肠球菌的耐药性及耐药基因检测

肠球菌广泛分布在自然界，常栖居于人和温血脊椎动物的肠道中。近30年来，由于畜牧业将抗菌药物作为抗菌生长促进剂(Antimicrobial Growth Promoter，AGP)添加在饲料中以增加饲料的利用率和加快动物生长，动物体内的肠球菌在抗菌药物的选择性压力作用下产生了各种耐药菌，甚至出现了多重药物耐药的耐多药菌，然后由人与动物的接触和人食用受耐药菌污染的肉食品而传播给人类。近年来，肠球菌已成为一种重要的医院感染病原菌。本文就肠球菌的耐药性和耐药基因检测作扼要介绍。     

肠球菌产β内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶基因检测

目的 探讨肠球菌耐药机制和耐药基因流行状况。方法 对20株肠球菌的β内酰胺酶TEM基因、氨基糖苷类修饰酶aac(6′／aph(2″)和aph(3′）-Ⅲ基因进行检测。结果 20株肠球菌中有9株表型为青霉素／阿莫西林耐药并均检出TEM基因；12株对高浓度庆大霉素耐药并均检出aac(6′／aph(2″)和／或aph(3′)-Ⅲ基因。结论 国内产β内酰胺酶、产氨基糖苷类修饰酶的肠球菌比率较高。     

鲍曼不动杆菌耐药基因及其检测

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumanii，Ab)是医院感染的重要病原菌之一。Ab菌分布于医护人员的手、手机、毛巾、工作服，病房墙壁，麻醉和呼吸器械等处。自上世纪90年代以来，世界各地Ab菌临床分离株的耐药率不断升高。我国也有类似报道。本文就Ab菌的产酶耐药基因检测和染色体编码基因突变而导致的耐药检测作扼要介绍。     

葡萄球菌大环内酯类耐药基因检测及其意义

目的了解葡萄球菌对大环内酯类药物表型耐药性和耐药基因以及分析大环内酯类耐药基因与诱导克林霉素耐药的相关性。方法用K—B纸片法检测2004—2005年分离的136株葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性，依据NCCLS2004年发布M100-S14的D-试验方法，测定红霉素对克林霉素的诱导耐药率；应用聚合酶链反应（PCR）法检测MsrA、Vgb、Sat4、ermA、ermB、ermC、mphA、MefA／E、ereA、ereB10种耐药基因。结果136株葡萄球菌共栓出MsrA、Sat4、ermC、mphA、ereB5种耐药基因，耐药基因总检出率为80，15％（109／136）。MRSA、MRCNS、MSSA、MSCNS耐药基因的检出率分别为81．25％（13／16）、89，47（68／76）、73，08％（19／26）、50，00％（9／18），耐药基因主要存在于MRCNS。葡萄球菌对红霉素和克林霉素同时耐药株占43．38％，红霉素耐药而克林霉素敏感株占37，50％；D-试验阳性率为25，00％（34／136），阳性株数占红霉素耐药而克林霉素敏感株的66，67％（34／51）。耐药基因MsrA、Sat4、ermC、mphA、ereB的阳性率分别为24．26％、41．91％、56，62％、1．47％、18．38％，其中核糖体甲基化酶基因ermC是诱导克林霉素耐药的主要基因。结论ermC是诱导克林霉素耐药的主要基因，临床微生物实验室应同时开展D试验和耐药基因检测，以指导临床更加合理使用抗菌素。     

