分泌抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用人甲胎蛋白(AFP)免疫BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗人AFP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株(G2和G10)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液和小鼠腹水的特异性抗体效价,分别为2～4×10~(-3)和10~(-6)～10~(-7)。两株杂交瘤细胞染色体的众数为104～108条。经体外连续传代及冻存半年复苏后,仍具有分泌抗体能力,说明其性能稳定。两株所分泌的抗体,均属IgGl型。     

抗重组人乳腺珠蛋白单克隆抗体的制备及其特异性鉴定

目的通过杂交瘤技术获得特异性抗hMAM单克隆抗体,为进一步研制基于hMAM的乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法以纯化的重组蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,运用杂交瘤技术制备、间接ELISA法及免疫组化法筛选出能稳定分泌特异性抗hMAM的单克隆抗体细胞株。结果通过杂交瘤技术获得了2株能分泌特异性抗hMAM单克隆抗体的杂交瘤细胞株hMAM-A2及hMAM-B7,其分泌的单克隆抗体亚类均属于IgG1,Western blotting结果显示2株细胞分泌的单克隆抗体特异性强能与34kDa处的hMAM抗原形成单一的蛋白质显色条带,免疫组化结果显示其仅与乳腺癌组织呈阳性反应,与其他肿瘤组织不发生交叉反应。结论利用鼠-鼠杂交瘤技术成功的制备了2株稳定分泌高效价、高特异性抗hMAM的杂交瘤细胞株。     

分泌载脂蛋白AII单克隆抗体杂交瘤的建立

以人血清载脂蛋白AⅡ为抗原,免疫BALB/C小鼠,将脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,经HAT选择性培养,特异性筛选及克隆化,获得1-C1、2-C2两株分泌抗人血清载脂蛋白AⅡ单克隆抗体杂交瘤细胞株。免疫双扩散确定它们分泌抗体的亚型均为IgG1;吸收试验及ELISA交叉试验表明单克隆抗体的特异性;ELISA测定其培养上清中抗体效价都为1:100,诱生腹水效价分别为1:10000和1:5000;两株杂交瘤细胞染色体均数分别为96.34±6.06、95.01±5.38;采用Protein A Sepharose 4B层析柱纯化了1-C1杂交瘤细胞培养上清中的单克隆抗体。     

轮状病毒单克隆抗体的研究和鉴定

运用杂交瘤技术,制备出7株分泌抗人轮状病毒短型S_2株单克隆抗体的杂交瘤,其中6株分泌IgG_(2a),1株分泌IgG_(2b)抗体。7株杂交瘤培养上清的免疫荧光抗体(IFA)滴度为1:32～256,腹水IFA滴度为1:8000～25600。双夹心ELISA腹水抗体滴度达10~(-4)～10~(-6)。7株McAb均与HSV、CMV、RSV、ADV等其它常见病毒无交叉反应。7株McAb均能与HRV长型Wa株反应,滴度为10~(-3)～10~(-6)。将其中二株或数株McAb混合后用ELISA检测其相应的OD值较每一单株为高,但相加指数(AI)值均在10%左右。结果表明,7株McAb均属RV群特异性抗体,但各自作用的抗原决定簇可能稍有差异。     

分泌抗—HBe单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＨＢｅＡｇ阳性血清纯化ＨＢｅＡｇ，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，反复克隆化培养，最终获得４株分泌抗－ＨＢｅ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的ＥＬ／ＩＳＡ效价分别为１：８００和１：５００，诱生同属小鼠腹水中的ＥＬＩＳＡ效价均为１：１０００，特异性试验表明，两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体，小鼠Ｉｇ亚类鉴定，两株抗体均为ＩｇＧ１亚类球蛋白。细胞染色体数为９５～１１０条。结果证明，此细胞株为特异性分泌抗—Ｈｋｅ单克隆抗体细胞株。     

