胆红素自由基对人红细胞膜流动性的影响

用荧光偏振法研究胆红素自由基对人红细胞膜流动性的影响。结果表明,胆红素自由基使红细胞膜荧光偏振度(P)减少,微粘度(η)降低,膜流动性增加。并讨论了上述现象产生的原因。     

胆红素自由基对人红细胞膜流动性的影响

用荧光偏振法研究胆红素自由基对人红细胞膜流动性的影响。结果表明，胆红素自由基使红细胞膜荧光偏振度（Ｐ）减少，微粘度（μ）降低，膜流动性增加。并讨论了上述现象产生的原因。     

阿霉素对培养心肌细胞膜流动性的影响及能气朗的保护作用

应用荧光探剂标记完整培养心肌细胞膜脂区，用稳态荧光偏振技术观测阿霉素对心肌细胞膜流动性的影响及能气朗的保护作用；结果表明：培养液中加入ＡＤＲ能使心肌细胞膜流动性明显低于对照组。提示ＡＤＲ具有损伤心肌细胞膜的作用，ＣｏＱ１０可保护维持心肌细胞正常功能。     

不同逆灌液对心肌细胞膜功能及细胞内钙影响的实验研究

目的探讨离体兔心经冠状静脉窦逆灌心脏停跳与不停跳对心肌细胞膜脂流动性及其功能的影响。方法健康成年家兔24只,体重3.0~3.5kg,随机分为3组:A组(对照组),B组(常温氧合血逆灌心脏不停跳),C组(温血心脏麻痹液持续逆灌),离体兔心顺灌左心做功20min,持续逆灌60min,左心做功60min。比较逆灌后各组心肌细胞膜丙二醛(MDA)含量、心肌细胞膜ATP酶活性、心肌细胞膜脂流动性、心肌细胞内钙离子浓度的变化。结果B、C两组心肌细胞膜ATP酶活性和心肌细胞膜脂流动性均较逆灌前低(P<0.05),心肌细胞膜MDA含量和心肌细胞内钙离子浓度较逆灌前高(P<0.01)。逆灌后,B组心肌细胞膜ATP酶活性和心肌细胞膜脂流动性优于C组(P<0.01),B组心肌细胞膜MDA含量和心肌细胞内钙离子浓度明显较C组高(P<0.01)。结论常温氧合血逆灌心脏不停跳在减轻心肌细胞膜自由基损伤,维持膜脂流动性和膜ATP酶功能,减轻细胞内钙超载方面优于温血心脏麻痹液逆灌停搏。     

不同逆灌方法对兔离体心脏心肌细胞膜脂流动性及膜功能的影响

目的　本实验探讨兔离体心脏经冠状静脉窦不同逆灌方法对心肌细胞膜脂流动性及膜功能的影响。方法　健康成年家兔 3 2只 ,体质量 3 0～ 3 5kg ,随机分为 4组 :A组 (常温氧合血逆灌心脏不停跳 ) ,B组 (温血心脏麻痹液持续逆灌 ) ,C组 (冷血心脏麻痹液持续逆灌 ) ,D组 (冷晶体麻痹液持续逆灌 )。兔离体心脏顺灌左心做功 2 0min ,持续逆灌 60min ,左心做功 60min。比较各组心肌细胞膜脂流动性、心肌细胞膜丙二醛 (MDA)含量、心肌细胞膜ATP酶活性、心肌细胞内钙离子浓度的变化。结果　逆灌后恢复顺灌左心做功第 60分钟B、C、D 3组心肌细胞膜ATP酶活性和心肌细胞膜脂流动性均明显低于A组 (P <0 0 5 ) ,心肌细胞膜MDA含量和心肌细胞内钙离子浓度较A组高 (P <0 0 1)。B组心肌细胞膜ATP酶活性和心肌细胞膜脂流动性优于C、D组 (P <0 0 1) ,B组心肌细胞膜MDA含量和心肌细胞内钙离子浓度明显较C、D组高 (P <0 0 1) ,C、D两组间差异不明显。结论　常温氧合血逆灌心脏不停跳在减轻心肌细胞膜自由基损伤 ,维持膜脂流动性和膜ATP酶功能 ,减轻细胞内钙超载方面优于心脏麻痹液逆灌停搏 ,温血逆灌优于冷血和冷晶体液。     

马齿苋对氧自由基引发人红细胞膜损伤的保护作用

目的　探讨马齿苋提取物对人红细胞膜氧化损伤的保护作用。方法　采用邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子自由基 (O· -2 )致红细胞膜损伤 ,以此为膜过氧化损伤实验模型 ,以脂质过氧化降解产物丙二醛 (MDA)、荧光偏振度和膜脂流动性 (MFU)为指标 ,观察马齿苋提取物对人红细胞膜氧化损伤的保护作用。结果　红细胞膜丙二醛 (MDA)含量明显降低 ,荧光偏振度P值明显降低 ,膜质流动性 (MFU)明显增大 ,其作用随剂量增加而增强。结论　马齿苋提取物对氧自由基引发的红细胞膜损伤具有一定的保护作用     

