家鼠类肾上腺嗜铬细胞简易染色法

一、染色方法 :( 1 )固定小家鼠肾上腺髓质于下列固定液中 2 4hr:即 3%重铬酸钾水溶液 1 0 ml,1 0 %福尔马林 2 0 ml,蒸馏水2 0 ml。 ( 2 )移浸入 3%重铬酸钾水溶液 48hr。( 3)水洗 2 4hr。 ( 4 )石蜡包埋、切片。 ( 5 )切片脱蜡至蒸馏水。 ( 6 )常规苏木素染液 1 5 min、水洗。 ( 7) 1 %盐酸酒精分化适度、水洗1 5 min。 ( 8)各级酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。结果 :肾上腺髓质嗜铬细胞颗粒呈现棕黄色 ,细胞核呈蓝色。二、注意事项 :( 1 )动物选择家鼠类 ,组织力求新鲜。 ( 2 )固定液临用前配制。 ( 3)组织铬化过程需每日更换新液…     

大鼠心内神经节胆碱乙酰转移酶阳性神经元——免疫组织化学法研究

应用 ABC免疫组织化学技术对大鼠心内神经节胆碱乙酰转移酶阳性神经元进行了研究 ,发现大鼠心脏心房后壁神经节内存在着胆碱乙酰转移酶 ( Ch AT)免疫阳性神经元。材料与方法 ,成年大鼠 1 0只 ,雌雄不限 ,体重 1 5 0克左右 ,0 .4%戊巴比妥纳腹腔麻醉 ,经左心室 0 .9%Nacl灌洗 ,4%多聚甲醛 30 0 ml( p H7.2磷酸缓冲液 ) ,灌注固定。取心房后壁 ,后固定1 2 hr,常规石蜡包埋 ,切片厚 5 μm,切片脱蜡至水 ,用 SABC法免疫组织化学反应 :切片于 3% H2 O2 1 0 min,D· W洗 3次× 2 min,0 .0 1 M枸橼酸缓冲液 ( p H6 .0 )微波修复( 1 0 0℃ )…     

培养细胞的免疫细胞化学操作体会

对培养的细胞进行免疫细胞化学反应 ,可以在培养皿内直接进行 ,亦可经树脂包埋后 ,在半薄切片上进行。本实验应用上述二种方法 ,对培养的大鼠内耳血管纹的组织细胞进行了免疫细胞化学显示。组织细胞处理 :1 )平皿培养和盖玻片上培养的大鼠内耳血管纹处组织细胞 ,经Bouin固定液固定 4h,0 .0 1 Mol/L PBS浸洗 ,0 .1 %的 Triton x- 1 0 0处理 2 0 min;2 )平皿培养的细胞经酶处理 ,离心收集 ,2 %戊二醛固定液固定 4h,经丙酮脱水与锇酸固定( - 2 0℃ )、树脂包埋、半薄切片。免疫细胞化学反应 :上述处理的细胞或切片进行免疫细胞化学反应 ,其…     

羚蝎胶囊对实验性脑出血大鼠脑细胞的保护机制

目的 :探讨羚蝎胶囊对实验性脑出血大鼠脑细胞的保护机制。方法 :( 1 )采用胶原酶与肝素复合法制造大鼠脑出血模型。动物分成正常、假手术、模型、清开灵、羚蝎胶囊等五组 (各 1 0只 )。 ( 2 )胰蛋白酶法制备大鼠脑细胞悬液 ,Ｆｕｒａ- 2 /ＡＭ(终浓度为 5μｍｏｌ/Ｌ)负载。用日立Ｆ - 450 0型双波长荧光分光光度计测定大鼠脑细胞内Ｃａ2 的浓度。 ( 3)采用黄嘌呤氧化酶法测定大鼠脑组织内ＳＯＤ的活力 ;硫代巴比妥酸(ＴＢＡ)法测定大鼠脑组织ＭＤＡ的含量。 ( 4 )用高效液相色谱仪测定大鼠海马组织中ＥＡＡ的含量。结果 :( 1 )在细胞外Ｃ…     

