P63基因在小细胞肺癌及肺腺癌组织中的转录表达

背景P53在人类肺癌发生发展过程中所起的作用已经得到研究者的肯定.随着P53基因家族又一新成员P63的发现,P63在人类肺癌中的作用与机制引起了世界范围内的广泛关注,P63基因在小细胞肺癌中转录表达的规律如何?目的检测P63基因mRNA在小细胞肺癌及肺腺癌癌组织、癌旁组织及相对应远癌组织中转录表达水平,并检测P63蛋白在肿瘤组织中表达情况,了解P63基因在小细胞肺癌及肺腺癌组织中转录表达的规律及其临床意义.设计对照实验.单位解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所心胸外科.对象收集解放军第三军医大学大坪医院2000-10/2002-09外科手术切除的小细胞肺癌病变标本6块.患者男4例,女2例;年龄42～67岁,平均50.7岁.另收集同期肺腺癌标本15块,每块标本均取肿瘤、癌旁及远癌肺组织各一份.方法采用反转录聚合酶链反应方法对6例小细胞肺癌及15例肺腺癌组织中P63基因两种亚型(TAP63及△NP63)转录表达情况进行检测和比较,同时用免疫组织化学检测P63蛋白在上述组织中的表达情况.主要观察指标①反转录聚合酶链反应检测P63蛋白在组织标本中表达情况.②免疫组织化学染色检测P63蛋白在组织标本中表达情况.结果①反转录聚合酶链反应检测P63蛋白在组织标本中表达情况5例小细胞肺癌肿瘤组织(83%,5/6)及1例小细胞肺癌癌旁组织(17%,1/6)中△NP63呈阳性表达,所有小细胞肺癌肿瘤、癌旁及远癌肺组织均无明显TAP63表达;腺癌肿瘤、癌旁及远癌肺组织TAP63与△NP63表达均为阴性.②免疫组织化学染色检测P63蛋白在组织标本中表达情况P63蛋白在小细胞肺癌组织中的阳性表达率明显大于腺癌组织[83%(5/6),17%(1/6),P＜0.01].结论P63基因在小细胞肺癌中呈阳性表达,其中主要是△NP63表达水平升高,而P63蛋白在小细胞肺癌中表达水平明显高于腺癌组织,这可能与其在小细胞肺癌发生、发展中所起的调控作用有关;推测△NP63基因在小细胞肺癌组织中转录表达水平升高可能抑制细胞凋亡,促进肿瘤增殖,起到癌基因作用,提示P63可能是影响小细胞肺癌预后的因素之一.     

非小细胞肺癌组织P53、P16和Bcl-2蛋白表达及意义

目的探讨P53、P16和Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化技术,检测原发性非小细胞肺癌组织60例和距离肿瘤边缘5 cm以上的癌旁正常肺组织18例的P53、P16和Bcl-2蛋白的表达。结果 P53、P16和Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达与癌旁正常肺组织比较,差异有显著性（Hc=10.003~14.783,P〈0.01）。非小细胞肺癌组织P53、P16蛋白的表达与肿瘤的分化程度有关（Hc=15.119、19.078,P〈0.01）,Bcl-2蛋白的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关（Hc=16.271、13.205,u=2.849,P〈0.01）。非小细胞肺癌组织的P53与P16蛋白表达之间呈负相关（rs=-0.437,P〈0.01）。结论 P53、P16及Bcl-2蛋白的表达失衡与非小细胞肺癌的发生发展密切相关。     

