创伤性急性肺损伤I-κB激酶的变化及意义

目的 :探讨 IκB激酶 (IKK)在创伤性急性肺损伤 (AL I)病理变化中可能的作用机制。方法 :复制创伤性 AL I家兔模型 ,用原位杂交方法结合原位定量分析检测肺组织中 IKKβ的 m RNA表达 ,用凝胶电泳迁移率改变分析法 (EMSA)和酶联免疫吸附 (EL ISA)法分别检测肺泡巨噬细胞 (PAM)中核因子 κB(NFκB)的活性和 PAM培养上清液中 TNF a、IL 6的含量。结果 :创伤性 AL I家兔组肺组织中 IKKβ的 m RNA表达 (0 .10 6 3± 0 .0 2 18)以及 PAM中 NFκB活性 (2 987.85± 16 3.85 )和上清液中 TNF a、IL 6的含量〔分别为 (2 35 .6± 30 .8) ng/ L和 (398.8± 2 4 3.6 ) ng/ L〕均较正常对照组〔分别为 0 .0 4 2 7± 0 .0 2 4 1、92 2 .0 2± 2 8.36、(36 .4± 8.0 ) ng/ L和 (78.6± 39.4 ) ng/ L〕显著增高 (P均 <0 .0 1)。结论 :蛋白激酶 IKK的激活介导 NFκB活化和分泌高水平细胞因子在创伤性 AL I的炎症反应中发挥重要作用。     

山莨菪碱对创伤性肺损伤激酶IKK的影响及意义

目的：探讨激酶IKK－β在创伤性急性肺损伤（ALI）病理变化中可能的作用机制及山莨菪碱（654－2）的影响效应。方法：复制创伤性ALI家兔模型，实验动物随机分为正常对照组，创伤模型组、654－2治疗组。用原位杂交方法检测肺组织中IKK－β的mRNA表达，用凝胶电泳迁移改变分析？（EMSA）法检测肺泡巨噬细胞（PAM）中核因子（NF）－kB的活性，用酶联免疫吸附（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子α（TNF－α）、白细胞介素6（IL－6）的含量。同时对各组动物动脉血气，肺湿／干（W／D）比值及肺组织的病理变化进行检测。结果：654－2治疗能明显改善创伤性ALI动物的血气，减少肺W／D值，减轻肺组织的损伤程度；能明显抑制创伤性ALI家兔肺组织中IKK－β的mRNA表达和PAM中NK-kB活性降低BALF中TNF－α、IL－6含量，结论：IKK－β/NF-kB/TNF－α效应在创伤性ALI的炎症反应中发挥重要作用，654－2可通过抑制IKK－β的激活，阻止NF－kB活化，缓解TNF－α介导的组织损伤。     

核因子-κB在小鼠急性肺损伤中的作用

目的　探讨核因子 (NF) κB在内毒素 (LPS)诱导的急性肺损伤小鼠发病中的作用。方法　腹腔内注射LPS诱导小鼠急性肺损伤模型。LPS注射后 0、 1、 3、 6、 12测定肺湿重 /干重比值 (W/D) ,迁移率改变电泳法检测肺组织NF κB活性 ,同时酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子 (TNF) α、白介素 (IL) 10浓度 ,RT PCR检测mRNA表达。结果　LPS注射后 ,W/D比值明显增高 ,6h升高最明显 (4 82± 0 10 ) ,显著高于LPS注射前 (3 6 7± 1 0 4 ,P <0 0 5 )。LPS注射后肺组织核蛋白NF κB活性明显增强 ,6h达到峰值 (40 5 7± 6 2 4 ) ,显著高于LPS注射前 (44 8± 30 9,P <0 0 5 )。肺组织匀浆TNF α和IL 10浓度分别在LPS注射后 6h和 12h升高最明显 ,分别为 (197 1± 5 2 4 )pg/ml和 (6 4 9± 39 7)pg/ml,显著高于LPS注射前 [分别为 (6 1 2± 10 7)pg/ml和 (71 6± 15 9)pg/ml]。与LPS注射前比较 ,LPS注射后 3～ 12h ,肺组织匀浆TNF α和IL 10mRNA表达显著增高。肺组织病理显示肺泡出血、水肿、大量炎症细胞浸润 ,电镜下见Ⅰ型肺泡上皮细胞断裂 ,Ⅱ型肺泡上皮细胞变性。结论　LPS导致肺组织NF κB的活化 ,介导炎症介质大量表达 ,参与急性肺损伤发生     

