鄂州市流感监测网络样品采集工作质量评估

目的评价流感监测网络的流感样病例(ILI)标本的采样质量,提高流感病毒分离率。方法对鄂州市中心医院和妇幼保健院为期52周(2013年第14周~2014年第13周)的ILI标本进行流感PCR检测,分析不同的标本来源、采样时间、病毒型别和PCR检测中的CT值与流感病毒分离阳性率的关系,评估样品采集质量。结果在采集的860份ILI标本中,PCR检测流感核酸阳性率为16.28%。流感核酸阳性标本分离病毒的阳性率为76.43%。流感病毒分离阳性率显示,与病毒的亚型有关,甲型H1N1流感和乙型流感的分离阳性率分别为84.76%和84.62%,均高于甲3型的64.29%。与PCR检测病毒核酸时的CT值有关,它随着CT值升高呈逐渐降低趋势(P0.01)。与标本采集时间有关,发病1~3天内病例标本病毒分离率高于发病3天以后采集的病例标本。与患者年龄有关,儿科患者标本的PCR阳性率和病毒分离率均高于内科(P0.01)。与门诊病例中ILI%的高低有关,ILI%与PCR检测阳性率呈正相关(P0.01)。结论流感病毒分离阳性率能有效反映流感监测采样与检测工作的整体情况,是对流感监测工作质量较为简单可行的评估方法。     

2013年湘西州流行性感冒监测结果分析

目的了解湘西州2013年流行性感冒(流感)的流行趋势、病原学变化特点,为今后的流感防治工作提供科学指导。方法对哨点医院流感样病例(ILI)及辖区8个县、市的流感聚集性病例进行监测。采集的咽拭子标本送至流感监测网络实验室进行流感病毒核酸检测和病毒分离。结果 2013年哨点医院共监测门急诊就诊病例212 052例,ILI 3 239例。流感样病例以0~4岁组为主,占70.21%,其次为5~14岁组和25~59岁组,分别占ILI总数的12.07%和11.33%。儿科门诊就诊的ILI数最多(1 856例),占全院ILI总数的57.31%。检测哨点医院咽拭子标本1 014份,分离出流感病毒14株,其中新甲H1流感7株,H3流感3株,乙型流感4株,分离培养阳性率1.38%(14/1 014)。检测18起ILI聚集性疫情咽拭子样本130份,11起流感暴发疫情分离出流感病毒23株,其中新甲H1流感4起,甲型H3流感1起,乙型流感6起,分离培养阳性率17.69%(23/130)。结论湘西州哨点医院就诊的ILI以15岁以下人群为主,哨点医院的病原学监测结果与暴发疫情监测结果基本吻合。     

河北省2006～2007年度流感监测分析

[目的]分析2006～2007年度河北省流感流行特征与流感病毒亚型分布情况.[方法]收集2006～2007年度河北省流感样病例(Influenza Like Illness, ILI)监测资料,采集ILI咽拭子标本用MDCK细胞分离病毒,血凝抑制试验鉴定病毒型别.[结果]2006～2007年度河北省流感监测表明:ILI就诊百分比为3.22%,其中儿童为6.59%,成人为0.74%,按月统计ILI就诊高峰出现在2007年1月;采集ILI咽拭子标本727份,分离到流感病毒88株,分离率为12.10%,毒株型别以甲3亚型为主,66株(占75%),甲1亚型次之,21株(占23.86%),乙型最少,仅1株(占1.14%),其中67株是1月分离到的,其高峰值出现时间与ILI就诊高峰期一致.[结论]2006～2007年度河北省流感流行高峰为1月,先后出现甲1、甲3和乙型流感病毒的流行,甲3亚型为优势毒株.     

实时荧光定量PCR、细胞培养法在流感病毒检测中的对比分析

目的对实时荧光定量PCR法和细胞分离培养法2种流感病毒检测方法和结果进行比较研究,为2种方法各自的实用领域提供参考依据。方法在流感高峰季节收集流感哨点医院流感样病例标本(ILI),同时进行实时荧光定量PCR检测和狗肾传代细胞培养,比较2种方法检测结果的差异。结果 1 025份ILI病例样本中,实时荧光定量PCR、细胞培养检测流感病毒核酸阳性率分别为26.63%、12.58%,差异有统计学意义(χ2=64.165,P0.05)。273份流感核酸阳性ILI病例样本中,分离病毒株118株,分离率为43.22%;752份阴性样本中,分离病毒株11株,分离率为1.46%。实时荧光定量PCR阳性标本与阴性标本分离率差异有统计学意义(χ2=94.712,P0.05)。结论实时荧光定量PCR具有高度灵敏性,检测速度快,实用于流感疫情应急检测、临床诊断、常规监测;细胞培养可获得毒株,用来开展抗原性、基因特性和耐药性等深入研究。     

