磁靶向药物粒子在肿瘤治疗中的研究进展

癌症目前成为威胁人类健康的严重疾病之一,治疗肿瘤的方法主要手术切除、放射治疗和化学药物治疗,化疗不能定位于肿瘤组织。磁性靶向治疗是以纳米级磁性颗粒为载体,利用载体的磁响应性,通过外磁场的作用使肿瘤药物浓集定位于靶组织、器官、细胞或细胞内结构病变等部位,实现靶向给药。而在纳米磁性颗粒的制备及载药技术等方面,还有许多深入细致的工作要做,此外磁性高分子微粒在人体内的应用还要解决生物相容性问题以及如何避免包覆的高分子层在生物体内的分解。随着材料学、医药学、生物工程学等的进一步发展,磁靶向给药系统的基础和应用研究将迎来新的发展阶段。     

白蛋白阿霉素磁纳米粒在大鼠体内的生物分布

目的：观察白蛋白阿霉素磁纳米粒肝动脉给药与肝动脉给予高剂量的游离药物在体内生物分布上的差异。通过直接测量组织中阿霉素的浓度,进一步证实白蛋白阿霉素磁纳米粒的靶向性。方法：大鼠正中开腹,胃十二指肠动脉插管。实验组：肝动脉注射白蛋白阿霉素磁纳米粒（相当0．5mg/kg阿霉素）左肝外叶应用磁场30min,磁场去除后,动物处死。对照组：肝动脉注射10倍于实验组剂量的阿霉素（5mg/kg),30min后处死。动物处死后,取靶区肝组织、非靶区肝组织、心、肾、脾和肺捣碎、匀浆,用乙醇提取法提取阿霉素,用荧光光度计测量。结果：实验组左肝外叶应用磁场30min,磁区肝组织阿霉素的浓度较非磁区肝组织的阿霉素浓度明显升高,磁共肝组织阿霉素浓度为非磁区肝组织的2．6倍,对照组靶区肝组织和非靶区肝组织的阿霉素浓度无统计学差异,对照组和心和肾组织的阿霉素浓度平均为实验组的9倍以上,脾为4．6倍,肺两组之间无统计学差异。而对照组靶区肝组织的阿霉素只有磁区肝组织阿霉素浓度的1／4。实验组心、肾、肺和脾组织与靶区肝组织阿霉素浓度的比值大大低于对照组。结论：通过纳米粒加磁场的方法从肝动脉给予阿霉素在靶区产生的药物浓度比肝动脉给予10倍剂量的游离阿霉素在靶区产生的药物浓度高3倍。而在心、肾和脾的阿霉素浓度比对照组大为降低。另外,实验组心、肾、肺和脾组织和与靶区肝组织阿霉素的比值比对照组明显降低,其意义若在靶区产生同样的阿霉素的浓度,实验组肝外脏器的阿霉素浓度将大大降低对照组。     

磁性阿霉素脂质体靶向治疗裸鼠大肠癌的实验研究

目的 观察磁性阿霉素脂质体靶向治疗裸鼠大肠癌的效果。方法 应用逆向蒸发法制备磁性阿霉素脂质体,考察其粒径大小和形态结构;进行体内靶向定位实验;在大肠癌肿瘤组织内植入磁铁,尾静脉给药,观察肿瘤的生长速度,测定其对裸鼠大肠癌的瘤重抑制率和肿瘤细胞凋亡率。结果 磁性阿霉素脂质体平均粒径230nm,磁性颗粒均匀分布于脂质体中。应用磁性脂质体加磁场的方式给药显著提高靶部位化疗药物浓度。在大肠癌肿瘤组织中磁场的作用下,磁性阿霉素脂质体显著抑制肿瘤组织的生长。结论 作为化疗药物的新型载体,磁性阿霉素脂质体具有良好的磁靶向定位作用和明显的抑瘤作用。     

