整合素与胚胎着床

整合素是一类细胞粘附分子受体，有粘附和信号传递两大基本功能。现已发现，整合素在子宫内膜和胚胎上均有表达，并受雌、孕激素等多种因素的调节。它参与细胞的增殖、分化、粘附和迁移等过程，在胚胎着床中起着重要的作用。其中，整合素亚单位α_vβ_3和α_4β_1可作为子宫内膜容受性的标志，并参与着床过程。此外，整合素在输卵管粘膜也有表达，可能为研究胚胎异位着床的分子机制提供一定的理论依据。     

整合素αvβ3和骨桥蛋白在人子宫内膜容受性的建立和胚胎着床中作用机制研究进展

整合素αvβ3和骨桥蛋白(OPN)是子宫内膜容受性的重要生物学标志。它们在人子宫内膜"植入窗"期呈特异性表达。整合素αvβ3和OPN表达异常使子宫内膜容受性受损,与不孕症的发生密切相关,且二者的表达具有卵巢性激素依赖性并受多种细胞因子和生长因子调控。现对整合素αvβ3和OPN在人子宫内膜容受性的建立及在胚胎着床过程中的表达、作用及其调节因素的研究进展作一综述。     

子宫内膜整合素蛋白β_3亚基在妊娠中的变化

为探讨整合素蛋白 β3亚基在胚胎着床期的作用 ,本实验应用特异性抗整合素蛋白 β3抗体 ,采用免疫和 Western印迹法 ,二氨基联苯胺显色 ,VDS扫描等技术 ,检测妊娠 d3、5、7、1 5小鼠子宫内膜及人分泌期子宫内膜和妊娠早期中整合素β3亚基的表达量。结果 :小鼠子宫内膜整合素蛋白 β3亚基表达量在妊娠 d5明显上升 ,至 d7时达高峰 (与对照组比较 ,P<0 .0 1 )。此后下降 ,d1 5时 ,整合素蛋白 β3的表达量与对照组相比 ,无明显差异。人蜕膜组织和分泌期子宫内膜均有整合素蛋白β3的表达。蜕膜整合素蛋白β3的表达量与胚囊大小无关 ,但比分泌期子宫内膜高 4～ 5倍 (P<0 .0 0 0 1 )。这些结果提示 :整合蛋白 β3亚基在子宫内膜中的特异性变化 ,可能启动、促进胚胎的粘附和着床 ,在着床过程中起重要作用。     

LIF及其抗体对小鼠胚胎着床影响的体外研究

目的 :研究外源性白血病抑制因子 (LIF)及其抗体对小鼠胚胎着床的影响。方法 :将妊娠 4d的小鼠胚胎种植于已建立的子宫内膜体外模型上 ,观察不同浓度的LIF及其抗体对小鼠胚胎的粘附、植入及扩展情况。并用RT PCR法测定子宫内膜上皮细胞整合素β3的变化。结果 :不同浓度的LIF促进了胚胎的粘附 (P <0 .0 5 ) ,胚胎的扩展率降低。加入LIF抗体 (5 ,1 0 μg/ml)降低了胚胎的粘附率 (P <0 .0 5 ) ,同时LIF对整合素β3的表达有明显的促进作用 (P <0 .0 1 ) ,加入抗体后整合素β3的表达降低。结论 :LIF可能通过上调整合素β3的表达促进胚胎的粘附和植入     

肿瘤坏死因子α对子宫内膜细胞基质金属蛋白酶9及其组织抑制物3蛋白表达的调控

基质金属蛋白酶（MMP）及其组织抑制物（TIMP）,是调控细胞外基质降解的主要酶类之一,可能是参与胚胎着床过程中细胞外基质降解的重要调节因素.有研究表明,肿瘤坏死因子α（TNF-α）对胚胎着床有重要的调节作用,但是否能调控子宫内膜细胞MMP及TIMP蛋白的表达,目前尚不明确.本研究通过检测不同浓度TNF-α作用于离体的子宫内膜后,子宫内膜细胞MMP-9及TIMP-3蛋白表达的变化,探讨在胚胎着床过程中,TNF-α调控MMP及TIMP蛋白作用的可能因素.     

