重楼总皂苷对脂多糖诱导大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α及IL-1β的影响

目的:探讨重楼总皂苷对细菌内毒素脂多糖(LPS)诱导大鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)分泌TNF-α、IL-1β的影响.方法:分离并纯化大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ),与重楼总皂苷共同孵育,2小时后予LPS(100ng/ml)诱导PMΦ释放TNF-α、IL-1β,以ELISA酶联免疫吸附测定法检测上清液中TNF-α、IL-1β浓度.结果:重楼总皂苷对LPS诱导PMΦ释放TNF-α、IL-1β具有显著的抑制作用(P＜0.01).结论:重楼总皂苷可以抑制腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1β的活性.     

重楼对多发骨折-脂多糖两次打击急性肺损伤的保护作用

目的:探讨重楼总皂苷(RPTS)对多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠急性肺损伤(ALI)的影响.方法:将36只Wistar大鼠随机分成3组,除空白对照组外,其余2组按多发骨折-脂多糖两次打击急性肺损伤动物模型标准制模,分成重楼干预组和模型对照组,制模后1h,重楼干预组予重楼总皂苷(RPTS)灌胃.干预后6h,采血以ELISA法检测血清中TNF-α、IL-1β及IL-6浓度;各组留取肺组织,光镜下进行病理形态观察.结果:重楼干预组大鼠血清TNF-α、IL-1β及IL-6浓度显著低于模型对照组(P<0.001).模型对照组,光镜下肺组织病理形态观察显示明显肺损伤;而重楼干预组肺损伤表现明显轻于模型对照组.结论:重楼总皂苷对多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠急性肺损伤具有保护作用,机制可能与下调血清中的TNF-α、IL-1β、IL-6水平从而减轻炎症反应有关.     

白藜芦醇甙对大鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α、IL-6和IL-1及细胞内钙浓度的影响

目的:研究白藜芦醇甙(polydatin,pol)对大鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PM)分泌TNF-α、IL-6和 IL-1的作用及其与[Ca~(2 )]_i 的关系,以了解 pol 的抗炎作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenylterazolium bromide,MTT]比色法检测 IL-1、TNF-α和 IL-6,采用荧光指示剂和荧光分光光度计检测 PM 的[Ca~(2 )]_i。结果:(1)pol 增加正常大鼠 PM 分泌 TNF-α和 IL-6,对 IL-1的分泌无明显作用。pol 可降低经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的大鼠 PM 分泌 TNF-α、IL-6和 IL-1。(2)pol 降低正常的和经 LPS 刺激后的大鼠 PM 静息[Ca~(2 )]_i 和外加 CaCl_2后[Ca~(2 )]_i 的升高。结论:pol 对PM 分泌细胞因子有双向调节作用。pol 可以抑制细胞内贮存钙释放和细胞外钙的进入。Pol 的抗炎机制可能与其抑制上述炎症介质有关,并可能通...     

重楼对多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠的保护作用

目的：探讨重楼总皂苷（RPTS）对多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠的保护作用。方法：将70只Wistar大鼠随机分成3组,除空白对照组外,其余2组按多发骨折-脂多糖两次打击致脓毒症并急性肺损伤动物模型标准制模,制模后1小时。重楼干预组予重楼总皂苷（RPTS）灌胃。干预后6小时,部分动物采血,以ELISA法检测血清中TNF-α、IL-1β及IL-6浓度;各组留取肺组织,光镜下进行病理形态观察。剩余动物用以观察死亡率。结果：重楼干预组大鼠血清TNF-α、IL-1β及IL-6浓度显著低于模型对照组（P〈0．001）。死亡率,一重按干预组显著低于模型对照组（P〈0．05）。结论：重楼总皂苷对多发骨折．脂多糖两次打击模型大鼠具有保护作用,机制可能与下调血清中的TNF-α、IL-1β、IL-6水平从而减轻炎症反应以及减轻急性肺损伤有关。     

三七总皂苷对佐剂性关节炎大鼠的保护作用及机制研究

目的：探讨三七总皂苷（PNS）对佐剂性关节炎（AA）大鼠的保护作用及可能机制。方法：以弗氏完全佐剂（FCA）制备AA大鼠模型,于造模第12天起,给药组分别灌胃给予相应的受试药物,疗程12d。足容积法测量大鼠继发侧足肿胀度;放免法测定血清白细胞介素IL-1、IL-6、肿瘤坏死因子TNF-α含量;HE染色法检测大鼠关节病理组织学改变;RT-PCR法检测AA大鼠腹腔巨噬细胞（PMΦ）中TNF-αmRNA的表达。结果：PNS（100,200mg.kg-1）能明显抑制AA大鼠继发性足肿胀,改善关节病理损伤程度,降低血清IL-1、IL-6、TNF-α的含量,同时抑制PMΦ中TNF-αmRNA的表达。结论：PNS对AA大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与调节细胞因子的产生有关。     