表阿霉素免疫纳米微粒靶向抗肝癌作用的研究

目的制备表阿霉素（E-ADM）免疫纳米微粒（NPs）,观察其对荷人肝癌裸鼠模型的靶向治疗效应。方法利用聚电解质复合法合成载表阿霉素纳米微粒（E-ADM-NPs）,化学交联法合成载表阿霉素的抗血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）单克隆抗体纳米微粒（E-ADM-Ab-NPs）,观察E-ADM-Ab-NPs在荷人肝癌裸鼠模型体内的分布特点,观察药物的靶向抗肿瘤效应及其毒副作用。结果 E-ADM-Ab-NPs保留了抗VEGFR2单克隆抗体的活性;E-ADM-Ab-NPs组肿瘤组织中的E-ADM浓度为（31.85±4.78）mg/kg,显著高于E-ADM-NPs组（P〈0.05）;E-ADM-Ab-NPs组的瘤体积抑制率及瘤重抑制率为60.69%和58.54%,较E-ADM-NPs组和E-ADM原药组均明显增强（P〈0.05）;且E-ADM-Ab-NPs组的血白细胞计数、谷丙转氨酶及肌酐水平与空白对照组相比,差异均无统计学意义（P〉0.05）;而E-ADM原药组的血白细胞计数较空白对照组下降42.68%,血清谷丙转氨酶水平则升高88.06%（P〈0.05）。结论 E-ADM-Ab-NPs具有免疫活性,其在动物模型体内呈导向性分布,可提高E-ADM的疗效并有效降低E-ADM的毒副作用,是一种安全的新型药物纳米靶向制剂。     

内磁场在磁靶向治疗胆道恶性肿瘤中作用的实验研究

目的 评价内磁场在磁靶向治疗胆道恶性肿瘤中的作用.方法 建立异位胆管癌移植瘤裸鼠模型32只,随机分成4组,每组8只.A组(实验组):采用自制的胆道磁性支架丝,在肿瘤内部建立30mT的磁场,尾静脉注射纳米氟尿嘧啶(5-FU)磁小体;B组(空白对照组):肿瘤模型自然生长,无磁场和药物应用;C组(单纯内磁场组):建立与A组一致的肿瘤局部内磁场,无药物治疗;D组(外磁场组):建立500mT的肿瘤局部外磁场,药物干预同A组.在首次治疗当天和治疗后第4、7、11、15、19天,分别测各组肿瘤体积,做重复测量的多因素方差分析.观察期结束后处死裸鼠,观察肿瘤组织病理变化.结果 与空白对照组比较,单纯内磁场组、外磁场组和实验组的肿瘤抑制率依次为18.039%、26.078%、40.12%,实验组肿瘤生长受到明显抑制,与3个对照组的肿瘤体积均有显著性差异,该组肿瘤组织镜下显示大量细胞凋亡,可见大量纳米磁小体颗粒沉积在凋亡的肿瘤细胞内.结论 基于内磁场的磁靶向治疗可抑制肿瘤生长,其效果优于传统的依靠外磁场的靶向治疗方法.     

5-氟尿嘧啶磁性纳米脂质体在大鼠肝癌模型体内的靶向分布

目的经肝动脉给予5-氟尿嘧啶磁性纳米脂质体(MNLF),研究其在大鼠肝癌模型体内的分布。方法建立肝癌大鼠模型,随机分为3组,经肝动脉给药,A组予5-Fu溶液、B组予MNLF、C组予MNLF肿瘤区加磁场,高效液相色谱仪测量给药半小时后各组织的药物浓度,并比较不同给药方式下各组织药物浓度及肝肿瘤与各组织药物浓度比值;肝肿瘤与正常肝组织进行病理切片观察在磁场作用下,MNLF经肝动脉给药的肝肿瘤靶向性。结果经肝动脉给药30min后,C组肝肿瘤部位药物浓度较A及B组明显升高,而心、肺、肠、肾和脾等肝外组织及正常肝组织药物浓度较后2组低,肝肿瘤的药物选择指数显著升高,B组肝肿瘤的药物选择指数亦较A组升高,差异均有显著性(P<0.01)。结论MNLF经肝动脉给药并配合外加磁场治疗肝肿瘤,具有明显的肿瘤靶向性,非靶器官分布明显减少;在不加磁场情况下,MNLF对肝肿瘤仍具有一定的靶向性,但较加磁场情况下选择性降低。     

