PKC-NF-kB信号传导系统对变应性鼻炎Th2细胞因子IL-4及IL-5表达的调控

目的：探讨PKC—NF—kB信号传导系统在调节变应性鼻炎（AR）T淋巴细胞的活化及IL-4、IL-5表达及其在发病过程中的作用。方法：24例急性发作期AR患者和24例健康成人为研究对象，分别从每位受试者的外周血中分离出T淋巴细胞并分成3组进行培养；第1组为空白对照（正常空白对照组及AR空白对照组）；第2组加入终浓度为20nmol／L的PKC激动剂12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯（PMA）（加PMA正常组及加PMAAR组）；第3组同时应用PKC激动剂PMA和终浓度为100μmol／L的NF-kB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）（加PMA和PDTC正常组及加PMA和PDTCAR组）。将培养的T淋巴细胞涂片，用免疫组织化学染色方法检测NF—kB的表达，用酶联免疫吸附（ELISA）法检测上清液中的IL-4及IL-5含量。结果：加PMAAR组T淋巴细胞NF-kB活化细胞百分比、培养上清液中的IL-4、IL-5与正常空白对照组及AR空白对照组比较，差异有统计学意义（均P〈0．01）；与加PMA正常组及加PMA和PDTC正常组T淋巴细胞比较，差异有统计学意义（均P〈0．01）；与加PMA和PDTCAR组T淋巴细胞比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。同时，加PMA和PDTCAR组T淋巴细胞NF—kB活化细胞百分比、培养上清液中的IL-4、IL-5与加PMAAR组、AR空白对照组、正常空白对照、加入PMA正常组、加入PMA和PDTC正常组比较，差异有统计学意义（均P〈0．01）。T淋巴细胞NF—kB活化细胞的百分比与培养上清中IL-后使IL-4和IL-5的表达增加的生物信号能通过激活NF—kB来实现，T淋巴细胞的PKC—NF-kB信号传导系统可能是变应性鼻炎发病机制中的重要环节之一。     

变应性鼻炎外周血T淋巴细胞蛋白激酶C活性检测

目的 检测变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者外周血T淋巴细胞蛋白激酶C(protein kinaseC,PKC)活性,探讨其与Th2细胞因子的关系.方法 季节性变应性鼻炎患者(AR组)及正常者(正常组)各20例,采集外周血并分离T淋巴细胞分两组培养,即空白对照组和加PKC激动剂12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)组.非同位素标记法检测T淋巴细胞PKC活性,ELISA法检测上清液中IL-4和IL-5的表达.结果 AR加PMA组T淋巴细胞PKC活性、上清液中IL-4和IL-5与AR空白对照组、正常组比较显著增加(P均<0.01);AR空白对照组T淋巴细胞PKC活性与正常组比较显著增加(P<0.01);AR空白对照组上清液中IL-4和IL-5与正常组比较无显著差异(P均0.05).T淋巴细胞PKC活性与上清液中IL-4和IL-5呈正相关(P均<0.05).结论 AR患者外周血T淋巴细胞PKC活性较正常人明显增加,IL-4和IL-5表达增多,提示PKC信号转导可能在AR发病中起作用.     

