Real-Time PCR及其在立克次体定量检测中的应用

立克次体病是由立克次体（Rickettsia）引起的严重威胁人类健康的人兽共患自然疫源性疾病。近年来,新的立克次体病原体不断被发现,立克次体病已成为世界关注的疾病,我国从病原学上已经证实了10种立克次体病的存在^[1]。立克次体病复杂多样,临床表现无特异性，易漏诊、误诊，通常实验室检测是诊断的主要依据。目前，Real—Time PCR（实时荧光定量PCR）技术已在病原学定量检测中得到良好的应用，本文将近年来该技术在立克次体中的定量检测研究进展进行综述。     

美国立克次体病的研究现状

立克次体病属人兽共患的自然疫源性疾病,在人类历史上,立克次体曾严重威胁人类的健康,目前该病在发达国家已基本得到了控制。然而,在发展中国家,特别是热带、亚热带某些国家,立克次体病仍然存在一定规模的流行。文章概述了美国当前立克次体病的最新研究情况,包括疫苗的研究、疾病的诊断分析、立克次体的流行病学情况等。     

立克次体病实验室检测技术研究进展

立克次体病是由立克次体引起的急性发热性疾病,早期表现为发热、头痛、虫咬溃疡、淋巴结肿大,晚期可因心、肝、肾等多脏器功能衰竭而死亡。实验室检测技术对防控立克次体病非常重要。目前,国内外立克次体病的检测技术很多,包括:血清学检测、病原学培养以及常规PCR、巢式PCR等多种分子生物学方法,现就立克次体相关实验检测技术研究进展进行综述。     

人感染立克次体致病研究现状

立克次体病是由人感染立克次体后引起的一系列如斑点热、斑疹伤寒、恙虫病、埃立克次体病、人粒细胞无形体病等急性发热性疾病,感染早期表现为发热、皮疹、头痛、肌肉酸痛、淋巴结肿大等,晚期可因心肌炎、脑炎、肺栓塞、静脉血栓形成、出血、休克、呼吸衰竭、肝肾衰竭和心力衰竭等严重并发症导致死亡。立克次体病随着交通运输、畜牧养殖、进出口贸易、旅游等产业的发展在全世界范围内广泛传播。检测技术随着分子生物学水平的发展,其灵敏度和特异度不断提高,治疗方案也不断被完善。为有效防控立克次体病的发生、发展和流行,保护人类的健康,本综述就人感染立克次体致病的流行病学调查、立克次体致病现状、临床和实验室诊断方法、治疗进展等进行归纳中介,以提高广大研究者对此类虫媒疾病的认识。     

立克次体病实验室诊断现状

立克次体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物，天然寄生在各种吸血节肢动物和昆虫体内。立克次体病是一类人兽共患自然疫源性疾病，人通过被感染立克次体的媒介昆虫叮咬或接触其粪便感染，该病多发生在热带与亚热带国家和地区，在历史上曾严重威胁人类健康，目前立克次体病已成为世界性关注的疾病。同发达国家一样，我国斑疹伤寒基本得到控制，然而地方性斑疹伤寒仍在持续流行，恙虫病疫区几乎漫延全国，世界范围包括我国在内的斑点热新种不断出现，一些非致病性的立克次体病原体不断被证实，尤其我国埃立克体及巴尔通体等新发传染病的各种流行病学资料、实验室数据足以提示我们提高实验室诊断能力是传染病预防控制中刻不容缓的任务。     

立克次体痘:3例报道和文献回顾

立克次体痘是一种罕见的立克次体病,好发于美国东部城市和世界其他地区,其临床特点是发热、焦痂和丘疹水疱性皮损。所有这些皮肤表现可以类似于美国疾病预防与控制中心指定生物恐怖试剂导致的感染性疾病(炭疽和天花)。所以,对于临床医生来说,熟悉立克次体痘很重要。作者报道3例立克次体痘,回顾其流行病学、临床和实验室检查、鉴别诊断和疾病的控制管理。立克次体痘:3例报道和文献回顾@Saini R. @Pui J.C. @Burgin S. @刘超     

海南岛恙虫病立克次体研究

目的:阐明海南岛恙虫病立克次体的存在及其分布。方法:①恙虫病立克次体血清学调查用微量免疫荧光检测法(mIFA)。②恙虫病立克次体分离用小鼠接种法和L929细胞培养法,恙虫病立克次体鉴定用特异性抗体mIFA。③应用聚合酶链反应(PCR、NPCR)技术检测恙虫病立克次体特异性DNA。④DNA序列。结果:①35份不明原因发热患者血清中,10/35(28.57％)份血清呈IgG抗体阳性反应(滴度≥1:80)。收集自海南岛的东、西、南、北、中部地区的561份人群血清恙虫病立克次体IgG抗体阳性率为13.55％(76/561)。其中东部地区阳性率为8.69％(10/115),南部为7.22％(7/97),西部为28.83％(32/111),北部为11.76％(12/102),中部为11.03％(15/136)。②小白鼠接种分离法从疑似立克次体病患者血液中分离出3株恙虫病立克次体,L929细胞培养法从20份不明原因发热患者血液中分离出3株恙虫病立克次体。③应用PCR技术从9例疑似立克次体感染患者血液中检出4例恙虫病立克次体特异性DNA。用NPCR法从17组野鼠脾脏标本中检出3组恙虫病立克次体特异性DNA。④DNA序列已经分析清楚。结论:海南岛确有恙虫病存在,该岛的中、西部感染率较高,南、北部较低。海南岛恙虫病立克次体DNA序列已分析清楚。     