氟尿嘧啶白蛋白磁性亚微球特性研究

目的 制备以牛血清白蛋白为载体的氟尿嘧啶白蛋白磁亚微球(FU-AMOM)并研究其有关特性.方法 采用乳化-超声-固化法制备FU-AMOM并考察其外观、粒径及其分布;测定FU-AMOM的载药量及包封率;评价其释药特征并对释药曲线进行方程拟合;考察荷瘤小鼠体内靶向性.结果 制得FU-AMOM平均粒径为(321&#177;50)nm,分布范围为100～600 nm;平均载药量为(9.69&#177;0.19)%;平均包封率为(70.36&#177;0.53)%;体外动态透析法释药模型符合Higuchi方程,具有明显的缓释作用;荷瘤小鼠试验结果表明,FU-AMOM于磁场作用下在肿瘤组织聚集,具有靶向性.结论 FU-AMOM磁亚微球具有较好的缓释和靶向作用,有希望作为新型药物载体用于靶向给药系统.     

阿霉素白蛋白磁纳米粒在正常肝脏的靶向性

目的：观察阿霉素白蛋白磁纳米粒在正常肝脏中的磁靶向性。并观察阿霉素白蛋白磁纳米粒在全身各脏器的分布特征。方法：大鼠正中开腹,胃十二指肠动脉插管固定。实验组,左肝外叶加磁场,肝动脉注射阿霉素白蛋白的磁纳米粒（相当于阿霉素0．5mg/kg),磁场应用30min移去磁场后,动物立即处死,对照组：左肝外叶外不加磁场,肝动脉注射同等剂量的纳米粒后30min处死。动物处死后,立即取靶区肝、非靶区肝、心、肾、脾、肺、小肠和胃作γ计数。肝组织作组织学切片。结果：左肝外叶应用磁场30min后,磁共肝组织的放射活性较非磁共肝组织的放射活性明显增加（P＜0．0001）,磁区肝组织与非磁区肝组织的放射活性比值为2．6。而对照组磁区肝组织与非磁区肝组织的放射活性之间无统计学差异。肝外脏器的放射活性明显降低。除实验组肺的放射活性较对照组明显下降外,其它脏器两组之间没有统计学差异,另外,实验组,心、肾、脾、肺和小肠与靶区肝组织和的放射活性比值较对照组明显降低,胃与靶区肝组织的放射活性比值两组之间无统计学差异。注入纳米粒的70％－80％分布于肝脏,其它脏器含量极少。病理切片显示磁共小动脉中见大量纳米粒存在,对照组及非磁共肝中纳米粒很少见。结论：阿霉素白蛋白磁纳米粒在正常肝脏组织中有明显的磁靶向性,阿霉素白蛋白磁纳米粒主要分布于肝脏,其它脏器含量较少。实验组心、肾、脾、肺和小肠与靶区组织的放射活性比值明显降低,说明磁的存在使这些脏器的相对药物暴露明显减少。     

顺铂磁性纳米药物体内靶向性研究

目的 研究顺铂磁性纳米药物(CDDP-MNP)在正常小鼠体内的磁靶向性分布.方法 正常昆明种小鼠32只,随机分为4组,每组8只.于小鼠一侧肾脏区域设置强度为4100～4200Gs的体外磁场,自尾静脉注射CDDP-MNP并保持体外磁场一定时闻:A、B、C、D组分别在注药后维持磁场30 min和1、2、4 h.以原子吸收光谱分析法检测小鼠肾脏内顺铂含量,MRI监测肾脏信号强度变化,普鲁士蓝铁染色及扫描电镜检查纳米粒子在肾脏组织内的分布.结果 小鼠磁靶侧肾脏内CDDP含量高于非靶向侧,经尾静脉注射后0.5、1、2 h靶向侧药物浓度分别为非靶向侧的1137、1.31、1.22倍(p<0.05).MRI显示注射CDDP-MNP后,T2WI中小鼠磁靶向侧肾脏区域信号强度较对侧明显降低.病理切片普鲁士蓝铁染色显示含氧化铁的纳米粒分布于肾脏毛细血管管腔、内皮细胞等部位,透射电镜下见纳米粒主要被内皮细胞吞噬.结论 具有超顺磁性的CDDP-MNP在体外磁场作用下能实现体内靶向性分布,并可通过MRI进行监测,该纳米药物具有临床靶向抗肿瘤应用潜力.     