整合素与生殖

整合素主要介导细胞与细胞外基质的粘附，参与一系列重要生理和病理过程。部分整合素在人类子宫内膜腺上皮的表达呈周期性变化，并与子宫内膜“植入窗”的开放同步，其表达的异常可能干扰子宫内膜的容受性导致部分患者不孕。     

整合素β3在子宫内膜和早孕蜕膜中的表达及其与不孕的关系

目的探讨整合素β３在子宫内膜中的表达规律及其与原发性原因不明性不孕症的关系。方法运用特异性单克隆抗体，采用免疫组化技术，对５６份分别取自正常月经周期第６～２７天的内膜、妊娠４６～６７天的蜕膜及９例原发性原因不明性不孕症患者黄体中期的子宫内膜，进行了整合素β３表达的检测。结果整合素β３表达于黄体中期的子宫内膜（即正常月经周期第１９天以后）和早孕期的子宫蜕膜中，且早孕期整合素β３的表达显著增强。与正常妇女相比，原发性原因不明性不孕症患者子宫内膜中整合素β３表达缺失。结论整合素β３参与子宫内膜的蜕膜化及胚泡着床过程，可作为评价子宫内膜容受性的良好指标。整合素β３表达的异常，可能是导致原因不明性不孕的重要因素     

骨桥蛋白及其受体与生殖

骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型糖基化磷蛋白,广泛存在于各种组织和体液中,具有多种生物学活性,整合素αVβ3是其主要受体。OPN在子宫内膜和滋养细胞均有表达,参与生殖的全过程包括受精、胚泡着床及胎盘形成,并对子宫和胎盘的连接起着重要作用。     

子宫内膜整合素蛋白β3亚基在妊娠中的变化

为探讨整全素蛋白β３亚基在胚胎着床期的作用，本实验应用特异性抗整合素蛋白ヂ３抗体，采用免疫和Ｗｅｓｔｅｒｎ即迹法，二氢基联苯胺显色，ＶＤＳ扫描等技术，检测妊娠ｄ３、５、７、１５小鼠子宫内膜及人分泌期子宫内膜和妊娠早期中整合素β３亚基的表达量。结果：小鼠子宫内膜整合素蛋白Ψ３亚基表达量在妊娠ｄ５明显上升，至ｄ廛达高峰（与对照组比较，Ｐ〈０．０１）。此后下降，ｄ１５时，整合素蛋白β３的表达量与对照级相     

促排卵治疗对多囊卵巢综合征患者子宫内膜整合素αv、β3表达的影响

目的　了解促排卵药物对多囊卵巢综合征 (PCOS)患者黄体中期子宫内膜整合素αv、β3表达的影响。方法　应用单克隆抗体 ,采用免疫组织化学技术对 2 2例正常妇女、40例无排卵PCOS患者促排卵治疗后黄体中期的子宫内膜整合素αv、β3 进行测定。结果　正常妇女子宫内膜整合素αv、β3 表达在“着床窗口期”呈现强阳性 ;而氯米芬 (CC)及绝经期促性腺激素 (hMG)抑制αv、β3 的表达 ,使其表达呈弱阳性 ;而促性腺激素释放激素激动剂对整合素αv、β3 的表达无影响。结论　CC、CC/hMG促排卵周期的黄体中期子宫内膜容受性下降 ,整合素αv、β3 表达下降或缺失。     

HOXA10对围着床期子宫内膜接受性的调节

同源框基因(HOX)是属于多基因家族的转录调节基因,其重要功能是调节胚胎发育,近年研究表明,HOXA10与胚胎着床密切相关。正常月经周期中,HOXA10在人类子宫腺细胞和基质细胞均有表达,并且在着床窗口期表达增加。母体HOXA10的正常表达是胚胎着床的条件。HOXA10可能通过直接调节整合素β3的表达、调节前列腺素(PG)系统功能及刺激基质细胞增生等机制,调节子宫内膜接受性。HOXA10受卵巢激素和松弛素调节,HB-EGF和LIF对HOXA10的表达也有调节作用。     

经后增殖方和促黄体方能诱导超促排卵小鼠子宫内膜中整合素β_3的表达

目的:观察益气血补肝肾方对控制性超促排卵小鼠子宫内膜组织中整合素β3表达的影响。方法:将实验小鼠随机分为COH模型组、中药治疗组和对照组。进入实验后,中药治疗组每日给予中药灌胃,其余小鼠以等量生理盐水代替。COH模型组和中药治疗组给予GnRHa降调节,PMSG+hCG促排。每组分别于孕第1日(pd1)、pd2、pd4、pd5、pd6处死10只动物,取子宫内膜采用实时荧光定量RT-PCR和免疫印迹的方法分别在mRNA和蛋白水平定量检测子宫内膜整合素β3表达情况。于妊娠第8日(pd 8)剖腹取各组小鼠子宫(每组10只),观察胚泡着床情况。结果:整合素β3在各组小鼠子宫内膜中呈周期性的表达,从孕第1日(pd 1)开始整合素β3表达逐渐增强,pd 4显著增加,pd 6表达开始减弱。与COH模型组相比,中药治疗组小鼠子宫内膜中整合素β3表达增强,两者相比有统计学意义(P<0.05);整合素β3在中药治疗组和对照组中的表达水平相近,两者相比无统计学意义(P>0.05)。COH模型组pd 8的平均胚胎着床数与中药治疗组和对照组相比,明显减少(P<0.05),而中药治疗组与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论:益气血补肝肾方可诱导小鼠子宫内膜中整合素β3的表达,并提高超促排卵小鼠的胚胎着床率,提示该方可能具有改善子宫内膜容受性的作用。     

