趋化因子CCL5在系统性红斑狼疮患者中的表达及临床意义

目的:检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythmatosus,SLE)患者血浆趋化因子CCL5表达,分析CCL5表达与SLE疾病活动性及脏器受累的关系?方法:收集31例SLE患者?16例健康志愿者外周血标本,SLE患者根据肾脏受累分为狼疮肾炎21例和SLE无肾脏受累10例?酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆CCL5水平,并分析其与SLE临床指标之间的关系?结果:SLE患者CCL5表达高于正常对照组;狼疮肾炎组患者CCL5表达高于SLE无肾脏受累组和正常对照组,差异具有统计学意义(P < 0.01);分析发现血浆CCL5表达水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关(r=0.54)?结论:趋化因子CCL5在SLE发病机制中具有重要作用,可能参与了SLE肾脏受累过程;CCL5可作为判断SLE病情活动性的指标?     

单核细胞趋化蛋白-1表达与狼疮肾炎

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在狼疮肾损伤中的作用.方法应用ELISA方法测定112例系统性红斑狼疮(SLE)患者、30例类风湿性关节炎患者、11例非SLE肾损伤患者及40例正常健康者血清MCP-1水平;应用RT-PCR方法,测定以上各组外周血单个核细胞(PBMCs)MCP-1 mRNA表达.结果狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,尤其是狼疮肾炎活动组患者PBMCs MCP-1 mRNA表达增加最为显著(P＜0.001),PBMCs MCP-1 mRNA表达不仅与总狼疮疾病活动指数评分呈正相关(r=0.6245,P＜0.001),而且与狼疮疾病活动指数肾评分呈正相关(r=0.6808,P＜0.001),而在类风湿性关节炎组和非狼疮肾脏疾病组仅低水平表达,与正常对照组水平相近似(P＞0.05).狼疮活动组血清MCP-1水平较非活动组及正常对照组均明显升高(P＜0.001),但活动性狼疮肾炎组与无肾损伤组之间血清MCP-1水平的差异无显著性(P＞0.05).结论狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,并与狼疮肾炎的疾病活动情况密切相关.     

pDCs在狼疮肾炎患者外周血和肾脏组织中的表达

目的 研究浆细胞样树突细胞(pDCs)在狼疮肾炎患者外周血和肾脏组织的表达和分布情况,探讨pDCs在狼疮肾炎发病中的作用.方法 31例狼疮肾炎患者,其中17例为活动期(14例行肾活检),14例为缓解期.分离患者外周血单个核细胞,流式细胞术检测pDCs的表达;设立正常对照组(n=12).应用免疫荧光抗体标记及激光扫描共聚焦显微镜技术,观察14例行肾活检患者肾脏组织中pDC8的分布;设立正常对照(n=4).结果 活动期狼疮肾炎患者外周血pDCs表达的百分数为0.039±0.052,显著低于缓解期的0.168±0.174和正常对照组的0.134±0.079(均P＜0.01).正常对照肾脏组织未见pDCs浸润,而狼疮肾炎患者肾脏组织肾小球pDCs呈高水平表达,在Ⅳ型狼疮肾炎的肾脏组织中,pDCs呈局灶节段分布于系膜区.pDCs表面可见趋化因子受体CCR7表达.结论 狼疮性肾炎的发生可能与其肾组织趋化因子受体水平上调,增强了外周血中pDCs向肾组织的迁移能力有关.外周血pDCs的变化可作为狼疮性肾炎治疗效果的评价指标之一.     

pDCs在狼疮肾炎患者外周血和肾脏组织中的表达

目的研究浆细胞样树突细胞(pDCs)在狼疮肾炎患者外周血和肾脏组织的表达和分布情况,探讨pDCs在狼疮肾炎发病中的作用。方法31例狼疮肾炎患者,其中17例为活动期(14例行肾活检),14例为缓解期。分离患者外周血单个核细胞,流式细胞术检测pDCs的表达;设立正常对照组(n=12)。应用免疫荧光抗体标记及激光扫描共聚焦显微镜技术,观察14例行肾活检患者肾脏组织中pDCs的分布;设立正常对照(n=4)。结果活动期狼疮肾炎患者外周血pDCs表达的百分数为0.039±0.052,显著低于缓解期的0.168±0.174和正常对照组的0.134±0.079(均P<0.01)。正常对照肾脏组织未见pDCs浸润,而狼疮肾炎患者肾脏组织肾小球pDCs呈高水平表达,在Ⅳ型狼疮肾炎的肾脏组织中,pDCs呈局灶节段分布于系膜区。pDCs表面可见趋化因子受体CCR7表达。结论狼疮性肾炎的发生可能与其肾组织趋化因子受体水平上调,增强了外周血中pDCs向肾组织的迁移能力有关。外周血pDCs的变化可作为狼疮性肾炎治疗效果的评价指标之一。     

