尖锐湿疣患者HPV感染与细胞免疫功能的相关性

目的研究尖锐湿疣初发、复发患者之间,以及不同病程患者之间T淋巴细胞亚群的表达情况。方法选择56例尖锐湿疣患者,经冷冻治疗后至疣体消失后随访3个月,未复发者计入A组(20例),再次复发者计入B组(36例),应用三色荧光抗体染色法检测各组患者外周血CD4+,CD8+T淋巴细胞的表达,比较A,B两组CD4+,CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值的差异,并与正常对照组进行比较。同时根据病程长短,病程<3个月者计入C组(37例),病程≥3个月者计入D组(19例),比较C,D两组CD4+,CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值的差异,并与正常对照组进行比较。结果①初发及复发患者组T淋巴细胞亚群的变化:A组CD4+,CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值分别为(34.61±4.98)%,(29.46±4.56)%和(1.20±0.22),B组分别为(30.33±4.84)%,(33.10±5.90)%和(0.94±0.21),正常对照组分别为(39.58±4.31)%,(25.44±3.54)%和(1.57±0.17),与正常对照组相比,A,B两组CD4+细胞百分率及CD4+/CD8+比值明显降低,CD8+T细胞百分率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),且B组变化更为明显,与A组差异有统计学意义(P<0.05);②不同病程患者组T淋巴细胞亚群的变化:C组CD4+,CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值分别为(33.03±4.51)%,(30.60±5.36)%和(1.11±0.23),D组分别为(29.57±5.98)%,(34.12±5.73)%和(0.89±0.22),C,D两组与正常对照组相比,CD4+细胞百分率及CD4+/CD8+比值明显降低,CD8+T细胞百分率明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),且D组变化更为明显,与C组差异有统计学意义(P<0.05)。结论与正常对照组比较,尖锐湿疣患者存在细胞免疫功能降低,且随着病程延长、病情反复,全身细胞免疫功能降低更为明显,导致CA迁延不愈。     

复发性生殖器疱疹患者外周血T细胞CD69和HLA-DR的表达

目的:探讨复发性生殖器疱疹(RGH)患者外周血CD69和HLA-DR分子在T细胞的表达。方法:采用免疫荧光三标记流式细胞术检测18例RGH患者在疾病发作期和静止期外周血T细胞上CD69和HLA-DR抗原的表达。结果:RGH患者外周血CD3+T细胞CD69的表达,较正常对照组明显升高(P<0.01);CD4+T细胞CD69的表达,在发作期为5.63±1.74,静止期为7.12±2.27,均比正常对照组明显升高,发作期与静止期相比差异有高度显著性(P<0.01);RGH患者外周血CD3+T细胞HLA-DR+的表达,亦显著高于对照组(P<0.01)。结论:单纯疱疹病毒感染诱导体内CD4+和CD8+T细胞活化、增殖,前者分泌多种抗病毒细胞因子,后者则分化为病毒特异性CD8+细胞毒T细胞,它们共同发挥着抗病毒作用。     

寻常疣和跖疣患者外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的检测

目的探讨寻常疣和跖疣患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及共刺激分子CD28,CD40的表达情况。方法采用流式细胞仪检测实验组60例(寻常疣、跖疣患者各30例)和健康对照组30例的外周血T淋巴细胞亚群和CD28,CD40分子在淋巴细胞上的表达水平。结果寻常疣组、跖疣组与健康对照组相比:外周血CD4+T淋巴细胞(34.57%,35.39%,42.02%)明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);CD4+/CD8+比值(1.38,1.44,1.72)降低,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴细胞上CD28的表达(52.80%,51.87%,37.41%)明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),CD40的表达(12.88%,11.94%,15.82%)减少,差异有统计学意义(P<0.05)。而寻常疣和跖疣两组间,外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的表达,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组患者的疣体数量和外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的变化均无相关性(P>0.05)。结论寻常疣和跖疣患者体内存在T淋巴细胞亚群改变和共刺激分子CD28,CD40表达异常,可能与其免疫功能紊乱和病程慢性化有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血中T细胞CD4CD25的表达