蛋白激酶C和激活蛋白-1信号级联在变应性鼻炎患者T淋巴细胞IL-5表达中的调控作用

目的：探讨蛋白激酶C（PKC）和激活蛋白-1（AP-1）信号转导级联在变应性鼻炎（AR）患者外周血T淋巴细胞IL-5表达中的作用。方法：25例AR患者和23例鼻中隔偏曲（DNS）患者为研究对象，分别从每位受试者外周血中分离T淋巴细胞，并随机分为空白组、PKC激动剂12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯（PMA）组、PMA和AP-1抑制剂姜黄素组进行培养。将培养的T淋巴细胞涂片，用免疫细胞化学染色方法检测AP-1的表达，用酶联免疫吸附（ELISA）法检测上清液中的IL-5含量。结果：①加PMAAR组T淋巴细胞的AP-1活化细胞百分比和培养上清液中的IL-5与DNS空白组与AR空白组比较，均差异有统计学意义（均P〈0．01）；与加PMADNS组及加PMA和姜黄素DNS组T淋巴细胞比较，均差异有统计学意义（均P〈0．01）；与加PMA和姜黄素AR组T淋巴细胞比较，差异亦有统计学意义（P〈0．01）；②加PMA和姜黄素AR组T淋巴细胞AP-1活化细胞百分比、培养上清液中的IL-5含量与AR空白组、加PMAAR组、DNs空白组、加PMADNS组、加PMA和姜黄素DNS组比较，均差异有统计学意义（均P〈0．01）；③T淋巴细胞的AP-1活化与IL-5表达呈显著正相关（r=0．92，P〈0．01）。结论：AR患者T淋巴细胞PKC活化后促进IL-5表达增加的生物信号可能是通过AP-1进行转导，提示T淋巴细胞PKC—AP-1信号转导级联的激活可能是AR发病机制之一。     

变应性鼻炎患者外周血单个核细胞Th1/Th2细胞因子的检测及其意义

目的探讨T淋巴细胞活化及释放的Th1/Th2细胞因子失平衡与变态反应性鼻炎发病的关系.方法用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定40例变态反应性鼻炎患者,20例慢性鼻炎患者和20例健康人的外周血单个核细胞(PBMC),经PHA诱导培养后上清液中Th1细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和Th2细胞因子白介素4(IL-4)、白介素5(IL-5)的水平及血清中可溶性白介素2受体(sIL-2R)的水平,并分别对变应性鼻炎患者的sIL-2R与IFN-γ、IL-4、IL-5的相关性进行研究.结果PBMC培养的上清液中变应性鼻炎组的IL-4和IL-5水平显著高于慢性鼻炎组和正常组(P＜0.01);而IFN-γ水平却显著低于后两组(P＜0.01).变应性鼻炎组患者血清的sIL-2R变应性鼻炎组均显著高于后两组(P＜0.01)且与PBMC培养的上清液中IL-4和IL-5的浓度呈正相关(r分别为0.625和0.595,P＜0.01).与IFN-γ浓度呈负相关(r=-0.580,P＜0.01).结论变应性鼻炎患者体内激活的T淋巴细胞是Th2细胞,并释放Th2细胞因子,Th1细胞和Th1细胞因子分泌则受到抑制;Th2细胞因子在调节变应性鼻炎IgE合成及嗜酸性细胞浸润等病理生理机制上起重要作用.     

中耳胆脂瘤组织中核因子κB的活化及白细胞介素6的异常表达

目的 研究中耳胆脂瘤组织中核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)活化与细胞因子白细胞介素6(IL-6)表达的关系,以进一步阐明胆脂瘤的发病机制.方法 于中耳手术中收集中耳胆脂瘤组织标本10例,正常外耳道皮肤组织6例,分别采用凝胶电泳迁移阻滞法及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NF-κB与IL-6在胆脂瘤中的表达,并进行相关性分析.结果 胆脂瘤及正常外耳道皮肤组织中NF-κB DNA结合活性分别为(15.9±8.2)%和(1.4±0.9)%,两组比较差异具有统计学意义(t=3.502,P=0.014);IL-6 mRNA相对表达量分别为0.836±0.281和0.470±0.115,两组比较差异具有统计学意义(t=2.166,P=0.048);NF-κB DNA结合活性与IL-6 mRNA表达水平呈正相关(r=0.752,P<0.05).结论 胆脂瘤组织中存在NF-κB的活化及IL-6基因的异常表达,NF-κB的活化可能是导致胆脂瘤中IL-6过量表达的重要因素.     