观察大鼠胚胎心内膜垫发育时的切面选择

心内膜垫 ( endocardialcushion,EC)是整个胚胎心脏发育过程中的重要部位 ,本文旨在研究不同切面时胎龄( ED) 1 1 d～ 1 9d Wistar大鼠胚胎 EC的形态学表现 ,探讨观察大鼠胚胎心内膜垫发育的最佳切面 ,为进一步开展心脏胚胎发育生物学提供形态学基础及技术支持。材料和方法 :实验动物用清洁级 ED1 1 d～ 1 9d Wistar大鼠胚胎 ,同一胎龄各取 1 5只胎鼠 ,将其经 1 0 %中性福尔马林固定 2 4hr,常规石蜡包埋 (融点 5 3℃ )、切片 (厚度 5 μm)后 HE染色 ,光镜下观察。每一胎龄各取 5只胎鼠分别行冠状切、水平切及矢状切。结果 :ED1 1 d E…     

糖尿病模型大鼠海马区星形胶质细胞活化与凋亡的观察

目的:探讨糖尿病高血糖状态对于大鼠海马星形胶质细胞的影响。方法:应用链脲佐菌素(STZ)诱导Ⅰ型糖尿病SD大鼠模型,分为糖尿病模型1、2、3、4周和5周组(DM1,DM2,DM3,DM4,DM5),同周龄SD大鼠作为对照组。采用免疫荧光、免疫组化和Western Blot等技术,对比观察糖尿病大鼠海马区星形胶质细胞的形态、caspase-3和GFAP的表达情况。结果:免疫荧光和免疫组化检测结果显示:DM1和DM2大鼠海马区星形胶质细胞的胞体增大,突起增粗;DM3和DM4大鼠海马内星形胶质细胞的突起增粗、变长,其数量明显多于正常对照组(P0.05);而DM5大鼠海马内星形胶质细胞的突起僵硬,细胞数量有所减少,但仍高于正常对照组(P0.05)。Western Blot结果显示:DM3,DM4,DM5大鼠海马区GFAP含量明显高于对照组和DM1,DM2(P0.05)。caspase-3/GFAP免疫组化双标结果显示:DM1和DM2大鼠海马区偶见caspase-3阳性标记的星形胶质细胞;而DM3,DM4,DM5大鼠海马区caspase-3/GFAP双标细胞数明显多于正常对照组(P0.05);其中DM5双标阳性细胞数明显多于DM3和DM4(P0.05)。结论:糖尿病高血糖早期可激活星形胶质细胞,持续性糖尿病高血糖可诱导海马区星形胶质细胞活化的抑制,并引起星形胶质细胞凋亡。     

胶体金标记人外周血白细胞表面 Con A 受体及其定位和定量分析

本实验用刀豆球蛋白 A-辣根过氧化物酶胶体金(Con A-HRP-G)法定量分析了戊二醛固定后的人外周血白细胞表面受体的分布和密度,可见所有白细胞以及血小板均显示具有 Con A受体。细胞表面平均每μm 周长金标 Con A 复合物的定量分析表明,细胞表面 Con A 受体标记密度因细胞类型而不同。各类血细胞 Con A 受体的标记密度依次为:分叶核中性粒细胞<单核细胞>NK 细胞>杆状核中性粒细胞>嗜碱粒细胞>嗜酸粒细胞>淋巴细胞。小淋巴细胞的密度明显多于大淋巴细胞。NK 细胞表面的受体有极性分布。以上结果说明:1.Con A 受体与细胞功能活性有关,细胞越活跃,则其表面 Con A 受体越多;2.Con A 受体可能与细胞的识别功能有关,如NK 细胞 Con A 受体呈极性分布的现象;3.Con A 受体数目与细胞的成熟程度有关,细胞越成熟,其表面 Con A 受体越多。     