目的了解CD4,CD25在系统性红斑狼疮患者外周血T细胞中的表达水平及其临床意义。方法用流式细胞术检测30例正常人和30例活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中T细胞CD4,CD25的表达水平,根据CD25表达荧光强度>100者为T细胞CD4+CD25+bright,并与SLE活动指数评分(SLEDAI)进行相关分析。结果SLE患者外周血T细胞CD4+CD25+表达率为(8.82±2.98)%,显著低于对照组(12.24±5.71)%(P<0.05);患者组T细胞CD4+CD25bright表达率为(1.56±0.76)%,低于对照组(2.23±1.22)%(P<0.05),差异有统计学意义;SLE患者外周血T细胞CD4+CD25+、T细胞CD4+CD25bright表达率与SLEDAI评分两者之间无相关性;r分别为-0.156,-0.153,P均>0.05)。结论SLE患者外周血中T细胞CD4+CD25+减少,其可能在发病机制中起一定的作用,低水平T细胞CD4+CD25bright在SLE发病中的确切作用机制有待进一步阐明。     

斑秃患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4~+CD25~+调节T细胞的检测

目的检测斑秃(AA)患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+调节性T(Tr)细胞数量变化,分析AA的可能病因。方法利用流式细胞仪和单克隆荧光抗体技术,测定重度和局限性AA各40例患者外周血中T淋巴细胞亚群占T淋巴细胞的比率及CD4+CD25+Tr细胞在CD3+CD4+T淋巴细胞中的比率。结果重度AA患者外周血中CD4+CD25+Tr细胞占CD3+CD4+T细胞的比率为(1.43±0.74)%,显著低于正常对照组(2.25±0.97)%(P<0.01),重度AA患者的CD4+T占T淋巴细胞的比率为(31.42±6.66)%,略高于正常对照组(30.69±7.47)%(P>0.05),差异无显著性,而CD8+T占T淋巴细胞的比率为(25.86±4.35)%,明显高于正常对照组(22.42±6.10)%(P<0.01);局限性AA患者的三项指标分别为(2.14±0.87)%,(32.60±10.27)%和(21.59±5.24)%,与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论AA患者外周血中CD4+CD25+Tr明显低于正常对照组,CD8+T比率明显高于正常对照组,可能是导致重度AA发病的主要免疫机制。     

HIV/AIDS患者CD4~+ T细胞中CD25和CD8~+ T细胞中CD28的表达

目的探讨外周血CD4+ T细胞中CD25表达率和CD8+ T细胞中CD28表达率在HIV/AIDS患者发病中的作用。方法应用流式细胞仪荧光染色技术检测35例HIV/AIDS患者CD4+ T细胞中CD25表达和CD8+ T细胞中CD28的表达,以41名健康体检人员做对照。结果HIV/AIDS患者和健康对照组之间CD4+ T细胞中CD25表达率(27.51±4.23)%,(44.41±9.17)%,CD4+25+ T细胞占淋巴细胞的比例(2.00±1.42)%,(16.62±4.60)%,CD4+25- T细胞占淋巴细胞的比例(5.16±3.37)%,(21.03±6.19)%,CD8+ T细胞中CD28中的表达率(25.12±6.33)%,(44.24±8.61)%,CD8+28- T细胞占淋巴细胞的比例(36.85±8.98)%,(13.33±4.58)%的差异均有显著性(P<0.01),CD8+ 28+ T细胞占淋巴细胞的比例(12.31±4.14)%,(10.51±3.71)%差异无显著性(P>0.05)。结论HIV/AIDS患者CD25在CD4+ T细胞与CD28在CD8+ T细胞的表达率降低可能与HIV感染后引起的免疫缺陷有关,CD8+ CD28- T细胞的增加有助于促进HIV/AIDS患者的炎性反应和免疫激活。     

尖锐湿疣患者外周血单一核细胞共刺激分子CD28,CD40的检测

目的探讨免疫共刺激分子CD28/CD152-CD80/CD86,CD40-CD40L在尖锐湿疣患者外周血单一核细胞(PBMC)中的表达情况。方法采用流式细胞仪(FCM)检测60例CA患者(初发组30例、复发组30例)和30例健康对照者外周血CD28,CD152,CD40L在CD4+,CD8+T细胞上CD80,CD86,CD40在CD19+B细胞上的表达水平。结果CA患者CD28,CD40L在CD4+,CD8+T细胞的表达,与对照组(42.36%,13.85%,5.08%,2.58%)相比,复发组(37.10,11.66%,2.57%,1.25%)较初发组(39.69%,12.76%,3.93%,1.96%)明显降低(P<0.01);CD80,CD86,CD40在CD19+B细胞上的表达与对照组(1.59%,3.83%,14.25%)相比,复发组(0.65%,3.05%,10.24%)较初发组(1.04%,3.45%,12.21%)显著降低(P<0.01),而CD152在CD4+,CD8+T细胞上的表达与对照组(1.71%,9.62%)相比,复发组(39.2%,12.15%)较初发组(2.64%,10.90%)显著增高(P<0.01)。结论尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞CD28/CD152-CD80/CD86,CD40-CD40L共刺激分子的异常表达可能与其免疫功能紊乱及复发机制有一定关系。     