桔梗联合阿霉素治疗乳腺癌肺转移小鼠的药代动力学研究

目的:观察桔梗联合阿霉素对乳腺癌肺转移小鼠心脏功能及体内药代动力学的影响,探讨桔梗联合阿霉素治疗乳腺癌肺转移的作用机制。方法:建立乳腺癌肺转移小鼠模型。取模型小鼠100只,随机分为阿霉素组和阿霉素+桔梗组,每组各50只。从肿瘤接种第15天起,阿霉素+桔梗组小鼠灌胃给予1 g·kg~(-1)·d~(-1)桔梗醇提物溶液,阿霉素组小鼠灌胃给予等体积纯水,连续14 d。分别于接种第21天和第28天,两组小鼠均腹腔注射10 mg·kg~(-1)·d~(-1)阿霉素。末次给药后,采用小动物超声成像系统检测各组小鼠的心脏结构和功能参数;于0、0.083、0.5、1、2、4、6、12、24、36 h,随机选取每组5只小鼠,采集血浆及心脏、肺脏、肿瘤组织样本,LC-MS/MS检测不同时间点小鼠血浆及组织样本中阿霉素的浓度,并计算药动学参数。结果:①与阿霉素组相比,阿霉素+桔梗组小鼠的心脏超声图像波起伏增大,左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)升高,其中LVEF增幅为40%。②阿霉素的体内代谢呈快速吸收与分布、缓慢消除的特点,符合非房室开放模型。与阿霉素组相比,阿霉素+桔梗组给药后0.5、6、24 h的血浆阿霉素浓度显著升高(P0.05,P0.01)。两组主要药动学参数比较,差异均无统计学意义(P0.05)。与阿霉素组相比,阿霉素+桔梗组的药物-时间曲线下面积(AUC_(0-t))增加30%,峰浓度(C_(max))升高10%,清除率(CL)降低20%。③与阿霉素组相比,阿霉素+桔梗组给药后1、2、24 h的心脏阿霉素浓度显著降低(P0.05,P0.01),给药后0.5、12 h的肺脏阿霉素浓度显著升高(P0.05),给药后0.083 h肿瘤组织阿霉素浓度显著降低(P0.05)。阿霉素在心脏组织的达峰时间延迟,在肺脏组织的达峰时间提前。结论:桔梗与阿霉素联合应用可在一定程度上提升乳腺癌肺转移小鼠LVEF和LVFS水平,增强心脏泵血功能。桔梗能促进阿霉素在肺部的聚集,降低其在心脏的分布,进而发挥增效减毒的作用。     

氨磷汀对荷瘤鼠放疗后肿瘤保护作用

目的探讨氨磷汀对C57BL／6荷瘤鼠放疗后肿瘤组织的保护作用及其对放疗效果的影响。方法培养Lewis肺癌细胞株，传代，制成单细胞悬液，调整细胞密度至10。／L，小鼠右下肢皮下注射制备荷瘤鼠模型。随机分为放疗＋氨磷汀组（A组）、放疗组（B组）、氨磷汀组（c组）、对照组（D组），各8只。放疗前给予A组、c组荷瘤鼠腹腔注射5mL氨磷汀溶液（8g／L），B组、D组给予同等剂量生理盐水腹腔注射，30min后A组、B组荷瘤鼠局部照射6MV的x线10Gy。每2d测量小鼠体质量及肿瘤体积；15d后处死小鼠，TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率。结果A、B、c、D组小鼠各时间点体质量差异均无显著意义（P〉0．05）。第1天4组荷瘤鼠肿瘤体积比较差异无显著意义（P〉0．05），第3～13天A组肿瘤体积较其他3组减小，B组肿瘤体积较c、D组减小，差异有显著意义（F=4．290～15．470，P＜0．05）；A组与B组比较、C组与D组比较，差异无显著意义（P〉0．05）。A组肿瘤细胞凋亡率高于其他3组，B、C组高于D组，差异均有显著意义（F=36．535，P〈0．01）；B组、C组比较，差异无显著意义（P〉0．05）。结论氨磷汀对肿瘤组织没有明显的保护作用，不影响放疗效果；氨磷汀可能具有促进肿瘤细胞凋亡的作用。     