非小细胞肺癌组织CtBP1和P16蛋白的表达及意义

目的探讨CtBP1和P16蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与NSCLC发生、发展的关系。方法采用免疫组化方法分别检测66例肺癌组织及30例癌旁组织中CtBP1和P16蛋白表达,分析其与NSCLC临床病理学参数之间的关系。结果肺癌组织CtBP1和P16蛋白阳性表达率分别为91.0%和47.0%,P16蛋白在癌旁组织中的阳性表达率高于肺癌组织（χ^2=9.196,P〈0.05）,而两者CtBP1蛋白的表达差异无显著性（P=0.662）。肺癌组织CtBP1蛋白与P16蛋白的表达呈负相关性（r=-0.392,P〈0.05）。P16蛋白表达与肺癌的临床分期、有否淋巴结转移和肿瘤分化程度有关（χ2=5.079~9.333,P〈0.05）,而与病理类型无关（P〉0.05）;CtBP1蛋白表达与上述临床病理学参数均无关（P〉0.05）。结论 P16表达缺失与NSCLC的发生、发展密切相关;联合检测CtBP1和P16可作为判定NSCLC恶性程度及评估其侵袭性、转移性的重要方法。     

抑癌基因P53和血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

肺癌的发生是一个多步骤多基因参与的生物学过程,涉及到癌基因的激活和抑癌基因的突变,P53属于抑癌基因的一种,是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因.血管内皮生长因子(VEGF),又名为血管通透因子(VPF),与肿瘤的复发、转移有关.我们应用免疫组化技术对有4次化疗史和非化疗史的非小细胞肺癌(NSCLC)组织标本中P53及VEGF的表达水平进行检测,判断二者的检测在NSCLC化疗疗效、预测预后中的临床意义.     

抑癌基因PTEN和P27在非小细胞肺癌中表达与肺癌分化程度及功能预后的相关趋势

目的：探讨抑癌基因PTEN，P27在非小细胞肺癌中表达的意义与预后的关系及其相关性。方法：56例非小细胞肺癌标本及10例正常肺组织均取自泰山医学院附属医院1997-01／1999—03手术切除标本的存档蜡块，应用免疫组织化学方法观察正常肺组织和非小细胞肺癌中PTEN和P27的表达情况：结果：PTEN和P27在肺癌组织与正常肺组织的表达差异具有显著性意义(tau_b=0．341，0．311，P&;lt;0．01)。PTEN的表达与有无淋巴结转移有关(tau_b=0．274，P&;lt;0．05)；与肺癌的分化程度有关(tau_b：0．245，P&;lt;0．05)，与临床分期有关(tau_b：0．359，P&;lt;0．01)，与预后有关(χ^2=5．22，P&;lt;0．05)。P27的表达与肺癌的分化程度有关(tau_b=0．246，P&;lt;0．05)，与预后有关χ^2=6．30，P&;lt;0．05)。PTEN与P27之间的表达无明显的关系(χ^2=2．851，P&;gt;0．05)。结论：从蛋白水平揭示PTEN的表达与非小细胞肺癌的分化程度，有无淋巴结转移，临床分期以及与肺癌预后有关；P27与肺癌的分化程度及预后有关：PTEN蛋白与P27蛋白之间未发现有明显的关系。     

KRAS基因在非小细胞肺癌患者外周血和肿瘤组织中的突变研究

目的 KRAS基因突变可能导致非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)治疗的耐药。本研究旨在探讨外周血检测KRAS基因的可行性,以及对EGFR-TKIs治疗的疗效预测价值。方法应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测120例NSCLC患者外周血标本和97例肿瘤组织标本KRAS基因突变情况,其中70例外周血标本和肿瘤组织相匹配。全组共55例接受EGFR-TKIs治疗,52例可评价疗效。比较外周血和组织标本突变一致性,分析KRAS基因突变和患者临床特征相关性。结果外周血标本中检测出14例突变(11.7%),组织中11例(11.3%),两种标本一致性为75.0%。接受EGFR-TKIs治疗患者中,外周血标本35例,其中检测KRAS突变者2例,疗效评价均为疾病进展(PD);未突变者33例,客观缓解率(ORR)27.3%,疾病控制率(DCR)57.6%。组织标本45例,其中检测KRAS突变者4例,疗效评价均为PD;未突变者41例,ORR26.8%,DCR56.1%。结论 NSCLC患者外周血和肿瘤组织中KRAS基因突变一致性较高,组织中检测KRAS基因突变和EGFR-TKIs...     

