甲状腺球蛋白—抗甲状腺球蛋白循环免疫复合物的单克隆抗体ELISA测定

本文介绍了一种应用抗人甲状腺蛋白单克隆抗体的ELISA方法,检测循环甲状腺球蛋白-抗甲状腺球蛋白免疫复合物(TG-IC)。该方法检测的敏感性约为200ng/ml血清,且具有很好的特异性。检测151名甲状腺疾病患者TG-IC的结果表明:甲状腺腺瘤,结节性甲状腺肿、原发性甲低等均可出现TG-IC;但桥本氏病TG-IC的检出率最高、Graves病活动期     

灵敏的人血清甲状腺球蛋白单克隆抗体ELISA法的建立

为提高对人血清甲状腺球蛋白检测的灵敏度。本文采用杂交瘤细胞技术制度了鼠抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体,建立了灵敏度的ＴｇＥＬＩＳＡ双抗体夹心法。其灵敏度为１ｎｇ／ｍＬ;批内变异系数为５．３％,批间变异系数为６．７％,１１６名健康献者血清中含有甲状腺球蛋白的占７２．４％。     

甲状腺球蛋白与抗甲状腺球蛋白复合物的ELISA测定

自身免疫性甲状腺疾病包括Graves病(甲亢)、桥本氏甲状腺炎(桥病)与特发性粘液水肿(甲低)。它们共同的特征是甲状腺内有大量淋巴细胞浸润,甲状腺细胞程度不等的变性和体内存在有针对甲状腺细胞或其成份的细胞免疫反应与自身抗体。对自身免疫性甲状腺疾病的发病机制,近年来已进行了广泛的研究。1974年Galder报告桥病病人血中循环免疫复合物(CIC)的检出率较高,江藤澄哉(Eto,s)等有类似的发现,     

抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的研制和初步应用

本文采用体细胞杂交瘤技术和酶联免疫吸附试验筛选技术,获得了6株持续分泌抗人甲状腺球蛋白 McAb 的杂交瘤细胞系。这6种 McAb 对人 T_3/T_4、及家兔、小牛、大鼠的甲状腺球蛋白均无交叉反应,但其中4种 McAb 对狗甲状腺球蛋白有不同程度的交叉反应,包括2种 McAb对人甲状腺微粒体也有交叉反应,余2种 McAb 均无交叉反应。将所得杂交瘤细胞接种 BALB/c鼠腹腔,获得高效价的腹水 McAb。本文还以这些 McAb 用免疫组化法,研究和检测病理甲状腺组织中甲状腺球蛋白的可能性进行了初步探索,并讨论了其临床意义。     

用单克隆抗体ELISA检测人血清中甲状腺球蛋白的探讨(摘要)

本文作者应用白制的3个鼠抗人甲状腺球蛋白(Alg)单克隆抗体建立厂快速、敏感、特异的3位抗体夹心的ELISA法。本法的标准曲线是用TG标准品连续稀释所得,共检测TG     

测定抗单纯疱疹病毒单克隆抗体的改良ELISA法及其初步应用

<正> 酶联免疫吸附试验(ELISA)已在单纯疱疹病毒(HSV)的研究及临床 HSV 感染的抗原抗体检测中广泛应用。该法多应用浓缩纯化的病毒抗原作为包被抗原。国外曾报道用培养于微板内的 HSV 感染细胞作为抗     

应用单克隆抗体分析甲状腺球蛋白的抗原性

应用自制的10种抗人甲状腺球蛋白(HTg)单克隆抗体(McAb)对HTg 进行抗原性分析。7种McAb同时结合人和狗的甲状腺球蛋白(Tg),3种 McAb仅结合 HTg。根据竞争结合抑制试验的结果,可将McAb 分成反应性不同的5个组,其中8种 McAb对2-ME 处理的HTg的结合力显著下降,2种 McAb对 SDS 解聚及热变性HTg的结合力下降。Graves′病,桥本氏甲状腺炎等抗HTg自身抗体可抑制6种McAb对HTg的结合。这些结果提示:1.HTg分子上至少存在着5个抗原区域,一些抗原决定簇决定着种属特异性,另一些可能为哺乳动物共有。2.抗HTg McAb可以识别依赖二硫键的抗原决定簇。3.与抗HTg自身抗体反应的一些抗原决定簇,可能分布在一定的抗原区域内。     