陕西省高陵县乙型流感暴发疫情的病原学检测报告

目的弄清陕西省高陵县某小学学生群体发热疫情的病因。方法采集住院病例的鼻拭子标本7份和鼻咽拭子标本13份,用流感快速检测试剂检测流感病毒抗原;RT-PCR法检测流感病毒核酸;接种MDCK细胞分离流感病毒。结果鼻拭子标本有4份乙型流感病毒抗原阳性。阳性率为57.14%（4/7）。鼻咽拭子混合标本12份检出乙型流感病毒核酸,阳性率为92.31%（12/13）。鼻咽拭子标本经细胞培养,其中10份标本出现细胞病变。经鉴定为乙型流感病毒,病毒分离率为76.92%（10/13）。结论这起暴发疫情是由乙型流感病毒引起。     

2015年-2016年宁夏流感监测结果分析

目的对宁夏2015年10月-2016年3月流感流行状况及毒株的型别分布进行监测分析,探讨其流行特征,为流感的防控提供依据。方法每周统计监测点流感样病例(ILI),采集ILI鼻咽拭子标本,用实时RT-PCR检测方法进行检测,对检测阳性标本进行病毒分离,对有关资料进行统计分析。结果全区流感哨点医院共采集ILI标本5 082份,核酸检测阳性标本925份,阳性率为18.20%。其中B型流感病毒阳性率为61.30%,甲型H1N1阳性率为21.19%,季节H3N2亚型阳性率为17.51%;对检测阳性标本进行病毒分离,共分离流感毒株241株。结论 2015年-2016年宁夏流感监测地区的流行情况相对较为平缓,主要发病群体是学龄前儿童和中小学生,流感病毒的优势毒株为BV型。     

2013-2014年北京市门头沟区流感病原学监测

目的通过对2013-2014年北京市门头沟区流感流行季病原学监测分析,明确门头沟区2013-2014年流感流行株、毒株变异情况以及流感病原学的特征,为流感疫情防控提供科学依据。方法将流感样病例(ILI)的咽拭子标本进行流感病毒核酸检测,并利用狗肾细胞(MDCK)进行病毒分离检测,病毒分离后采用血凝试验方法(HA)判断是否有病毒存在,并利用实时荧光定量PCR法进行流感病毒型别的鉴定。结果 2013年10月-2014年4月共检测流感样病例(ILI)咽拭子标本452份,核酸阳性的标本为109例(核酸阳性率为24.11%),其中新甲型H1N1共31株、H3N2型34株、乙型BY44株。细胞分离到流感病毒83株(阳性率18.36%),其中新甲型H1N1共26株、H3N2型28株、乙型BY29株。结论门头沟区流感病毒在2013-2014年新型H1N1、H3N2、乙型BY型别均有流行。     

2011年-2013年邢台市流感病原学监测分析

目的分析2011年-2013年邢台市流感病毒流行情况,了解病毒毒株的型别及变化特点,为科学预防和控制流感提供依据。方法采集流感样病例(ILI)的咽拭子标本,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测病毒核酸。结果2011年1月-2013年12月共采集2 144份ILI咽拭子标本,核酸阳性211份,阳性率为9.84%,包括127份A型流感病毒(5.92%)和84份B型流感病毒(3.91%)。其中A型流感病毒进一步分类鉴定为新A型H1N1 58份(2.70%),A型H3 68份(3.17%),A型未分型1份(0.05%)。不同年龄组病毒阳性率差异有统计学意义(χ2=13.703,P0.01),以5岁~年龄组阳性率(14.00%)最高。结论 2011年流感病毒优势株为A型H3,2012年为B型,2013年为新A型H1N1,各型别阶段性交替形成优势株。每年1月-2月为邢台市流感发生高峰期。为更好的防控流感,及时掌握流行趋势,仍需加强监测。     