金黄色葡萄球菌抗生素耐药相关基因检测

目的检测医院及环境样中金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaurell,SA）耐药基因,了解耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MethicillinResistantStaphylococcusaUleus,MRSA）和甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌（MethiciUinResistantcoagulaseStaphylococcusanl＇e118,MRCNS）检出率以及金黄色葡萄球菌耐药基因分布情况。方法应用多重聚合酶链反应（Multiplexpolymeraschmnreaction,muhiplexPCR）检测医院及环境样中金黄色葡萄球菌的mecA、居mA基因。采用聚合酶链反应（Polymeraschmnreaction,PCR）技术检测金黄色葡萄球菌的11种耐药基因,分别是Bβ内酰胺类耐药基因blaTEM,氨基糖苷类耐药基因Aac（6’）／aph（2”）、aph（3’）-Ⅲ、ant（3”）-I、ant（4’,4”）与ant（6）-I,四环素耐药基因tetM,红霉素耐药基因erm,万古霉素耐药基因vanA、vanB,耐消毒基因qacA。结果44株菌分离自医院病人样本,检出12株MRSA,3株MRCNS。其中29株菌携带1种以上耐药基因,14株携带tetM基因,5株携带vanB基因,7株携带A0c（6’）伽h（2”）基因,9株携带aph（3’）-Ⅲ基因,7株携带ant（4＇,4”）基因,5株携带ant（6）-I基因。29株菌分离自环境样本,未检出MRSA与MRCNS。仅1株检出Aac（6’）/aph（2”）基因,16株检出ant（4＇,4”）基因,其余10种耐药基因未检出。结论院内样本中,不同样本分离菌株携带耐药基因存在差异,未检出携带qacA基因的菌株。环境样本携带肌￡（4’,4”）基因较高。检测耐药基因分布情况,为指导临床用药、控制院内感染及监测环境中菌株耐药情况提供依据。     

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及耐药基因检测研究

目的 探讨多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及耐药基因检测结果.方法 2019年1月-2020年1月期间菏泽市立医院临床病例标本96例分离出的96株的鲍曼不动杆菌作为研究菌株.所有临床病例标本经细菌培养鉴定、药敏试验和耐药基因检测,统计临床标本分离的鲍曼不动杆菌株对常用抗菌药物耐药性,并分析其耐药基因情况.结果 临床病例分离的...     

氨基糖苷类修饰酶及其基因检测

氨基糖苷类(aminodycosides)抗生素是由氨基环醇、氨基糖与糖组成的抗生素总称。自1944年首次发现链霉素以来，因此类抗生素抗菌谱广、疗效卓越，在医学临床和畜牧兽医业得到广泛应用。但由于泛用和过度使用氨基糖苷类抗生素耐药问题随之凸现，细菌对该类药物耐药是因为产氨基糖苷类修饰酶(aminoglycoside-     

铜绿假单胞菌氨基糖苷类抗生素耐药基因检测

目的 了解铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗生素耐药基因的分布情况.方法 收集临床分离的铜绿假单胞菌,采用仪器法和纸片扩散法(K-B法)进行药敏实验.筛选出对氨基糖苷类抗生素耐药的菌株,用PCR法检测16个氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因和5个16S rRNA甲基化酶基因的表达,进一步对阳性基因扩增产物进行测序验证.结果 54株菌中51 株AMEs基因阳性,检出率为94.4% ,28 株甲基化酶基因阳性,检出率为51.9% .共检出5 种AMEs基因:ant(3″) -Ⅰ、aac(3) -Ⅱc、ant(4′) -Ⅰa、aac(6′) -Ⅰb和ant ( 2″) - Ⅰa,阳性率分别为 66.7% 、 38.9% 、 31.5% 、31.5%和16.6% ;2种16S rRNA甲基化酶基因:rmtB和ar-mA,阳性率分别为29.6%和29.6% ,其余基因均未检出.测序结果与目的基因一致.结论 铜绿假单胞菌氨基糖苷类抗生素耐药的主要基因为ant(3″)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱc、ant(4′) -Ⅰa、aac(6′)-Ⅰb和ant(2″)-Ⅰa以及rmtB, armA.     

多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因检测分析

目的 为了解多重耐药铜绿假单胞菌（MDRPA）β内酰胺类耐药相关基因、氨基糖苷类修饰酶基因（AMEs）、消毒剂与磺胺类耐药基因（qacE△1-sull）和质粒介导的氟喹诺酮类耐药基因（qnr）存在情况。方法 对2005年1～10月份临床分离的36株多重耐药菌株（耐三类抗菌药物者）,应用聚合酶链反应进行检测。结果 36株MDRPA中6株（9．7％）对受试的19种抗生素都不敏感。TEM、CARB、aac（6’）-I、aac（6’）-II和qacEa△1-sull扩增阳性株分别为4株（11．1％）、5株（13．9％）、4株（11．1％）、4株（11．1％）和8株（22．2％）。OprD2基因缺失率为19．4％（7／36）。而PER、OXA．23群、OXA-24群、GES、DHA、IMP、VIM、SPM、GIM和qnr扩增均阴性。结论 MDRPA中qacEa△1-sull和CARB基因携带率高,OprD2基因缺失率高。     