心复康对培养乳鼠心肌细胞心肌酶及膜流动性的实验研究

采用体外培养的乳鼠心肌细胞 ,通过暂时停止供应心肌细胞生存必需的糖和氧 ,造成心肌细胞缺血样损伤。测定细胞培养液中心肌酶的活性 ,并用荧光分光光度计偏振法测定心肌细胞膜流动性 (MFU) ,观察中药心复康对心肌细胞缺血性损伤的影响。结果显示心复康明显降低培养液中心肌酶活性 ,增强心肌细胞膜流动性 ,研究表明心复康对心肌细胞的缺血性损伤具有保护作用     

一种观察血管内皮损伤与自由基关系的新方法——Ⅱ、内皮扫描电镜观察

本研究用离体兔胸主动脉淋浴灌流系统电解Krebs液损伤血管内皮模型,观察了自由基对血管内皮的影响。结果发现,电解性自由基在损伤血管内皮释放EDRF能力的同时,内皮细胞完整性遭破坏,细胞膜凹陷,细胞间隙增宽及部分区域内皮细胞脱落。     

小檗碱对兔红细胞膜流动性及膜蛋白荧光的影响

目的：研究小檗碱对细胞膜流动性及其膜蛋白荧光的影响．方法：以制备的兔红细胞膜为材料,1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene（DPH）为荧光探针,运用荧光偏振技术检测与小檗碱作用后兔红细胞膜流动性的变化,观察小檗碱与兔血红细胞膜蛋白作用后Tyr残基荧光强度的变化．结果：兔血红细胞膜与小檗碱作用后其荧光偏振P值发生了剂量依赖性的下降;小檗碱使兔血红细胞膜蛋白Tyr残基的荧光产生剂量依赖性的淬灭作用．结论：小檗碱在体外能有效提高细胞膜的流动性,可能与小檗碱多种心血管药理活性有关;小檗碱与膜蛋白的作用可能是膜流动性变化的引发机制．     

葡萄糖－6－磷酸脱氢酶缺乏时红细胞膜氧化性变化

用荧光分光法测定红细胞膜过氧化脂质（ＭＤＡ），同时用荧光偏振法，以疏水性荧光探剂１，６－二苯基－１，３．５－己三烯（ＤＰＨ）标记正常人及葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏者的红细胞膜脂区，测定０℃和９０℃的偏振荧光，膜流动性以荧光偏振度表示。结果发现：Ｇ６ＰＤ缺乏时红细胞膜ＭＤＡ含量（１．４８±０．０９５）及荧光偏振度（０．２６３３±０．００４３）明显高于正常（０．３８２±０．０７２及Ｏ２２６１±０．００６９），Ｐ均＜０．０１．即红细胞膜有序程度增高，流动性降低结果提示，Ｇ６ＰＤ缺乏时红细胞膜发生了氧化性损伤，红细胞膜ＭＤＡ含量增加，膜流动性下降，膜ＭＤＡ含量与流动性下降相关．这可能是引起溶血的一个重要原因。     

枸杞多糖对细胞膜流动性及蛋白激酶C的体外效应

目的：研究枸杞多糖（LBP）体外免疫调节效应的作用机制。方法：以DPH作为荧光深剂，采用荧光偏振法观察LBP对免红细胞膜流动性的影响。并以32P-组蛋白内参入的放射性强度检测法，观察LBP对淋巴细胞胞膜和胞浆蛋白激酶C（PKC）活性的影响。结果：100mg／LLBP可明显促进兔红细胞细胞膜的流动性，并能增强10mg／L和25mg／LConA对膜流动性的促进作用。同时100ms／LLBP尚可增加ConA活化后的小鼠脾淋但细胞膜上的PKC的活性，但对胞浆PKC的活性无影响。结论：LBP的体外作用途径可能是作用于细胞膜，通过促进细胞膜的流动性及促进ConA活化的小鼠脾淋巴细胞胞浆内PKC从胞浆到胞膜的激活移位而发挥免疫调节效应的。     

Study on Biologic Activity for Membrane of Normal Bone Marrow Cells with Infection of Epidemic Hemorrhagic Fever Virus

Membranelipidfluidity(MLF)hascorrelationtothemultiplicationandma1ignantdegreeofce11s,whichplaysanimPOrtantroleinthepathOgenesisoftheneoplasiacellsescapingfromthegrowthcontrol.Atpresent,noreportonthebio1ogicchangesinMLFofnormalbonemarrowcellswithinfectionofEHFV.ThepurposeofthisstudywastostudythechangesinMLFofnormalbonemarrowce11sanditsrelationtotheinfectionofEHFV.1MATERIALSANDMETHODS1'lCeIlcultureThepuncturewasmadeontheanteriorsuperioriliacspineorposteriorsuperioriliacspineof27c…     

Normal and leukeymic lmphocyte membrane fluidity and response to stimulation with ConA and PHA

In our experiment, lymphocyte membrane was 1abeled by DPH fluorescence probe. The rate of rotation of the probe can be measured from the value of fluorescence polarization (P_DPH). With this method useful information could be provided about membrane fluidity of lymphocytes. It was found that the F value (unit of lipid fluidity of membrane) of leukemic lymphocytes was obviously higher than that of normal ones. Furthermore, the F value of cultured leukemic T_s lymphocytes was the highest. In contrast with normal spleen T-lymphocytes or mixed lymphocytes, the response of malignant lymphocytes to the stimulation with ConA or PHA was reflected in the decrease of P_DPH value or the increase of F value. Unexpectedly, the F value of T-lymphocytes from “615” mouse not injected with tumour cells was also higher than that of the mixed. The possibility of using the membrane fluidity as a diagnostic criterion was also discussed.     