核因子-κB及ICAM-1 mRNA在变应性鼻炎鼻黏膜中的表达

目的:检测变应性鼻炎(AR)患者鼻黏膜细胞中NF-κB的活化及其对ICAM-1 mRNA表达量的影响.方法:选取AR患者32例(AR组),同时以单纯鼻中隔偏曲患者20例为对照组,采用免疫组织化学法检测2组患者的中鼻甲黏膜NF-κB亚单位p50、p65的表达情况,用RT-PCR法检测2组患者的中鼻甲黏膜ICAM-1mRNA的表达量.结果:NF-κB在AR组表达为阳性或强阳性,其中NF-κB p50主要表达于细胞质和细胞核;NF-κB p65主要表达于细胞质,细胞核表达较少.对照组鼻黏膜组织中NF-κB有微弱的表达.2组NF-κB p50、NF-κB p65表达的差异有统计学意义(均P＜0.01).RT-PCR显示:对照组中ICAM-1 mRNA表达微弱,AR组ICAM-1 mRNA表达较强,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).NF-κB p50、NF-κB p65的表达强度与ICAM-1 mRNA的表达强度均存在相关性(r=0.899 5,P＜0.01;r=0.7601,P＜0.01).结论:NF-κB在AR形成、发展中发挥重要作用.过度活化的NF-κB启动ICAM-1 mRNA的转录,上调黏附分子的表达.ICAM-1作为一种重要的炎性因子,与AR形成、发展有关.     

核因子-κB在分泌性中耳炎早期活性的变化及PDTC对其表达的影响

目的探讨核因子-κB（NF-κB）在分泌性中耳炎（secretory otitis media,SOM）发病机制中的作用,为临床探寻以NF-κB为靶点治疗SOM提供实验依据。方法将76只豚鼠随机分三组：对照组（10只）,SOM组（22只）和吡咯醛二硫氨基甲酸（pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC）组（44只,其中PDTC1组和PDTC2组各22只）。对照组：右鼓室内注入0.9%生理盐水0.1ml,分别于注射后0h、6h、1d、3d、5d各处死2只。SOM组：经豚鼠右鼓室内注入灭活肺炎链球菌完成SOM造模。PDTC组：右鼓室注入细菌后6h分别给予PDTC50mg/kg（PDTC1组）和200mg/kg（PDTC2组）腹腔注射。SOM组、PDTC组按注入细菌后不同时点0h、6h、1d、3d、5d分别处死5只。通过免疫组织化学的方法检测鼓室黏膜NF-κB、TNF-α和IL-1β的表达,并行组织学观察。结果SOM组：NF-κBp65、TNF-α、IL-1β在注射后6h就有表达,三者均于24h表达最强;3～5d鼓室黏膜明显增厚,大量炎性细胞浸润。PDTC1组：各时间段与OME组表达相似,仅于注射后1d时NF-κBp65表达较低,两者差异有统计学意义（P〈0.05）。PDTC2组NF-κBp65、TNF-α、IL-1β在注射后6h表达与SOM组表达相似,1、3、5d有表达,但均低于SOM组（P〈0.01）,3～5d时鼓室黏膜厚度明显低于SOM组（P〈0.01）,两组之间的差异具有显著统计学意义。结论①NF-κB信号通路激活可能为SOM发病机制之一,SOM早期NF-κB活化可能与TNF-α和IL-1β上调密切相关。②抗氧化剂PDTC可抑制豚鼠SOM动物模型鼓室黏膜上皮NF-κB的活化,两者存在量效依赖关系,早期足量PDTC干预可明显抑制NF-κB的活化。③抑制NF-κB的活化可下调SOM重要致炎因子TNF-α和IL-1β的表达,从而减轻SOM的病理改变。     