骨桥蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:研究骨桥蛋白(OPN)在非小细胞肺癌中的表达。方法:采用免疫组化SP法,检测78例非小细胞肺癌和20例肺炎性假瘤中OPN的表达情况,分析OPN的表达与临床病理特征关系。结果:在非小细胞肺癌组织中OPN的阳性率为59.0%(46/78),明显高于肺炎性假瘤(10.0%)(P<0.01),其表达与肿瘤分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:非小细胞肺癌中骨桥蛋白为过表达,且与TNM分期及淋巴结转移有关,提示OPN可能促进了非小细胞肺癌发生、发展及转移。     

survivin及P53和P27在非小细胞肺癌组织中的表达

目的探讨survivin、P53、P27在非小细胞肺癌组织中的表达。方法 89例非小细胞肺癌患者的肺癌组织(肺癌组)和10例支气管扩张患者的肺组织(对照组),2组采用免疫组织化学SP法检测survivin、P53、P27蛋白的阳性表达率。结果肺癌组survivin蛋白(53.9%)、P53蛋白(68.5%)阳性表达率均高于对照组(10.0%、30.0%)(P0.05),P27蛋白阳性表达率(48.3%)低于对照组(90.0%)(P0.05);肺癌组腺癌组织P27蛋白阳性表达率(59.1%)明显高于鳞癌组织(37.8%)(P0.05)。结论非小细胞肺癌组织中survivin、P53高表达,P27低表达。     

非小细胞肺癌细胞p53凋亡刺激蛋白家族的表达及调节

目的:探讨p53遗传背景不同的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中p53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族的表达和调节。方法:应用荧光定量RT-PCR方法检测细胞株中ASPP的mRNA表达以及应用Westernblot检测ASPP蛋白含量,MTT法检测不同细胞对抗肿瘤药物的敏感性。结果:顺铂处理后NCI-H157细胞株的IC50值是3.7μg/mL,A549的IC50是10.48μg/mL。NCI-H157细胞株中ASPP1、ASPP2mRNA平均表达量分别是A549的2.66倍(P=0.002)和6.98倍(P=0.03)。NCI-H157细胞株ASPP1、ASPP2蛋白表达量分别是A549的1.33倍和1.24倍。结论:ASPP家族在突变型NSCLC细胞株中的表达比在野生型细胞株中高,ASPP家族表达和肺癌细胞对抗肿瘤药物的敏感性有关,有望成为抗肿瘤治疗的新的分子靶点。     

利用生物信息学分析CALHM2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

[目的]基于TCGA及GEO等数据库收录肿瘤高通量数据,分析钙稳态调节家族蛋白2(CAL-HM2)等CALHMs家族基因在非小细胞肺癌癌(NSCLC)中的表达及临床价值.[方法]利用Oncomine,GEPIA及UALCAN等在线工具分析和验证CALHMs(CALHM1-6)家族基因在NSCLC的表达水平;利用Huma...     

p63在肺癌微小活检组织标本中的应用价值

目的 探讨p63及其与CK5/6、CK7联合应用在鉴别诊断肺微小活检组织标本鳞状细胞癌和腺癌中的作用.方法 用SP法进行p63、CK5/6、CK7免疫组化染色,回顾观察47例已有相应肺癌根治切除标本证实其组织病理学类型的活检标本.结果 鳞状细胞癌p63阳性率为96%(25/26),CK5/6为81%(21/26),CK7为4%(1/26);腺癌p63阳性率为5%(5/21),CK5/6为10%(2/21),CK7为95%(20/21).结论 p63对于诊断鳞状细胞癌有高度特异性,特别体现在微小组织活检标本上.联合应用p63、CK5/6、CK7有助于小块活检组织中肺鳞状细胞癌和腺癌的鉴别.     