血清甲状腺微粒体抗体放射免疫测定的临床初步应用

<正> 近年来,应用放射免疫方法以测定血清中甲状腺微粒体(TM)抗体。TM 抗体的检测在自体免疫性甲状腺病的诊断上的价值国内外已一致公认。我们应用国产 TM放射免疫分析药盒对100例正常人及104例各种甲状腺疾病患者的血清进行测定,现将结果报告如下。     

人血清抵抗素ELISA方法的研究及其临床初步应用

用兔抗人抵抗素(resistin)片断(22～34氨基酸残基)的多克隆抗体(PcAb)包被固相板,用辣根过氧化物酶(HRP)标记PcAb得HRP-PcAb.在包被PcAb的孔中加入抵抗素标准品(或待测样品),加入HRP-PcAb,形成PcAb-resistin-HRP-PcAb复合物,加酶底物邻苯二胺(OPD)显色,用酶标仪在492nm波长处测定OD值,绘制标准曲线.从标准曲线读出样本中抵抗素含量.本方法特异性强,灵敏度高,精密度好.该法测定范围0.5～100ng/mL,最低检出量0.5ng/mL,批内和批间CV%分别为3.4%和7.2%.50例2型糖尿病患者血清抵抗素含量为23.2±3.9 ng/mL,明显高于正常值16.0±2.5ng/mL.结果表明该法稳定,灵敏度适于检测人血清抵抗素水平.     

斑点ELISA检测血清HBcAg及其临床应用

<正> 乙型肝炎病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)是反映HBV复制的直接指标,血清中HBcAg通常为病毒的壳蛋白所包裹,或以抗原-抗体复合物形式存在,用常规方法不能检出。硝酸纤维膜(NC)是一种吸附作用很强的固相载体。用其建立的ELISA方     

ELISA法检测甲状腺刺激抗体及其临床应用

ＥＬＩＳＡ法检测甲状腺刺激抗体及其临床应用汤特，张天庚，叶静，张定泉Ｇｒａｖｅ病（ＧＤ）是一种常见的甲状腺自身免疫性疾病。甲状腺自身抗体（Ｔｈｙｒｏｉｄｓｔｉｍｕｌａｔｉｕｇａｎｔｉｂｏｄｙ，ＴＳＡｂ）的存在与ＧＤ的发病密切相关［１］。本文以制备的抗...     

血清瘦素测定的初步临床应用

瘦素 (Ｌｐ)是ｚｈａｎｇ等于 1994年从遗传性肥胖小鼠 (Ｏｂ)的脂肪组织中采用位置克隆技术首次克隆出小鼠肥胖基因(Ｏｂ基因 )后 ,Ｌｓｓｅ等又克隆成功了人的肥胖基因。近年的研究发现 ,其血浆水平的变化与多种疾病关系密切 ,为了解和掌握其临床意义 ,本文对临床几种相关疾病进行了测定研究 ,现报道如下。对象和方法一、对象 :2型糖尿病 (ＮＩＤＤＭ )患者组 4 0例 (男 2 6 ,女14 ) ,年龄 2 5～ 72岁。单纯性肥胖组 32例 ,体重指数 (ＢＭＩ)≥2 5ｋｇ ｍ2 (男 2 0 ,女 12 ) ,年龄 18～ 5 4岁。高血压病患者组 36例 (男 2 6 ,女 10 ) ,年…     