分泌抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

以医用尿激酶免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Fo和Ns-1骨髓瘤细胞进行3次融合,筛选到6株分泌抗尿激酶单克隆抗体的杂立瘤细胞系,分别为IUB_5、IUD_2、3UA_2、3UD_12、3UG_2和3UH_7细胞株,对其中IUB和IUD_2两个细胞株进行克隆化培养、冷冻、储存、复苏传代和染色体分析等处理,结果显示IUB_5和IUD_2确系BALB/C鼠脾细胞与FO骨髓瘤细胞融合后获得的单个细胞的克隆。根据免疫双扩散法和ELISA方法鉴定,它属IgG_1和IgG_(2(?));其培养上清液的ELISA效价为10~(-2)～10~(-3),注入BALB/C×C_(57)第一代杂交鼠腹腔诱生的腹水抗体效价达10~(-6)～10~(-7)。经高纯度的低分子量尿激酶检测后,确定是抗高分子量尿激酶的单克隆抗体。     

人OX40单克隆抗体的制备、纯化及初步鉴定

目的 应用杂交瘤技术,制备鼠抗人OX40单克隆抗体.方法 以本室纯化的OX40胞外段融合蛋白免疫6～8周龄的雌性BalB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞阳性克隆.用杂交瘤细胞接种小鼠腹腔诱生腹水,腹水经饱和硫酸铵纯化沉淀后用间接ELISA法测定抗体的Ig类别.SDS-PAGE分析抗体的纯化程度,用免疫组化技术鉴定单克隆抗体与表达有OX40分子的组织及细胞特异性结合的情况.结果 获得1株能稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞,细胞株诱生的小鼠腹水纯化后抗体纯度较高,Ig类别为IgG,蛋白浓度为6.129g/L.制备的单抗经淋巴细胞免疫组化及炎性淋巴组织免疫组化技术初步鉴定结果表明,该抗体与OX40单克隆抗体标准品制剂相比具有类同的特异性.结论 成功获得能稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备的单克隆抗体具有较高的纯度和活性.     

抗重组人白细胞介素12单克隆抗体的制备及其生物学特性

以纯化的重组人白细胞介素12（rhIL-12）蛋白为抗原,制备具有生物活性的rhIL-12单克隆抗体（McAb）,并对其特性进行研究鉴定,为肿瘤及免疫相关性疾病的诊断与治疗提供具有实用价值的研究工具。方法： 以纯化的rhIL-12p70免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术,用间接ELISA法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞及多次克隆化,培养制备杂交瘤细胞系,用clutathione sepharose 4B进行纯化。采用间接ELISA及Western blotting等方法对McAb的Ig亚类（型）腹水效价及特异性进行鉴定。结果：建立了3株持续分泌rhIL-12p70　McAb的杂交瘤细胞株,3株细胞染色体数目均为100条左右,证实为杂交瘤细胞,所分泌的抗体为2株IgG1亚类及1株IgG2a亚类,轻链属k型,小鼠腹水效价测定分别为1∶5.9×106、1∶2.9×10⁷、1∶3.6×10⁷,亲和力依次为EM5>EM6>EV9。结论：成功地制备了3株能稳定分泌抗rhIL-12p70的杂交瘤细胞株,产生的McAb特异性好,亲和力高。     

EB病毒GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备EB病毒GST—Rta150融合蛋白的单克隆抗体并鉴定其特性．方法取经GST-Rta150融合蛋白免疫小鼠的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞常规融合,依次进行阳性杂交瘤细胞株的筛选及亚克隆,接种杂交瘤细胞至小鼠腹腔,收集腹水并纯化。制备的单克隆抗体以琼脂双向扩散法鉴定抗体类及亚类．间接ELISA法测定抗体的效价,Western-blot检测抗体的特异性。结果获得一株稳定分泌抗GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1A9,细胞培养上清效价为10^-3,腹水效价为10^-5,纯化的抗体效价为10^-6．经鉴定GST-Rta150融合蛋白单克隆抗体的亚类为IgGl。Western-blot结果显示此单克隆抗体能特异结合GST-Rta150融合蛋白．将杂交瘤细胞株在液氮中冻存3个月后复苏,其分泌的单克隆抗体效价不变。结论通过上述方法制备出来的单克隆抗体特异性强,稳定性好,为研究EB病毒立即早期基因产物Rta蛋白以及EB病毒相关疾病的诊断和治疗奠定了基础。     