背侧海马内给予雷公藤内酯醇(T10)对慢性痛大鼠痛行为和抑郁样行为及其内小胶质细胞激活的影响

目的:探究背侧海马内置管给予雷公藤内酯醇(T10)对于神经病理性痛模型大鼠痛行为和抑郁样行为,以及海马内小胶质细胞激活的影响。方法:采用L5脊神经结扎(SNL)的方法制作慢性神经病理性痛模型。利用von Frey丝刺激法连续观察造模后大鼠的痛行为学变化;运用强迫游泳(FST)和新奇摄食抑制实验(NSF)观察造模后动物的抑郁样行为;分别采用免疫组织化学染色和Western Blot方法观察大鼠背侧海马内电离钙绑定衔接分子1(Iba-1)的表达情况。结果:(1)痛行为学检测结果显示:与正常对照组相比,造模1 d后SNL模型大鼠机械性痛阈明显降低(P 0. 001),且术后21 d维持在较低水平(P 0. 001);从术后第14 d起背侧海马内置管连续给予T10至第21 d,观察到T10能够明显提高上述模型大鼠手术侧后足的机械性痛阈(P 0. 01)。(2)抑郁样行为学检测结果显示:SNL模型大鼠于术后21 d出现明显抑郁样行为,与对照组相比,NSF的不动时间和FST的潜伏期均明显延长(P 0. 05,P 0. 001);背侧海马内给予T10后,动物的NSF和FST抑郁样行为均有明显缓解(FST P 0. 05; NSF P 0. 001)。(3)免疫组织化学染色结果显示:SNL模型大鼠双侧背侧海马内Iba-1的表达水平均明显高于正常对照组;给予T10后,其背侧海马内小胶质细胞的激活均被显著抑制。(4) Western Blot结果显示:造模后21 d双侧背侧海马内I-ba1的表达明显上调(P 0. 01),连续给予T10后可以显著下调其内Iba-1的表达水平(P 0. 05)。结论:背侧海马内置管连续给予T10能有效缓解由SNL诱导的慢性痛模型大鼠的痛行为和抑郁样行为,其机制可能与抑制背侧海马内小胶质细胞的激活,进而减轻海马内炎症反应密切相关。     

穹窿海马伞损伤对大鼠学习记忆和海马GFAP阳性神经胶质细胞的影响

为探讨穹隆海马伞损伤鼠学习记忆能力与海马胶质纤维酸性蛋白阳性细胞之间的关系 ,切断 SD成年大鼠左侧穹窿海马伞 ,用 Y迷宫和免疫组织化学结合图像分析系统测试大鼠学习记忆能力和海马胶质纤维酸性蛋白阳性细胞的变化状况及它们的相互关系。结果显示 :损伤 2周后 ,损伤组损伤侧海马 CA1 区辐射层和齿状回分子层胶质纤维酸性蛋白阳性细胞的数密度较正常组分别增多 3 0 .2 9%和 3 0 .15 % (都为 P<0 .0 1) ,胞体面积分别增加 16.0 4%和 19.42 % (都为 P<0 .0 1) ,齿状回分子层胶质纤维酸性蛋白阳性细胞体密度增大 19.40 % (P<0 .0 5 )。经相关分析 ,大鼠学习记忆能力与海马 CA1 区胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数密度呈负相关 (r=-0 .83 6,P<0 .0 1) ,与齿状回数密度呈负相关 (r=-0 .792 ,P<0 .0 1)。提示海马星形胶质细胞可能参与学习记忆过程     

马桑内酯致痫大鼠海马神经细胞外Na~ 、K~ 活度的变化

目的和方法 :应用Na 、K 选择性微电极检测马桑内酯致痫大鼠海马及海马脑片神经细胞外Na 、K 活度的改变。结果 :海马内注射马桑内酯 (5 μL ,5× 10 -4 mol/L)致痫大鼠 30s、1min和 2min后 ,海马神经细胞外Na 活度分别低于对照组 2 7 7mmol/L、5 0 3mmol/L和 5 7 8mmol/L ,而K 活度则分别高于对照组 2 3mmol/L、2 4mmol/L和 2 9mmol/L(P <0 0 1)。 3min后 ,K 活度基本恢复至对照水平 ,而Na 活度仍持续低于对照水平 (P <0 0 1)。海马脑片的实验结果与在体实验相似。结论 :海马神经细胞处于癫痫状态时 ,存在Na 内流、K 外流现象。     

维生素C对应激大鼠脑内超氧化物歧化酶含量的影响

目的 :探讨在急性应激状态下大鼠脑内超氧化物歧化酶 (SOD)活性的变化及维生素C (VitC)对SOD改变的影响。方法 :在强迫游泳应激模型中 ,大鼠用VitC慢性给药 (腹腔内注射 0 5g·Kg- 1 ,每日一次 ,连续 7天 ) ,观察强迫游泳应激后大鼠额叶、海马、中脑和下丘脑内SOD的活性。结果 :与对照组比较 ,强迫游泳组大鼠海马内SOD活性显著性增高 (t=3 3 2 4,P <0 0 1) ,额叶、中脑和下丘脑SOD活性也显著升高 (t =2 5 3 3 ,2 3 0 3 ,2 5 89,P均 <0 0 5 )。VitC组与对照组各脑区SOD活性未见明显变化 (P均 >0 0 5 ) ;但与强迫游泳组比较 ,海马内SOD活性显著性降低 (t=3 812 ,P <0 0 1) ,额叶、中脑和下丘脑内SOD活性也显著性降低 (t=2 2 5 1,2 3 42 ,2 2 16,P均 <0 0 5 )。结论 :VitC可显著减少急性应激状态下脑内产生的自由基 ,具有神经保护作用。     

