桂皮醛对人舌癌Tca8113细胞体外增殖的影响

目的：探讨中药桂皮醛对人舌癌Tca8113细胞株增殖的影响。方法：体外培养人舌鳞癌Tca8113细胞,采用256,128,64,32,16,8μg／mL浓度的桂皮醛对其进行干预,用倒置相差显微镜及扫面电镜观察桂皮醛对细胞生长形态的影响,用细胞增殖检测法（MTT）检测桂皮醛对细胞增殖的影响。结果：16,8μg／mL组的桂皮醛对Tca8113细胞生长形态无明显影响,128,64,32μg／mL组Tca8113细胞的生长形态发生改变。8μg／mL的桂皮醛对Tca8113细胞生长有促进作用,256,128,64,32,16ug／mL的桂皮醛对Tca8113细胞生长有抑制作用,呈明显浓度依赖性。结论：桂皮醛对人舌癌Tca8113细胞的增殖有明显浓度依赖性,低浓度能促进其生长。     

桂皮醛对小鼠成纤维细胞瘤NIH3T3细胞碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子β1表达的影响

目的 研究桂皮醛刺激小鼠成纤维细胞瘤NIH3T3细胞后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白在不同时相点表达的规律,探讨桂皮醛促进成纤维细胞增殖及胶原合成的机制.方法 采用MTT法观察不同质量浓度桂皮醛对NIH3T3细胞增殖的影响;利用羟脯氨酸(Hyp)测试法测定细胞上清中胶原水平;利用免疫细胞化学技术检测桂皮醛对NIH3T3细胞bFGF、TGF-β1蛋白表达的影响.结果 桂皮醛作用NIH3T3细胞48 h后,细胞增殖速度和细胞上清中的胶原量均较对照组明显增加.桂皮醛刺激后,bFGF和TGF-β1蛋白表达增加,其中bFGF蛋白表达高峰在18 h,TGF-β1蛋白在刺激后12 h达到峰值.结论 桂皮醛可以上调内源性生长因子bFGF、TGF-β1蛋白的表达,这可能是桂皮醛体外促进NIH3T3细胞增殖及胶原合成,以及在创伤愈合、组织修复方面发挥作用的分子生物学机制.     

桂皮醛药理作用的研究进展

桂皮醛是中国传统中药材桂枝或肉桂挥发油的主要成分,为烯醛类有机化合物,具有抗炎、解热镇痛、抗肿瘤、抗菌、降糖、抗肥胖和神经保护等多种药理作用。对神经系统、心血管、肿瘤、糖尿病等疾病均有一定的防治作用,作为预防保健的天然药物具有较好临床和市场潜力。该文对近5年来国内外关于桂皮醛的药理作用及其机制研究进行了综述,以期对桂皮醛的深入研究和开发提供一定的科学依据。     

GC-MS法测定麻黄汤不同配伍对桂皮醛含量的影响

目的　建立气相色谱 -质谱法 (GC- MS)测定麻黄汤中桂皮醛含量的方法 ,研究配伍对桂皮醛含量的影响。方法　 GC- MS法测定桂皮醛的含量 ,并用 MS鉴定其他色谱峰。采用 L8(2 7)正交设计安排试验 ,统计软件(SPSS10 .0 )分析麻黄、杏仁、甘草及两两交互作用对桂皮醛含量的影响。p H计测定各组合的 p H值。结果　麻黄、杏仁对方中桂皮醛的含量影响差异具有显著性 (P<0 .0 5 ) ,甘草及两两交互作用对其影响不显著 (P>0 .0 5 )。各组合 p H值变化不明显。结论　麻黄、杏仁显著降低桂皮醛的含量 ,甘草及交互作用则对其含量的降低无统计学意义     