核因子—кB在两种实验性胰腺炎时表达的意义

目的　探讨核因子 -κB在水肿型及坏死型胰腺炎时胰腺组织中的表达情况。方法　制作大鼠水肿型及坏死型胰腺炎模型 ,采用免疫组化的方法测定胰腺组织中核因子 -κB的表达 ,并应用正常大鼠作对照组。结果　对照组核因子 -κB无表达 ,从水肿型组到坏死型组 ,核因子 -κB表达明显增强 ,且三组之间有明显差异 (P <0 0 1)。结论　水肿型胰腺炎较坏死性胰腺炎核因子 -κB表达强度明显减弱 ,可能是由于水肿型胰腺炎时存在着细胞凋亡的保护机制。     

白介素—10和一氧化氮对内毒素诱导肺泡巨噬细胞核因子—кB活化及肿瘤坏死因子释放的调节

目的：探讨白介素－10和外源性一氧化氮（NO）对内毒素（LPS）诱导肺泡巨噬细胞（PAM）核因子－кB（NF－кB）活化及肿瘤坏死因子－α（TNF－α）基因表达的调节,为临床运用提供理论依据。方法：用支气管肺泡灌洗法收集PAM进行培养,分为正常对照组、LPS组、IL－10＋LPS组和NO＋LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）法和酶联免疫吸附（ELISA）法分别检测核提取物中NF－кB活性和细胞培养上清中TNF－α含量。结果：LPS组NF－кB活性和TNF－α含量在刺激后3显著高于对照组;IL－10＋LPS组和NO＋LPS组NF－кB活性和TNF－α含量均显著低于LPS组。结果：LPS诱导PMAM宾NF－кB活化,导致TNF－α基因表达增强;白介素－10和外源性NO可抑制NF－кB活化而减少TNF－α的释放。     

急性肺损伤核因子-κB的活性变化及糖皮质激素的干预研究

目的：观察急性肺损伤（ALI）肺组织核因子（NF）-kB、肿瘤坏死因子（TNF）-α的活性变化及地塞米松（Dex）的干预作用。方法：采用ALI大鼠模型，实验动物随机分为ALI模型组（8只）、Dex治疗组（8只）、正常对照组（8只），用免疫组织化学法结合原位定量分析检测肺组织NF-kB、IkB-a、TNF-α蛋白表达及相对含量，并进行肺组织的病理学光镜检查。结果：ALI大鼠肺组织NF-kB、TNF-α的蛋白明显升高，I-kB表达显著降低。Dex能明显下调NF-kB、TNF-α的蛋白表达，上调I-kB表达，并能减轻肺组织的损伤程度。结论：NF-kB活化在ALI的发生、发展过程中起着重要作用。Dex发挥抗炎作用，减少肺组织损害，与其对NF-kB的活性和细胞因子的调节作用密切相关。     

急性炎症反应中真核细胞转录因子—кB的信号转导作用

真核细胞转录因子 κB(nuclearfactorκB,NFκB)是一种普遍存在于真核细胞中具有序列特异性二聚体结构的转录因子 ,是所有 Rel家族 DNA结合蛋白的总称 ,在调节免疫应答、炎症反应及细胞增殖、分化及凋亡等方面起关键作用 〔1〕。NFκB转录复合体包括一系列由 p5 0、p5 2、Rel A(p6 5 )、Rel B和 c Rel等亚基构成的同型或异型二聚体 ,这些复合体结合到 DNA的调控区域 (称为κB位点 )后 ,激活特异靶基因的表达活性〔2〕。通常情况下 ,NFκB存在于细胞浆中 ,并与其抑制蛋白 (inhibitoryκB,IκB)家族相结合 ,后者遮蔽了 NFκB的细…     

急性肺损伤兔肺泡灌洗液及血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6浓度变化与小剂量高渗盐水的干预