侧脑室给一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对AVP降温作用的影响

目的 :探讨一氧化氮 (NO)在精氨酸加压素 (AVP)降温中的作用。方法 :实验用成年雄性Wistar大鼠 ,体重 2 0 0 - 2 70g,分别单笼饲养于 2 5℃环境的中 ,动物允许自由进食进水。用数字体温计测量大鼠的结肠温度 ,每次间隔 30min ,观察了侧脑室注射一氧化氮合酶抑制剂L -硝基精氨酸甲酯 (L -NAME)对静脉注射AVP降温作用的影响。结果 :①静脉注射AVP(4μg·kg-1)后结肠温度由给药前的 (37 83± 0 2 1)℃降低到 (37 2 1± 0 2 0 )℃ (- 0 6 2℃ ) ,当静脉联合给AVP和L -NAME(30mg·kg-1)后结肠温度由给药前的 (37 88± 0 18)℃降低…     

大鼠海马内注射β淀粉样蛋白1-40抑制铜蓝蛋白表达

目的:通过检测阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型大鼠海马铜蓝蛋白(glycan-phosphatidyli-nositol ceruloplasmin,GPI-Cp)的变化,探讨AD时脑铁增高的机制。方法:取雄性(290±10)g SD大鼠,经海马内注射(amyloid beta-peptide 1-40,Aβ1-40)建立AD模型,于1、2、3和4周取各组大鼠脑组织,分离海马,用RT-PCR检测GPI-Cp mRNA表达情况,免疫组织化学染色检测GPI-Cp蛋白表达情况。结果:海马的星形胶质细胞、血管内皮细胞、室管膜细胞均有GPI-Cp的mRNA和蛋白表达;而海马的锥体细胞仅轻度表达,颗粒细胞不表达。注射Aβ1-40后,模型组海马GPI-Cp mRNA和蛋白表达均随着时间延长逐渐降低,具有统计学意义(P<0.01)。结论:海马内注射Aβ1-40可引起大鼠海马GPI-Cp表达减少,GPI-Cp表达减少可能是AD时脑铁增高的原因。     

二仙汤加减对急性不完全性脑缺血大鼠脑保护作用的实验形态学研究

目的 :探讨二仙汤加减的脑保护作用及其作用机理。方法 :用中老年Wistar大鼠 ,采用双侧颈总动脉夹闭 2小时后 ,去夹再通的方法制作急性不完全性脑缺血再灌流模型。实验组大鼠造模前给予二仙汤加减 ,于血流再灌后 6h、2 4h、3d及 7d处死 ,对顶叶皮质及背侧海马进行形态学研究。结果 :实验组与对照组比较 ,光、电镜图象显示毛细血管、脑细胞渗出及细胞损伤明显减轻 ;海马CA1区细胞丢失明显减少 (P <0 .0 5 )。结论 :该方药有改善脑血液循环、减轻脑水肿和保护脑细胞的作用。     

糖皮质激素受体的高效液相分离特征

目的 :探讨糖皮质激素低亲和力受体的理化特征。方法 :应用 6- 1 2周龄雄性ＳＤ大鼠肝胞液为标本 ,要求蛋白质浓度为 4～ 8ｍｇ/ｍＬ ,在 0～ 4℃ ,用 [1 ,2 ,4,6,73Ｈ]地塞米松 (英国放化中心产品 ,3 1 8ＴＢｑ ,31 8 2× 1 0 1 0 Ｂｑ/ｍｍｏｌ,放化纯度 >97% ) ,配制成 1 0ｎｍｏｌ/Ｌ ,1 0 0ｎｍｏｌ/Ｌ(冷标法 ) ,标记大鼠肝胞液中糖皮质激素受体 ,0～ 4℃放置 3～ 4ｈ ,用活性炭Ｄｃｃ法吸附 ,离心 ,取其上清液 ,测其ｃｏｕｎｔｓ·ｍｉｎ- 1 值。通过高压液相疏水作用 (层析柱Ｓｙｎｃｈｒｏｐａｋｐｒｏｐｙｌ 1 0 0× 4.6ｍｍＩＤ)…     