桂皮醛对滑膜成纤维细胞增殖、凋亡及周期影响的实验研究

[目的]研究不同浓度的桂皮醛(CA)对滑膜成纤维细胞(FLS)的增殖、凋亡及细胞周期的影响,进而探讨CA对骨关节炎滑膜炎症的调控机制。[方法]不同浓度的CA分别作用于LPS诱导后的FLS,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)、流式细胞术(FCM)对其增殖、凋亡和周期进行测定。[结果]低浓度的CA可轻度促进FLS的生长,较高浓度CA则可显著降低FLS的存活率(P0.05),呈浓度依赖性。LPS可减少FLS的凋亡率,缩短G1期、延长S期,可用来制备炎症模型。与对照组相比,CA高浓度组与低浓度组均能是Q2和Q4区细胞比率明显增加(P0.05),延长G1期并缩短S期(P0.05),诱导FLS凋亡及抑制FLS的增殖,尤其是CA高浓度组作用更加显著。[结论]不同浓度的CA对FLS的生长均有一定的抑制作用,其中CA高浓度组的抑制作用更强,这可能是CA抗炎作用的潜在机制。     

大黄素对血管平滑肌细胞周期调控蛋白CyclinD1表达的影响

目的:观察大黄素对人血管平滑肌细胞周期时相和CyclinD1表达的影响.方法:取对数增长期的平滑肌细胞,采用MTT法观察大黄素对平滑肌细胞增殖抑制的有效浓度范围,求出IC50并干预细胞;然后分别用流式细胞仪和Westernblot法进行细胞周期时相和CyclinD1表达的测定.结果:与对照组比较,LC50时药物组G0/G1期细胞百分比升高,S期细胞百分比下降,CyclinD1表达高峰延迟,表达量下调,细胞周期受阻于G0/G1期.结论:大黄素在抑制平滑肌细胞增殖的过程中通过下调Cyclin D1表达,阻滞了细胞周期的进程;是一种有效的抗平滑肌细胞增殖的药物.     

配伍及煎煮方法对麻黄汤中桂皮醛含量的影响

目的 :测定麻黄汤中桂皮醛的含量 ,分析煎煮方法及配伍对桂皮醛含量的影响。方法 :用GC MS法测定桂皮醛含量。实验条件 :DB 17弹性石英毛细管 (30m× 0 5mm ,0 2 5 μm) ,载气He ,无分流进样 ,柱初温 12 0℃ ,以8℃ /min升至 2 5 0℃ ,进样量 1μl。用SPSS统计软件进行统计分析。结果 :桂皮醛在 0 0 136～ 0 136mg/ml内有良好的线性关系 ;精密度RSD =1 0 2 % ;2 4h内稳定性RSD =2 5 7% ;重现性RSD =4 2 0 % ;平均回收率为 10 1 30 % ,RSD=1 5 6 %。桂皮醛的含量 :麻黄汤分煎合液 (Ⅱ ) >麻黄汤合煎液 (Ⅰ ) (P <0 0 5 ) ;桂枝煎液 (Ⅲ ) >Ⅰ (P <0 0 5 ) ;Ⅱ>Ⅲ (P >0 0 5 )。结论 :配伍可能是影响桂皮醛溶出量的主要因素。     

桂皮醛对小胶质细胞激活和COX-2表达的影响

目的:神经炎症作为阿尔茨海默氏病(Alzheimer's disease,AD)的主要病理机制之一,主要表现为小胶质细胞激活和炎症因子环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的过表达,最终导致神经元损伤和记忆障碍。本研究主要探讨反式桂皮醛(transcinnamaldehyde,TCA)对AD神经炎症过程中小胶质细胞激活和COX-2过表达的抑制作用及其机制。方法:利用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导建立AD的细胞和动物神经炎症模型;采用qRT-PCR和Western blot检测小胶质细胞和小鼠皮质COX-2mRNA和蛋白表达,免疫组化方法观察皮质小胶质细胞形态变化。结果:脂多糖激活原代小胶质细胞后COX-2 mRNA和蛋白表达均明显增多,桂皮醛(10μM)通过降低COX-2 mRNA稳定性抑制小胶质细胞COX-2 mRNA和蛋白的过表达;同时桂皮醛(50 mg/kg)对脂多糖诱导神经炎症小鼠的皮质COX-2 mRNA和蛋白过表达也有抑制作用,并对皮质小胶质细胞形态改变有明显的恢复作用。结论:桂皮醛抑制AD神经炎症的小胶质细胞激活可能是通过降低COX-2过表达发挥作用的。     