高尔基体蛋白73单克隆抗体的制备和鉴定

目的探讨高尔基体蛋白73(GP73)鼠源单克隆抗体的制备方法并进行鉴定。方法用GP73重组抗原蛋白免疫5只小鼠获得血清抗体,免疫小鼠脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合,经过筛选后选择GP73抗体阳性杂交瘤细胞进行克隆化培养,通过腹水制备获得高特异性和高效价的GP73单克隆抗体(单抗)。结果成功筛选出11株能稳定分泌特异性GP73单抗的杂交瘤细胞株,经多次复苏传代仍能稳定分泌特异性强、效价高的抗体。11株单抗均能结合天然状态下的GP73蛋白,与无关蛋白均无交叉反应,提示有较强的特异性。应用筛选出的配对GP73单抗可检测出浓度为1ng/ml的GP73基因工程表达抗原。结论制备的GP73杂交瘤细胞株分泌的抗体对GP73蛋白具有特异亲和性,并且有较高效价,为GP73蛋白诊断试剂的研制提供了关键技术基础。     

肿胀技术在美容整形外科的应用

目的 探讨肿胀技术在美容整形外科的临床应用价值。方法 应用肿胀技术142例，其中脂肪抽吸术92例；体表瘢痕切除术2l例；扩张器植入术14例；色素痣切除术8例；隆胸术5例；巨乳缩小术2例。完全采用肿胀技术麻醉l26例；在全麻下应用肿胀技术14例。结果 肿胀技术具有易于进行组织分离、减少组织损伤、减少术中出血、增强麻醉效果并发症少的特点。结论 肿胀技术具有创伤轻、出血小、安全有效等优点，可使吸脂术达到传统抽吸法难以达到的完美效果，并可广泛应用于体表美容整形外科。     

数字医疗应用技术的产生与发展探究

阐述了数字医疗应用技术产生和形成的起因,研究认为：数字医疗应用技术是以数字技术为核心,信息技术、计算机技术、通信技术、电子技术、人工智能和虚拟现实等技术为基础,全方位与医学科学技术相结合,形成了以数字化为特征的新型诊疗技术。数字医疗应用技术按照用途可分为五大类,即数字医疗检测技术、数字医疗诊断技术、数字医疗治疗技术、数字医疗监控技术和数字医疗康复技术等。     

Microelectrode-guided Technique for Treatment of Parkinson‘s Diseases

The microelectrode- guided technique is a newtechnique introduced in 90 s of lastcentury,whichcan allow the operational accuracy much higherthan that the traditional operative localization did.We began to use the techniques from 2 0 0 0 andhave achieved good results in our work.Presentedin this report are the preliminary results.1　 CLINICAL DATA AND METHODS1 .1　 General DataThe patients included1 8men and9women.Their mean age was 6 2 years old,with a range of43— 75 .The mean durat…     

双环法、Lejour 法与垂直双蒂法治疗乳房下垂的疗效比较

目的 探究双环法、Lejour 法与垂直双蒂法在乳房下垂治疗中的效果。方法 选取2015 年3 月- 2017 年2 月在武汉科技大学附属天佑医院诊治的67 例乳房下垂患者为研究对象,依据治疗方案不同,将其纳 入双环组23 例,Lejour 组26 例,垂直双蒂组18 例,比较3 组患者手术前后的临床资料。结果 Lejour 组温哥 华瘢痕评分低于双环组、垂直双蒂组（P <0.05）。Lejour 组满意度高于双环组、垂直双蒂组（P <0.05）;3 组 并发症发生率比较,差异无统计学意义（P >0.05）。末次随访时3 组乳房形态与术前相比效果明显,且Lejour 组与双环组、垂直双蒂组比较,差异有统计学意义（P <0.05）。末次随访时,3 组乳头乳晕感觉与术前比较差 异无统计学意义（P >0.05）,组间比较差异无统计学意义（P >0.05）。结论 双环法、Lejour 法与垂直双蒂法 治疗乳房下垂,均能改善乳房症状,达到乳房塑形效果,且患者较满意,术后并发症发生率低,但Lejour 法治 疗后乳房形态更好,瘢痕更小,且依旧有泌乳功能。     