单克隆抗体对人甲状腺球蛋白抗原性的分析

人甲状腺球蛋白(HTg)是一种分子量660000道尔顿复杂的糖蛋白,与自身免疫性甲状腺疾病机制有关。由于HTg分子太大,目前对HTg抗原性方面等了解甚少。我们使用10种抗HTg单克隆抗体(McAb)为探针,对HTg的抗原性进行分析。 由于7种McAb可以同时结合人和狗的甲状腺球蛋白(Tg),余3种仅可结合HTg,故将10种McAb分成二类。根据McAb竞争抑制另一种McAb结合HTg能力的不同,将10种McAb分成反应性不同的5个组。其中第V组针对的抗原区域几乎包含着Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组7种     

血清透明质酸ELISA检测方法的建立及临床初步应用

采用透明质酸特异结合蛋白(Hyaluronate binding protein,HABP)为透明质酸(Hyaluronate,HA)抗体,建立了血清HA 的夹心ELISA 检测方法。关键步骤为HABP 的提纯及其酯化生物素的标记,并利用亲合素生物素系统放大提高其灵敏度。临床初步应用提示,尿毒症和慢性肝病患者血清HA 含量明显高于正常人。本方法简便、快速、重复性好,灵敏度可达2.5ng/ml,可适用于HA 的临床和基础研究。     

甲状腺球蛋白测定在甲状腺疾病中的临床意义

对我院2007年3月～2008年12月甲状腺疾病甲状腺球蛋白（TG）检查1312例,现分析报告如下。     

应用单克隆抗体测定纤维连结蛋白ELISA方法的建立

本文介绍用McAb作为包被和检测抗体进行双抗体夹心ELISA来测定人血浆纤维连结蛋白。通过实验找出最佳条件,即两种McAb混合使用,在McAb和酶结合物稀释液内加入4％PEG及使用TMBI底物的最适浓度等,该法敏感性可达80ng/ml,可作为临床常规方法使用。     

甲状腺球蛋白测定在甲状腺癌中的应用及研究进展

甲状腺癌是常见的内分泌肿瘤之一,最常见的病理类型是分化型甲状腺癌(DTC).而甲状腺球蛋白(Tg)是DTC重要的肿瘤标志物,测定Tg水平在诊断DTC复发或转移、疗效评估方面有重要的价值.目前除了检测血清Tg,细针穿刺洗脱液甲状腺球蛋白(FNA-Tg)测定也广泛用于临床,洗脱液中的Tg有助于诊断DTC颈部淋巴结转移,两者Tg测定共同提高DTC的临床诊断效能.本文主要对甲状腺球蛋白测定在甲状腺癌中的应用及研究进展进行综述.     

用单克隆抗体ELISA一步法检测人血清甲胎蛋白

<正> 检测人血清中甲胎蛋白(AFP)含量的方法,历经不断改进,其灵敏度已由 30000ng/ml提高到 0.1～10ng/ml,阳性率也从70％提高到90%以上。但目前所用抗体大多为异种动物免疫血清,生产工艺复杂,批间差异较大,难以标准化。单克隆抗体(McAb)的问世,为免疫学诊断提供了良好的工具。本文运用两种AFP McAb建成检测AFP的ELTSA一步法,以期开发新一代诊断试剂。     

甲状腺球蛋白抗体对电化学发光免疫分析法测定甲状腺球蛋白的影响

采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)同时测定甲状腺球蛋白(Tg)、自身甲状腺球蛋白抗体(TgAb)值,并用回收实验研究TgAb对Tg测定值的影响。甲状腺疾病患者血样84例,测定Tg、TgAb。回收实验分为三组。第一组分别加入50、100和200 ng/ml的标准Tg;第二组TgAb≥4 000 IU/ml的血样对倍稀释5次,分别测定Tg、TgAb值,并加入100 ng/ml标准Tg;第三组TgAb浓度梯度组,分别加入100 ng/ml标准Tg。计算回收率(R)。结果显示血清对倍稀释后,TgAb实测值逐渐下降;Tg实测值、Tg计算值逐渐上升,两者的差值随稀释倍数的增加而增大。当R<80%时,有22人(91.7%)TgAb>115 IU/ml。ECLIA测定Tg时,TgAb的干扰导致Tg测定值低于真实值,并呈浓度依赖性。TgAb的存在是导致回收率降低的主要原因。