知母皂苷抑制Aβ25-35引起巨噬细胞TNF-α释放及信号传导机制

目的:观察知母皂苷(SAaB)能否通过PI3K/mTOR/p70S6K信号通路抑制淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)引起的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α释放的增多。方法:小鼠腹腔巨噬细胞培养24h,分别加入不同浓度SAaB(10、30、100 mol/L)、雷帕霉素(RAPA,0.05 mol/L)和LY294002(20 mol/L),之后加入Aβ25-35(20 mol/L)继续培养。ELISA方法测定巨噬细胞培养上清液中TNF-α含量。Western blot和免疫荧光观察巨噬细胞磷酸化p70S6K表达水平的改变。结果:Aβ25-35引起的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α释放增多和磷酸化p70S6K表达明显增加,SAaB各浓度、RAPA和LY294002均可不同程度抑制Aβ25-35引起的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α释放增多,SAaB(100 mol/L)可下调Aβ25-35引起的小鼠腹腔巨噬细胞磷酸化p70S6K表达增加。结论 :SAaB能够明显的抑制Aβ25-35引起的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α产生增多,这种作用机制与SAaB下调巨噬细胞PI3K/mTOR/p70S6K信号通路有关。     

糖槭多糖对RAW264.7炎症因子分泌的影响

目的:通过考察糖槭叶多糖(ASP-A)和糖槭果多糖(ASP-B)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌细胞因子的影响,明确其抗炎作用机制。方法:MTT法测定不同浓度两类多糖对RAW264.7细胞的毒性作用,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-1α(TNF-1α)、前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量。结果:糖槭多糖能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞释放细胞炎症因子NO,TNF-1α,PGE2,IL-1β的分泌量。结论:ASP-A和ASP-B在浓度小于200 mg·L-1对RAW264.7细胞无显著毒性,且可以通过抑制细胞因子NO,TNF-1α,PGE-2,IL-1β的分泌发挥抗炎作用。     

赤雹根总皂苷对类风湿性关节炎大鼠血清细胞因子的影响

目的研究赤雹根总皂苷对类风湿性关节炎大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α的影响。方法以弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎,将造模成功50只大鼠随机分为模型组,赤雹根总皂苷160,80,40 mg/(kg·d)组和雷公藤12 mg/(kg·d)组,另取10只正常大鼠作正常对照。连续灌胃给药21 d。观测各组大鼠继发关节肿胀度和关节炎指数;给药后第22天,处死大鼠,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量。结果赤雹根总皂苷能明显降低佐剂性关节炎大鼠继发侧的关节肿胀度和关节炎指数(P<0.01);与正常对照组相比,模型组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高(P<0.01);赤雹根总皂苷灌胃治疗后,各组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量较模型组明显降低(P<0.01)。结论赤雹根总皂苷对大鼠类风湿性关节炎有治疗作用,且该作用与抑制IL-1β、IL-6、TNF-α的合成有关。     

当归醇沉物及其中性组份体外对巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1的影响

目的观察当归醇沉物(ESA)及其中性组分(ESA-1)体外对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1的影响.方法L929细胞株细胞毒法测TNF-α;L929细胞增殖法测IL-1.结果ESA、ESA-1与小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)共同培养可显著增强其TNF-α、IL-1的分泌.在5～20μg/mL浓度范围,ESA的这种作用呈剂量依赖性;ESA-1虽有明显的作用,但未表现出剂量依赖.结论当归醇沉物及其中性组分体外可增强小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1.     

甘草总皂苷抗炎作用机制研究

目的: 采用体外炎症模型研究甘草总皂苷抗炎作用机制。 方法: 建立脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞系RAW264.7细胞体外炎症模型,检测不同浓度甘草总皂苷对炎症因子生成与释放及花生四烯酸代谢通路中与前列腺素E₂(PGE₂)生成有关的关键酶的影响。 结果: 甘草总皂苷能显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞一氧化氮(NO)、白细胞介素-1(IL-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放,并通过抑制磷脂酶A₂(PLA₂)酶活性及环氧合酶-2(COX-2)表达而降低PGE₂的合成。 结论: 甘草总皂苷抗炎作用与其减少巨噬细胞炎症介质生成与释放、抑制花生四烯酸代谢途径PGE₂合成的关键酶密切相关。     

