单侧磨牙缺失对老年学习记忆减退大鼠基底前脑胆碱能系统的影响

目的:探讨单侧缺牙对不同学习记忆能力老年大鼠基底前脑胆碱能系统的影响。方法:用Morris水迷宫筛选出老年记忆减退鼠和老年记忆正常鼠,拔除单侧磨牙后2个月,用免疫组化和组织化学染色观察对其斜角带核垂直支胆碱能神经元和海马CA1区、前额皮质胆碱能纤维密度的影响。结果:斜角带核垂直支ChAT阳性细胞数和海马CA1区、前额皮质AChE阳性纤维密度在老年记忆减退鼠中,拔牙组较对照组(未拔牙)明显下降;海马CA1区AChE阳性纤维密度在老年记忆正常鼠中,拔牙组较对照组明显下降。结论:单侧磨牙缺失可加速老年学习记忆减退鼠基底前脑胆碱能系统的损害。     

老年记忆减退大鼠海马CA1区锥体细胞和神经毡线粒体的体视学研究

目的 应用电镜观察老年记忆损害大鼠海马线粒体的形态学改变.方法 青年(3月龄)和老年(26月龄)SD大鼠经Morris水迷宫测试后,以青年鼠平均逃避潜伏期正常值上限的95%和99%上限值为界将老年鼠分为老年记忆正常组和老年记忆减退组.用透射电镜观察海马CA1锥体细胞和神经毡内线粒体的体视学参数.结果 1.与青年大鼠相比,老年记忆正常大鼠海马线粒体数密度(Nv)、比膜面(Sm)、比表面(Ss)下降显著,但体密度(Vv)与青年大鼠相比无显著差异;老年记忆减退大鼠海马线粒体Nv、Ss、Sm、Vv均下降显著,且Vv、Nv的下降与老年记忆正常大鼠间有显著差异;2.老年记忆减退大鼠和老年记忆正常大鼠线粒体平均体积(V)均较青年组明显增加,但两老年组间无差异.讨论 线粒体的形态学参数体现了老年期海马线粒的代偿改变,而线粒体的功能失调可能在老年记忆损害中起重要作用.     

神经细胞黏附分子在学习记忆减退大鼠海马中的表达

目的探讨神经黏附分子(NCAM)细胞在学习记忆减退对大鼠脑海马组织中的表达。方法20只雄性SD大鼠随机分成模型组和对照组。建立学习记忆减退模型鼠,4周后行Y迷宫检测和基底前脑胆碱能神经元免疫组织化学染色验证模型成立;并对海马CA1和CA3区进行免疫组织化学染色,观察NCAM含量的变化。结果Y迷宫检测显示模型组大鼠学习记忆能力较正常组明显下降,免疫组织化学染色表明模型组胆碱能神经元数和NCAM阳性数明显低于正常组(P<0.05)。结论学习记忆减退可降低大鼠脑海马组织NCAM表达。     

穹窿海马伞损伤对大鼠学习记忆和海马GFAP阳性神经胶质细胞的影响

为探讨穹隆海马伞损伤鼠学习记忆能力与海马胶质纤维酸性蛋白阳性细胞之间的关系 ,切断 SD成年大鼠左侧穹窿海马伞 ,用 Y迷宫和免疫组织化学结合图像分析系统测试大鼠学习记忆能力和海马胶质纤维酸性蛋白阳性细胞的变化状况及它们的相互关系。结果显示 :损伤 2周后 ,损伤组损伤侧海马 CA1 区辐射层和齿状回分子层胶质纤维酸性蛋白阳性细胞的数密度较正常组分别增多 3 0 .2 9%和 3 0 .15 % (都为 P<0 .0 1) ,胞体面积分别增加 16.0 4%和 19.42 % (都为 P<0 .0 1) ,齿状回分子层胶质纤维酸性蛋白阳性细胞体密度增大 19.40 % (P<0 .0 5 )。经相关分析 ,大鼠学习记忆能力与海马 CA1 区胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数密度呈负相关 (r=-0 .83 6,P<0 .0 1) ,与齿状回数密度呈负相关 (r=-0 .792 ,P<0 .0 1)。提示海马星形胶质细胞可能参与学习记忆过程     