Association between human-Pneumocystis infection and small-cell lung carcinoma

BACKGROUND: Tobacco smoking is the most important but not the only risk factor in lung carcinoma. There is evidence that certain infections, which cause chronic inflammatory reactions, can also induce tumour development. It has recently been shown that patients with chronic pulmonary diseases present a high rate of subclinical Pneumocystis infection, and that the latter is able to induce inflammatory responses and alveolar cell alterations. The possible role of Pneumocystis infection in the development of lung neoplasms thus deserves consideration. MATERIAL AND METHODS: Polymerase chain reaction has been used to analyze the presence of DNA of two independent loci of the Pneumocystis genome: the mitochondrial region (mtLSU rRNA) and the gene encoding for the dihydropteroate synthase enzyme, in paraffin-embedded tissue blocks of 10 cases of small cell lung carcinoma (SCLC) and 10 cases of nonsmall cell lung carcinoma (NSCLC) with similar demographic and clinical characteristics. Five cases without lung pathology, and two cases of Pneumocystis pneumonia were also analyzed as controls. RESULTS: DNA of the microorganism was found in all the cases of SCLC but in only two of the NSCLC, and in none of the controls without pulmonary disease - thus implying a statistically significant association (P < 0.0001) between subclinical Pneumocystis infection and SCLC. CONCLUSIONS: While the nature of this association is not clear, it nevertheless constitutes an important finding - either the infection is specifically facilitated by this tumour or induces the development of this type of neoplasm in combination with other factors. Eur J Clin Invest 2004; 34 (3): 229-335     

esp1基因上调表达对肺腺癌细胞的生物学效应研究

目的:研究分离酶(seperase/estradiol-stimulatedprotein,esp1)在Spc-A-1细胞中对染色体分离的作用,为肿瘤的基因治疗探索新的治疗方法。方法:实验于2003-07/12在解放军第三军医大学分子遗传教研室完成。将含esp1基因的EGFP-N1质粒转染到Spc-A-1细胞,构建稳定的细胞系,检测其转染效率及对染色体分裂相的影响。结果:表达载体EGFP-N1-esp1转染成功,稳定细胞系构建成功,染色体异常分裂相由众数68条减为57条。结论:esp1的上调表达对于肿瘤的异常染色体分裂相有一定的抑制作用,对于肿瘤治疗有潜在的应用价值。     

Deficiency of acylpeptide hydrolase in small-cell lung carcinoma cell lines.

During protein biosynthesis, processing of the N terminus of many proteins may occur through acetylation and deacetylation. The enzyme acylpeptide hydrolase is likely involved in deacetylation of nascent peptide chains or of bioactive peptides. The related enzyme, acylase, hydrolyzes the acetyl amino acid product of the acylpeptide hydrolase reaction to acetate and a free amino acid. There is a reciprocal relationship between the substrates for these enzymes (i.e., substrates for one enzyme are competitive inhibitors for the other). In several cultured cell lines, including normal and malignant cells, the ratio of acylpeptide hydrolase to acylase enzyme activities appears to be coordinated and characteristic for a given cell type. Thus, in normal cultured lung cells, hamster ovary cells, hepatoma cells, and lymphocyte cells, nearly equal amounts of these enzymes are expressed, conducive to optimal processing of acetylated N-terminal residues. Four lines of erythroleukemic cell lines were found to express nearly twice as much acylase as acylpeptide hydrolase activity. In the Ehrlich ascites tumor cell line, where 80% of the proteins have been reported to remain acetylated at their N terminus, acylpeptide hydrolase is hardly expressed but acylase activity is not reduced. The 3p21 region of human chromosome 3, which contains the DNF15S2 locus that encodes acylpeptide hydrolase (Jones et al., Proc Natl Acad Sci USA 1991;88:2194), undergoes deletion in some carcinoma cells; the gene that encodes for the acylase is also present on region 3p of the same chromosome. We found that both acylpeptide hydrolase and acylase activities are practically absent in six small-cell lung carcinoma cell lines tested.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

Bilateral uveal metastases from small-cell carcinoma of the lung.

