0%,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 9p21区域的LOH在GIST中普遍存在 CDKN2A抑癌基因可能参与GIST的发生发展 P16蛋白与GIST侵袭风险及预后关系密切.     

前列腺癌细胞凋亡与iNOS、Bcl-2的表达及意义

目的 :探讨细胞凋亡和诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)、Bcl 2蛋白表达在前列腺癌中的意义以及两者之间的关系。　方法 :对 2 4例前列腺癌、15例前列腺增生及 5例正常前列腺组织行原位细胞凋亡检测及iNOS、Bcl 2蛋白免疫组化检测。　结果 :前列腺癌组的细胞凋亡率和iNOS的染色强度均显著高于前列腺增生组及正常前列腺组(P <0 .0 1) ,且Bcl 2蛋白表达阳性者的细胞凋亡率显著低于阴性者 (P <0 .0 1)。　结论 :前列腺癌的细胞凋亡率可反映其恶性程度 ;iNOS的表达与前列腺癌的分化程度无关 ,但与Bcl 2蛋白表达呈负相关 ;Bcl 2蛋白表达与前列腺癌细胞凋亡呈负相关。iNOS与Bcl 2均可通过影响前列腺癌细胞凋亡而在前列腺癌病理发生发展中起作用     

P170和PCNA在恶性骨肿瘤中的表达

作者作用Ｓ－Ｐ法免疫组织化学染色技术观察６７例恶性骨肿瘤组织、１５例正常骨组织、１５例骨软骨瘤组织中多药耐药基因产物Ｐ糖蛋白（简称Ｐ１７０）、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达情况。结果显示：恶性骨肿瘤组织中Ｐ１７０阳性率４６．２７％（３１／６７），ＰＣＮＡ阳性率９８．５１％（６６／６７）；正常骨组织及骨软骨瘤组织中无Ｐ１７０表达，ＰＣＮＡ阳性率分别为６．６７％（１／１５）和２０％（３／１５）。６７     

Differential heparanase-1 expression in malignant and benign pheochromocytomas

INTRODUCTION: Extracellular matrix (ECM) degradation is an essential step that allows tumor cells to penetrate a tissue barrier and become metastatic. Heparanase-1 (HPR) is an endoglycosidase that specifically degrades heparan sulfate proteoglycans, a chief component of the ECM. Previous studies have demonstrated HPR expression in various malignancies and that there is differential HPR expression between benign and malignant tumors. Currently, there is no technique that can reliably predict the malignant behavior of some pheochromocytomas. This study tests whether HPR is differentially expressed in malignant and benign pheochromocytomas. METHODS: Paraffin-embedded specimens from 29 pheochromocytomas were evaluated. The tissues were collected from surgical specimens over a 10-year period from 26 patients (8 males, 18 females) with a mean age of 47 years (range 19-78 years, median 47 years). One female patient underwent 3 separate operations for malignant pheochromocytoma and thus provided 3 specimens. Another female patient had both the primary tumor and a liver metastasis processed, and therefore provided 2 specimens. Patient charts and pathology reports were reviewed to classify the pheochromocytomas as either benign or malignant. Based on clinical behavior and/or pathological evidence of metastasis or invasion into surrounding tissues, 10 specimens were malignant and 19 had benign behavior. As a control, normal adrenal tissue from 3 nephrectomy specimens was included in the study, as was tissue from 1 adrenocortical adenoma. All 33 specimens were tested for HPR gene expression by in situ hybridization (ISH) with an antisense RNA probe and immunohistochemistry (IHC) with an anti-HPR antibody. Statistical analysis was done using the chi(2) test of proportions to determine if HPR expression correlated with malignancy using ISH, IHC, or both tests together. RESULTS: Using ISH, the percentage of HPR expression in the malignant pheochromocytomas was 50% while HPR expression in the benign tumors was 21% (P = 0.11). Using IHC, the percentage of HPR expression in the malignant pheochromocytomas was 80% while HPR expression in the benign tumors was 32% (P = 0.01). Considering both tests cumulatively, all 10 malignant pheochromocytomas stained positive for HPR by ISH and IHC, while only 37% of the benign tumors were positive for HPR expression (P = 0.001). The one adrenal adenoma and the 3 normal adrenal glands processed stained negative for HPR expression by both ISH and IHC. CONCLUSIONS: HPR expression is higher in malignant pheochromocytomas than in benign pheochromocytomas or normal tissue. HPR may contribute to the invasive characteristics of malignant pheochromocytomas and might be used as a marker to distinguish malignant from benign pheochromocytomas. HPR expression might also be used as a prognostic tool in guiding long-term patient follow-up.     

肾上腺肿瘤P53及c—myc癌基因表达研究

为探讨肾上腺肿瘤发病机理，为鉴别肿瘤良恶性及其分级分期提供依据，收集３４例肾上腺恶性肿瘤应用ＳＰ法作Ｐ５３及ｃｍｙｃ免疫组化检测，并与２５例肾上腺良性瘤及１２例非瘤肾上腺组织对比。结果显示：肾上腺恶性瘤Ｐ５３阳性率４７１％，良性瘤８０％，非瘤组织无表达；肾上腺恶性肿瘤ｃｍｙｃ阳性率３８２％，良性瘤及非瘤组织无表达；Ｐ５３表达与肾上腺恶性瘤临床分期相关，ｃｍｙｃ与其临床分期不相关，均可用于良恶性瘤鉴别。     