Elevated interleukin-13 in patients with active lupus nephritis

目的　探讨白细胞介素 13(IL 13)在活动性狼疮肾炎患者中的作用。方法　选择 10名健康人和 16名活动性狼疮肾炎患者。采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定IL 13血浆水平 ,反转录多聚酶链反应 (RT PCR)检测外周血单个核细胞IL 13基因表达水平。肾组织内IL 13基因表达采用原位杂交技术 (ISH)测定。结果　活动性狼疮肾炎患者IL 13血浆水平和外周血单个核细胞IL 13mRNA表达水平均较正常对照组增高 (P<0 0 0 1)。活动性狼疮肾炎患者肾组织内IL 13mRNA表达较正常对照组明显增高 (P <0 0 0 1)。直线相关分析结果表明 ,活动性狼疮肾小管间质区IL 13mRNA表达量与血肌酐浓度、肾小球活动指数和肾小管间质活动指数、血C3浓度相关 (P <0 0 5 )。结论　IL 13水平增高在活动性狼疮肾炎的分子发病机制中起一定的作用。     

miR-383增强SLE患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达

目的初步探讨microRNA-383（miR-383）对IL-2信号介导的系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中Foxp3mRNA转录的影响。方法采用Westernblot方法检测14例SLE患者PBMCs中SOCS3蛋白表达水平,通过相关microRNA软件预测和Westernblot鉴定靶向SOCS3的microRNA,RT—PCR方法检测miR-383转染SLE患者的PBMCs中转录因子Foxp3mRNA的转录水平。结果Westernblot结果发现,SLE患者的PBMCs中SOCS3蛋白表达水平显著增加,miR-383抑制SOCS3蛋白表达。SLE患者PBMCs转染miR-383后Foxp3mRNA的转录水平显著增高。结论miR-383靶向抑制SOCS3,上调IL-2信号介导的SLE患者的PBMCs中Foxp3mRNA的转录水平。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞单链DNA表达研究

目的研究系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）中单链DNA（ssDNA）表达情况。方法流式细胞术检测26例SLE患者（SLE组）外周血ssDNA表达阳性的PBMC细胞百分比（ssDNA阳性率）,设立正常对照组（n=17）和其他结缔组织病（CTD）对照组（n=7）。结果 SLE组、正常对照组和CTD对照组外周血B淋巴细胞中ssDNA阳性率分别为（0.906±0.838）%、（0.216±0.371）%和（0.270±0.311）%。统计学分析表明,SLE组患者外周血B淋巴细胞中ssDNA阳性率显著高于两对照组（P〈0.01,P〈0.05）;SLE组内有与无狼疮肾炎患者的外周血B淋巴细胞中ssDNA阳性率分别为（1.228±0.259）%和（0.510±0.436）%,两者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 SLE和狼疮肾炎的发生和发展可能与患者外周血表达ssDNA的B淋巴细胞异常增多有关。     

Expression of miR-155 and miR-146a in patients with systemic lupus erythematosus

目的 通过检测miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)和血浆中的表达,探讨miR-155和miR-146a的表达在SLE发病中的作用.方法 SLE患者20例,健康对照组15例.取外周血分离PBMC和血浆,提取和纯化miRNA,实时定量PCR检测miR-155和miR-146a的表达,以小分子RNA U6作为内对照,计算标准化后的2-ΔCt值表示miRNA的相对表达含量.结果 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a的表达水平是健康对照组的3.07倍(P＜0.01)和1.91倍(P=0.056); SLE患者血浆中miR-155和miR-146a的表达水平比对照组低,但差异无统计学意义;同时SLE患者中蛋白尿阳性组血浆中两种miRNAs表达水平有降低的趋势,活动组患者血浆中两种miRNAs表达水平也有降低的趋势,但差异无统计学意义.结论 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a异常高表达,但血浆miR-155和miR-146a的表达水平有下降的趋势.     