不同形态桂枝饮片中桂皮醛和桂皮酸含量的考察

目的:考察桂枝饮片外观形态与饮片中桂皮醛和桂皮酸含量之间的关系。方法:采用HPLC的方法测定不同外观形态的桂枝饮片中桂皮醛和桂皮酸的含量,得出含量与形态之间的关系。结果:桂枝饮片以颜色为深红棕色,断面直径小于1 cm,香气浓者为佳,桂皮醛和桂皮酸的含量较高。结论:通过直观观察桂枝饮片的外观形态可以判断饮片质量,为市场流通中评价桂枝饮片质量提供便捷有效的方法。     

反相高效液相色谱法测定消瘤胶囊中桂皮醛及桂皮酸的含量

目的 :测定消瘤胶囊中桂皮醛和桂皮酸的含量。方法 :反相高效液相色谱 (RP- HPLC)法 ,乙腈∶ 0 .1 %磷酸溶液 (32∶ 78)为流动相 ,Luna C1 8柱为固定相 ,流速 1 .0 ml· min-1 ,检测波长 2 85 nm。结果 :桂皮醛在 2 .63～ 2 6.3μg/ ml,桂皮酸在 0 .736～ 7.36μg/ ml,呈现出良好的线性关系 ,相关系数分别为 0 .9996,0 .9999。加样回收率桂皮醛为 98.4% ,桂皮酸为 98.7%。仪器精密度为 1 .3% ,方法精密度为 2 .2 %。结论 :方法快速简便 ,重现性好     

X射线诱导人滋养细胞周期及凋亡改变的研究

目的:观察X射线对人滋养细胞JEG-3肿瘤细胞株的生物学特性的影响及作用。方法:体外培养人滋养细胞肿瘤细胞系(JEG-3细胞),采用不同剂量的X射线(2Gy、6Gy、8Gy)照射JEG-3细胞,MTT法测定照后不同时间(12、24、36h)的细胞增殖能力;流式细胞术检测6Gy照后不同时间(12、24、36h)的细胞凋亡的变化;western-blot检测P53、Bcl-2蛋白的表达量的变化。结果:6GyX射线照后36h细胞增殖活性下降;8Gy照后对细胞产生了明显的毒性,照后12、24、36h时细胞增殖均明显下降(P0.05)。6Gy照后36h时凋亡率显著增加(P0.05)。6Gy照后36h,凋亡相关蛋白P53的蛋白表达量显著增加、Bcl-2的蛋白表达量显著降低(P0.05)。结论:6GyX射线照射可抑制人滋养细胞的增殖,提高细胞凋亡率;同时诱导P53蛋白表达增加和Bcl-2表达降低。     

宝藿苷对人食管癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的 研究香加皮中宝藿苷-Ⅰ对人食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响及其作用机制.方法 采用MTT法分析不同质量浓度宝藿苷-Ⅰ(12.5、25、50 μg/mL)分别作用24、48、72 h后,对Eca-109细胞增殖的影响;流式细胞术分析宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞周期的影响;RT-PCR技术检测宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞Cyclin B1mRNA表达的影响;Western blotting方法检测宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞Cyclin B1蛋白表达的影响.结果 25、50μg/mL宝藿苷-Ⅰ均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P<0.05),作用48 h的IC50为24.8μg/mL.25、50μg/mL宝藿苷-Ⅰ作用48 h后,随宝藿苷-Ⅰ质量浓度的增加,Eca-109细胞的G0/G1期细胞比例明显下降,G2/M期细胞比例明显提高,细胞的Cyclin B1蛋白及mRNA表达水平降低,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01).结论 香加皮宝藿苷-Ⅰ可抑制Eca-109细胞增殖,使细胞周期阻滞,该作用町能与下调细胞Cyclin B1表达有关.     

