基于thermoTRP介导冷痛敏机制对膝骨关节炎虚寒冷痛的研究

目的 基于膝骨关节炎大鼠冷缩足潜伏期和冷刺激敏感通道蛋白TRPA1和TRPM8在患膝滑膜组织的表达变化,阐述膝骨关节炎虚寒冷痛的形成原理。方法 健康4月龄SD雄性大鼠45只,体质量440~470g,随机分成KOA模型组（仅造模,无药物干预）、拮抗剂干预组（造模2周后应用TRPA1、TRPM8拮抗剂干预的大鼠）;正常组（正常健康大鼠,无药物干预）。分别于造模前3d、造模后2、4、6、8周,在3组中随机选择5只大鼠,测定冷缩足潜伏期;并于造模后第8周测定痛阈值结束后处死大鼠（CO₂窒息法）,取患膝滑膜、软骨组织样本,观察软骨组织病理切片形态,并检测滑膜组织TRPA1、TRPM8基因量及蛋白表达水平。结果 造模后2周KOA大鼠出现明显的冷刺激痛敏,至造模后4周其冷刺激痛阈仍处于非正常低水平,应用TRPA1、TRPM8抑制剂能够提高KOA大鼠的冷刺激痛阈。结论 TRPA1、TRPM8表达上调参与构建膝骨关节炎冷刺激痛敏,是膝骨关节炎虚寒冷痛形成的重要基础。      

瞬时受体电位通道蛋白A1和V1在正常小鼠耳蜗中的定位表达

目的 研究瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和V1(TRPV1)在正常小鼠耳蜗中的定位与表达.方法 选择12只健康成年BALB/c小鼠,应用免疫荧光染色方法和蛋白质印迹技术检测TRPA1和TRPV1在耳蜗中的定位与表达,同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试小鼠的听力.结果 TRPA1和TRPV1在小鼠耳蜗螺旋器的内、外毛细胞、螺旋神经节细胞和血管纹边缘细胞等都有表达,且主要定位于细胞膜;蛋白质印迹检测结果亦显示小鼠耳蜗中有TRPA1和TRPV1的表达.结论 TRPA1和TRPV1在正常BALB/c小鼠耳蜗的多种细胞中均有表达,这为深入研究二者在内耳听觉生理和病理生理中的作用奠定基础.     

TRPV1/TRPA1对小鼠子宫内膜异位症炎症及疼痛的作用

目的 探讨瞬时受体电位锚定蛋白1(transient receptor potential ankyrin 1,TRPA1)和瞬时受体电位香草酸1(transient receptor potential cation channel subfamily Ⅴ member 1,TRPV1)异聚体在子宫内膜异位症(简称内异症)小鼠子宫内膜组织中的表达及其与内异症缩宫素介导的疼痛的相关性,同时研究TRPA1和TRPV1对炎症因子的影响。方法 建立小鼠内异症模型,予以TRPA1激动剂肉桂醛和TRPA1拮抗剂HC-030031给药干预。疼痛行为学实验检测内异症小鼠扭体次数;ELISA检测血液及腹腔灌洗液炎症因子含量;实时荧光定量PCR及Western blot检测TRPV1/TRPA1基因和蛋白表达;免疫荧光检测TRPV1/TRPA1共定位。结果 在内异症模型小鼠中,TRPV1/TRPA1基因和蛋白表达上调,TRPA1激动剂肉桂醛上调TRPV1表达,TRPA1抑制剂HC030031抑制TRPA1的表达。肉桂醛对缓解小鼠内异症疼痛的作用较小,HC030031对疼痛的缓解作用显著。内异症小鼠血清及腹腔灌洗液IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和前列腺素(prostaglandin E2,PGE2)的含量显著升高,肉桂醛进一步促进这种作用,而HC030031显著抑制内异症小鼠血清及腹腔灌洗液炎症因子的含量。结论 TRPV1、TRPA1为内异症中感知炎症并进行传导的通道;TRPV1/TRPA1异聚体可能有利于响应炎症微环境,进行信号传导,增强疼痛感。     

哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1mRNA的表达

目的观察哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1 mRNA的表达。方法 SPF级雌性Balb/c小鼠16只,随机分为哮喘组和对照组,每组8只。哮喘组应用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型,末次激发后留取肺组织,采用荧光实时定量RT-PCR技术检测支气管肺组织中TRPM8与TRPA1的mRNA表达水平。结果哮喘组肺组织中TRPM8与TRPA1 mRNA水平分别为(0.619 1±0.213 1)和(0.272 2±0.167 1),明显高于对照组(0.347 1±0.221 1和0.107 9±0.041 5),差异有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1 mRNA的表达上调,可能是冷刺激诱发哮喘发作的分子机制。     

DNCB诱导TRPA1基因敲除小鼠特应性皮炎模型的建立与评价

目的:在C57BL/6遗传背景下的野生型以及瞬时受体电位通道A1(transient receptor potential cation channel,subfamily A,member 1,TRPA1)基因敲除小鼠上建立2,4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzene,DNCB)诱导的特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)模型,初步探索TRPA1在该模型的作用。方法:首先将野生雄性C57BL/6小鼠随机分成实验组(n=6),对照组(n=6),建立AD模型。具体造模方案:在致敏阶段,于第1天小鼠背部及耳部分别使用2%DNCB(丙酮/橄榄油3∶1)溶液及单纯丙酮/橄榄油溶液外涂。在激发阶段,于第5、8、11、14、17、20天背部及耳部分别外涂0.5%DNCB溶液及单纯丙酮/橄榄油溶液,共6次,造模后取皮损行HE染色,鉴定AD模型。通过qRT-PCR和Western blot检测背部皮损TRPA1 mRNA和蛋白的表达水平,免疫组化检测TRPA1蛋白的定位及表达水平。然后随机选取6只TRPA1+/+(野生型)小鼠为模型组I,6只TRPA1-/-(敲...     

新冠肺炎寒湿疫小鼠模型的建立及其评价

目的 为中医理论下新冠肺炎归属“寒湿疫”提供病理模型,本实验通过脂多糖诱导小鼠引发细胞因子风暴,结合寒湿刺激,旨在建立合理、实用的寒湿疫小鼠模型。方法 24只雄性KM小鼠随机分为两个造模组和正常组。造模组1(脂多糖组)为腹腔注射5 mg/kg脂多糖生理盐水溶液,造模组2(脂多糖+寒湿刺激组)为腹腔注射5 mg/kg脂多糖生理盐水溶液+寒湿刺激,正常组给予等量生理盐水。造模8 d后,评价模型小鼠在中医理论下的相关外观行为表征,以及肺指数、脾指数、胸腺指数,ELISA检测肺组织细胞因子的水平,检测环氧化酶2(COX-2)、瞬时受体电位通道蛋白V1和A1(TRPV1和TRPA1)的表达量。结果 与正常组比较,脂多糖+寒湿刺激组小鼠的外在状态和行为表现与中医理论定义的寒湿证相一致,包括活跃程度下降、精神状态不佳。模型组的肺指数,胸腺指数,脾指数高于正常组;脂多糖+寒湿刺激组TNF-α,IFN-γ,IL-6和PGE2的水平明显高于正常组及脂多糖组;HE染色显示,模型组肺组织损伤明显。模型组中COX-2和TRPA1蛋白表达显著升高,TRPV1蛋白表达显著降低。结论 脂多糖+寒湿刺激小鼠模型可作为构...     