社区人群健康诊断方法探讨

辨证地讨论了社区人群健康诊断所采用的定性和定量方法的用途、优缺点、实施方法等，目的是为社区卫生工作者提供参考依据。主要包括专题小组讨论，参与性观察，德尔菲法，个体访谈；普查与抽样调查，典型调查，捕获-标记-再捕获法。     

跳跃性技术对医疗设备装备的影响

为探讨现代医院的医疗设备装备策略，文章介绍了跳跃性技术基本概念，并比较了持续性技术与跳跃性技术的特点，以及跳跃性技术的演化过程；分析了跳跃性技术对医疗设备装备的影响，提出了应用跳跃性技术装备医疗设备的策略。     

A COMPARATIVE STUDY OF REPAIR OF INGUINAL HERNIAS BY SHOULDICE TECHNIQUE VIS-A-VIS BASSINIS TECHNIQUE

A comparative study of repair of inguinal hernias by Shouldice technique (ST) vis-a-vis Bassinis technique (BT) was conducted on 100 patients who presented with inguinal hernia in the OPD services of our hospital. The patients were worked up and alternatively distributed to undergo repair by ST (n=50) or BT (n=50). Repair by ST required longer operating time (Avg 95 min vs 80 min), but involved lesser hospitalization (4.0 days vs 4.5 days), lesser complication rate (2 vs 4), lesser recurrence rate (0 vs 2) and higher rate of satisfaction. The study confirms the advantages of Shouldice repair in the treatment of inguinal hernia.     

Flange technique的开发及临床应用

目的解决下颌牙槽嵴低平,吸收严重,修复难度高的无牙(牙合)患者的义齿修复,确保义齿在口腔内的安定性.方法采用Flange technique专用蜡,粘附于下颌基托上,戴入患者口腔内,使其作口腔机能性运动,形成义齿的空间,并在此空间内排列人工牙,然后再作牙龈部的机能性修整.结果完成的全口义齿能处于口腔肌压的等压区域内,减少了肌压脱离作用,增强了义齿的安定性,有效地恢复患者的咀嚼、吞咽、语言及审美等各项功能.结论应用Flange technique作全口义齿的修复,具有很高的临床应用价值.     

小梁切除联合技术的应用及进展

虽然小梁切除术是治疗闭角型青光眼的主要手段,但仍有3%的手术失败率,失败原因主要是滤过口处成纤维细胞增殖以及瘢痕形成而使滤过口阻塞所致.因此,建立改良的标准小梁切除术并结合调节技术(小梁切除联合技术)减少手术失败是青光眼滤过性手术的发展趋势.本文对小梁切除术联合药物技术、非药物技术及复合式小梁切除术进行综述.     

移动消融技术在微波消融治疗甲状腺良性结节中的应用价值

目的研究移动消融技术在超声引导下微波消融治疗甲状腺良性结节中的应用价值。方法选取2010年11月-2013年12月在我科行超声引导下微波消融治疗的甲状腺良性结节患者61例共72个结节,结节平均直径3．0±1．4cm。按照消融方式分为固定针消融组（n=39）和移动消融组（n=33）,比较两组消融手术参数、消融范围及缩小率的差异。结果移动消融组消融单位体积用时较固定消融组短（P〈0．01）,完全消融率高于固定消融组（P=0．044）。随访1～12个月移动消融组结节各阶段体积缩小率均高于固定消融组,其中3～6个月时差异有统计学意义（P=0．041）。结论移动消融技术疗效确切,见效快,较固定消融技术对甲状腺良性病变治疗的效率高,且消融范围更适形、更完全。