复发性生殖器疱疹sHLA-G及外周血T细胞亚群和NK细胞的表达

目的:明确复发性生殖器疱疹(RGH)患者治疗前后外周血T细胞亚群和NK细胞及sHLA-G水平变化。方法:采用酶联免疫吸附法和流式细胞仪分别检测60例RGH患者治疗前后血浆sH LA-G水平及外周血T细胞亚群和NK细胞表达。结果:RGH患者血浆sH LA-G水平治疗前后分别为(11.03±14.57)U/mL和(0.41±0.45)U/mL,差异有统计学意义(P0.05);NK细胞治疗前后分别为(15.01±5.89)%和(17.72±5.56)%,差异有统计学意义(P0.05)。CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞及CD4~+/CD8~+治疗前后差异无统计学意义(P0.05)。结论:外周血sH LA-G及NK细胞表达可能与RGH患者病情发展有关。     

玫瑰糠疹患者外周血淋巴细胞亚群的检测及意义

目的检测玫瑰糠疹(PR)患者外周血淋巴细胞亚群,探讨其在PR发病中的作用。方法应用流式细胞仪检测27例PR患者外周血淋巴细胞上CD3,CD4,CD8,CD28,HLA-DR的表达水平,并以20例健康体检者作为正常对照。结果HLA-DR在PR组的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);PR组与对照组相比,CD3+HR+,CD8+,CD8+CD28+显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);CD4+,CD3+HR-及CD4+/CD8+比值降低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);CD3+,CD8+CD28-,CD3-HR+,CD3-HR-等在两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论玫瑰糠疹患者T淋巴细胞亚群间的正常比例发生变化;细胞免疫失调可能在玫瑰糠疹的发展过程中起重要作用。     

HIV-1 RNA有效抑制下T淋巴细胞与HAART持续治疗时间的相关性

目的观察HIV-1RNA有效抑制下HAART持续治疗时间与T淋巴细胞的相关性。方法对102例HAART持续治疗时间超过6个月,血浆HIV-1RNA<50个拷贝/mL的AIDS患者进行回顾性研究,采用Spearman秩和相关检验考察HAART持续治疗时间与CD4+,CD3+,CD8+,CD4+CD28+,CD4+CD45RA+,CD4+CD45RO+和CD8+CD38+,CD38+T细胞的相关性。同时根据HAART持续治疗时间将102例AIDS患者分为A(6～12个月)、B(13～24个月)、C(25～36个月)、D(37～52个月)4组,考察4组间T细胞亚群的差别。结果 HIV-1RNA有效抑制下HAART持续治疗时间与CD4+CD28+,CD4+CD45RA+,CD4+CD45RO+T细胞绝对计数呈正相关,相关系数r分别为0.214,0.249,0.259,P值分别为0.007,0.016,0.012。HAART持续治疗时间分别与CD8+CD38+,CD3+,CD8+T细胞表达比例呈负相关,r分别为-0.352,-0.204,-0.236,P值分别为0.000,0.041,0.018;与CD28+细胞绝对计数呈正相关(r=0.204,P=0.042)。CD4+T细胞绝对计数与CD4+CD28+,CD4+CD45RO+T细胞相对计数呈正相关,r分别为0.421,0.241,P值分别为0.000,0.015;与CD8+CD38+T细胞相对计数呈负相关(r=-0.268,P=0.007)。D组的CD4+CD28+T细胞绝对计数显著高于A组(P<0.05);C,D组的CD4+CD45RA+T细胞绝对计数显著高于A组(P<0.05)。D组的CD8+CD38+T细胞相对计数(17±9)显著低于A组(25±8)(P<0.05)。结论 AIDS患者经过HAART治疗病毒复制被抑制后,HAART持续治疗时间与某些T细胞亚群数量有关,HAART持续治疗时间是AIDS患者免疫重建的因素之一。     

复发性生殖器疱疹患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的检测

目的 研究外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Treg细胞)表型和功能改变所致的细胞免疫抑制效应在复发性生殖器疱疹(RGH)发病机制中的作用.方法 采用免疫荧光标染技术,经流式细胞仪检测34例RGH患者和33例正常人外周血CD4⁺CD25⁺T细胞转录因子Foxp3及细胞毒T细胞相关抗原4(CTLA-4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关基因(GITR)、程序性死亡1(PD-1)等抑制性膜分子的表达水平.同时,用免疫磁珠细胞分选技术从外周血中分选出高纯度的CD4⁺CD25⁺T细胞,经体外刺激后分析胞内分泌白介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)阳性细胞数.结果 RGH患者外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞数量比正常人对照组显著增加(P<0.001),CD4⁺CD25⁺T细胞表面抑制性膜分子CTLA-4、GITR、PD-1表达明显增强(P分别<0.001、<0.001及<0.01),胞内IL-10和TGF-β阳性细胞增多(P值分别<0.01及<0.001).结论 单纯疱疹病毒感染可诱导CD4⁺CD25⁺Treg细胞活化增殖,高表达负性共刺激分子和分泌抑制性细胞因子,通过多种机制抑制机体的抗病毒免疫应答.     