核因子κB信号转导通路对鼻黏膜上皮细胞的细胞因子调控

目的 探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导体外培养的鼻黏膜上皮细胞致炎后核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的活性变化对局部细胞因子的调控作用.方法 取11例经鼻蝶垂体瘤切除术患者的蝶窦黏膜,采用无血清原代培养法分离培养黏膜上皮细胞,传3到4代后,经LPS(1 mg/L)诱导以及加入NF-κB阻断剂Wedelolactone前后,应用凝胶电泳迁移率分析法检测NF-κB的DNA结合活性,采用反转录-聚合酶链反应法检测各种细胞因子如白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-5、IL-6、IL-8、粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、正常T细胞活化表达和分泌调节物(regulated on activation,normal T expressed and secreted,RANTES)、嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)、eotaxin-2、血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA的表达水平.应用统计软件SPSS17.0对数据进行分析.结果 LPS诱导鼻黏膜上皮细胞后平均(-x±s,以下同)NF-κB DNA结合活性相对值为2.050±0.305,对照组为1.013±0.144,差异有统计学意义(P=0.004).对照组鼻黏膜上皮细胞IL-1β、IL-8和COX-2 mRNA均未见表达,经LPS诱导后相对表达量分别为1.057±0.041、0.950±0.042、0.117±0.012,LPS诱导前后差异有统计学意义(P值均为0.000).应用NF-κB阻断剂Wedelolactone后NF-κB DNA结合活性以及IL-1β、IL-8和COX-2 mRNA的表达水平分别下调至0.917±0.188、0.180±0.008、0、0,与LPS组比较差异有统计学意义(P值分别为0.002、0.000、0.000和0.000).其他各检测指标在各组检测值均为0.结论 NF-κB通路参与了LPS体外诱导人正常鼻黏膜上皮细胞IL-1 β、IL-8和COX-2 mRNA转录水平的调控.     

核因子-kappa B活化对鼻息肉组织中PKC、IL-8表达活性的影响

目的探讨核因子-kappa B p65(NF-κB p65)活化对鼻息肉组织中蛋白激酶C-α(PKC-α)和白细胞介素- 8(IL-8)表达的影响及其在鼻息肉发病机制中的可能作用。方法息肉组织标本35例,正常下鼻甲黏膜16例,免疫组织化学技术检测NF-κB p65、PKC-α、IL-8的表达活性。结果鼻息肉中的NF-κB p65、PKC-α和IL-8表达活性明显高于下鼻甲黏膜,差异有统计学意义(P<0.01);NF-κB p65表达活性与PKC-α和IL-8呈正相关(r分别为0.902,0.946,P<0.01);PKC-α表达活性与IL-8呈正相关(r=0.970,P<0.01)。结论NF-κB-PKC信号传导通道可以调节IL-8的表达活性,是鼻息肉发病的重要机制之一。     

NF-κB和IL-5在豚鼠变应性鼻炎脾脏组织表达及意义

目的 探讨实验性豚鼠变应性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）核转录因子一出（NuclearfactorkappaB，NF-κB）和白介素-5（Intefleukin-5，IL-5）的表达及相互关系，分析其在豚鼠AR发病中的作用。方法用免疫组化Elivision方法半定量测定脾脏组织NF-κB（亚单位P65）的活性细胞表达及双抗体夹心酶联免疫吸附技术（Enzyme labeledimmunosorbent assay，ELISA）定量测定IL-5的表达；比较豚鼠AR模型组及与正常组的差异。结果豚鼠AR模型组NF-κB P65阳性细胞比例和IL-5、嗜酸粒细胞（Eosinophil，Eos）明显高于正常组（P〈0．05），且NF-κB P65阳性细胞比例与IL-5的表达呈正相关（r=0．85，P〈0．05）。结论 核转录因子 -κB通过促进豚鼠AR发病过程中Th2类细胞因子IL-5的表达，进而增多鼻黏膜Eos的浸润而加重豚鼠AR症状。     