17 老年学习记忆减退大鼠海马和新皮质小白蛋白阳性神经元的丢失

<正>小白蛋白(Parvalbumin,pv)是一种细胞内钙调节蛋白,存在于GABA能神经元的一个亚型中,有研究报道它与学习记忆有密切关系.本文研究了衰老脑PV阳性神经元的变化及其与老年性学习记忆缺陷的关系.实验以青年鼠在Morris水迷宫测试中平均逃避潜伏期99%和95%正常值范围,将老年鼠分为学习记忆损害组和学习记忆正常组.用免疫组化方法显示海马结构、额皮质和颞皮质的PV阳性神经元,并对其进行定量分析.结果发现老年正常、损害组海马CAI区PV阳性神经元数量较青年组均明显减少(P<0.01),CA3区和齿状回老年正常、损害组PV阳性神经元数量较青年组显著减少(P<0.01),此外,老年损害组也较老年正常组明显减少(P<0.05),颞皮质只有老年损害组PV阳性神经元较青年组明显减少(P<0.05).相关分析结果表明被检脑区PV阳性神经元数量与大鼠在Morris水迷宫的平均逃避潜伏期、原平台象限游泳距离百分比分别呈显著正相关和负相关关系(P<0.01,r=-0.68;P<0.01,r=0.70).本研究结果提示在老年大鼠颞叶皮质和海马结构,尤其是海马CA3区和齿状回的PV阳性神经元的丢失可能与老年性学习记忆缺陷有关.     

大鼠海马结构在空间辨别性学习记忆时突触素表达的变化

目的:探讨空间辨别性学习记忆活动与突触可塑性的关系。方法:用免疫组织化学方法对具有空间辨别性学习记忆功能的模型大鼠与对照组大鼠海马结构内突触素I的表达进行对比研究。结果:(1)对照组大鼠海马结构内未见明显的突触素颗粒产物;在模型组,经水迷宫训练1周的大鼠海马切片上见到齿状回、CA4和CA3区出现深染的颗粒分布,CA2和CA1区颗粒较少;训练2周的大鼠海马结构内的染色显示颗粒与训练1周的比较无明显差异,但染色加深;(2)模型组大鼠的突触素反应产物的光密度值明显大于对照组(P＜0.05);模型组大鼠海马结构内突触素光密度值在训练的1~2周内随训练时间增加而增加,训练2~3周则增加不明显;模型组大鼠海马结构CA3、CA4区和齿状回突触素反应产物的光密度值较CA1和CA2区的大,差异有显著(P＜0.05)。结论:(1)大鼠经水迷宫训练获得空间辨别性学习记忆功能时在海马结构内有新突触形成;(2)海马结构的CA3、CA4区和齿状回与空间辨别性学习记忆的关系密切。     

老年学习记忆减退大鼠脑线粒体DNA缺失

目的和方法:测定老年大鼠脑mtDNA缺失型(以下简称缺失型),缺失mtDNA比例,探讨mtDNA缺失与老年性学习记忆减退的关系,为研究其分子机制提供基础资料。用Morris水迷宫将老年大鼠(24个月)筛选为老年学习记忆正常和学习记忆减退两组。用稀释PCR法测定大鼠大脑皮质、海马和小脑缺失型mtDNA比例。结果:青老年鼠大脑皮质、海马和小脑均存在mtDNA缺失,片段为4834bp;青年鼠的缺失比例约为0.00018%。老年记忆正常鼠上述3个脑区缺失型mtDNA缺失比例分别是青年鼠的6倍、6倍和2倍;老年记忆减退大鼠上述脑区的缺失型mtDNA比例分别是老年记忆正常鼠的2倍、1.8倍和3倍。结论:衰老时脑组织缺失型mtDNA增多,而老年学习记忆减退鼠较老年学习记忆正常鼠mtDNA缺失进一步成倍增加,表明相关脑区的mtDNA缺失在老年学习记忆减退的细胞分子机制中发挥重要作用。     