姜黄素对人食管癌细胞Eca-109增殖及细胞周期的影响

目的研究姜黄素对人食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响及其作用机制。方法采用MTT法分析不同浓度姜黄素对Eca-109细胞增殖的影响,采用流式细胞术分析姜黄素对Eca-109细胞周期的影响,采用RT-PCR技术检测姜黄素对Eca-109细胞Cyc linB1mRNA表达的影响,采用W estern-b lotting方法检测姜黄素对Eca-109细胞Cyc lin B1蛋白表达的影响。结果 20,40,60μmol/L姜黄素均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P均<0.05),特别是姜黄素作用24 h后,随姜黄素浓度增加,Eca-109细胞的G0/G1期细胞比例明显下降而G2/M期细胞比例明显提高,Cyc lin B1蛋白与mRNA表达水平均降低,与对照组比较均有显著性差异(P均<0.01)。结论姜黄素可抑制Eca-109细胞增殖,使细胞周期阻滞,该作用可能与下调细胞Cyc lin B1表达有关。     

大蒜素对NIH3T3细胞增殖及胶原合成的影响

目的 研究大蒜素对NIH3T3细胞生长增殖和Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗纤维化作用机理。方法 大蒜素加入NIH3T3细胞培养液,以丹参为对照药物,测定H^3-thymidineDNA掺入量;碱消化法检测细胞培养液中羟脯氨酸含量,荧光免疫染色方法检测NIH3T3细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达一结果大蒜素在0．2～5μg／mL剂量范围内剂量依赖的抑制NIH3T3细胞生长和增殖;药物作用后,细胞培养液中的羟脯氨酸含量减少,Ⅰ型胶原蛋白的表达减少。结论 大蒜素对NIH3T3细胞生长增殖有抑制作用,减少细胞胶原的合成,减少Ⅰ型胶原的表达,可能具有抗纤维化作用。     

甜菜碱对HepG2人肝癌细胞周期及凋亡的影响

目的 研究甜菜碱对HepG2人肝癌细胞周期及细胞凋亡的影响.方法 MTT法测定甜菜碱对HepG2的细胞毒作用;PI染色,流式细胞术观察甜菜碱对HepG2人肝癌细胞周期及细胞凋亡的影响.结果 甜菜碱对HepG2细胞的IC50为0.5mol/L;甜菜碱使HepG2细胞G2/M期比例下降;甜菜碱作用于HepG2细胞24h后,3个不同剂量组(0.1、0.2、0.4mol/L)诱导细胞凋亡率分别为(7.5±0.9)%、(11.5±1.1)%、(33.9±1.2)%,48h后凋亡率为(13.4±1.9)%、(20.9±1.4)%、(67.8±1.8)%.结论 甜菜碱可抑制人肝癌细胞HepG2的生长,阻滞细胞进入G2/M期进而诱导细胞凋亡.     

川芎当归提取物对血管平滑肌细胞MAPK信号通路与周期蛋白的调控效应

目的揭示川芎当归提取物(ELCAS)抑制血管平滑肌细胞增生的分子机制。方法以体外培养的原代大鼠血管平滑肌细胞为研究对象,应用Westernblot方法检测不同质量浓度ELCAS对血管平滑肌细胞内的ERK、JNK、p38磷酸化水平的影响,以及周期蛋白CyclinD1和细胞周期抑制子p21的表达情况。结果ELCAS能显著抑制ERK、JNK和p38的磷酸化以及血清诱导的CyclinD1蛋白的表达,并表现出良好的浓度依赖性;同时ELCAS能剂量依赖性地促进细胞内周期蛋白抑制子p21过表达,并抑制pRb磷酸化水平和CyclinD1蛋白表达。结论ELCAS可通过抑制MAPK信号通路以及对周期蛋白的调控来抑制血管平滑肌细胞增生。     