杨梅素对小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞增殖的影响

目的:研究杨梅素体外对小鼠脾脏淋巴细胞增殖及腹腔巨噬细胞活化的影响。方法:取健康小鼠,MTT法检测杨梅素对小鼠脾淋巴细胞增殖的作用;中性红法测腹腔巨噬细胞吞噬活性;Griess试剂法测NO释放量;Elisa法测TNF-α、IL-1β和IL-4的含量。结果:杨梅素对未活化及丝裂原(Con A、LPS)活化的淋巴细胞增殖均有明显促进作用;可剂量依赖性地增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力和促进NO释放;促进RAW264.7细胞TNF-α、IL-1β产生,抑制IL-4的释放。结论:杨梅素可能通过促进小鼠脾淋巴细胞增殖和提高巨噬细胞吞噬及分泌功能,提高机体免疫功能。     

瓜子金有效部位群抗炎作用机制研究

目的:采用体外炎症模型研究瓜子金有效部位群抗炎作用机制。方法:建立脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞系RAW264.7细胞体外炎症模型,研究不同浓度瓜子金有效部位群对一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的释放及对TNF-α和IL-6 mRNA表达的影响。结果:瓜子金有效部位群能显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞NO,IL-6及TNF-α的释放,显著降低TNF-α及IL-6 mRNA的表达。结论:瓜子金有效部位群抗炎作用与其减少巨噬细胞炎症介质的生成与释放及降低TNF-α和IL-6 mRNA的表达密切相关。     

重楼皂苷VII对骨关节炎大鼠病理损伤和细胞外基质的影响

目的:研究重楼皂苷VII对大鼠骨关节炎和细胞外基质影响。方法:采用前交叉韧带横断(ALCT)手术处理大鼠,将成模大鼠分为:骨关节炎模型组、重楼皂苷VII 25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg组和双醋瑞因胶囊50 mg/kg组,另设假手术组。开放性运动测试检测大鼠10 min运动距离;苏木素-伊红染色和番红O-固绿染色检测大鼠骨关节病理损伤程度;ELISA试剂盒检测膝关节液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)水平和血清中IL-1β、基质金属蛋白酶9(MMP9)、解聚素金属蛋白酶5(ADAMTS-5)含量。结果:与假手术组相比较,骨关节炎模型组10 min运动距离显著降低,病理损伤程度明显改善且Mankin's评分及OARSI评分显著升高,膝关节液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著升高,血清中IL-1β、MMP9、ADAMTS-5含量显著升高;与骨关节炎模型组相比较,重楼皂苷VII 50、100 mg/kg和双醋瑞因胶囊组10 min运动距离显著升高,病理损伤程度明显改善且Mankin's评分及OARSI评分显著降低,膝关节液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著降低,血清中IL-1β、MMP9、ADAMTS-5含量显著降低。结论:重楼皂苷VII具有改善骨关节炎病理损伤程度,调节细胞外基质的作用。     

复方银黄微型灌肠剂对巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子和白细胞介素-6的影响

目的研究复方银黄微型灌肠剂(Yinhuang Micro-enema Compound,YHMEC)含药血清对大鼠腹腔巨噬细胞(PMФ)分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的影响。方法将大鼠随机分成3组,分别于末次灌肠给药后10,30,60 min采集含药血清,采用MTT比色法检测不同采血时间的含药血清对PMФ活力的影响;细胞培养上清液中TNF-α,IL-6的表达采用ELISA法检测。结果末次给药后30,60 min采集的含药血清对PMФ的活力及细胞因子的表达影响显著(P<0.05或P<0.01)。结论复方银黄微型灌肠剂含药血清能显著抑制LPS诱导的TNF-α,IL-6表达,具有明显的体外抗炎活性。     

藏药忍冬果对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及分泌细胞因子的影响

目的:研究藏药忍冬果水提物(FLM)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及分泌细胞因子的影响。方法:运用吞噬中性红试验观察FLM对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,用小鼠腹腔巨噬细胞分泌物对小鼠胸腺细胞增殖及对L929细胞杀伤作用的影响分别测定IL-1及TNF-α的活性,用RT-PCR技术观察药物对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-αmRNA和IFN-γmRNA表达的影响。结果:FLM在1～100μg.mL^-1剂量内对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有明显促进作用,同时能诱导巨噬细胞分泌IL-1及TNF-α,并促进细胞因子TNF-αmRNA和IFN-γmRNA的表达。结论:FLM对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及分泌细胞因子都有促进作用。     