皮质发育障碍大鼠海马神经元的体视学方法定量研究

目的　用体视学方法计数比较X射线制作的大脑皮质发育障碍（DCDs）模型大鼠海马神经元数量变化和测量海马体积变化。 方法　选择2月龄正常SD大鼠和DCDs模型鼠各5 只,取脑后石蜡包埋、连续冠状切片。根据均匀系统随机抽样原则,从含海马结构的切片中随机抽取一组切片,组织化学染色,在体视学设备下计数大鼠海马CA1、CA3和DG区的神经元数目和测量海马体积。 结果　正常大鼠单侧海马CA1、CA3和DG区的神经元的数目分别是（8.35×104±1.44×104）、（8.23×104±1.60×104）和（1.43×105±2.24×104）,DCDs模型大鼠单侧海马CA1、CA3和DG区的神经元的数目分别是（3.70×104±　1.96×104）、（3.57×104±1.47×104）和（6.86×104±4.85×104）;正常大鼠和DCDs模型鼠单侧海马的体积分别是(14.18±1.52)mm3和(8.49±3.41)mm3。DCDs大鼠海马结构各亚区的神经元数量和海马体积均较正常鼠明显减小（P＜0.05）。 结论　X射线制作的DCDs模型鼠海马CA1、CA3和DG的神经元数目和海马体积都较正常大鼠减少。     

老龄大鼠海马结构脑源性神经营养因子表达的改变

目的：探讨大鼠海马结构脑源性神经营养因子（BDNF）表达的老龄性改变，为脑衰老提供可靠的免疫组织化学资料。方法：选用雌性Wistar大鼠24只，分为青年组和老龄组。应用免疫组化方法结合图像分析技术对2组大鼠海马结构BDNF阳性产物进行定性、定量分析。结果：老龄组海马CA3和CA1区神经元BDNF含量比青年组分别下降了13．3％、10．4％，然而，齿状回从青年到老年变化不显著。结论：老龄时海马CA3和CA1区神经元的BDNF表达发生了明显的变化，其含量明显降低。提示老龄大鼠海马CA3和CA1区神经元BDNF表达的改变，可能是老龄动物海马结构营养及学习记忆障碍的形态学基础。     

雄激素对快速老化小鼠SAMP8海马神经元突触蛋白的快速影响

目的:研究去势以及去势后雄激素补充治疗对快速老化小鼠(SAMP8)海马神经元突触蛋白的快速影响。方法:7月龄健康雄性SAMP8小鼠,随机分为假手术对照组(对照组)、去势组、去势+睾酮补充治疗组(T组)和去势+双氢睾酮补充治疗组(DHT组)。通过免疫组织化学显色和免疫印迹研究去势及雄激素补充治疗对其海马突触蛋白SNAP25、Syt1、SYN、PSDD95、NR1和Drebrin表达的快速影响。结果:免疫组织化学显色结果显示,与SAMP8小鼠假手术组相比,去势组CA1区和CA3区各突触蛋白的OD值均明显降低。T组和DHT组CA1区和CA3区各突触蛋白的OD值较去势组明显增加。免疫印迹结果显示,与SAMP8小鼠假手术组相比,去势组海马结构各突触蛋白条带光密度的相对值均明显降低。T组和DHT组海马结构各突触蛋白条带光密度的相对值较去势组明显增加。结论:SAMP8小鼠去势后,雄激素缺乏导致海马结构内突触蛋白表达减少;去势后雄激素补充治疗能快速增加SAMP8小鼠海马结构内突触蛋白的表达。     

运动对小鼠海马结构和大脑皮质胆碱能纤维的影响

用组织化学方法结合体视学测量研究小鼠海马结构和大脑皮质胆碱能纤维的年龄变化以及长期适量运动（跑转笼）对胆碱能纤维的影响。以同年龄对照组心重／体重比率均值的２倍标准差作为运动有效标准。结果显示，老年鼠（２４月龄）海马ＣＡ１区、ＣＡ３区，齿状回分子层和运动、体感皮质第Ⅲ和Ⅴ层乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）阳性纤维密度明显低于成年鼠（１３月龄）和青年鼠（５月龄）（Ｐ＜０．０１），后两者间除海马ＣＡ３区分子层纤维密度成年鼠稍低外Ｐ＜０．０５），其它各区无显著差异（Ｐ＞０．０５）；５月龄小鼠经过８和１９个月运动后，被检各区ＡＣｈＥ阳性纤维密度均显著高于同年龄对照组（Ｐ＜０．０１）。结果表明从青年开始的长期适量运动能够促进海马和皮质内胆碱能纤维的增生，延缓衰老时胆碱能纤维的丢失。     