目的:观察创伤性休克兔经小剂量高渗盐水治疗后肺部炎症反应及病理学损伤的变化情况,进一步研究高渗盐水对创伤应激状态下急性肺损伤的作用及其机制。方法:实验于2005-08/2006-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成。①实验分组:新西兰白兔30只随机分为3组:假手术组、生理盐水处理组、高渗盐水治疗组,每组10只。②实验方法:假手术组:局部麻醉下行插管术及肝素化,静脉输注平衡盐80mL。生理盐水处理组:用骨钳致兔一侧股骨中下1/3粉碎性骨折,经股动脉放血至储血瓶内,使平均动脉压降至(40±5)mmHg,45min后输注生理盐水4mL/kg,再回输储血及2倍于失血量的平衡盐液进行复苏。高渗盐水治疗组:除以75g/L的氯化钠溶液代替生理盐水外,其余处理同生理盐水处理组。在休克前、休克末、复苏后2h、4h分别采集静脉血1mL备用。复苏后4h空气栓塞处死动物,进行支气管肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液。③评估指标:双抗体夹心ELISA法测定支气管肺泡灌洗液以及血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的浓度;凝胶电泳迁移率改变分析法检测肺泡巨噬细胞核蛋白提取物中核因子κB的活性;显微镜观察肺组织的病理改变。结果:30只实验动物均进入结果分析。①血清细胞因子浓度的变化:与假手术组比较,生理盐水处理组肿瘤坏死因子α浓度在休克发生后迅速升高(P<0.05),复苏后又进一步上升(P<0.01),白细胞介素1β及白细胞介素6浓度在复苏后4h才有明显增加(P<0.01)。高渗盐水治疗组与生理盐水处理组比较,复苏后2～4h肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6浓度均有不同程度下降(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。②支气管肺泡灌洗液细胞因子浓度的变化:生理盐水处理组肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6浓度均显著高于假手术组(P均<0.01),高渗盐水治疗组各细胞因子的浓度虽然也高于假手术组(P<0.05,P<0.01,P<0.01),但与生理盐水处理组比较均有明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。③肺泡巨噬细胞核因子κB的活性变化:生理盐水处理组核因子κB的活性远高于假手术组(P<0.01),而高渗盐水治疗组核因子κB的活性虽然也高于假手术组(P<0.01),但与生理盐水处理组比较有显著降低(P<0.01)。④肺组织病理学改变:高渗盐水治疗组肺水肿及炎性细胞浸润明显减轻;Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮细胞内仅有少量空泡,上皮基本完整,基底膜增厚不明显。结论:小剂量高渗盐水治疗可抑制创伤性休克时核因子κB的活化,减少促炎细胞因子的合成与分泌,减轻肺部的炎症反应,从而发挥对急性肺损伤的保护作用。     

核因子-κB与急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征

急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）为多种疾病所引起，表现为急性呼吸困难、低氧血症和双侧肺部浸润性病变。发病机制错综复杂，其病理生理基础是多种炎症细胞及炎症介质参与的炎症反应，多种效应细胞和炎症介质是参与ALI／ARDS两个主要因素，对ALI／ARDS的发病机制起关键作用。核因子-κB是一种具有基因转录调节作用的核蛋白，调控多种炎性细胞因子的表达，它在ALI／ARDS中的作用日益引起人们的关注。本文对近年NF-κB与ALI／ARDS发病关系的研究进展作一综述。     

前列腺素E1对急性肺损伤肺组织核因子κB表达的干预作用

目的建立急性肺损伤（ALI）大鼠模型，通过观察脂微球前列腺素E1（lipo—PGEl）对肺组织核因子kB（NF—kB）活化的调控作用和对血清中细胞因子表达的调控作用，探讨PGEl对Au的保护作用机制。方法 雄性SD健康大鼠45只随机分成3组，A组：生理盐水组；B组：LPS模型组；C组：LPS＋lipo-PGEl治疗组。各组分1、2、4h3个时间点各5只观察肺组织变化，测定肺组织NF-kB的表达及血清细胞因子TNF-α、IL-12、IL-10浓度。结果 治疗组肺组织充血出血情况较模型组明显改善，NF-kB表达显著降低，血清TNF—α、IL-12浓度显著降低，IL-10浓度明显增高。结论 前列腺素E1通过下调NF-kB的活性，抑制炎症因子的表达从而减轻急性肺损伤。     

急性肺损伤的转录机制

急性肺损伤实际上是一种炎症反应 ,炎症介质增高伴有抗炎分子表达的下降是肺部炎症发病机制的关键。近几年来的研究发现 ,炎症介质的基因表达是通过转录机制被调节的 ,其中核因子 -κＢ(ＮＦ -κＢ)作为一种很重要的转录因子 ,在各种细胞外刺激介导的细胞信息转导调控中起核心作用。本文对ＮＦ -κＢ的生物学特性以及其在急性肺损伤发病中的作用和调节作一综述。1986年Ｓｅｎ和Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ[1] 首先报道ＮＦ -κＢ ,随后许多学者发现其具有提高多种基因转录的功能 ,包括细胞因子、生长因子、黏附分子、免疫受体、急性期蛋白以及参与炎…     