双氢青蒿素对前列腺癌裸鼠种植瘤生长及VEGF表达的影响

目的：研究双氢青蒿素（DHA）对前列腺癌PC-3细胞裸鼠种植瘤的抑制作用及对VEGF表达的影响,并探讨其作用机制.方法：采用人前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠种植瘤模型,20只模型鼠随机分为对照组;二甲基亚砜（DMSO）溶剂组（DMSO1mL/kg）;DHA实验1组（DHA100μmol/kg）;DHA实验2组（DHA200μmol/kg）.经13d干预后,计算抑瘤率.采用光镜及电镜观察肿瘤组织形态学变化;采用免疫组织化学法检测VEGF的表达水平;采用体视学分析肿瘤微血管密度（MVD）.结果：DHA实验1,2组抑瘤率分别为63.186%,69.221%.光镜及电镜下观察可见DHA实验1组和实验2组肿瘤组织内凋亡细胞明显增多,出现典型的凋亡小体.免疫组化结果显示VEGF表达DHA实验1组和实验2组均低于对照组及DMSO溶剂组（P〈0.05）,但2个DHA实验组组间相比较差异无统计学意义;DMSO溶剂组与对照组组间相比较差异也无统计学意义.2个DHA实验组MVD均低于对照组（P〈0.05）,但2个DHA实验组之间相比较差异无统计学意义;DMSO溶剂组与对照组组间相比较差异也无统计学意义.结论：DHA具有较强的抗肿瘤作用,其机制与下调凋亡相关基因VEGF有关.     

磁流体热疗联合 IL-2对小鼠Lewis肺癌治疗作用的实验研究

目的通过观察磁流体热疗（MFH）联合IL-2对小鼠Lewis肺癌的生长、凋亡及小鼠免疫系统的影响,探讨MFH联合免疫治疗肺癌的可行性。方法建立小鼠浅表Lewis肺癌皮下移植瘤模型,瘤体直径增至0.8cm左右时,将其分为IL-2组、MFH组、MFH＋IL-2组及对照组。MFH组瘤体内部注射0.2ml水平约75mg/ml的磁流体,24h后在交变磁场下加温1次,通过控制磁场的强度,加温温度稳定在43.0℃左右30min。IL-2组瘤体内部注射0.2ml（5×10^4U）的IL-2。MFH＋IL-2组热疗后24h,按上述方法向肿瘤内部注射0.2ml（5×10^4U）的IL-2。对照组瘤体内部注射0.2ml的0.9%氯化钠溶液。采用流式细胞术检测MFH法、MFH＋IL-2后小鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化。采用免疫组化法检测治疗后肿瘤组织HSP70、CD4^＋、CD8^＋等免疫因子的表达,比较MFH组、MFH＋IL-2组对肿瘤的治疗效果。结果 MFH组和MFH＋IL-2组注射磁流体后肿瘤内部温度迅速升高至43℃,肿瘤细胞呈凋亡和坏死样改变,小鼠外周血T淋巴细胞水平明显升高（P＜0.05）,HSP70、CD4^＋、CD8^＋水平也均明显升高,小鼠瘤体生长均受到抑制,MFH＋IL-2组小鼠瘤体生长抑制更明显。结论43℃、30min条件下的MFH能抑制Lewis肺癌的生长,诱导荷瘤小鼠机体产生抗肿瘤免疫。IL-2单独对荷瘤小鼠肿瘤生长无明显抑制作用,但可以提高外周血CD4^＋、CD8^＋水平,从而增强MFH对Lewis肺癌抑瘤效果。     