老年性学习记忆减退大鼠新皮质和海马结构胆碱能纤维的定量研究

用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫行为检测方法以青年组平均逃避潜伏期９５％和９９％正常值范围上限值为界将老年大鼠分为学习记忆正常组（老年正常组）和学习记忆减退组（老年减退组）,以Ｈｅｄｒｅｅｎ等推荐的ＡＣｈＥ组织化学染色方法结合形态计量方法对各组大鼠的额、枕、内嗅皮质、海马ＣＡ１区多形层、腔隙分子层和齿状回分子层外带的胆碱能纤维密度进行分析,结果显示老年减退组较老年正常组、青年组各层（除枕叶外）ＡＣｈＥ阳性纤维数量均明显减少（Ｐ０．０５,Ｐ＜０．０１）。老年正常组与青年组相比各层阳性纤维数量有所减少,但除海马ＣＡ１区腔隙分子层差异显著外,其余差异均无显著性。相关分析结果表明大鼠各层ＡＣｈＥ阳性纤维数量与其平均逃避潜伏期呈负相关关系,与原平台象限游泳距离占总距离百分比呈正相关关系。本研究提示老年性学习记忆能力减退与新皮质、海马结构胆碱能纤维溃变密切相关。     

血管性痴呆大鼠海马Ng及其磷酸化水平的动态变化

目的:观察血管性痴呆(VD)模型大鼠海马神经颗粒素(Ng)及其磷酸化水平的动态变化,探讨Ng在VD学习记忆功能障碍中的作用及其机制。方法:采用双侧颈总动脉夹闭再灌注同时腹腔注射硝普纳建立血管性痴呆模型,在15d,1,2,4个月等时间点,采用Morris水迷宫和免疫荧光方法分别观察大鼠空间学习记忆能力及海马Ng及其磷酸化水平的变化。结果:模型组大鼠各时间点的逃逸潜伏期(EL)比假手术组均明显延长(P0.01);海马CA1区Ng及其磷酸化Ng免疫阳性神经细胞数表达较假手术组明显减少(P0.01,P0.05),而且随造模手术后时间的延长,以上变化逐渐加重。齿状回仅在2个月和4个月时间点的免疫阳性神经细胞数比假手术组显著减少(P0.01,P0.05)。结论:模型组大鼠的空间学习记忆功能障碍可能与海马(特别是CA1区)的Ng及其磷酸化Ng表达水平持续降低有关。     

外源性硫化氢对海洛因依赖大鼠海马长时程增强的影响

目的:观察外源性H2S供体NaHS对海洛因依赖大鼠学习记忆能力及海马LTP的影响。方法:SD大鼠随机分成3组:正常对照组、heroin组、heroin+NaHS组。先通过跳台实验检测大鼠学习记忆能力,然后记录高频刺激(HFS)前后在体海马CA1区群体峰电位(PS)变化,诱导长时程增强(LTP)的产生,最后通过Nissl染色观察海马神经元的损伤情况。结果:与对照组比较,heroin组和heroin+NaHS组学习记忆成绩均降低(P<0.05),PS幅值变化率减小(P<0.01),且形态学观察可见海马神经元损伤;与heroin组比较,heroin+NaHS组学习记忆成绩提高(P<0.05),PS幅值变化率增大(P<0.01),海马神经元损伤较轻。结论:(1)海洛因依赖导致大鼠海马神经元损伤,抑制海马CA1区LTP的产生,从而降低正常学习记忆能力;(2)外源性H2S可减轻海洛因依赖对大鼠海马神经元的损伤,易化海马CA1区LTP的产生,改善海洛因依赖导致的正常学习记忆能力的降低。     

PTSD大鼠海马CA1区和前额叶皮层突触小泡蛋白的表达

目的:观察创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠海马CA1区和前额叶皮层(prefrontal cortex,PFC)突触小泡蛋白(synaptophysin)的表达,探讨PTSD大鼠空间记忆损伤的机制。方法:健康成年SD大鼠36只,随机分为正常对照组和模型组,每组18只。模型组采用单次延长应激(single prolonged stress,SPS)构建PTSD大鼠模型。Morris水迷宫实验检测2组大鼠的学习记忆能力,利用免疫组化、Western blot和免疫荧光实验检测海马CA1区和PFC突触小泡蛋白的表达情况。结果:经过Morris水迷宫实验,模型组大鼠从第2天开始逃避平台的潜伏期较对照组均显著延长(P 0.01),目标象限的停留时间均明显降低(P 0.01),穿越原平台位置的次数也明显减少(P 0.01)。在免疫组化、Western blot和免疫荧光实验中,模型组大鼠海马CA1区和PFC突触小泡蛋白的表达较对照组均明显减少(P 0.05或P 0.01)。结论:创伤后应激障碍大鼠空间记忆能力减退,可能与海马CA1区和PFC突触小泡蛋白的表达减少有关。     