PI3-K与活动性狼疮肾炎Th2细胞因子的关系

【目的】了解磷脂酰肌醇三激酶（PI3-K）在活动性狼疮肾炎患者外周血单个核细胞中的表达,并探讨其与Th2细胞因子的关系。【方法】利用免疫沉淀、免疫印迹和RT-PCR技术检测12例正常人和14例活动性狼疮肾炎患者外周血单个核细胞PI3-K磷酸化产物、IL-6mRNA和IL-10mRNA表达,观察PI3-K特异性抑制剂PY294002对活动性狼疮肾炎患者外周血单个核细胞IL-6mRNA和IL-10mRNA表达的影响。【结果】自发培养时活动性狼疮肾炎组外周血单个核细胞PI3-K磷酸化产物明显高于健康对照（1.14±0.23vs0.46±0.12,P=0.023）,CD3单抗诱导下活动性狼疮肾炎组PI3-K磷酸化产物表达仍然高于健康对照组（2.09±0.63vs0.65±0.14,P=0.016）。活动性狼疮肾炎组外周血单个核细胞PI3-K磷酸化产物表达量与IL-6mRNA和IL-10mRNA呈正相关关系（r=0.652,P=0.008;r=0.718,P=0.007）。PI3-K特异性抑制剂PY294002明显抑制了抗CD3单抗诱导的活动性狼疮肾炎组IL-6mRNA(2.32±0.51vs0.57±0.15,P=0.009)和IL-10mRNA(1.71±0.33vs0.67±0.11,P=0.006)的表达。【结论】PI3-K过度活化可能介导了IL-6和IL-10细胞因子的高效表达而参与狼疮肾炎的发病过程。     

系统性红斑狼疮患者外周血BMP/Smads信号通路相关基因表达及与OPG/RANKL的相关性分析

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血BMP/Smads信号通路相关基因表达,了解其与OPG/RANKL相关性,探讨其在SLE骨代谢中的意义?方法:选取SLE患者26例及正常对照组20例,运用实时定量PCR方法检测两组外周血单个核细胞BMP/Smads信号通路相关基因BMP-2?Smad1?Smad5?Smad8及RANKL?OPG的表达,ELISA法定量检测血清中RANKL?OPG水平,计算OPG/RANKL比值;分析Smad1?Smad5?Smad8基因表达量与疾病活动相关指标及OPG/RANKL相关性?结果:SLE患者外周血单个核细胞OPG/RANKL系统中OPG基因mRNA表达水平较正常对照组减低 (0.002 5 ± 0.000 7 vs. 0.017 6 ± 0.006 7,P < 0.05),RANKL基因mRNA表达水平无统计学差异 (0.003 3 ± 0.001 0 vs. 0.002 4 ± 0.000 9,P > 0.05),SLE患者OPG/RANKL比值较正常对照组明显减低 (0.229 6 ± 0.071 2 vs. 0.609 5 ± 0.165 1,P < 0.01)?SLE患者Smad1?Smad8基因mRNA表达水平较正常对照组明显减低 (0.003 1 ± 0.000 4 vs. 0.006 6 ± 0.000 7;0.003 3 ± 0.000 5 vs. 0.005 6 ± 0.000 6,P < 0.01),Smad5基因mRNA表达较正常对照组减低(0.001 7 ± 0.000 3 vs. 0.004 2 ± 0.000 4,P < 0.05),SLE患者与正常对照组BMP-2基因mRNA表达水平无统计学差异(0.006 9 ± 0.002 0 vs. 0.010 5 ± 0.002 1,P > 0.05)?SLE患者组血清RANKL表达较正常对照组明显增高(P < 0.01),OPG表达在两者间无明显统计学意义(P > 0.05),SLE血清OPG/RANKL较正常对照组明显减低(P=0.006)?相关性分析显示,SLE患者Smad8 mRNA水平?OPG/RANKL均与血沉呈正相关 (P < 0.05)?OPG mRNA水平与Smad8 mRNA表达水平呈正相关P <0.01,而RANKL与Smad1 mRNA基因表达呈负相关(P < 0.01)?结论:SLE患者体内BMP/Smads系统基因表达存在异常,可能与SLE的骨代谢异常相关?     