南平市2011年-2015年流行性感冒监测结果分析

目的了解南平市2011年-2015年的流感样病例(ILI)病原学特点,为南平市流感的防控工作提供科学依据。方法根据国家流感监测方案,采集哨点医院ILI鼻咽拭子标本,使用实时荧光定量PCR方法进行流感病毒亚型鉴定,阳性标本用MDCK细胞进行病毒分离,构成比和率的比较采用χ~2检验。结果 2011年-2015年南平市流感监测哨点医院ILI就诊比例为3.03%~3.76%,共核酸检测流感样病例标本7 799份,阳性1 178份,阳性率为15.1%,分离到流感病毒毒株587株,分离率为49.8%;主要的流行毒株每年存在交替现象;每年有冬季和夏季2个流行高峰;5岁~年龄组流感病毒阳性率最高,60岁~年龄组最低,不同年龄组阳性率差异有统计学意义(χ~2=124.323,P0.01)。结论2011年-2015年南平市的流感病毒活动强度总体平稳,流感病毒优势亚型呈现交替频繁的特征,尚未发现变异株及高致病株;流行具有明显的季节性,儿童和青少年是易感人群;因此需要长期对南平市流感进行病原学监测,为进一步控制流感的传播提供理论基础。     

2010-2012年南京流感样病例部分呼吸道病毒流行特征分析

目的了解南京流感样病例9种呼吸道病毒流行特征。方法 2010-2012年采集两个流感哨点医院流感样病例(ILI)咽拭子标本1 367份,荧光定量PCR检测流感病毒(甲型、乙型、丙型)、副流感病毒(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型)、鼻病毒与人博卡病毒等9种常见呼吸道病毒。结果 1 367份ILI咽拭子标本中,检测出374份阳性,检出率为27.36%。以乙型流感病毒检出率最高(8.49%),其次是甲型流感病毒(7.53%),Ⅳ型副流感检出率最低(0.22%)。不同季节中,以夏季病毒检出率最高(31.50%),秋季最低(22.10%)。检出混合感染19例,以鼻病毒与其他病毒混合感染最多,共15例,占所有混合感染的78.95%。结论南京市2010-2012年流行呼吸道病毒以甲、乙型流感病毒、鼻病毒为主,间或有丙型流感流行,偶有个别4型副流感病毒与人博卡病毒感染病例出现。     

甘肃省定西市2014年-2017年流感病原学监测分析

目的通过分析定西市近4年流感监测数据,掌握其病原学特征及流行形势,为今后该地区流感防控提供科学依据。方法采用real-time PCR方法对哨点医院采集送检的流感样病例(ILI)咽拭子标本进行核酸检测,对所有阳性标本进行犬肾细胞(MDCK)病毒分离培养、鉴定。结果 2 763份ILI咽拭子标本中,流感病毒核酸总阳性率为20.59%;阳性样本中乙型、季节性H3和新甲型H1N1的构成比分别为42.36%、35.50%和22.14%。对阳性标本进行病毒MDCK细胞分离培养,获得毒株176株。不同性别间阳性率差异无统计学意义(χ~2=0.239,P0.05),不同年龄组流感病毒阳性率差异有统计学意义(χ~2=143.75,P0.05),以5岁～14岁年龄组阳性率最高。每一年度流感流行均呈单峰,主要集中在当年12月-次年3月,各年稍有不同。结论定西市流感呈季节性、单峰型分布,主要集中在冬春季,每年优势病原均有变化,主要感染人群为儿童。因此应继续加强流感病毒的监测及流行季节前儿童流感疫苗的接种。     

2014 - 2016年镇江地区流感病毒流行特征分析

目的 通过对镇江地区流感病毒监测结果进行分析,了解该地区流感病毒流行动态,为流感防控提供科学依据。方法 收集2014 - 2016年哨点医院流感样病例监测资料,采集咽拭子标本进行核酸检测和病毒分离。结果 2014 - 2016年镇江地区哨点医院共累计报告流感样病例65 201例,其中3年的流感样病例就诊比例分别为2.19%、2.64%和2.90%。共检测标本9 532份,检出阳性标本1 122份,阳性率11.77%。其中甲型H1N1型175份（15.60%）,甲H3型491份（43.76%）,乙型BY系400份（35.65%）,乙型BV系56份（4.99%）。男性和女性的阳性率分别为11.67%和11.87%,不同性别阳性率差异无统计学意义（χ2 = 0.106,P = 0.745）。不同年龄段流感病毒阳性率以60岁及以上人群最高(13.88%),其次为5岁～人群(12.38%),差异有统计学意义（χ2 = 21.933,P＜0.001）。对355份阳性标本进行流感病毒分离,获得毒株109株,其中甲型H1N1型44株,甲H3型17株,乙型48株（BY37株,BV11株）。结论 镇江地区的流感发病高峰主要集中在冬春季,夏季也会出现小的流行,每年呈现流感病毒多种亚型的混合流行,以老人和小孩阳性率最高。     