恶性骨肿瘤化疗药物敏感性研究

目的　分析恶性骨肿瘤化疗药物敏感性和多药耐药性 ,为制定敏感的个体化化疗方案提供依据。　方法　取恶性骨肿瘤新鲜标本 3 2例 (骨肉瘤 2 0例 ,其它恶性肿瘤 12例 ) ,运用流式细胞术检测化疗药物作用后的瘤细胞凋亡情况及其P170蛋白表达 ,分析其化疗敏感性和耐药性。结果　不同化疗药物作用后的骨肉瘤细胞凋亡百分比分别为 :甲氨喋呤 ( 3 0 5 0± 10 2 2 ) % ,阿霉素( 2 6 2 8± 9 3 5 ) % ,丝裂霉素 ( 2 3 11± 7 3 8) % ,足叶乙甙 ( 18 17± 6 14 ) % ,长春新碱 ( 4 4 4± 2 5 5 ) % ,环磷酰胺 ( 1 2 2± 0 5 9) %。P170蛋白表达较高者化疗敏感性均较低。　结论　流式细胞术分析化疗药物作用后的恶性骨肿瘤细胞凋亡及其P170蛋白表达 ,对预测肿瘤的化疗敏感性和耐药性有一定意义。     

骨肿瘤复发后组织起源及p53.C—erbB—2表达的变化

目的：探讨骨肿瘤复发后组织起源及相关癌基因蛋白表达的变化。方法：应用免疫组化方法，测定８例骨肿瘤复发前后１６个标本Ｖｉｍｅｎｔｉｎ．Ａｃｔｉｎ．ｐ５３Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白的表达。良性骨肿瘤２例，恶性骨肿瘤６例。结果：２例良性骨肿瘤在复发前后各项指标均无变化；６例恶性骨肿瘤中，３例Ｖｉｍｅｎｔｉｎ，５例Ａｃｔｉｎ，３例ｐ５３和２例Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因在复发前后表达结果不同。结论：复发恶性骨肿瘤与原发可能并非同源，体内存在另外的致癌因素，使癌基因发生改变，导致肿瘤再生。     

大鼠睾丸扭转后生殖细胞凋亡与Bcl-2和Bax基因表达

目的 :研究睾丸扭转复位后生殖细胞凋亡与Bcl 2 /Bax基因表达的关系。　方法 :30只成年健康SD雄性大鼠随机分成扭转组 (n =15 )和对照组 (n =15 )。建立单侧睾丸扭转复位动物模型 (72 0° 2h)。术后 3d取手术侧睾丸 ,采用原位缺口末端标记法 (TUNEL)检测生殖细胞凋亡 ,免疫组化SP法检测Bcl 2 /Bax基因表达。　结果 :与对照组相比 ,扭转组手术侧睾丸生殖细胞凋亡显著增多 (P <0 .0 1) ,Bax表达显著升高 (P <0 .0 1) ,Bcl 2表达显著降低 (P <0 .0 1)。凋亡细胞主要是初级精母细胞和圆形精子细胞。　结论 :睾丸扭转复位后 ,生殖细胞凋亡与Bcl 2 /Bax基因表达密切相关。细胞内Bcl 2 /Bax比值是影响生殖细胞凋亡的重要因素之一。     

胃肠道平滑肌肿瘤nm23表达与细胞增殖活性关系的研究

目的探讨ｎｍ２３表达与胃肠道平滑肌肿瘤（ＧＩＳＭＴ）良恶性、恶性程度、转移、预后及细胞增殖活性的关系。方法采用免疫组化法检测８６例ＧＩＳＭＴ患者ｎｍ２３的表达情况,采用胶银染色法及免疫组化法检测核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）来反映细胞的增殖活性。结果ｎｍ２３的表达按平滑肌瘤、低度恶性平滑肌肉瘤、高度恶性平滑肌肉瘤的顺序依次明显下降（Ｐ＜０．０１）。ｎｍ２３表达与肿瘤的良恶性生长方式、大小、中心有无坏死亦有明显的关系（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３阳性表达组的５年生存率明显高于阴性表达组（Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３阴性组的ＡｇＮＯＲｓ和ＰＣＮＡ表达明显高于ｎｍ２３阳性表达组（Ｐ＜０．０１）。结论ｎｍ２３是反映ＧＩＳＭＴ生物学特性的良好标志物,与ＡｇＮＯＲｓ、ＰＣＮＡ可互补作为判断ＧＩＳＭＴ良恶性、恶性程度、转移及预后的客观指标。     

热休克蛋白在良恶性嗜铬细胞瘤中的表达及其意义

目的通过检测热休克蛋白90（HSP90）在良、恶性嗜铬细胞瘤（PC）组织中的表达情况,探讨HSP90能否成为一项用于评估嗜铬细胞瘤潜在恶性程度的有效分子标记物。方法选取1986年10月～2006年8月在我院泌尿外科行手术治疗、且有完整的临床、病理和随访资料的嗜铬细胞瘤患者存档石蜡标本38例,其中良性嗜铬细胞瘤（BP）21例,恶性嗜铬细胞瘤（MP）17例。采用免疫组化技术Envision二步法,检测良、恶性嗜铬细胞瘤中HSP90的表达情况。恶性组经首次手术确诊后随访28～179月,良性组经首次手术确诊后随访93～264月。结果在MP组中HSP90的阳性表达率为70.59%,明显高于BP组中阳性表达率28.57%,两组热休克蛋白的表达具有显著的统计学差异（P〈0.05）。结论 HSP90有望成为区分嗜铬细胞瘤良恶性的一项指标。