NOS阳性细胞在大鼠和小鼠睾丸内分布的比较

1　材料和方法　　选用雄性Ｗａｓｔｅｒ大鼠 8只 ,体重 2 1 0± 1 0 ｇ ,雄性昆明小鼠 8只 ,体重 2 2 1± 2 ｇ。 4 %水合氯醛 ( 6 0ｍｇ/ｋｇ)腹膜腔麻醉 ,经左心室灌注 0 9%ＮａＣｌ冲洗血液 ,4 %多聚甲醛 ( 2 5 0 0ｍｌ/ｋｇ)固定 ,取睾丸 ,后固定 8ｈ ,30 %蔗糖过夜 ( 4℃ )。液氮速冻后进行冰冻冠状切片 ,片厚 30 μｍ ,裱于铬钒明胶片上。应用改进ＮＡＤＰＨ ｄ黄递酶组织化学方法进行ＮＯＳ组织化学反应 ,常规脱水、透明、封片 ,光镜观察 ,每只动物随机选取 1 0个高倍视野 ,将 1 0个高倍视野的细胞数之和除以 1 0 ,做为该只动物的…     

氯化锂匹罗卡品诱导癫痫大鼠海马神经元GPER1表达的变化

目的:观察G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)在癫痫大鼠海马神经元中表达的变化。方法:成年雄性SD大鼠分成对照组(control)和癫痫组(epilepsy),利用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品方法制备癫痫模型,分别在1、2、3、7、14 d和28 d,利用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,利用尼氏染色观察大鼠海马神经元形态变化;利用免疫组化和Western Blot技术观察GPER1在海马的表达。结果:水迷宫结果显示,与Control组相比,造模14 d的大鼠逃逸潜伏时间明显延长(P 0. 05),穿越目标象限区域的次数较Control组显著降低(P 0. 05)。尼氏染色结果显示:与Control组相比,造模1 d和2 d的大鼠CA1及CA3区锥体细胞层细胞及DG区颗粒细胞层细胞体积缩小,细胞间距增加,尼氏染色减弱;造模3和7 d的大鼠细胞体积明显缩小,细胞间隙明显增大,尼氏染色加深,CA1及CA3细胞数量明显减少;造模14 d和28 d的大鼠神经元体积逐渐向正常恢复,但仍较Control组小。免疫组化结果显示:GPER1免疫阳性细胞以海马锥体细胞和齿状回颗粒细胞为主,主要分布在细胞膜。与Control组相比,造模2 d和3 d的大鼠海马CA1及CA3区GPER1表达增加(P 0. 05),7 d后增加最明显(P 0. 01),14、28 d后表达下降;在DG区,造模3 d及7 d的大鼠GPER1表达增加(P 0. 05),14 d后表达下降(P 0. 05),28 d大鼠无显著差异。Western Blot结果显示:与Control组比较,造模2 d和3 d的大鼠GPER1相对表达量开始增高,7 d后明显增高(P 0. 05),14 d及28 d的大鼠表达降低。结论:GPER1在海马神经元的表达随着神经元损伤的加重而增高,随着神经元损伤的恢复逐渐降低,提示其表达变化与神经元的损伤与修复有关。     