冷束缚应激对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞及白细胞介素2和6表达的影响

目的 探讨冷束缚应激对实验大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型鼻黏膜中嗜酸粒细胞及白细胞介素(interleukin,IL)2和IL-6表达的影响.方法 选健康雌性大鼠50只,以随机数学表法分为5组,每组10只:空白对照组(A组)、AR模型组(B组)、先应激后AR造模组(C组)、先AR造模后应激组(D组)、应激与AR造模同时进行组(E组).空白对照组及各实验组造模后,取大鼠鼻中隔两侧的呼吸区黏膜制备成石蜡切片后进行HE染色及IL-2、IL-6免疫组织化学染色,显微镜下利用图像分析系统,取5个视野嗜酸粒细胞、IL-2、IL-6阳性细胞计数的平均值进行分析.结果 经冷束缚应激后的C、D、E组大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞计数(x-±s,以下同)高于B组(14.1±3.2)及A组(2.3±1.4),差异有统计学意义(F值分别为7.06和8.54,P值分别＜0.05和0.01);C、D、E组IL-6阳性细胞数高于B组(15.3±4.8)及A组(4.9±2.4),差异有统计学意义(F值分别为7.14和8.20,P值分别＜0.05和0.01);C、D、E组IL-2阳性细胞数低于B组(14.4±3.5)及A组(15.4±4.1),差异有统计学意义(F值分别为7.27和7.32,P值分别＜0.05和0.01).C、D、E三组间,嗜酸粒细胞计数、IL-2和IL-6阳性细胞数3项指标差异均无统计学意义(F值分别为2.90、3.12、3.20,P值均＞0.05).结论 鼻黏膜组织中嗜酸粒细胞及IL-6在空白对照组几乎不表达,在AR组中度表达,在经过冷束缚应激的AR大鼠中高度表达,且冷束缚应激与AR造模的先后时间顺序对嗜酸粒细胞及IL-6的表达没有影响.冷束缚应激的AR各组大鼠鼻黏膜组织中IL-2表达明显减少.     

PDTC对喉癌裸鼠模型中循环肿瘤细胞的影响

目的:探讨核因子κB(NF-κB)与喉癌循环肿瘤细胞(CTC)发生之间的相关性,并观察NF-κB抑制剂PDTC对CTC的影响及可能机制.方法:裸鼠皮下接种喉癌Hep-2细胞,建立喉癌裸鼠模型.将60只裸鼠随机分为实验组(PDTC预处理组)、对照组(生理盐水组)及空白组(不接种喉癌细胞),每组各20只.肿瘤接种成功8周后处死裸鼠,采用RT-PCR法,以CK19mRNA为标记物检测各组中CTC的表达;取出肿瘤组织,测定其体积,免疫组织化学方法观察喉癌组织NF-κB的表达及激活情况,实时荧光定量PCR检测各组喉癌组织中血管内皮生长因子-C和基质金属蛋白酶-9 mRNA的表达.结果:CTC发生与NF-κB的表达率无明显关联,在CTC 表达阳性的喉癌组织中,NF-κB阳性率为90%,而在CTC表达阴性的喉癌组织中,NF-κB阳性率为56.7%(P>0.05),但其与NF-κB的活性有关;PDTC可抑制NF-κB的激活.减少喉癌裸鼠模型中CTC的发生率,PDTC组CTC阳性率为5%,明显低于对照组CTC的阳性率45%(P<0.01).结论:PDTC可减少喉癌裸鼠模型中CTC 的发生率,其作用可能得益于PDTC降低了喉癌发生转移的能力,其机制町能为PDTC通过抑制NF-κB活性而使血管内皮生长因子-C和基质金属蛋白酶-9表达下调,减少肿瘤组织新生血管形成及降低喉癌侵袭力有关.     

脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜IL-3mRNA的活性表达

目的 观察脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织白细胞介素-3(IL-3)mRNA的表达,探讨脾气虚与变应性鼻炎的病理相关性.方法 以卵清蛋白法和卵清蛋白加饮食不节法分别建立大鼠变应性鼻炎模型(AR组)和脾气虚变应性鼻炎模型(脾气虚AR组),分别取鼻黏膜组织,RT-PCR检测IL-3 mRNA表达水平,进行组间比较.结果 AR组鼻黏膜IL-3 mRNA表达水平11.85±0.82,显著高于健康对照组的6.85±0.49(P＜0.01);脾气虚AR组鼻黏膜IL-3 mRNA表达水平14.21±2.10,显著高于AR组(P＜0.01).结论 变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织IL-3 mRNA的表达增加, 脾气虚型变应性鼻炎大鼠者IL-3 mRNA表达活性进一步升高,IL-3活性表达水平可能是脾气虚型变应性鼻炎病情加重的一个重要因素.     