前列腺素E1对急性肺损伤肺组织核因子κB表达的干预作用

目的建立急性肺损伤(ALI)大鼠模型,通过观察脂微球前列腺素E1(1ipoPGEl)对肺组织核因子-κB(NF-κB)活化的调控作用和对血清中细胞因子表达的调控作用,探讨PGE1对ALI的保护作用机制。方法雄性SD健康大鼠45只随机分成3组,A组:生理盐水组;B组:LPS模型组;C组:LPS lipoPGE1治疗组。各组分1、2、4h3个时间点各5只观察肺组织变化,测定肺组织NF-κB的表达及血清细胞因子TNFα、IL-12、IL-10浓度。结果治疗组肺组织充血出血情况较模型组明显改善,NF-κB表达显著降低,血清TNF-α、IL-12浓度显著降低,IL-10浓度明显增高。结论前列腺素E1通过下调NFκB的活性,抑制炎症因子的表达从而减轻急性肺损伤。     

脂多糖诱导大鼠急性肺损伤时核因子-κB信号转导及盐酸氨溴索的作用

目的探讨脂多糖（LPS）诱导的大鼠急性肺损伤（acute lung injury,ALI）时核因子κB（NF-κB）的信号转导,以及盐酸氨溴索（AMB）对其的作用。方法雄性SD大鼠108只,实验分为两部分：第一部分选择其中90只,采用随机排列表法分为6组（n=15）：A组无菌生理盐水（NS）0．5ml腹腔注射1h后,再腹腔注射NS0．5ml;B组腹腔注射AMB10mg／kg 1h后腹腔注射NS0．5ml;C组腹腔注射NS0．5ml 1h后腹腔注射LPS5mg／kg;D、E、F组分别腹腔注射AMB5、10、20mg／kg后1h腹腔注射LPS5mg／kg。各组分别按1、2、4h再分为3个亚组,每组5只。采用酶联吸附免疫法（ELISA）测定肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）水平,并测定BALF中乳酸脱氢酶（LDH）与总蛋白量的变化。采用蛋白印迹法（Western blot）测定肺组织细胞胞核中NF-κBp65、胞浆中NF-κB抑制蛋白-α（IκBβ）及C—Jun氨基末端激酶（JNK）的表达。第二部分选择18只大鼠按上述分组法随机分为6组（n=3）,A、B、C、D、E、F组,给药方法同第一部分,腹腔注射NS（A组、B组）或腹腔注射LPS（C、D、E、F组）后4h观察大鼠肺组织病理形态学变化。结果第一部分：与A组比较,C、D、E、F组BALF中LDH、总蛋白量、总蛋白量、TNF-α、IL-1β和MIP-2均明显升高（P〈0．05或P〈0．01）：与C组比较,E、F组上述指标均降低（P〈0．05或P〈0．01）。与A组比较,C、D、E、F组肺组织细胞中的NF-κB p65与JNK表达明显增多（P〈0．01）,而IκBα的表达量减少（P〈0．01）;与C组比较,E、F组NF-κB p65与磷酸化JNK的表达减少（P〈0．05或P〈0．01）,而IκBα的表达量增多（P〈0．05或P〈0．01）。第二部分：A、B组肺组织形态学正常,C组呈明显的肺损伤病理形态学改变,D组肺损伤程度与C组相似,E、F组肺损伤程度较C组减轻。结论AMB可以减轻LPS诱导大鼠ALI．其机制可能与抑制肺组织细胞NF-κB065与JNK的活化,并促进IκBα的表达,以及下调TNF-α、IL-1β和MIP-2的表达有关,且呈剂量依赖性。     

雷公藤氯内酯醇对急性肺损伤核因子-κB的调节功能观察

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)在急性肺损伤(ALI)中的作用及雷公藤氯内酯醇(T4)的调节功能.方法:实验分ALI组、雷公藤T4组、健康对照组.用迁移电泳法(EMSA)检测外周血单核细胞(PBMC)中NF-κB活性;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PBMC培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL10)含量.结果:与健康对照组比较,ALI组PBMC中NF-κB活性明显增强(P<0.01),PBMC 培养上清中TNF-α、IL-10含量均明显升高(P均<0.01);TNF-α含量随NF-κB活化而增高,两者呈显著正相关(r=0.79,P<0.01).与ALI组比较,雷公藤T4组PBMC中NF-κB活性显著下降(P<0.01);TNF-α、IL10含量亦明显下降(P<0.05和P<0.01).结论:ALI时PBMC中NF-κB明显活化,介导促炎、抗炎介质大量释放,参与ALI发生.雷公藤T4能明显抑制NF-κB活化及促炎介质TNF-α、抗炎介质IL10释放,调节促炎/抗炎反应失衡.     