活化PPAR-γ对特发性血小板减少性紫癜小鼠NOS的影响

目的探讨在特发性血小板减少性紫癜（ITP）模型小鼠体内,过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPAR-γ）对一氧化氮合酶（NOS）生成的影响。方法 ITP模型小鼠分成罗格列酮试验组、GW9662对照组和磷酸盐缓冲液（PBS）对照组,罗格列酮试验组用相同浓度（20umol/L）的PPAR-γ激活剂噻唑烷二酮（thiazolidinediones,TZD）类药物罗格列酮进行灌肠,同时设立的GW9662对照组使用PPAR-γ特异性拮抗剂GW9662的终浓度为10μmol/L,PBS对照组使用相同体积的磷酸盐缓冲液进行灌肠,用药6、12、18、24和30h后,检测小鼠血清中NOS活性和血液淋巴细胞PPAR-γmRNA表达情况。结果血清中NOS在第6,12,18,24和30h的活性,罗格列酮试验组高于GW9662对照组及PBS对照组（P均〈0.05）。在罗格列酮试验组中,NOS活性随着用药时间的延长而升高,各测量时间点NOS活性具有统计学差异（P〈0.05）,PPAR-γmRNA的表达随着时间的延长而增加（P〈0.05）,PPAR-γ的表达与NOS活性呈正相关（r=0.82,P〈0.05）。结论在ITP小鼠模型内,PPAR-γ活化剂能够以时间依赖的形式增加NOS的活性,PPAR-γ可能通过NOS途径来发挥相应的生理功能。     

艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用研究

目的：观察艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用。方法：将人胃癌细胞BGC-823接种于裸鼠右腋皮下,建立荷瘤裸鼠模型;将荷瘤裸鼠随机分为5组：模型组、环磷酰胺组和艾迪注射液高、中、低剂量组,各组动物按相应药物和剂量给药,连续14d;末次给药后处死动物,剥取瘤块,称重计算抑瘤率并作组织学观察。结果：艾迪注射液高剂量组的抑瘤率为61.84%,光镜下可见大片状的坏死区。结论：艾迪注射液对裸鼠人胃癌细胞BGC-823具有抑制作用。     

化痰散结方对 MCF-7／ADM裸鼠移植瘤逆转耐药机理研究

目的：探究化痰散结方对乳腺癌MCF-7/ADM移植瘤的逆转耐药机制。方法制备荷瘤小鼠模型;设立生理盐水空白对照组、阿霉素组、阿霉素＋维拉帕米组、阿霉素＋中药低中高剂量组,观察肿瘤组织内阿霉素蓄积情况,用流式细胞仪（ FCM ）检测各组移植瘤耐药细胞P糖蛋白（ P-gp）表达情况。结果中药组及维拉帕米组均能减轻瘤重,提高抑瘤率,与生理盐水组及阿霉素组比较均有统计学意义（P＜0．05）,中药组及维拉帕米组均能够降低P-gp含量、提高细胞内阿霉素浓度,其中高剂量中药组对细胞内阿霉素、P-gp的影响较维拉帕米组差异有显著性（ P＜0．05）。结论化痰散结方能逆转阿霉素耐药,增减肿瘤组织中阿霉素含量,并呈剂量依赖性,同时降低P-gp的表达。     

5-氟尿嘧啶纳米磁性颗粒在荷瘤鼠体内靶向性分布

目的研究5-氟尿嘧啶（5-FU）纳米磁性颗粒在荷瘤裸鼠体内的靶向性分布。方法制备荷瘤小鼠异位肝癌模型（荷瘤鼠），随机分3组，每组8只。A组：5-FU原液治疗组；B组：单纯5-FU纳米磁性颗粒治疗组，无磁场应用；C组：实验组，在肿瘤内部建立300高斯（GS）的磁场，药物应用同B组。采用高效液相色谱（HPLC）分析法检测离体组织中5-FU药物浓度，原子吸收光谱法（AAS）测定荷瘤鼠组织中的铁浓度，磁共振成像（MRI）检测5-FU纳米磁性颗粒在荷瘤鼠体内组织分布。结果在肿瘤组织内建立内磁场后，尾静脉注射5-FU纳米磁性颗粒（250mg／kg），与无磁场的相同药物治疗组及单纯5-FU对照组比较，HPLC检测荷瘤鼠的肿瘤组织中5-FU浓度显著增加（P〈0．01），AAS检测肿瘤组织中铁浓度也显著增加，肿瘤组织MRI的T2加权像发生变化，呈现低信号。结论在磁场引导下，5-FU纳米磁性颗粒中磁性载体和所载药物在荷瘤鼠体内具有肿瘤靶向性分布。     