免疫刺激DNA序列与尘螨过敏原联用治疗变应性鼻炎的实验研究

目的:观察免疫刺激DNA序列(ISS)与尘螨过敏原(Df)合用,对Df致敏的变应性鼻炎(AR)大鼠模型鼻腔过敏性炎症的作用及其维持时间。方法:SD大鼠32只,分ISS组(A组)、ISS加Df组(B组)、Df组(C组)和正常对照组(D组),每组各8只。A、B、C组用Df致敏及激发。各组在第1次激发后6周中,每周采血1次测特异性IgE,最后处死大鼠,组织病理学方法观察鼻黏膜改变,ELISA测血清IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-12水平。结果:A、B组IFNγ-和IL-12水平明显高于C组(P<0.01),而A、B组IL-4和IL-5水平明显低于C组(P<0.01)。血清特异性IgE前5周B组与C组比较差异有统计学意义(P<0.01),第6周B组Df特异性IgE水平有回升,但与C组比较差异仍有统计学意义(P<0.05);而A组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ISS与Df合用对Df致敏的AR大鼠模型鼻腔过敏性炎症有很好的抑制作用,其抑制作用可维持6周。     

白细胞介素23在变应性鼻炎患者鼻黏膜中的表达及意义

目的:探讨白细胞介素23(IL-23)在变应性鼻炎(AR)患者鼻黏膜中的表达及意义.方法:收集12例AR患者(AR组)下鼻甲黏膜及11例单纯性鼻中隔偏曲患者下鼻甲黏膜(对照组),采用免疫组织化学方法和实时定量RT-PCR方法检测下鼻甲黏膜中IL-23的表达.结果:IL-23p19 mRNA在AR组中的表达水平较对照组明显增高(P<0.01).免疫组织化学显示IL-23蛋白主要表达于黏膜固有层的炎性浸润细胞,AR组鼻黏膜中IL-23阳性细咆数明显高于对照组(P<0.01).IL-23p19mRNA和蛋白表达水平与黏膜固有层总炎性细胞浸润程度及固有层胶原纤沉积程度成显著正相关(对于mRNA表达水平,相关系数分别为0.678和0.834;对于蛋白表达水平,相关系数分别0.644和0.721,均P<0.01).结论:IL-23可能参与了AR的慢性炎症和组织重塑.     

慢性鼻-鼻窦炎炎性黏膜中核转录因子-κB活性与局部三种细胞因子表达的关系

目的探讨慢性鼻-鼻窦炎炎性黏膜中核转录因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF—κB）活性与局部3种细胞因子表达的关系。方法采用酶联免疫吸附方法检测52例慢性鼻-鼻窦炎[根据是否伴变应性鼻炎（allergic rhinitis，AR），分为AR组与NAR组]与12例正常筛窦黏膜组织中IL-5、IL-6及IL-8含量，半定量RT—PCR和免疫组织化学法检测NF—κB亚单位P50、P65在鼻黏膜的表达及活性，分析NF-κB各亚单位的活性与IL-5、IL-6及IL-8含量间的相关性。结果AR组与NAR组筛窦黏膜中IL-5、IL-6、IL-8水平均显著高于正常组（AR组P值均〈0．01；NAR组P值分别〈0．05、0．05、0．01）；AR组的3种细胞因子水平均明显高于NAR组（P值分别〈0．01、0．05、0．01）。半定量RT—PCR显示，AR组与NAR组P50、P65的mRNA表达水平均显著高于正常组（AR组P值均〈0．01；NAR组P值均〈0．01）；AR组明显高于NAR组（P值均〈0．05）。免疫组化显示AR及NAR两组P50、P65核染阳性率均显著高于正常组（P值均〈0．01）；AR组较NAR组更高（P值均〈0．01）。Pearson相关性分析显示，P50、P65核染阳性率与局部IL-6、IL-8水平存在显著相关性，其中P50与IL-6、IL-8的相关系数分别为0．49与0．54（P值均〈0．01）；P65与两者的相关系数分别为0．61与0．66（P值〈0．01）。P50、P65核染阳性率与IL-5间无明显相关性。结论慢性鼻-鼻窦炎炎性黏膜中NF—κB的P50、P65两个亚单位的核转位及活化是诱导局部IL-6、IL-8表达的可能机制之一，AR的并存可进一步提高NF-κB活性，进而增加局部IL-6、IL-8的表达。IL-5的局部表达不依赖于NF-κB途径。     