Crocetin inhibits cell cycle G1/S transition through suppressing cyclin D1 and elevating p27kip1 in vascular smooth muscle cells

Crocetin is a natural carotenoid compound isolated from Gardenia jasminoids Ellis. Our previous study shows that crocetin inhibits angiotensin II (Ang II)‐induced vascular smooth muscle cells (VSMCs) proliferation. To further explore the mechanism by which crocetin inhibits VSMCs proliferation, in the present study we examined the effect of crocetin on cell cycle progression and cell cycle regulatory proteins. Flow cytometry analysis showed that Ang II elicited significant increase in the percentage of VSMCs in the S phase, with a concomitant decline in the percentage of VSMCs in the G₀/G₁ phase. However, on pretreatment of VSMCs with crocetin, the percentage of VSMCs in the S phase decreased, while that in the G₀/G₁ phase increased significantly. In addition, Ang II‐induced increase of cell proliferation index was also decreased by crocetin. Western blotting analysis indicated that crocetin markedly inhibited the protein expression of cyclin D1 but not cyclin E. Crocetin also increased the level of cyclin‐dependent kinase inhibitor (CDKI) p27^kip1 but not CDKI p21^waf1/cip1. In conclusion, our present results suggest that the inhibition of cell cycle G₁/S transition in VSMCs by crocetin can be attributed, at least in part, to its suppression of cyclin D1 and elevation of CDKI p27^kip1. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

芒果甙对K562细胞端粒酶活性和细胞周期的影响

目的:研究芒果甙对白血病K562细胞端粒酶活性及其细胞周期的影响。方法:采用端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)PCR-ELISA方法检测K562细胞经芒果甙作用前后端粒酶活性的变化,应用流式细胞仪检测细胞周期的分布。结果:经芒果甙作用后,K562细胞端粒酶活性下降,随药物浓度增加和作用时间的延长,其抑制作用增强;芒果甙作用24小时后,K562细胞G2/M期细胞增多,S期细胞减少,出现G2/M期阻滞,并呈现剂量依赖性。结论:芒果甙能抑制K562细胞的端粒酶活性,其机制可能与其细胞周期阻滞作用有关。     

Korean Scutellaria baicalensis water extract inhibits cell cycle G1/S transition by suppressing cyclin D1 expression and matrix-metalloproteinase-2 activity in human lung cancer cells

Aim of the study

Scutellaria baicalensis Georgi is a widely used medicinal herb in several Asian countries including Korea. The various medicinal properties attributed to Scutellaria baicalensis include anti-bacterial, anti-viral, anti-inflammatory and anti-cancer effects. The present study investigated the cytotoxicity of Scutellaria baicalensis water extract (SBWE) on A549 non-small-cell-lung cancer cells and the A549 expression of cyclin D1, cyclin-dependent kinase 4 (CDK4) and matrix metalloproteinase-2 (MMP-2), and the effects of SBWE on cell cycle progression, especially the G1/S phase, and on cell motility.

Materials and methods

SBWE cytotoxicity was assessed by a standard colorimetric assay utilizing 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and expression of cyclin D1 and CDK4 protein in SBWE-treated A549 cells was assessed by Western blot analysis. Flow cytometry analysis was performed to determine the effect of SBWE on A549 cell cycle progression. A549 cell MMP-2 activity was examined by zymography. Cell motility and migration was assessed by a scratch wound healing assay.

Results

SBWE was not cytotoxic. The production of Cyclin D1, CDK4 and MMP-2 activity were significantly decreased in a SBWE dose-dependent manner, with maximum inhibition occurring at SBWE concentrations of 250 μg/ml and 500 μg/ml. SBWE inhibited cell cycle progression in the G1/S phase and significantly inhibited the motility of A549 cells.

Conclusions

Cyclin D1 protein may be associated with MMP-2 activity and cell motility. Thus, SBWE promotes a strong protective effect against MMP-2 mediated metastasis and cell proliferation through the down-regulation of cyclin D1. SBWE may be a useful chemotherapeutic agent for lung cancer.