右美托咪啶通过抑制p38和JNK活化减少异氟醚诱导的新生大鼠海马神经元凋亡

 目的：探讨右美托咪啶（dexmedetomidine, Dex）对异氟醚（isoflurane, Iso）诱导的新生大鼠海马神经元凋亡的影响及其与p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38）和c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase, JNK）蛋白活化的关系。方法：48只出生后7 d的SD大鼠随机分为对照组（Con组）、Dex组、Iso组和Iso+Dex组。前2组吸入空气,后2组吸入0.75% Iso 6 h。Dex组和Iso+Dex组在麻醉前20 min和麻醉开始后2 h、4 h经腹腔注射25 μg·kg-1 Dex;Con组和Iso组则在相同的时点注射150 μL生理盐水。麻醉结束后使用TUNEL法检测海马神经元凋亡; Western blotting检测海马组织激活型caspase-3、p38、磷酸化p38（p-p38）、JNK和磷酸化JNK（p-JNK）蛋白表达的变化。结果：(1) Iso组海马CA1区TUNEL阳性细胞数较Con组增加447.57%（P<0.01）,Dex抑制Iso诱导的TUNEL阳性细胞增加达75.18%（P<0.01）。(2) Iso组海马组织激活型caspase-3的表达比Con组增加126.29% （P<0.01）;Dex显著抑制了Iso诱导的caspase-3活化（P<0.01）。(3) Iso组海马p-p38/p38和p-JNK/JNK比值均较Con组明显增加（P<0.01）;Dex显著抑制了Iso诱导的p-p38 和p-JNK表达增加（P<0.01）。结论：Dex能通过减少海马神经元凋亡来减轻Iso对新生大鼠的脑毒性。抑制p38和JNK的磷酸化可能是Dex发挥保护作用的机制之一。     

β-淀粉样蛋白诱导大鼠行为学改变及星形胶质细胞变化

为了探讨不同剂量β-淀粉样蛋白 2 5 -3 5片段 ( Aβ2 5- 35)诱导老年性痴呆 ( AD)大鼠动物模型中星形胶质细胞变化与大鼠行为学改变之间的关系 ,在大鼠双侧海马内注射不同剂量 Aβ2 5- 35( 2 .5、5、10和 2 0 μg)制作大鼠 AD模型 ,注射一周后采用胶质原纤维酸性蛋白 ( GFAP)免疫组化染色、NOS组化染色及 NOS组化和 GFAP双重染色分析大鼠海马 GFAP与 NOS的表达。结果发现海马内注射 Aβ2 5- 35剂量≥ 10 μg时 ,模型组大鼠出现学习记忆减退 ,海马星形胶质细胞增生、肥大 ,数目明显多于对照组 ( P<0 .0 5 ) ;海马 NOS阳性神经元数较对照组显著减少 ( P<0 .0 5 ) ;并出现 NOS阳性星形胶质细胞。结论 :星形胶质细胞参与Aβ神经毒性导致 NOS阳性神经元损伤 ,间接导致大鼠学习记忆能力下降 ,在 AD模型大鼠早期学习记忆功能减退中起重要作用     

海马注射米诺环素对CCI大鼠热痛阈以及海马炎症因子表达的影响

目的:观察海马CA1区注射米诺环素对坐骨神经缩窄性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠海马小胶质细胞激活、Toll样受体2(Toll like receptor 2,TLR2)、Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)、IL-1β、TNF-α和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)表达的影响。方法:成年SD大鼠随机分为3组(n=8):(1)sham组(假手术组+0.01 mol/L PBS)、(2)CCI组(CCI+0.01 mol/L PBS)、(3)CCI+米诺环素组。大鼠海马CA1区置管7 d后行坐骨神经结扎,CA1区注射0.01 mol/L PBS或米诺环素(2μg/μl),每日2次,连续7 d。于CCI术前1 d,术后1、3、5和7 d测定海马给药1 h后热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL);术后第7 d取海马,荧光定量PCR检测Iba-1、TLR2、TLR4、IL-1β、TNF-α和i NOS m RNA表达;酶联免疫吸附试验测定海马IL-1β和TNF-α含量。结果:大鼠CCI术后即形成稳定的热痛敏,与假手术组相比,TWL明显缩短(P0.01);与CCI组相比,海马CA1区注射米诺环素可明显延长CCI大鼠的TWL(P0.05)。与假手术组相比,CCI大鼠海马Iba-1、TLR2、TLR4、IL-1β、TNF-α和i NOS m RNA表达明显上调(P0.01);与CCI组相比,海马CA1区注射米诺环素几乎完全抑制海马Iba-1、TLR2、TLR4和TNF-αm RNA表达上调(P0.01),仅部分阻断IL-1β和i NOS m RNA表达上调(P0.05)。与假手术组相比,CCI大鼠海马IL-1β和TNF-α含量明显增多(P0.01);与CCI组相比,注射米诺环素后几乎完全抑制海马TNF-α水平上升(P0.01),仅部分抑制IL-1β水平上升(P0.05)。结论:海马CA1区注射米诺环素可明显缓解CCI大鼠热痛敏症状,其机制可能与抑制海马小胶质细胞激活和TLR2、TLR4表达,进一步抑制IL-1β、TNF-α及i NOS表达有关。