双重实时逆转录聚合酶链反应检测甲型和乙型流感病毒

目的:建立双重实时荧光RT-PCR方法(DqRT-PCR)以检测甲、乙型流感病毒。方法:设计甲、乙型流感病毒M基因的特异性引物及双标记探针,优化反应条件,建立双重实时荧光RT-PCR方法(DqRT-PCR)。设计甲型流感病毒HA1、HA3亚型的H1、H3、N1、N2基因的特异性引物,建立双重普通RT-PCR(DRT-PCR)方法。对HA1、HA3和B型细胞分离株进行DqRT-PCR和DRT-PCR检测。对80份发热病人咽拭子标本进行DqRT-PCR和DRT-PCR检测及细胞培养分离病毒。结果:DqRT-PCR检测甲型和乙型靶DNA片段(重组质粒)最低极限为1×103拷贝。DqRT-PCR和DRT-PCR对11株H1N1、16株H3N2和12株乙型细胞分离株检测,符合率100%。DqRT-PCR、DRT-PCR和细胞培养分离病毒对80份咽拭子标本的阳性率分别为:37.5%(30/80)、30.0%(24/80)和43.8%(35/80),检出率差异未见统计学意义(2χ=5.5,P>0.05)。与细胞培养分离病毒法比较,DqRT-PCR的阳性和阴性总符合率为73.7%(59/80),阳性预测值为62.9%(22/35),阴性预测值为88.9%(40/45);经配对2χ检验,差异无统计学意义(2χ=0.76,P>0.05)。结论:建立DqRT-PCR可应用于甲型和乙型流感的检测,以多种检测方法互补将有助于提高临床标本的病毒检出率。     

哈尔滨市某医院2012—2017年儿童流感病原学监测结果分析

目的对哈尔滨市儿童医院2012—2017年流感病原学监测资料进行分析,掌握其流行规律、病毒分型及活动水平,为儿童流感的防控工作提供科学依据。方法采集哈尔滨市儿童医院0～14岁流感样病例(ILI)患儿的咽拭子标本,采用Real-timePCR方法,对ILI患儿咽拭子标本检测,阳性标本进行流感病毒分离,并用血凝抑制试验进行流感病毒型别的鉴定,进行流行病学分析。结果共采集3 528份0～14岁ILI患儿咽拭子标本,阳性标本309份,阳性率8.76%。2017年检出率最高(15.38%),2015年检出率最低(3.79%),各年流感阳性检出率差异有统计学意义(χ~2=63.845,P<0.01)。检出流感病毒由新甲H1、季H3和B型组成,各年型别构成比差异有统计学意义(χ~2=176.789,P<0.01);儿童与成人同期阳性检出率差异有统计学意义(χ~2=5.387,P<0.05)。3～5岁年龄组检出率最高,为10.99%,6～8岁组阳性检出率为9.57%,9～11岁组阳性检出率为9.33%,<3岁组检出率最低,为5.82%。流感流行高峰在每年的12月份至次年的4月份,检出的病毒数占病毒总数的97.77%。结论哈尔滨市近年儿童流感在不同年度流行型别存在差异,呈现交替流行,且流行强度存在差异。托幼儿童及中小学生为流感病毒易感的高危人群。冬春季节为流感的高发季节,且近年春季呈现高发趋势。     

2009-2012年山东省流感样病例流行病学及病原学特征分析

目的掌握2009-2012年山东省流行性感冒流行规律,病毒型别及其活动水平,为流感的监测预警提供信息。方法收集2009-2012年山东省流感监测系统流感样病例(ILI)监测资料和ILI鼻咽拭子标本的流感病毒检测结果资料进行分析。结果 2009-2012年4个年度,哨点医院内科(儿内科)门诊患者合计19 877 694例,其中ILI 446 406例,占2.25%。4个年度ILI%分别为3.16%、1.98%、2.11%和2.01%,4个年度ILI%差异有统计学意义(P0.05);74.0%的ILI集中在5岁以下年龄组。合计检测ILI标本40 257份,检出流感阳性标本8 960份,阳性率为22.39%。4个年度流感病毒检测阳性率分别为48.67%、17.28%、8.90%和14.04%。对ILI%与病毒分离率两条序列进行等级相关分析,相关系数为0.874(P0.05),为正相关关系。结论 2009年流感病毒活动较为活跃,4个年度中流感优势病毒亚型之间呈交替变化并有一定的规律,ILI流行趋势与流感病毒活动趋势高度一致。     