瞬时受体电位蛋白通道A1 在大鼠炎症性膀胱感觉通路中不同部位的表达变化

 目的瞬时受体电位蛋白通道A员（TRPA1）参与机械性感觉、痛觉的传导以及炎性反应,我们制作大鼠的膀胱炎症模型,检测在膀胱传入通路中不同部位TRPA1 的表达情况。方法采用大鼠腹腔内注射环磷酰胺制作膀胱炎症模型,正常大鼠作为对照组。采集膀胱黏膜层及脊髓后根神经节,利用实时定量PCR 检测TRPA1 转录水平的变化。结果大鼠腹腔内注射环磷酰胺2 d 后,肉眼及病理检查证实膀胱炎性反应。TRPA1 在膀胱黏膜层的表达水平没有明显变化,在脊髓后根神经节中,与对照组相比,炎症组的TRPA1 的表达水平明显上调（P < 0.05）。结论在膀胱炎症状态下,TRPA1 在黏膜层的表达没有明显变化,提示它作为黏膜层的机械敏感性受体参与炎症诱发的排尿改变的可能性较小;TRPA1 在脊髓后根神经节中表达上调,感觉神经元表达的TRPA1 可能参与膀胱炎性反应,并且与膀胱炎时病理性的排尿方式相关。     

基于皮肤TRP通道探讨三伏贴穴位经皮给药渗透机制的研究

目的 研究三伏贴中有效成分芥子碱硫氰酸盐(Sinapine thiocyanate, SPT)和延胡索乙素(Tetrahydropalmatine, THP)对瞬时感受器电位离子通道(Transient receptor potential ion channels, TRP)的影响,以及激活TRP通道后对三伏贴透皮行为的影响,以探究三伏贴经穴位渗透的机制。方法 通过背根神经节细胞Ca²⁺内流实验考察三伏贴有效成分对TRP通道的激活作用。通过Western blot和免疫荧光法比较肺俞穴与非穴位皮肤中TRPV1和TRPA1表达的差异以及给药后TRPA1表达的变化,并且通过在体滞留和激光共聚焦3D扫描,研究激活TRP通道对三伏贴穴位透皮行为的影响。结果 三伏贴中有效成分SPT可以促进TRP通道介导的Ca²⁺内流。大鼠肺俞穴皮肤TRPV1、TRPA1的表达量显著高于非穴位皮肤(P<0.05),三伏贴持续作用后肺俞穴和非穴位皮肤TRPA1的表达量下降。皮肤TRPV1和TRPA1被激活后,经肺俞穴皮肤渗透的SPT和THP的皮肤滞留量均显著提高(...     

The expression of TRPA1 mRNA in the rat brain

Objective： To investigate the distribution of TRPA1 （one kind of the TRP-like ion channel family） channel in the hippocampus and cerebral cortex of rat. Methods： RT-PCR was used to amplify the fragment of TRPA1 in the DRG （dorsal root ganglion）, hippocampus and cerebral cortex of adult SD rat. In situ hybridization staining was used to show the distribution of TRPA1 mRNA in the hippocampus and cerebral cortex of adult rat brain. Results： Both RT-PCR and in situ hybridization staining showed that TRPA1 mRNA was expressed in hippocampus and cerebral cortex of the adult rat brain. Conclusion： Our results suggest that there is expression of TRPA1 mRNA both in the hippocampus and cerebral cortex of the adult rat brain.     

鞘内注射瞬时受体电位通道A1 shRNA对部分坐骨神经结扎小鼠神经病理性疼痛的作用及其机制

探讨瞬时受体电位通道 A1（TRPA1）在部分坐骨神经结扎（pSNL）小鼠神经病理性疼痛模型中的作用,阐明其作用机制。     

湖南三大省级医院术后疼痛现况调查

目的 客观掌握湖南三大省级医院的术后疼痛现况.方法 根据经典的疼痛评估量表和新的疼痛干预指南,结合我国现况设计出一套术后疼痛调查表,对湖南三大省级医院患者的术后疼痛现况进行调查分析.结果 调查显示,82.8%的患者在术后第3天疼痛已降至轻度或消失;51.6%的患者术后疼痛未得到任何处理,14.9%的患者即使向医务人员报告了疼痛也未得到及时或有效的处理;20.2%的患者对疼痛治疗不满意.51.6%的患者认为并非所有的疼痛都需治疗,70.2%的患者在中重度疼痛时才报告;72.6%的患者对吗啡一无所知,18.5%表示坚决不用.结论 湖南三大省级医院对术后疼痛的处理能够使大部分患者的疼痛得以缓解,但医务人员对术后疼痛的重视不够,疼痛处理尚未规范化.同时,患者对术后疼痛及止痛药的认识存在一定误区.为了提高术后疼痛控制水平,建议加强对医务人员、患者及其家属的术后疼痛宣教.     