多重耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因检测

目的:了解浙江省湖州市中国人民解放军第98医院自临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌(MRPA)中氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因存在状况.方法:在2003年9月至2004年10月间从临床分离30株MRPA,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测9种AMEs基因[aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aac(6')-Ⅰ、aac(6')-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ、ant(2")-Ⅰ和aph(3')-Ⅵ].结果:30株MRPA中各种AMEs基因的阳性株数(阳性率)分别为aac(3)-Ⅱ23株(76.7%)、aac(6')-Ⅰ 1株(3.3%)、aac(6')-Ⅱl0株(33.3%)、ant(3")-Ⅰ 16株(53.3%)、ant(2")-Ⅰ 8株(26.7%),而aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ和aph(3')-Ⅵ均为阴性.基因总阳性率为86.7%(26/30).结论第98医院临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌中AMEs基因携带率很高,至少存在5种AMEs基因,分别为aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰ、aac(6')-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ和ant(2")-Ⅰ.     

医院感染的金黄色葡萄球菌耐药性与耐药基因检测

目的研究医院感染的金黄色葡萄球菌的耐药性与耐药基因状况,指导临床合理用药。方法对本院感染标本分离出的120例金黄色葡萄球菌（SAU）进行药敏试验,多重PCR法检测aph（2＂）、aph（3）’Ⅲ、ant（4’,4）＂、TEM、tetM、macA、erm和qacA/B基因。结果 120株SAU中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）有71株,占59.1%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）有49株（40.9%）。MSSA对15种抗生素制药率超过50%的只有6种,而MRSA对15种抗生素耐药率超过50%的12种;经8种基因进行检测,MRSA与MSSA对8种耐药基因携带率各不相同,MRSA高于MSSA。结论医院感染的金黄色葡萄球菌对抗菌药物有很高的耐药性,MRSA较MSSA的耐药性更高、更复杂,必须加强金黄色葡萄球菌的耐药性监控,以最大限度降低其耐药性的发生。     

溶血葡萄球菌的感染分布及耐药分析

目的 了解溶血葡萄球菌的临床感染分布及其耐药特性。方法 采用法国生物梅里埃ATB细菌鉴定和药敏分析系统，对142株溶血葡萄球菌进行鉴定和16种常规抗生素进行耐药分析，同时分析对红霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、四环素、克林霉素5种非β-内酰胺类抗生素多重耐药性。结果 在临床分离到的319株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中，溶血葡萄球菌有142株，占44．5％，居CNS分离菌种首位。溶血葡萄球菌标本检出率最高为前列腺液(占45％)，其次为精液(占26．2%)和尿道分泌物(占25．1％)。抗生素耐药分析显示，溶血葡萄球菌对青霉素、红霉素、诺氟沙星、庆大霉素表现出高度耐药性，耐药率分别为98．6％、93．7％、76．8％、74．7％。溶血葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为82．4％。117株耐苯唑西林溶血葡萄球菌(MRSH)对3种以上非β-内酰胺类抗生素多重耐药率达82．9％；25株苯唑西林敏感溶血葡萄球菌(MSSH)对3种以上非β-内酰胺类抗生素多重耐药率达已52．0％。结论 溶血葡萄球菌所致临床感染日趋严重，检出率不断增加，提示综合性医院应加强对溶血葡萄球菌的监测与药敏分析，建议为了减少新的耐药株出现，临床医生应多做感染样本的细菌培养和药敏试验，依据检验结果合理使用抗生素。     

肺炎链球菌耐药基因检测

肺炎链球菌 (StreptococcusPneu moniae,Sp)又称肺炎球菌 ,是肺炎、脑膜炎、鼻旁窦炎和中耳炎等疾病的重要病原菌。近年来 ,国内外均报道临床分离到的Sp菌株对青霉素、红霉素、四环素和喹诺酮类药物耐药性呈上升趋势 ,并出现了耐多药的Sp〔1〕 。细菌耐药基因的检测在临床用药指导、耐药细菌监测和细菌耐药机制研究诸方面均有重要意义。本文就Sp耐药基因检测的国内外现状作扼要介绍。1　青霉素耐药基因　　青霉素是治疗Sp感染的传统药物。其作用机制为青霉素 (包括其他 β内酰胺类药物 )与细菌细胞壁上的青霉素结合蛋白 (PBPs)不可逆地…     