核因子-κB在小鼠急性肺损伤发病中的作用及治疗干预研究

目的　探讨核因子 (NF) -κB在内毒素 (LPS)诱导的急性肺损伤 (ALI)小鼠发病中的作用以及地塞米松 (Dex)的干预作用。方法　腹腔内注射LPS诱导小鼠ALI模型 ,随机分为LPS组、LPS +Dex组 ,LPS注射后 0、1、3、6、12h测定肺湿重 干重比值 (W D)、肺组织NF -κB活性、肺组织匀浆中肿瘤坏死因子 (TNF)α及白细胞介素 (IL) - 10浓度 ,检测mRNA表达 ,并观察肺组织光镜、电镜病理改变。结果　LPS注射后 ,W D明显增高 ,3h开始明显升高 ,6h达到高峰 ( 4 82± 0 10 ) ,显著高于注射前 ( 3 6 7± 1 0 4,P <0 0 5 ) ;肺组织核蛋白NF -κB活性 1h开始明显升高 ,6h达到峰值 ( 40 5 7± 6 2 4) ,显著高于注射前( 44 8± 30 9,P <0 0 5 ) ;肺组织匀浆TNF -α和IL - 10浓度分别在注射后 6h和 12h升高最明显 ,分别为 ( 197 1± 5 2 4)pg mL和 ( 16 4 9± 39 7)pg mL ,显著高于注射前。地塞米松明显抑制NF -κB活化 ,肺组织匀浆中TNF -α、IL - 10及其mRNA表达明显下降。肺组织病理显示LPS可导致肺泡出血、水肿 ,大量炎症细胞浸润 ,电镜下见Ⅰ型肺泡上皮细胞断裂 ,Ⅱ型肺泡上皮细胞变性 ,地塞米松可明显改善肺损伤。结论　LPS导致肺组织NF -κB的活化 ,介导炎症介质大量表达 ,参与ALI发生 ,地塞米松通过抑制炎症反     

丹参对创伤性急性肺损伤治疗作用的实验研究

目的：探讨丹参对创伤性急性肺损伤（ＡＬＩ）及多器官功能障碍综合征（ＭＯＤＳ）的治疗效应及可能机制。方法：采用家兔创伤性ＡＬＩ模型,实验动物随机分为正常对照组（８只）、创伤性ＡＬＩ组（８只）和丹参治疗组（８）,进行各组动物动脉血气,血浆和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）含量及ＢＡＬＦ中白细胞数量、补体Ｃ３ａ、Ｃ５ａ、白蛋白含量的测定。用免疫组织化学结合原位定量分析方法检测     