胃痛模型的建立及内脏痛的测定

通过特殊胃管导人少量甲醛导致胃黏膜急性化学损伤致内脏痛。参照躯体痛的测量法，采用电刺激和热测痛法测定内脏痛时的痛阈改变。通过内脏痛阈的测定，其痛阈降低改变高峰时间为1～2h，观察痛阈的变化规律，可基本反映胃痛和胃黏膜损伤的情况。     

心理恐惧对止血带加压性疼痛刺激的预测

目的：研究止血带加压性疼痛对心率（heart rate,HR）、血压（blood pressure,BP）的影响以及实验前受试者心理状况对疼痛反应的预测性。方法受试者为15名健康年轻成年男性。实验前让受试者填写知情同意书,填写6项心理学量表,以便衡量受试者的心理状况。记录其实验前心率与血压。然后进行3次左上臂（非利手边）止血带加压,连续记录受试者疼痛程度（pain intensity,PI）和不适程度（ pain distress,PD）,加压速度为10 mmHg/ s（1 mmHg =0.133 kPa）。同时记录各次加压前的疼痛阈值（pain threshold,PT）及每次加压刺激后的心率和血压。结果1）受试者实验前的恐惧量表测量的结果在正常范围内,与其对应的各次加压性疼痛的疼痛阈值变化之间呈负相关（r1=-0.58,P=0.02）。2）疼痛刺激时,心率会随之增加（P〈0.03）。3）受试者经每次止血带加压性疼痛刺激,疼痛程度和不适程度都会逐渐升高。结论1）恐惧评分可以预测止血带加压性的疼痛阈值。2）疼痛刺激能增加心率。     

屈反射与痛阈量化测定

目的对人的痛阈进行客观量化测定。方法利用人类感痛性屈曲反射（ＮＦＲ）阈值与痛阈的密切关系，应用电子刺激系统与肌电记录系统建立ＮＦＲ痛阈测定法，对３２名正常人进行主观痛阈、ＲⅡ及ＲⅢ反射阈的测定。结果正常人的ＲⅡ反射阈为５．５２±０．７２Ｖ，主观痛阈为６．７２±１．１６Ｖ，ＲⅢ反射阈为７．３４±１．２１Ｖ。在痛阈与ＲⅢ反射阈之间存在密切相关关系（ｒ＝０．９２９８）。结论可用ＲⅢ反射阈来客观反映主观痛阈，使疼痛的研究具有量化指标。     

中药口服联合外用治疗老年顽固性腰腿痛200例临床分析

目的: 探讨中药口服联合外用治疗老年顽固性腰腿痛的临床疗效。方法: 200例老年顽固性腰腿痛患者随机均分为2组,分别采用中药口服加外用(联用组)和口服腰腿痛丸(对照组)进行治疗。分析2组患者视觉模拟评分法(VAS)、腰椎功能障碍指数(ODI)评分和综合疗效。结果: 所有患者获得半年随访。联用组患者VAS评分和ODI评分低于对照组(P < 0.05),有效率则显著高于对照组(P < 0.01)。结论: 中药口服联合外用治疗老年顽固性腰腿痛能够获得良好的效果。     

肢体与腰背部封闭后反应性疼痛的差异及原因分析

目的　分析肢体与腰背部疼痛首次封闭后反应性疼痛的差异及原因。方法　将我院 6 8例患者按疼痛部位分为两组 :肢体痛组 36例 ,腰背痛组 32例 ,均用 2 %普鲁卡因 1～ 5ml加泼尼松龙 2 5～ 5 0mg行封闭治疗 ,观察两组封闭后首次反应性疼痛。结果　肢体痛组反应性疼痛的发生率为 77 78% ,腰背痛组为 2 5 0 0 % ,两组间差别有显著性意义 (P <0 0 1) ;两组反应性疼痛出现的时间、程度及持续时间间的差别均有显著性意义 (P <0 0 1)。结论　两组反应性疼痛的发生率、出现的时间、程度及持续时间均存在差异 ,其原因可能与四肢用药处组织较致密等因素有关     