白细胞介素10在系统性红斑狼疮中的异常表达及其意义的初步研究

目的：分析Th2型 细胞因子白细胞介素（IL）－10在系统性红斑狼疮（SLE）发生发展中的变化及其意义。方法：以37例符合美国风湿病学会（ARA）诊断标准的SLE患者为研究对象，与相匹配的正常人26名相对照，以ABC－ELISA法检测血清及细胞培养上清的IL－10水平，其中部分标本同时以荧光定量RT－PCR分析IL－10mRNA的表达。结果：SLE患者血清IL－10水平显著高于正常人（P＜0．01），伴狼疮性肾炎者和抗双链DNA抗体阳性者其IL－10水平更高，活动期与缓解期患者相比，IL－10水平有所升高，但在统计学上差异无显著性；血清IL－10水平与外周血单个核细胞（PBMCs）中mRNA水平呈正相关性，相对于正常人而言，SLE患者的IL－10 mRNA亦呈高表达。体外培养结果显示，SLE患者PBMCs自发分泌或植物血凝素（PHA）诱生IL－10的水平均显著高于正常人（P＜0．05）。结论：细胞因子IL－10的蛋白水平和mRNA转录水平，在SLE患者均明显升高，高水平的IL－10可能与狼疮性肾炎的姓有关。SLE患者PBMCs产生IL－10的能力异常增高。     

循环型microRNA-26a及其靶基因PTEN与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨循环型microRNA-26a（miR-26a）及靶基因PTEN在系统性红斑狼疮（SLE）的表达,以及在SLE发生、发展中可能发挥的作用。方法选取36例SLE和10例健康体检者血液标本,实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-26a、外周血单个核细胞（PBMC）中PTEN 的表达,统计分析miR-26a、PTEN 与SLE临床资料的相关性,利用双荧光素酶报告系统验证PTEN是否为miR-26a 的靶基因。结果SLE 患者血清miR-26a mRNA 的表达高于健康人群（P <0.05）,PBMC 中PTEN mRNA 的表达低于健康人群（P <0.05）。SLE 患者miR-26a、PTEN 的表达水平与C3、抗ds-DNA、红细胞沉降率、狼疮活动指数相关。miR-26a 转染BaF3 细胞后,PTEN 表达下调,PI3K 表达上调,转染组荧光素酶活性下降（P <0.05）。结论SLE 患者血清中过表达的miR-26a可能通过下调靶基因PTEN,上调PI3K/AKT信号通路,参与SLE的发生、发展。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞Toll样受体9和核因子-κB水平的测定及其临床意义

目的  测定系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMCs）Toll样受体9（TLR9）和核因子-κB（NF-κB）水平并分析其临床意义。方法  选取2013年4月-2014年12月该院风湿免疫科收治的60例SLE患者作为研究对象,其中35例SLE患者处于活动期作为活动组,25例SLE患者处于缓解期作为缓解组。同时选取该院健康体检者30例作为对照组。对比3组PBMCs中TLR9和NF-κB水平,观察SLE患者PBMCs中TLR9、NF-κB水平与脏器受累和免疫抑制剂种类的相关性。结果  活动组PBMCs中TLR9水平低于缓解组和对照组,差异有统计学意义（P <0.05）;缓解组PBMCs中TLR9水平低于对照组,差异有统计学意义（P < 0.05）。活动组PBMCs中NF-κB水平低于缓解组和对照组,差异有统计学意义（P <0.05）;缓解组PBMCs中NF-κB水平低于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。皮疹、白细胞降低表现阳性患者与阴性患者PBMCs中TLR9水平比较,差异无统计学意义（P >0.05）。发热、浆膜炎、血尿表现阳性患者与阴性患者PBMCs中TLR9水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）。浆膜炎、血尿表现阳性患者与阴性患者PBMCs中NF-κB水平比较,差异无统计学意义（P >0.05）。发热、皮疹、白细胞降低表现阳性患者与阴性患者PBMCs中NF-κB水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）。结论  SLE患者TLR9水平较正常人群明显降低,NF-κB水平较正常人群明显升高,同时TLR9水平的降低与发热、浆膜炎、血尿的临床表现相关。NF-κB水平升高与发热、皮疹、白细胞降低的临床表现相关,严密监测SLE患者PBMCs中TLR9和NF-κB水平变化对患者的临床诊治有重要价值。