γδT细胞、调节性T细胞、白细胞介素17及转化生长因子β1在变应性鼻炎患者外周血中的表达

目的 探讨变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者外周血中γδ T细胞、调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)、白细胞介素(interleukin,IL) 17及转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)的表达及临床意义.方法 2012年3-7月,收集32例AR患者(AR组)和20例健康志愿者(对照组)的外周血,采用流式细胞术检测外周血中γδ T细胞和Treg细胞比例;酶联免疫吸附试验检测血清中IL-17、TGF-β1的水平,并分析它们之间的相关性.采用SPSS 16.0软件进行数据分析.结果 γδ T细胞百分比在AR组和对照组分别为(13.30±8.62)％、(5.18±1.86)％,差异有统计学意义(t =5.18,P＜0.01);Treg细胞百分比分别为(1.75±0.56)％、(4.76±1.74)％,差异有统计学意义(t =7.46,P＜0.01).AR组血清中IL-17的表达水平为(668.55 ±45.15) pg/ml,高于对照组的(573.53±17.42) pg/ml,差异有统计学意义(t=8.97,P＜0.01);AR组TGF-β1的表达水平为(0.34±0.04) pg/ml,低于对照组的(0.49 ±0.06) pg/ml,差异有统计学意义(t=9.51,P＜0.01).AR组患者外周血中γδ T细胞百分比与Treg细胞百分比呈负相关趋势(r=-0.561,P＜0.01),γδ T细胞百分比与IL-17呈正相关趋势(r=0.469,P＜0.01),γδ T细胞百分比与TGF-β1呈负相关趋势(r=-0.622,P＜0.01),Treg细胞百分比与TGF-β1呈正相关(r=0.738,P＜0.01),IL-17表达水平与Treg细胞百分比、TGF-β1无相关性(r值分别为-0.111、-0.196,P＞0.05).结论 AR患者外周血中γδ T细胞和Treg细胞之间存在免疫平衡失调,γδ T细胞可能参与了IL-17的分泌,这可能在AR的发病和发展过程中发挥重要作用.     

NF-κB抑制剂对慢性鼻咽炎豚鼠鼻咽黏膜炎症细胞增殖与凋亡活性的影响

目的 观察核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)特异性抑制剂吡咯二硫代氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对慢性鼻咽炎豚鼠鼻咽黏膜组织浸润炎症细胞增殖与凋亡活性的影响,探讨慢性鼻咽炎在鼻咽癌前病变发生与发展过程中的地位.方法 利用细菌病毒联合法建立豚鼠慢性鼻咽炎模型,然后将模型鼠随机分为慢性鼻咽炎对照组和PDTC干预组,并平行设置正常对照组.经药物处理后,取各组动物鼻咽黏膜组织观察病理组织学改变,免疫组化法检测鼻咽黏膜NF-κB p65和增殖细胞核抗原(PCNA)表达活性,末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术检测浸润炎症细胞凋亡指数.结果 模型组鼻咽黏膜组织浸润炎性细胞NF-κB p65表达活性明显高干正常对照组(P<0.01),PDTC干预组则明显低于模型组;模型组浸润炎症细胞凋亡时间延长、增殖活性升高,PDTC干预组炎症细胞凋亡活性、增殖水平与正常对照组的差异无统计学意义.结论 NF-κB抑制剂PDTC对慢性鼻咽炎黏膜组织中浸润炎症细胞的增殖活性显示明显抑制效应,其机制可能是通过促进靶细胞凋亡活性而发挥效应,提示鼻咽炎有演变为鼻咽癌前病变的潜在风险.     