自然及促排卵周期子宫内膜整合素α4β1的表达

目的 了解氯米芬（CC）、绝经期促性腺激素（hMG）对黄体中期子宫内膜整合素α4β1表达的影响。方法 应用单克隆抗体,采用免疫组织化学技术检测48例正常妇女自然周期以及48例正常妇女、30例多囊卵巢综合征患者应用CC／绒毛膜促性腺激素（hCG）及CC／hMG/hCG方案促卵治疗后黄体中期子宫内膜整合素α4β1的表达。结果 子宫内膜整合素α4β1在正常妇女自然周期着床窗口期呈现强阳性表达,而CC、hMG抑制整合率α4β1的表达,两者比较,差异有极显著性（P＜0．01）;妊娠者较妊娠者整合素α4β1表达强度高。结论 促排卵周期黄体中期整合素α4β1表达下降或缺失,子宫内膜容受性下降,妊娠率降低。     

子宫内膜异位症中整合素表达的研究

目的 :研究整合素α4、α5、β1亚单位及αvβ3在子宫内膜异位症中的表达。 方法 :采用免疫组化法分析子宫内膜异位症 2 7例的在位内膜和异位内膜整合素α4、α5、β1及αvβ3的表达 ,并选择同期正常育龄 13例子宫内膜进行对照。 结果 :整合素α4、α5、β1及αvβ3在正常子宫内膜以及内异症患者的在位内膜和异位内膜腺上皮均有不同程度表达 ,α5在内异症中表达显著低于正常子宫内膜 ;而αvβ3在血管内皮细胞中有极显著性的阳性表达 ,以增生期异位灶为甚。结论 :推测内异症中整合素α5的低表达和血管内皮细胞中αvβ3的高表达可能与内异症发病有关。     

子宫内膜整合素β_3和细胞外基质的变化及与不孕症的关系

对生育组３１例,原因不明不孕组３４例采用免疫组化方法检测整合素β３及细胞外基质纤维粘连蛋白（ＦＮ）、层粘连蛋白（ＬＮ）、Ⅳ型胶原纤维（ＣＬ）在分泌期子宫内膜上的表达,探讨其变化规律及在调控妊娠中的作用。结果显示整合素β３在生育组腺上皮细胞分泌中期出现,持续至分泌晚期,而不孕组分泌期无表达;细胞外基质在生育组分泌中期呈强表达,早期次之,晚期较弱;不孕组在分泌各期表达均高于生育组。结论认为整合素β３ＦＮ、ＬＮ和Ⅳ型ＣＬ在分泌期子宫内膜上呈周期性变化参与子宫内膜的功能变化及胚泡的着床环节,其异常表达可致着床失败而不孕。     

促排卵治疗对多囊卵巢综合征患者子宫内膜整合素αv,β3表？…

目的 了解促排卵药物对多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）患者黄体中期子宫内膜整合素αｖ、β３表达的影响。方法 应用单克隆抗体,采用免疫组织化学技术对２２例正常妇女、４０例无排卵ＰＣＯＳ患者促排卵治疗后黄体中期的子宫内膜整合素αｖ、β３进行测定。结果正常妇女子宫内膜整合素αｖ、β３表达在“着床窗口期”呈现强阳性;而氯米芬（ＣＣ）及绝经期促性腺激素（ｈＭＧ）抑制αｖ、βｂ的表达,使其表达呈弱阳性;而促性腺素释     