斑秃患者外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞及T淋巴细胞亚群的测定

目的 研究斑秃患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量及CD4+、CD8+ T淋巴细胞亚群数量与斑秃疾病严重程度的关系。方法 对斑秃进行病情分组，以流式细胞仪检测17例重度、15例局限型斑秃患者和25例正常人对照者外周血中有功能活性的CD4+CD25+调节性T细胞（即CD4+CD25+ Foxp 3 T 细胞）在CD4+ T淋巴细胞中的比率，CD4+和CD8+占T淋巴细胞的比率。 结果 重度斑秃患者外周血中有功能活性的CD4+CD25+ Foxp 3 T细胞占CD4+ T细胞比率为0.54% ± 0.31%，显著低于正常人对照组（3.21% ± 0.76%）及局限型斑秃患者（2.71% ± 0.37%，P ＜ 0.001）；与正常人对照组比较，差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。重度斑秃患者的CD4+占T淋巴细胞的比率为32.61% ± 3.48%，显著低于正常人对照组（43.0% ± 3.63%，P ＜ 0.001），而CD8+占T淋巴细胞的比率为40.96% ± 8.54%，显著高于正常人对照组（25.23% ± 2.14%，P ＜ 0.001）。局限型斑秃患者的此两项指标分别为41.25% ± 4.27%和26.6% ± 2.28%，与对照组差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。重度斑秃患者的CD8+占T淋巴细胞的比率与CD4+CD25+ Foxp 3调节性 T 细胞占CD4+ T细胞的比率有负相关关系（r ＝ －0.94，P ＜ 0.001）。结论 重度斑秃可能与外周血中CD4+CD25+ T细胞数量的减少和功能活性的降低有关。     

复发性生殖器疱疹患者外周血单一核细胞CD40和CD40L的表达

目的 探讨复发性生殖器疱疹患者外周血单一核细胞CD40、CD40L的表达。方法 利用流式细胞仪对30例复发性生殖器疱疹患者和20例正常人对照者外周血单一核细胞(PBMC)CD40、CD40L的表达及T淋巴细胞亚群进行检测。结果 病例组PBMC中CD40阳性细胞百分数较对照组显著降低(P=0.0061);CD40L阳性细胞百分数较对照组明显降低(P=0.041);CD3⁺T细胞和CD4⁺T细胞百分数亦显著低于对照组(其P值分别为0.025和0.032)。结论 CD40-CD40L共刺激作用低下是生殖器疱疹复发的重要原因之一。     

Role of regulatory T cells in patients with acute herpes zoster and relationship to postherpetic neuralgia

This study is to analyze distribution of peripheral T cell subsets including regulatory T cells in patients with acute herpes zoster (AHZ) and investigate its relationship to the development of postherpetic neuralgia (PHN). T lymphocyte subsets in peripheral blood from 76 patients with AHZ and 38 normal controls were analyzed using flow cytometry. According to the visual analogue scales in the acuter phase and followed up by PHN for 3 months, patients with herpes zoster (HZ) were divided into different patient groups. The results demonstrated a significant decrease in the percentage of CD4 lymphocytes and CD4/CD8 ratios in each patient group as compared with normal controls, and the CD4+ subsets in the severe group were significantly decreased as compared with mild group and moderate group (p < 0.01). Moreover, there seemed a relationship between severity of acute pain during zoster and PHN. The proportions of regulatory T cells (Treg; CD4+CD25+FoxP3+ T cells) were significantly elevated from AHZ patients as compared with normal controls, and CD4+ T cells were inversely correlated with Treg cells (p < 0.01). Furthermore, FoxP3 expression was significantly increased by CD4+CD25^high T cells in the severe group as compared with mild group, moderate group and normal controls. These results indicated that T cellular immunity in AHZ patients was impaired and suggested increased activation of Treg cells may suppress anti-viral CD4+ T cells immune responses, especially in the severe HZ patients. Treg cells may play an important role in the pathogenesis of AHZ and progression toward PHN.     