2015镇江市流感病原学监测结果分析

目的分析镇江市2015年流感病毒流行情况,为今后科学有效地防控流感提供依据。方法收集2015年镇江市国家级流感哨点监测医院流感样病例(ILI)标本3 237份,利用实时荧光定量PCR法进行病毒核酸检测,并对ILI报告数据、病原学监测数据进行分析。结果 3 237份咽拭子标本共检出流感病毒核酸阳性464份,总阳性率为14.33%,其中甲型H1N1流感病毒3份、季节性H3N2型流感病毒164份、BY型流感病毒297份。男性和女性阳性率分别为14.10%和14.55%,不同性别阳性率比较,差异无统计学意义(χ2=0.13,P0.05)。流感全年出现,冬季和夏季2个小流行高峰。1月-3月优势流感毒株为BY型,7月-9月优势流感毒株为季节性H3N2型。结论 2015年镇江市共出现3种毒株流行。应进一步加强流感哨点监测工作,加强人员密集场所的暴发性疫情监测,警惕新型流感病毒株的出现和流行。     

随州市2012年流感监测结果分析

目的分析随州市2012年流感监测结果,了解流感流行特征,为随州市流感防控工作提供科学依据。方法在流感监测哨点医院采集流感样病例(ILI)咽拭子标本,采用实时荧光定量PCR方法检测流感病毒核酸,核酸阳性标本用MDCK细胞进行病毒分离,采用血凝抑制方法(HI)进行流感病毒型别鉴定。结果 2012年共监测流感样病例692例,流感哨点医院流感样病例就诊百分比为0.69%,流感样病例主要集中在15岁以下儿童,占73.70%。检测流感样病例咽拭子标本635例,测得流感病毒核酸阳性195例,总阳性率为30.71%。核酸阳性样本分离到54株流感病毒毒株。随州市2012年流感活动高峰主要集中在1-3月份和7-10月份。结论随州市曾都区2012年春季以乙型流感流行为主,然后夏季逐渐过渡为甲型H3流感。     

荧光定量PCR法快速检测海南省流感样病例样本的结果与分析

[目的]探讨荧光定量PCR检测方法在海南流感病毒检测中的意义. [方法]随机抽取该省流感监测点流感样病例的咽拭子标本459份和当年1起流感暴发标本共14份,应用荧光定量RT-PCR和常规病毒分离方法进行平行检测. [结果]对于473份流感样病例的咽拭子标本,用荧光定量RT-PCR法检测出阳性结果98份,阳性率20.7%;MDCK细胞培养及病毒分离鉴定出阳性结果46份,阳性率9.7%. [结论]荧光定量RT-PCR方法能在短时间内快速检测流感病毒,并且操作简便、特异性强、灵敏度高.所以荧光定量RT-PCR方法可作为海南省流感样病例的一种快速检测手段,为该省流感疫情的快速检测和疫情处置提供科学的实验室依据.     

应用实时荧光定量PCR技术快速检测甲型H1N1流感病毒

目的:对疑似甲型H1N1流感患者标本进行病毒核酸检测确诊,探讨实时荧光定量PCR检测方法在流行性感冒检测诊断中的意义。方法:采用WHO标准实时荧光定量PCR方法对2009年6月～12月萧山地区采集的436份疑似甲型H1N1流感患者咽拭子标本进行病毒核酸检测,并对甲型H1N1流感病毒、甲1型流感病毒、甲3型流感病毒和乙型流感病毒进行快速分型。结果:436份咽拭子标本中有144份呈甲型H1N1流感病毒核酸阳性,阳性率33.03%,另检出甲1型流感病毒15份,甲3型流感病毒30份,没有检出乙型流感病毒。结论:实时荧光定量PCR方法操作方便、耗时短、特异性强、灵敏度高,可作为甲型H1N1流感疫情可靠的快速诊断方法。     

吴起县学生群体性发热疫情的快速检测诊断

目的 搞清2006年吴起县学生群体性发热疫情的病原。方法采集了20例发热学生的鼻咽拭子和血液标本，使用美国QUICKVUE流感A＋B快检试剂进行现场检测；在国家级流感监测网络实验室（陕西省疾病预防控制中心），使用美国DHI公司呼吸道病毒抗原七项（甲、乙型流感病毒，副流感病毒1、2、3型，腺病毒，呼吸道合胞病毒）荧光检测试剂盒进行直接荧光抗原检测，用RT—PCR方法进行乙型流感病毒核酸检测。结果对13份鼻拭子标本进行了现场快速抗原检测，其中7份小学生标本显示乙型流感病毒抗原阳性，阳性率为53．85％；对12份鼻咽拭子进行了免疫荧光抗原检测，其中3份呈乙型流感病毒抗原阳性，阳性率为25．00％；对17份鼻咽拭子标本进行了RT—PCR检测，12份显示乙型流感病毒核酸阳性，阳性率为70．59％。结论根据以上实验室快速检测结果，引起此次学生群体发热的病原为乙型流感病毒。