Metastasis from small-cell carcinoma of the lung (SCCL) has most frequently been found in the lymph nodes, bones, brain, and liver. We have reported a case of metastatic SCCL located in the uveal layer of both eyes (choroidal in one and iridic in the other), an extremely rare occurrence.     

宫颈鳞状细胞癌组织中p63和p40的表达及其临床意义

目的探讨宫颈鳞状细胞癌组织中p63和p40的表达及其临床意义。方法选择宫颈鳞状细胞癌组织标本83例,采用免疫组织化学染色法检测p63和p40的表达,分析p63和p40在宫颈鳞状细胞癌中的表达状况,并分析宫颈鳞状细胞癌组织中p63和p40表达与患者临床病理特征的关系以及二者之间的相关性。结果在83例宫颈鳞状细胞癌组织中,呈p63弱阳性或阳性表达者65例,阳性率为78.31%,呈p40弱阳性或阳性表达者72例,阳性率为86.75%,二者均呈弱阳性或阳性表达者53例,阳性率为63.86%,二者均呈阴性表达者10例,阴性率为12.05%。不同年龄、部位的宫颈鳞状细胞癌患者组织中p63和p40的阳性表达无明显差异性(χ^2分别=1.17、1.75、0.52、0.71,P均>0.05),但不同肿瘤大小、临床分期、分化程度、肌层浸润深度及有无淋巴结转移、脉管浸润、宫旁浸润的患者组织中p63和p40的阳性表达存在显著性差异(χ^2分别=5.72、23.14、13.10、43.40、53.99、61.36、62.43、6.57、33.73、7.36、35.85、35.87、22.13、50.02,P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,宫颈鳞状细胞癌组织中p63与p40的表达水平呈正相关(r=0.96,P<0.05)。结论p63和p40在宫颈鳞状细胞癌组织中具有较高的阳性表达率,与患者的疾病恶性程度有关,且二者表达呈正相关。     

p16基因异常甲基化检测对周围型肺癌的诊断价值

目的:了解周围型肺癌患者外周血血浆中p16基因异常甲基化发生情况及其在周围型肺癌临床辅助诊断中的应用价值。方法:选取56例肺周围型结节手术患者的血浆和组织标本,其中31例为周围型肺癌,25例为肺部良性结节,采用甲基化特异性聚合酶链反应方法检测p16基因启动子的异常甲基化情况。结果:在周围型肺癌患者的血浆和肿瘤组织中,p16基因甲基化检出率分别为64.5%(20/31)和70.9%(22/31);周围型肺癌患者血清、肿瘤组织中p16基因的甲基化异常事件与肿瘤分期、分型无明显相关性。在25例良性肺部疾病患者中,3例血浆和手术切除标本检测出p16基因启动子的异常甲基化存在;良、恶性肺周围型结节的p16基因异常甲基化发生情况差异存在显著性。结论:检测周围型肺癌患者血浆中p16基因异常甲基化情况有可能成为有价值的临床辅助诊断手段。     

肝细胞癌中p14ARF基因启动子甲基化及蛋白表达的研究

目的 通过检测肝细胞癌中p14ARF基因启动子甲基化状态与蛋白表达的关系,探讨p14ARF基因启动子甲基化与肝细胞癌的关系.方法 通过甲基化特异性PCR(MSP)方法及免疫组化(IHC)法分别检测50例肝细胞癌组织和癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化状态和蛋白表达水平.结果 癌组织及癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化阳性率分别为28%(14150)和4%(2/50)(P<0.01).癌与癌旁组织p14ARF蛋白表达差异极显著(P<0.01).p14ARF基因启动子甲基化和蛋白表达与临床分期、门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤大小、肿瘤个数及血清AFP值无关,而在肿瘤分化程度上p14ARF盯蛋白表达有显著差异,p14ARF基因启动子甲基化则无差异.p14ARF基因启动子甲基化与蛋白表达呈负相关.结论 启动子区甲基化是p14ARF基因失活的重要机制.p14ARF启动子区异常甲基化可能参与了肝癌的发生、发展,在肝癌的进展中起重要作用.