变应性鼻炎患儿血清中IL-25和IL-12的表达与IgE的相关性

目的探讨变应性鼻炎患儿血清中白细胞介素25(interleukin-25,IL-25)和白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)的表达及与IgE的相关性。方法采用酶联免疫吸附法检测34例变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患儿和34例健康志愿儿血清中IL-25、IL-12和IgE的含量,并进行比较及相关分析。结果间歇性AR组血清IL-25水平为(42.64.±11.77)ng/L,IL-12水平为(38.52±8.32)ng/L,IgE水平为(563.2±141.7)kU/L;持续性AR组血清IL-25水平为(57.51±5.36)ng/L,IL-12水平为(29.31±11.69)ng/L,IgE水平为(625.6±104.3)kU/L;正常对照组血清IL-25水平为(33.42±9.78)ng/L,IL-12水平为(49.31±11.69)ng/L,IgE水平为(209.7±113.2)kU/L。各组间两两比较,间歇性AR组与持续性AR组、间歇性AR组与对照组、持续性AR组与对照组之间差异均具有统计学意义(P<0.05);AR患儿血清IL-25水平与IL-12水平呈显著...     

白介素12基因治疗对变应性鼻炎小鼠嗜酸粒细胞及白介素5的影响

目的 探讨经鼻局部给予脂质体包裹的白细胞介素(interleukin,IL)12基因治疗对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠模型鼻黏膜、外周血和骨髓中嗜酸粒细胞(eosinophils,EOS)的调节作用及相关因子IL-5的影响.方法 采用6～8周雄性BALB/C小鼠,随机分成AR组、基因治疗组和健康对照组,每组12只.卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏激发建立AR模型,治疗组激发前经鼻给予脂质体包裹的pGEG.m IL-12,对照组用生理盐水代替.三组分别用HE染色计数鼻黏膜中EOS的数量,用瑞氏染色计数骨髓涂片中EOS数,以流式细胞仪检测外周血中的EOS数;免疫组化染色检测鼻黏膜和骨髓中IL-5的表达,以ELISA方法检测血清中的IL-5含量.采用单因素方差分析进行统计学处理.结果 三组小鼠中,各检测指标在各组之间的差异均有统计学意义(P值均<0.01).两两比较发现,基因治疗组鼻黏膜EOS数为(4.6±2.6)个/高倍镜视野,低于AR组的(26.5±9.8)个/高倍镜视野,差异有统计学意义(P<0.05);IL-5阳性细胞数[(3.0±1.3)个/高倍镜视野]也低于AR组[(17.6±6.4)个/高倍镜视野],差异有统计学意义(P<0.05);骨髓涂片中EOS(0.040±0.029)低于AR组(0.086±0.014),差异有统计学意义(P<0.05),IL-5阳性细胞数(0.035±0.012)也低于AR组(0.083±0.025),差异有统计学意义(P<0.05).基因治疗组外周血中EOS(0.124±0.031)低于AR组(0.184±0.079),差异有统计学意义(P<0.05),IL-5[(29.51±6.68)pg/ml]也低于AR组[(56.58±16.80)pg/ml],差异有统计学意义(P<0.05).结论 经鼻局部给予脂质体包裹的pGEG.m IL-12能够通过降低骨髓、外周血和鼻黏膜中IL-5的表达,进而减少骨髓、外周血和鼻黏膜中EOS的数量,IL-12基因治疗可能为呼吸道变应性炎症开辟一种新的治疗途径.