Th17细胞在小鼠H22原位肝癌模型中的表达和意义

目的 检测小鼠原位肝癌模型中Th17细胞的表达,探讨其在肝癌免疫中的作用. 方法 30只Balb/C小鼠随机分为肝癌模型组（10只）、生理盐水对照组（10只）、空白对照组（10只）,流式细胞术检测小鼠分离纯化后的各组新鲜脾脏Th17细胞的相对比例;实时RT-PCR检测各组肝组织IL-17基因和RORγT基因表达水平.结果 肝癌模型组脾脏Th17/ CD4＋T细胞的比例高于生理盐水对照组脾脏、空白对照组脾脏,差异有统计学意义（P 〈 0.01）,而各对照组之间的比例差异无统计学意义（P 〉 0.05）.肝癌模型组肿瘤组织IL-17 mRNA和RORγT mRNA的表达水平均高于各自对照组,差异有统计学意义（P 〈 0.01）,而IL-17 mRNA和RORγT mRNA在各自对照组之间表达水平的差异无统计学意义（P 〉 0.05）. 结论 Th17细胞在小鼠原位肝癌模型中数量增多,IL-17表达升高,增强免疫反应,但在肝癌免疫中的作用及机制复杂,有待深入研究.     

热消融联合消融灶周边注射CpG ODN抑制小鼠肝癌生长的研究

目的 探讨热消融联合消融灶周边注射CpG ODN治疗对小鼠肝癌的影响及继发免疫效应的抗肿瘤效果.方法 建立Hepa1-6小鼠皮下肝癌动物模型32只,随机分为热消融治疗组、热消融联合CpG ODN治疗组、CpG ODN治疗组和对照组,每组8只.每组各6只接种肿瘤细胞后第7天、第14天给予治疗,测量小鼠肿瘤体积,观察荷瘤小鼠存活率及消融灶内淋巴细胞和HSP70变化,另8只第7天给予治疗,30 d后对侧接种等量肿瘤细胞,1个月后处死,观察小鼠生存状况及对侧肿瘤生长情况.结果 （1）各实验组小鼠观察期内死亡率均低于对照组（P＜0.05）,各实验组对侧均无肿瘤生长,对照组再接种肿瘤生长率为100%（3/3）,两者相比差异有统计学意义（P＜0.05）;（2）各实验组小鼠与对照组相比,肿瘤体积显著缩小（P＜0.05）,联合治疗组肿瘤缩小更显著;（3）各实验组较对照组有较多淋巴细胞浸润（P＜0.05）,联合治疗组数量最多;（4）各实验组与对照组相比有更多HSP70表达（P＜0.05）,联合治疗组HSP70表达最多,与其余实验组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 CpG ODN对荷瘤小鼠具有明显的免疫增强作用,CpG ODN联合热消融治疗小鼠肝癌有效,且能减少复发.     

姜黄素对人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的:探究姜黄素对人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其潜在机制。方法:采用人肝癌SMMC-7721细胞建立肝癌移植瘤模型,将20只荷瘤裸鼠均分为对照组和10、50、100 mg/kg姜黄素组,每组5只,均采用腹腔注射给药,分别给予生理盐水及对应剂量姜黄素,每日1次,每次200μL,连续16 d。自给药当天起,隔天观察和记录各组裸鼠体重和瘤体体积;16 d后麻醉裸鼠,分离瘤组织,记录瘤重并计算抑瘤率;采用蛋白免疫印迹法测定瘤组织中内质网应激通路相关蛋白及凋亡相关蛋白的表达水平;采用免疫组织化学法检测瘤体组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和需肌醇酶(IRE1)阳性表达水平。结果:不同剂量姜黄素组裸鼠体重增长无显著差异(P>0.05),但50和100 mg/kg姜黄素组裸鼠移植瘤体积生长较对照组和10 mg/kg姜黄素组明显减小(P均<0.05)。10、50和100 mg/kg姜黄素组抑瘤率分别为35.3%、45.7%、54.7%。蛋白印迹结果显示,与对照组相比,50、100 mg/kg姜黄素组GRP78、IRE1、C/EBP同源蛋白(CHOP)以及Cle...