牛磺酸对肢体缺血再灌注后红细胞的保护作用

（1）目的：观察牛磺酸对红细胞（RBC）的保护作用。（2）方法：实验用大鼠肢体缺血再灌注损伤动物模型，采用荧光偏振法，以DPH（1．6－二苯－1、3、5己三烯）为探剂，测定红细胞膜的流动性；以硫代巴比妥酸法及邻苯三酚自氧化法分别测定血浆丙二醛（MDA）及红细胞超氧化物歧化酶（SOD）含量。（3）结果：大鼠肢体缺血再灌注2h后，RBC膜流动性增强，再灌注4h后RBC膜流动性降低。而牛磺酸既能改善再灌注2h的膜流动性增强，又能改善再灌注4h的膜流动性，并可抑制脂质过氧化，增加SOD活性。（4）结论：牛磺酸可保护RBC膜免受缺血再灌注后自由基生成过多而引起的损伤。     

正常和恶性淋巴细胞膜的流动性及其对PHA、ConA刺激的反应性

本实验采用疏水性荧光探针DPH(1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene,1,6-二苯基-1,3,5-己三烯)标记小鼠的淋巴细胞膜,根据荧光偏振值的变化比较正常细胞膜和癌变细胞膜流动性及对外界刺激反应性的差别。实验结果表明癌变淋巴细胞膜的流动性明显增高(P<0.001)。用同样浓度的ConA 10mg/L,PHA 40mg/L刺激后,荧光偏振值的变化幅度和方向也不同于正常细胞。本文还对以细胞膜流动性变化作为癌变指标的可能性作了补充说明。     

MOCA对大鼠红细胞膜流动性的影响

采用荧光偏振法，以ＤＰＨ为探针，测定了红细胞膜的流动性，实验结果表明，４，４′－亚甲基双（α－氯苯胺）（ＭＯＣＡ）可引起红细胞膜损伤，导致膜流动性降低，而加入ＶＣ或ＶＥ后，均可使膜流动性恢复近于正常水平，提示ＶＣ和ＶＥ可保护红细胞，免于ＭＯＣＡ的损伤作用。     

Mitomycin C对小鼠腹水肝癌细胞膜脂的作用

本实验用1,6-二苯基-1,3,5-已三烯(DPH)作荧光探剂,应用荧光偏振技术研究Mitomycin C(MC)对小鼠腹水肝癌细胞膜脂的作用。结果表明,MC使细胞膜脂区流动性降低,呈明显的量效关系。薄层液相色谱分析,MC改变了膜脂的Rt值。但MC不改变膜的相变温度。     

高低转移性人肺腺癌细胞膜脂区流动性的测定及比较

本文应用荧光探剂DPH(1,6-dipheny1-1,3,5-hexatriene)及荧光偏振技术,对高转移性的人肺腺癌细胞系Anip-973及其低转移性的母系AGiY-83a,经S相(S-phase)同步后细胞膜的流动性进行了测定并作了对比分析。结果表明,高转移性的人肺腺癌细胞膜比其低转移性的母系细胞膜具有较大流动性。     

卡维地洛对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究卡维地洛对缺氧／复氧损伤心肌细胞的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法新生1-3 d的Sprague-Dawley鼠,原代分离,培养其心肌细胞72 h后,随机分为正常对照组、单纯缺氧／复氧组及卡维地洛 缺氧／复氧组。先将培养板中的心肌细胞缺氧(氧浓度<1％)120 min,再复氧30 min,造成缺氧／复氧损伤模型,测定细胞存活率;抽取细胞培养上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB);并破碎细胞,测定丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果卡维地洛 缺氧／复氧组的细胞培养液中LDH和CK-MB漏出量分别为(32．32±1．46)和(28．33±2．12)U／L,均显著低于缺氧／复氧组[(50．28±1．22)和(42．45±3．22)U／L,P值均<0．05];卡维地洛 缺氧／复氧组的细胞存活率为(70．21±2．12)％,显著高于缺氧／复氧组[(58．39±3．22)%,P<0．05]。卡维地洛 缺氧／复氧组的细胞内MDA含量为(5．32±0．32)nmol／mL,显著低于缺氧／复氧组[(8．32±0．42)nmol／mL,P<0．05];SOD活性为(10．32±0．42)U／mL,显著高于缺氧／复氧组[(7．42±0．20)U／mL,P<0．05]。结论卡维地洛对心肌细胞缺氧／复氧损伤具有保护作用,能清除氧自由基,提高心肌细胞抗氧化能力。