     

增殖诱导配体mRNA在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的表达

目的 检测增殖诱导配体（APRIL）mRNA在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）的表达水平，探讨APRIL在SLE发病中的意义。方法 采用半定量RT-PCR法检测36例SLE患者及17例正常人PBMC的APRILmRNA表达，并与SLE疾病活动指数（SLEDAI）进行相关性分析。结果 SLE患者活动期组和非活动期组APRIL mRNA表达水平均明显高于正常对照组（P〈0．05或P〈0．01），活动期组较非活动期组增高更明显（P〈0．01）；SLE患者APRILmRNA表达水平与SLEDAI评分呈正相关（r=0．6725，P〈0．01）。结论 SLE患者APRILmRNA表达水平的增高，可能在SLE的发病机制中具有重要作用。     

血清肾损伤分子-1在预测系统性红斑狼疮病人发生狼疮性肾炎中的临床价值研究

目的:探讨血清肾损伤分子-1(KIM-1)预测系统性红斑狼疮(SLE)病人发生狼疮性肾炎(LN)的临床价值.方法:选择78例SLE病人为研究对象.所有SLE病人均获得有效随访,中位随访时间为5.9年(1～9.5年).采用酶联免疫吸附实验检测基线时血清KIM-1水平.绘制ROC曲线分析KIM-1预测LN的价值,计算ROC...     

血清C1q检测在系统性红斑狼疮疾病活动性判断及狼疮肾炎诊断中的价值

目的  探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者血清C1q水平变化对SLE疾病活动性判断及狼疮肾炎（LN）的诊断意义。方法  150例研究对象,根据临床资料,分为SLE组（60例）、其他风湿疾病组（30例）、其他肾脏疾病组（30例）及正常对照组（30例）4组,其中SLE组包括33例LN患者和27例非LN患者。采用免疫透射比浊法测定各组血清C1q水平,并与其他SLE活动性指标进行相关性分析。结果  ①SLE组的血清C1q水平低于其他风湿性疾病组、其他肾脏疾病组及正常对照组（F =41.428,P =0.000）,其中LN组的血清C1q水平低于非LN组（t =-4.262,P =0.000）,SLE病情活动期患者C1q水平低于病情稳定期患者（t =-5.159,P =0.000）。②在SLE组中C1q诊断LN的敏感性为66.7%,特异性为59.3%。工作特征曲线的曲线下面积为0.717。③相关分析表明,SLE患者血清C1q水平与C3、C4呈正相关,与SLE疾病活动指数积分呈负相关（r=0.593、0.448和-0.589,P =0.000）。结论  血清C1q不仅有助于SLE及LN的诊断,且对SLE的病情评估及疗效判断具有重要参考价值。

     

维生素D受体与MCP-1在系统性红斑狼疮患者中的表达及意义

目的 观察维生素Ｄ受体（VDR）在系统性红斑狼疮患者（SLE）中的表达以及与单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的关系。方 法 共计纳入中南湘雅三医院肾脏风湿科住院SLE患者60 例和募集28 例健康志愿者作为研究对象。使用实时荧光定量聚合链反应方法（QRT-PCR）检测外周血单个核细胞（PBMC）的VDR mRNA和MCP-1 mRNA,Western blot检测VDR蛋白表达,ELISA法检测外周血MCP-1水平,使用单因素方差分析、Pearson相关分析进行统计学分析。结果 我们发现SLE患者PBMC的VDR mRNA及蛋白表达量均显著低于正常对照组（P<0.01）,活动组低于非活动组（P<0.05）;SLE患者PBMC的MCP-1mRNA及血清水平显著高于正常对照组（P<0.01）,活动组高于非活动组（P<0.01）;Pearson相关分析显示PBMC VDR mRNA与SLE疾病活动指数（SLEDAI）呈负相关（r=-0.417,P=0.001）;VDR mRNA与MCP-1 mRNA、VDR蛋白与血清MCP-1浓度分别呈负相关（r=-0.554,P=0.000;r=-0.400,P=0.028）。结论 本研究表明SLE患者PBMC的VDR表达下调与SLE疾病活动度成负相关,且可通过影响MCP-1的表达在SLE发病过程中发挥重要作用。