甘草酸二铵对急性肺损伤大鼠肺组织糖皮质激素受体及核因子κB表达的影响

目的 观察甘草酸二铵(GL)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核因子κB(NF-κB)、糖皮质激素受体(GR)表达的调控作用及对血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)表达的影响.方法 将24只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为生理盐水对照组、ALI模型组和GL干预组,每组8只.ALI模型组、GL干预组分别给予内毒素(LPS)5 mg/kg尾静脉注射;IPS注射前1 h,GL干预组给予GL 20 mg/kg静脉注射.观察4 h后各组大鼠肺组织病理,测定肺湿干比(W/D)、PaO_2,并采用逆转录-PCR反应检测肺组织NF-κB mRNA,GR mRNA的表达,western blot法测定肺组织Nf-κB及GR蛋白的表达,ELISA法测定血清TNF-α,IL-10质量浓度.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析,各组间均数比较采用单因素方差分析,均数两两比较采用q检验.结果 (1)ALI模型组TNF-α为(153.68±20.42)ng/L,明显高于生理盐水组(43.96±7.57)ng/L(P<0.01)和GL干预组(87.23±7.52)ng/L(P<0.01).ALI模型组IL-10为(42.48±6.81)ug/L,明显高于生理盐水组(24.72±8.03)ng/L(P<0.01),但低于GL干预组水平(58.33±9.62)ug/L(P<0.05).(2)ALI模型组NF-κBmRNA和蛋白的表达水平[分别为(3.414±0.521),(254.7±16.4)]明显高于生理盐水组[分别为(0.432±0.085),(45.6±7.3)](P<0.01),而GRmRNA和蛋白的表达[分别为(0.152±0.025),(11.5±2.3)]则明显低于生理盐水组[分别为(0.434±0.013),(54.6±6.5)](P<0.01);GL干预组NF-κB mRNA和蛋白的表达水平[分别为(1.894±0.272),(133.5±11.7)]明显低于ALI模型组(P<0.01),GR mRNA和蛋白的表达[分别为(0.308±0.033),(28.2±5.6)]则明显高于ALI模型组(P<0.05,P<0.01).(3)ALI模型组肺组织出现充血、水肿、中性粒细胞浸润,GL干预组肺部炎症较ALI模型组减轻.结论 甘草酸二铵可能通过下调NF-κB的表达,同时提高GR的表达,进而调节炎症因子TNF-α及抗炎介质IL-10的表达,从而起到减轻ALI的作用.     

急性肺损伤发病机制和治疗现状

急性肺损伤发病机制非常复杂,趋向性认为是炎症细胞内免疫信号转导紊乱在其病理机制中发挥重要作用,其治疗目前尚无特效手段;现代基因技术靶向调控NF-κB 信号通路或许能为ALI的临床治疗开辟新途径.     

核转录因子-κB信号通路在内毒素致急性肺损伤中的作用

急性肺损伤 (acutelunginjury ,ALI)是由各种致病因素(如创伤、休克、感染、中毒等 )导致的急性进行性呼吸衰竭 ,严重的ALI被定义为急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)。在细胞水平上它表现为单核 /巨噬细胞、中性粒细胞 (PMN)等炎性细胞的浸润 ;在分子水平上则表现为众多炎症细胞因子、黏附分子的过度表达 ,伴有多种炎症介质的产生。内毒素损害是导致ALI发病的最常见形式之一 ,对其致病机制的研究现已逐渐深入到分子及信号转导水平。内毒素可通过激活多条信号转导通路最终将胞外信号转变为核内信号 ,其中 ,核转录因子 -κB(nuclearfactorofk…     

B7—1与B7—2对调节人IL—2基因的转录因子NF—кB和AP—1的的相同作用

为了解B7共刺激对细胞因子，特别是对IL-2mRNA及转录因子NF-кB和AP-1的影响，探讨B7介导的IL-2调节的分子机制，在异基因混合淋巴细胞反应（MLR）体系中分别或联合加入抗B7-1，抗B7-2单克隆抗体和CTLA-4Ig以阻断B7/CD28信号传导，通过竞争性PCR定量检测其对IL-2和IL-4mRNA的影响，并初步测定IFN-γmRNA的改变，同时用转染MHCⅡ类分子及联合转染等量B7-1或B7-2的NIH3T3转基因细胞tDR7,tDR7/B7-1和tDR7/B7-2刺激CD28^ T细胞，通过DNA-蛋白结合实验观察B7对（IL-2转录因子NF-кB和AP-1的影响。结果表明：抗B7-2单抗和CTLA-4Ig可明显抑制B7介导的I轼和IL-4mRNA合成，而抗B7-1单抗仅有轻度抑制作用，2种或3种抗体联合应用时抑制作用相加，MLR1-6小时，单独tDR7即可诱导NF-кB的表达，联合转染B7早期对其结合活力无明显影响，6小时后tDR7诱导作用减弱，B7却可显延长tDR7的诱导作用至72小时，tDR7早期同样可诱导AP-1的表达，联合转染B7分子在24小时内对其有一定的抑制作用，而在反应后期可延长tDR7早期同样可诱导AP-1的表达，联合转染B7分子在24小时内对其有一定的抑制作用，而在反应后期可延长tDR7对AP-1的上调作用，B7-1与B7-2间作用未见明显不同，结论：B7通过减少IL-2mRNA降解和影响基因转录而上调IL-2分泌，并可同时影响多种细胞因子分泌；在转录水平B7-1与B7-2作用未见明显不同，提示两的功能差异可能与细胞表达和时间动力学不同有关，详细了解B7介导的T细胞免疫耐受的分子机制有助于设计更好的临床方案预防移植排斥和GVHD。