复发性生殖器疱疹患者外周血Tc1/Tc2亚群检测及意义

目的检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者不同病期外周血CD8+T细胞IFNγ和IL4的水平,分析其与病程、复发次数间的关系,探讨其在RGH发病中的作用。方法应用流式细胞仪对30例发作期、20例发作间歇期患者和15名健康志愿者外周血CD8+T细胞IFNγ和IL4的水平进行检测。结果发作期患者外周血Tc1百分率显著低于正常对照组(P<0.001),其中近半年复发≥3次者呈极显著性降低(P<0.001);Tc1/Tc2比值显著低于正常对照组(P<0.05);发作期患者的复发次数与Tc1和Tc1/Tc2比值显著相关(P均<0.05);在发作间歇期近半年复发≥3次患者外周血Tc1百分率显著低于正常对照组(P<0.05),发作间歇期患者的复发次数与Tc1显著相关(P<0.05)。结论近期反复发作患者外周血Tc1细胞水平低下和Tc1/Tc2比例失衡,Tc1细胞水平低下是潜伏单纯疱疹病毒活化和RGH复发的重要原因之一。     

卡介菌多糖核酸联合中药对白癜风患者T细胞亚群及Fas/FasL系统表达的调节

【摘要】 目的 探讨卡介菌多糖核酸（BCG-PSN）联合中药白癜风颗粒治疗白癜风临床疗效及对免疫的调节作用。 方法 流式细胞仪和ELISA法检测BCG-PSN联合白癜风颗粒治疗白癜风前后T细胞亚群及外周血淋巴细胞Fas及FasL的表达水平,并与BCG-PSN及白癜风颗粒单一治疗对照组进行比较。结果 BCG-PSN联合白癜风颗粒治疗组总有效率达82.86%,明显高于BCG-PSN对照组的40.63%（P ＜ 0.01）。各组治疗前外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+均低于健康对照组（P ＜ 0.01）, CD4+/CD8+比值升高（P ＜ 0.01）, Fas表达明显降低（P ＜ 0.01）。治疗后CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+较治疗前升高 （P ＜ 0.05）,CD4+/CD8+比值下降（P ＜ 0.05）,Fas明显上升（P ＜ 0.01）。结论 BCG-PSN可通过逆转外周血淋巴细胞的Fas/FasL表达异常,诱导淋巴细胞的正常凋亡,与中药合用起协同作用。     

银屑病患者外周血调节性T细胞的检测

目的 检测不同类型银屑病患者外周血中调节性T细胞（Treg）的水平。方法 用流式细胞仪和单克隆荧光抗体检测20例寻常性银屑病、15例脓疱性银屑病和10例红皮病性银屑病患者外周血中CD4+CD25bright调节性T细胞百分率，对寻常性银屑病患者中的10例进行了CD4+CD25hi-intCD127low/-调节性T细胞百分率的检测。结果 红皮病性银屑病组CD4+CD25bright调节性T细胞比例高于其他组（P < 0.01）；寻常性银屑病患者组CD4+CD25hi-intCD127low/-调节性T细胞在CD4+ T细胞中比例为4.39% ± 0.84%，正常人对照组为3.83% ± 1.68%，两组进行Mann-Whitney U检验，差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 CD4+CD25bright调节性T细胞可能与红皮病性银屑病的发病有关。     

TLR9在初发和复发尖锐湿疣皮损及外周血T细胞亚群中的表达

目的检测初发和复发尖锐湿疣(CA)患者皮损及外周血T细胞亚群中TLR9的表达情况,并探讨TLR9在HPV感染和CA复发机制中的作用。方法分别选用30例初发CA和27例复发CA患者皮损,并以28例正常人皮肤石蜡切片作为正常对照组。采用双色免疫荧光抗体染色流式细胞术检测入选者外周血T细胞中TLR9的表达。结果初发CA组和复发CA组皮损颗粒层和棘层TLR9表达(1.38±0.72和2.06±0.84)和外周血CD3+CD4+T细胞内TLR9表达[(11.4±3.2)%和(14.6±2.4)%]显著高于正常对照组[0.97±0.43和(6.2±2.1)%];另外,复发CA患者外周血CD3+CD4+T细胞内TLR9的表达也显著高于初发CA组;以上差异均有统计学意义(P均<0.05)。但是该两组患者的外周血CD3+CD8+T细胞内TLR9的表达与正常对照组差异不显著(P>0.05)。结论 CA皮损及外周血CD3+CD4+T细胞内TLR9表达上调可能是HPV病毒感染的识别受体,并参与机体的抗HPV免疫应答。TLR9可能在CA复发机制中发挥着重要的作用。