TRAIL在小鼠胚胎着床过程中子宫内膜的表达

目的:检测TRAIL在小鼠胚胎着床过程中子宫内膜的表达,探讨它在蜕膜细胞凋亡中的作 用。方法:采用RT-PCR及免疫组化技术检测妊娠d 1-8小鼠子宫组织TRAILmRNA及蛋白的表 达情况。结果:妊娠d 1-8的小鼠子宫组织均有TRAIL mRNA的表达,且着床期间的表达较着床前 明显增加(P<0．05)。妊娠d 1-3,小鼠子宫内膜无TRAIL蛋白表达;妊娠d 4,TRAIL表达在小鼠胚 胎定位、黏附点的子宫内膜腔上皮细胞;妊娠d 5-6,TRAIL定位于胚胎着床点附近的蜕膜细胞中; 妊娠d 7-8,TRAIL表达在与子宫蜕膜邻近的胚胎滋养层细胞中。结论:在小鼠胚胎着床过程中, TRAIL诱导子宫内膜腔上皮细胞凋亡可能是胚胎跨越上皮屏障的重要机制之一,且TRAIL诱导的 蜕膜细胞和胚胎滋养层细胞的凋亡在滋养层细胞对子宫内膜的适度侵入过程中起重要作用。     

不同条件下小鼠围着床期子宫内膜整合素α_v和Le~y寡糖的表达

目的:探讨促排卵药、胚胎本身及孕后激素等条件对小鼠子宫内膜整合素av和Ley寡糖的表达及对着床窗开放的影响。方法:将成年雌鼠分为对照和实验两大组。对照组为自然受孕;实验组为用促排卵药后受孕,其中一部分为假孕,另一部分为事先行一侧输卵管结扎。各组分别于孕2-7 d取子宫标本2份,一份石蜡包埋行HE染色和免疫组化染色测定Ley寡糖,另一份于-80℃保存,冰冻切片行免疫组化染色测定整合素av。结果:①对照组于孕7 d,大部分小鼠子宫外观即见明显胚胎着床,显微镜下从孕5 d起出现子宫内膜间质的蜕膜反应,但实验组无1例有此变化。②整合素av在小鼠子宫内膜腺上皮细胞胞浆内表达。对照组的表达于孕4 d达高峰,而各实验组的表达高峰均推迟1-2 d,且表达水平较对照组明显减弱(P <0.05)。结扎侧和未结扎侧子宫内膜整合素av的表达高峰无明显差异。③Ley寡糖在小鼠着床期表达于子宫内膜腔上皮和腺上皮表面,其表达两组间无明显差异,不同妊娠天数之间的表达亦无明显差异。在对照组,于孕4 d开始Ley寡糖在子宫内膜间质有表达,孕6 d达高峰,而实验组未见一定的规律。结论:①小鼠子宫内膜腺上皮细胞胞浆内整合素av的表达与子宫内膜着床窗的开放一致。②促排卵药能抑制小鼠子宫内膜着床窗期整合素av的表达,延迟着床窗的开放;孕     

钙粘附蛋白与子宫内膜

钙粘附蛋白全称钙依赖的粘附分子家族（cadherin)，是一种单链跨膜糖蛋白，主要参与介导特定器官和组织同型细胞间的粘附。在月经周期不同阶段，钙粘附蛋白的表达量和类型不同，且受类固醇激素的调节。在胚泡着床过程中，不同类型的钙粘附蛋白分别在内膜上皮、间质及滋养细胞的表达，提示其在着床调节方面的重要作用。E－钙粘附蛋白结构、功能的缺陷与子宫内膜异位症发病的关系密切。     

子宫内膜异位症患者组织中骨桥蛋白及配体整合素仪αVβ3的表达及对血管生成的影响

目的检测子宫内膜异位症患者组织中骨桥蛋白（osteopontin，OPN）、整合素αVβ3、血管内皮生长因子（VEGF）的表达，探讨子宫内膜异位症的发病机制。方法选取因卵巢子宫内膜异位囊肿行手术治疗的56例患者为研究组，以单纯子宫肌瘤行子宫切除术患者21例为对照组，采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法（SP法）检测子宫内膜异位症患者异位内膜及在位内膜中OPN、整合素αVβ3和VEGF的表达，并分析其相关性。结果①异位内膜OPN的阳性表达率（73．21％）与在位内膜（70．00％）相似，与对照组（19．05％）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；②异位内膜整合素αVβ3的表达率（100．00％）与在位内膜（55．00％）及对照组（4．76％）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；③异位内膜VEGF的强阳性表达率（76．79%）与在位内膜（60．00％）及对照组（28．57％）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；④OPN、整合素αVβ3与VEGF在异位内膜组织的表达呈正相关（rs=0．596和0．568，P均〈0．01），OPN与整合素αVβ3呈正相关（rs=0．738，P〈0．01）。结论异位内膜细胞OPN、整合素αVβ3的高表达促进异位内膜的黏附和侵袭，并可能通过促血管生成，共同促进异位内膜的种植与生长，在子宫内膜异位症的发生发展中发挥重要作用。