慢性胰腺炎疼痛机制研究进展

慢性胰腺炎导致的顽固性胰腺疼痛往往很难利用现有临床疗法有效解决.人们对这种疼痛的机制尚不清楚,虽然导管和实质压力增加是引起胰腺炎疼痛的主要原因,但充足的证据表明神经病理性疼痛也是很重要的原因之一.此外,最近的研究证实脊髓以上和较高的大脑中枢在胰腺炎疼痛维持中起到重要作用.本文重点阐述了对慢性胰腺炎疼痛产生和维持起作用的外周及中枢发病机制.     

星形胶质细胞在大鼠选择性结扎镜像痛模型脊髓中的激活和意义

目的：观察星形胶质细胞在大鼠选择性结扎镜像痛模型脊髓中的激活情况。方法：实验组选择性结扎（SNL）镜像痛模型大鼠20只,对照组SNL非镜像痛模型大鼠20只,取第4~5腰椎段脊髓做石蜡切片,免疫荧光组织化学标记胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果：实验组非手术侧（镜像痛）脊髓背角GFAP免疫阳性细胞数量增多,平均荧光强度增高,与手术侧比较差异无统计学意义（P>0.05）;但与对照组非手术侧比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：在神经病理性疼痛镜像痛中,镜像侧脊髓背角星形胶质细胞活化并参与了镜像痛的形成和维持。     

脑源性神经营养因子-B型酪氨酸激酶受体通路在大鼠切口痛机制中的作用

目的:观察鞘内注射B型酪氨酸激酶受体(TrkB)抑制剂K252a对切口痛大鼠疼痛的影响,以了解脑源性神经营养因子(BDNF)-TrkB通路在切口痛机制中的作用.方法:27只成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为切口痛(I)组、K252a+切口痛(K+I)组和二甲基亚砜(DMSO)+切口痛(D+I)组.建立大鼠切口痛模型.K+I组和D+I组分别于切口痛模型制备前30 min鞘内注射K252a 10 μL+磷酸盐缓冲液(PBS)10μL和0.Ol% DMSO 10 μL+PBS 10 μL,并用PBS 10 μL冲管,I组接受同样的处理但鞘内不予任何药物.分别于术前((0 d)和术后1、3、5、7 d采用von Frey纤毛法检测大鼠的机械痛阈值,采用热辐射法检测大鼠热痛阈值的变化.结果I,D+I和K+I组术后1、3d时的机械痛阈值均显著低于同组Od时(P值均<0.01).术后1、3 d时,K+I组与I组、D+I组机械痛阈值的差异均有统计学意义(P值均<0.05),1组术后1、3、5 d时及D+I组术后1、3 d时的热痛阈值均显著低于同组0d时(P值均<0.01).术后1d时,K+I组与I组、D+I组热痛阈值的差异均有统计学意义(P值均<0.05).结论:鞘内注射K252a可以减轻切口痛引起的大鼠疼痛行为学改变,BDNF-TrkB通路可能参与大鼠切口痛的形成机制.     

《诸病源候论》疼痛类词语例释

《诸病源候论》不仅具有极高的医学价值,而且用词丰富,尤其对疼痛这一症状的描述,更是形象生动。试从语言角度对书中容易产生歧义的表示疼痛证候的部分语词进行考释,表示疼痛义的有苦痛、烦痛、楚痛等,表示酸痛义的有盩疼、盩削等,表示灼痛义的有烊、痛等,表示剧痛义的有切痛、弦痛等,表示刺痛义的有策策痛、恻恻痛等词。解释其词义,分析其异同,为中古汉语词汇研究及中医临床辨证提供资料和借鉴。