金属β内酰胺酶基因及其检测方法

碳青霉烯类药物是一组新型β内酰胺类抗生素(如：亚胺培南、美洛培南)。此类抗生素抗菌谱广，对革兰阳性和革兰阴性菌、需氧菌、厌氧菌皆有很强抗菌活性。药物学研究发现，碳青霉烯类药物对大多数β内酰胺酶高度稳定(含ESBLs、Ampc酶)，与青霉素结合蛋白(PBPs)亲和力强，并能够有效渗透细菌外膜进入周质间隙，     

甲氧西林耐药溶血葡萄球菌的耐药基因检测及同源性分析

目的 了解本地区甲氧西林耐药溶血葡萄球菌(MRSH)携带耐药基因情况及其流行状况,提供临床治疗及感染控制的依据.方法 耐药基因的检测采用PCR,菌株同源性分型采用随机扩增DNA 多态性(RAPD)技术.结果 65 株MRSH 的mecA、Aac(6')/aph(2')、aph(3')-Ⅲ、ermB、ermC 和tetM 耐药基因的阳性率分别为100.0%、93.8%、76.9%、7.7%、96.9%和4.6%,未检测出ermA、tetO 和vanA 耐药基因.依照RAPD 检测方法将65 株MRSH 分为3型,其中A 型占83.1%.结论 本地区的MRSH 携带高比例的mecA、Aac(6')/aph(2')、aph(3')- Ⅲ和ermC 耐药基因,RAPD分析MRSH 的流行株以A 型为主.     

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌红霉素耐药erm基因检测

目的：探讨耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)erm基因的存在状况。方法：应用兼并引物扩增MRCNS菌的erm基因。结果：55株MRCNS菌中有45株检出erm基因。结论：MRCNS菌获得erm基因的红霉索耐药率为81．8％。     

武汉地区结核分枝杆菌氨基糖苷类抗生素耐药分离株rpsL和rrs基因特征分析

目的阐明武汉地区结核分枝杆菌分离株氨基糖苷类药物耐药相关基因rpsL和rrs的分子突变特征。方法从武汉医疗救治中心共收集69株结核分枝杆菌的临床菌株,包括耐链霉素(SM)菌株35株(其中4株同时对卡那霉素耐药)和SM敏感菌株34株(其中全敏感20株)。采用PCR直接测序法分析rpsL和rrs基因的分子突变特征。结果 35株SM耐药株中有26株(74.3%)检测到rpsL突变,突变位点集中在第43位和第88位密码子,并发现了1个新的突变类型Lys88Glu;13株耐药株(37.1%)检测到四种不同类型的rrs基因突变,分别为A1401G(17.1%,6/35)、A514C(14.3%,5/35)、G1487A(2.9%,1/35)和C517T(2.9%,1/35),1株全敏感菌株的rrs基因发生了C1029T突变。卡那霉素耐药株中只有3株检测到了rrs突变,并发现了一种rrs基因尚未见报道的G1487A突变类型。结论结核分枝杆菌对氨基糖苷类药物的耐药与rpsL和rrs突变相关,耐药基因突变类型存在地域差异。     

革兰阴性杆菌9种氨基糖苷类修饰酶基因的检测

目的 调查革兰阴性杆菌氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因的流行状况。方法 建立检测AMEs基因的PCR法，检测临床分离的20株革兰阴性杆菌9种AMEs基因。结果 20株革兰阴性杆菌中6株检出AMEs基因(30％)，同一菌株可产生2种以上AMEs，且不同菌株产生的AMEs有很大差异。3株表型为氨基糖苷类药物敏感，但检出AMEs基因；8株表型为氨基糖苷类药物耐药，但9种AMEs基因检测为阴性。本研究肺炎克雷伯菌的aac(3)-Ⅱ、大肠埃希菌的Bile(6’)-Ⅰ、铜绿假单胞菌的aac(3)-Ⅱ和ant(2”)-Ⅰ基因已成功注册GenBank。结论 产生AMEs是细菌对氨基糖苷类抗生素耐药的机制之一。不同菌株产生的AMEs有很大差异。