老年学习记忆减退大鼠的海马GABA能神经元数量变化

为探讨γ-氨基丁酸 (GABA)能神经元在老年脑的改变及其与老年性学习记忆减退间的关系。本研究通过 Morris水迷宫测试将老年大鼠分为学习记忆正常和损害组 ,用免疫细胞化学和体现视学方法定量描述 GABA能神经元的改变。结果显示 ,老年记忆正常和损害组海马本部各区的 GABA能神经元均较年轻组明显减少 ,但正常组和损害组海马之间无显著性差异。齿状回分子层的 GABA阳性神经元的数量仅在老年学习记忆损害组明显减少 ,且 GABA神经元数量与搜寻平台的游泳时间呈负相关 (r=- 0 .91,P<0 .0 1)。提示老年学习记忆能力减退可能与齿状回分子层的 GABA能神经元丢失有关     

D-半乳糖联合染铝大鼠海马结构Aβ及相关蛋白的表达

目的:探讨D-半乳糖联合染铝的阿尔茨海默病大鼠海马结构Aβ及其相关蛋白的表达及其分布。方法:30只雄性SD大鼠随机分为2组,即:对照组和模型组(n=15)。模型组每日腹腔注射D-半乳糖60 mg/kg和灌胃三氯化铝500 mg/kg,连用60 d;对照组给予等量生理盐水进行腹腔注射和灌胃。铃木镀银法观察神经原纤维缠结的形成,确定模型是否成功。免疫组织化学法观察海马结构三个亚区的Aβ、β分泌酶(BACE)和早老素-1(PS-1)蛋白的表达。结果:铃木镀银染色可见模型组大鼠颞叶、顶叶皮层及海马神经元内的神经原纤维缠结。模型组大鼠海马CA1、CA3区及齿状回Aβ表达较强,与对照组相比差异显著(P<0.01);模型组海马CA3区神经元的BACE和PS-1蛋白表达量较对照组明显增加(P<0.01)。结论:D-半乳糖联合染铝的阿尔茨海默病大鼠海马结构Aβ、BACE及PS-1表达均明显上调,可能是导致AD大鼠功能障碍的主要原因。     

大鼠中央杏仁核向迷走背核复合体的直接投射──HRP逆向追踪和形态计量学研究

依据细胞大小、形态和密度的不同，把中央杏仁核分为５个亚区：即内侧亚区（ＣＭ）、腹侧亚区（ＣＶ）、中间亚区（ＣＩ）、外侧亚区（ＣＬ）和外侧囊亚区（ＣＬＣ）。ＣＬ体积最大（０．１０３ｍｍ３），细胞总数最多（８７１１个），细胞中等大小，细胞密度最高（８．６４ｘ１０４个／ｍｍ３）；ＣＩ体积最小（０．０１６ｍｍ３）、细胞总数最少（１０７５个），但细胞最大；ＣＬＣ细胞密度最低（４．５４×１０４个／ｍｍ３），细胞也最小；ＣＭ和ＣＶ的各项参数介于上述最高和最低参数之间。将ＨＲＰ注入一侧迷走背核复合体的上部后，在同侧中央杏仁核各亚区内标记细胞的平均数及与其神经元总数的百分比为：ＣＭ：３７２１个，７０％；ＣＶ：１４１２个，３５％；ＣＩ：８３个，８％；ＣＬ：３９１个，５％。ＨＲＰ注射入闩下部后，数据为：ＣＭ：１８２２个，３４％；ＣＶ：６０６个，１５％；ＣＩ：６８个，６％；ＣＬ：２９５个，３％。本研究表明：向迷走背核复合体直接投射的神经元是中央杏仁核内较小的细胞。投射的主要亚区为ＣＭ和ＣＶ，两亚区向闩上部的纤维投射明显多于向闩下部的投射。