麝香配伍乳香对小鼠前列腺抗原诱导的单核细胞分泌炎症因子的调控作用

目的:探讨不同浓度麝香配伍乳香含药血浆(DP-MO)对单核细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10水平的影响,了解麝香配伍乳香在治疗前列腺炎中抗炎作用的机理。方法:制备小鼠脾脏单核细胞,细胞培养后分加入2.5%、5%、10%、20%浓度的DP-MO预处理1 h后,加入小鼠前列腺抗原(PAgs)诱导活化单核细胞。阳性对照组加入脂多糖(LPS)处理。阴性对照组加入等体积DMEM完全培养基。培养96 h后收集各组上清,ELISA法检测单核细胞分泌的炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10的水平。结果:与空白对照组比较,经PAgs刺激诱导后,各组小鼠单核细胞的炎症因子释放增加,除IL-10的升高明显低于阳性对照LPS组外,其他TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8均明显增高;2.5%DP-MO预处理后,虽然炎症因子有改变的趋势,但与PAgs组比较,差异无统计学意义(P0.05);随着DP-MO浓度增加,对TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8降低及IL-10升高作用更明显,呈剂量依赖性改变,在20%DP-MO预处理后,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8分别降低了74.4%、56.0%、76.6%、70.5%,IL-10上升了236.1%。结论:DP-MO具有直接抑制前炎症因子产生的作用,其中对IL-1β的抑制作用最强;可促进IL-10的升高,从而抑制单核巨噬细胞释放炎症介质,减少PAgs诱导活化导致的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的分泌释放。     

黄芪多糖对THP-1巨噬细胞HSP60诱导下IL-6、TNF-α表达的影响

目的探讨黄芪多糖(Astragalus Polysaccharide,APS)对炎症模型细胞所释放的炎症因子白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法以人急性单核白血病细胞株(THP-1)为实验对象,以热休克蛋白60(HSP60)诱导,使分化为巨噬细胞(MΦ),并以APS干预。随机分为4组,分别是THP-1组、MΦ组、HSP60组、APS组。收集上清培养液,用ELISA法检测细胞上清中IL-6、TNF-α的浓度。结果 APS组较HSP60组IL-6、TNF-α表达明显下调。结论APS对THP-1巨噬细胞HSP60诱导下的炎症反应具有一定干预作用。     

清热、活血类中药有效成分对THP-1巨噬泡沫细胞形成及分泌IL-1β、TNF-α的影响

目的探讨清热、活血类中药有效成分抑制巨噬细胞泡沫化的作用及机制。方法以氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和细菌脂多糖(LPS)诱导THP-1细胞成为巨噬泡沫细胞,采用油红O染色脂质半定量分析法和ELISA法检测中药有效成分对THP-1巨噬泡沫细胞形成及培养上清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的影响。结果20μmol/L的黄连素、黄芩苷、大黄素、丹参酮ⅡA和100 mg/L的三七总皂苷可显著降低THP-1巨噬泡沫细胞油红O染色阳性率;20μmol/L的大黄素、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA可显著降低THP-1巨噬细胞的IL-1β分泌量;20μmol/L的黄连素可显著降低THP-1巨噬细胞的TNF-α分泌量。结论清热、活血类中药有效成分可抑制巨噬细胞泡沫化及其炎症因子IL-1β和/或TNF-α的分泌,抑制炎症因子的释放可能是其抗泡沫细胞形成的机制之一。     

短葶山麦冬多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的观察短葶山麦冬多糖(LMP)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。方法分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞用不同质量浓度LMP(62.5、125、250、500μg/m L)共同培养,检测巨噬细胞吞噬中性红试验,趋化作用和分泌TNF-α、IL-6的功能。结果不同质量浓度的LMP能显著增强巨噬细胞吞噬能力和趋化作用,促进TNF-α、IL-6释放。结论 LMP能增强小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能。     

松萝酸原料及自微乳的抑菌抗炎实验初步研究

目的考察松萝酸原料及自微乳的抗菌抗炎作用。方法采用体外抑菌实验观察松萝酸原料及自微乳的抑菌效果;采用MTT法考察松萝酸原料及自微乳制剂对腹腔巨噬细胞的细胞毒作用,及对热灭活大肠杆菌诱导小鼠腹腔巨噬细胞释放TNF-α的影响。结果松萝酸原料药及其自微乳制剂对金黄色葡萄球菌和肺炎球菌的生长有抑制作用,对绿脓杆菌和大肠杆菌无效。抗炎实验表明,松萝酸原料及自微乳在1-100μg／ml质量浓度范围内对小鼠腹腔巨噬细胞无显著细胞毒作用;不同质量浓度的原料药和自微乳制剂均可使热灭活大肠杆菌诱导的TNF-α水平有不同程度的下降,并呈一定的量-效关系。结论松萝酸原料药和自微乳制剂均有一定抗菌作用,并显示出较强抗炎效应,其中制剂作用更为明显,抗炎效应明确。