恙虫病立克次体DNA及DNA序列测定

目的:检测39例不明原因发热患者血液中恙虫病立克次体DNA。方法:用NPCR检测恙虫病立克次体DNA,取其DNA提取物进行DNA序列分析。结果:序列分析表明扩增的片段为立克次体DNA片段。39例不明原因发热患者血液用NPCR法检出13例恙虫病立克次体DNA。占不明原因发热患者的33.3%。结论:NPCR法可以快速检出恙虫病立克次体DNA,可用于恙虫病的临床早期诊断。     

山东省沂源县西部地区恙虫病东方体、地方性斑疹伤寒和斑点热立克次体血清流行病学的初步研究

目的 了解近年山东省沂源县西部地区农村人口恙虫病东方体、地方性斑疹伤寒立克次体和斑点热立克次体的感染情况,为自然疫源性疾病的预防和控制提供依据。方法 2011年从山东省沂源县西部乡镇的农村人口中随机收集192份血清,采用间接免疫荧光法检测血清中恙虫病东方体、地方性斑疹伤寒立克次体和斑点热立克次体抗体。结果 恙虫病东方体、地方性斑疹伤寒立克次体和斑点热立克次体抗体血清阳性率分别为56.77%(109/192)、79.69%(153/192)和69.79%(134/192)。结论 山东省沂源县西部农村人口中恙虫病东方体、地方性斑疹伤寒立克次体和斑点热立克次体的感染率较高。     

恙虫病的诊断与治疗

恙虫病(tsutsugamishi disease)亦称丛林斑疹伤寒(scrub typhus),是由恙虫病立克次体(Richettsia tsutsugamushi)亦称东方立克次体(R.orientalis)所致的急性自然疫源性传染病,鼠类为其主要传染源,以恙虫幼虫为媒介将疾病传染给人.临床上有发热、焦痂(或溃疡)、淋巴结肿大及皮疹等为特征.     

昆明市2018年～2020年新发现HIV-1感染男男性行为人群新近感染分析

  目的  了解2018年～2020年昆明市通过社会组织新报告的HIV-1感染男男性行为人群（men who have sex with men,MSM）的新近感染情况和影响因素,为该人群的艾滋病防治提供参考。  方法  对昆明市2018年1月至 2020年12月经抗体筛查和确证检测后的MSM阳性样本采用HIV-1限制性抗原亲和力酶联免疫方法（HIV-1 LAg-Avidity enzyme immunoassay,LAg-Avidity EIA）结合CD4+T淋巴细胞计数判断新近感染,采用Logistic回归分析新近感染影响因素。  结果  共收集389份阳性样本,2018年1月至2020年12月HIV-1新近感染者比例分别为48.1%（90/187）、51.6%（49/95）、30.8%（33/107）,2018年1月和2019年12月的新近感染比例,差异无统计学意义（P > 0.05）,2020年的新近感染比例低于2018年和2019年（P < 0.05）。多因素Logistic回归分析显示职业为学生（P = 0.017,OR = 2.989,95%CI:1.221～7.318））检测出新近感染的比例高。  结论  昆明市MSM人群HIV-1新近感染的比例出现下降趋势,在部分人群中新近感染的比例较高,需要有针对性地采取措施,加强新近感染的监测,通过社会组织加强干预服务的可及性,进一步促进检测。     

Drug resistance in patients with pulmonary tuberculosis.

A review of the records of 984 patients admitted to hospital from 1970 through 1973 with bacteriologically proven pulmonary tuberculosis showed bacterial resistance to one or more antituberculosis drugs in 103 (10.5%). Among the patients who had had previous drug treatment for tuberculosis the prevalence of drug resistance was 20% in the Canadian-born patients and 69.4% in the recent immigrants. Among the patients who had had no previous drug treatment the prevalence of drug resistance (primary resistance) was 2.7% in Canadian-born patients but 11.4% in recent immigrants. Because of the higher prevalence of drug resistance among recent immigrants and the finding in recent years that increasingly more tuberculosis patients in Ontario are recent immigrants, drug resistance in this group is likely to assume even more importance in the future.     

丘脑遗忘症的记忆过程分析

目的：分析丘脑遗忘症异常的记忆过程,探讨其发病机理。方法：对１２例丘脑卒中病人的病前远、近期记忆内容进行测查,并观察病人病后对近期记忆的保持及形成远期记忆的能力。结果：所有病人均有不同程度的顺行性遗忘,部分病人尚有逆行性遗忘。后者可分为远期记忆内容的遗忘和近期记忆内容的遗忘。两者均可恢复,对近期记忆内容的遗忘恢复不全,留有对病前数小时到２ｄ的记忆空白。顺行性遗忘主要是对近期内容的保持时间过短,难以形成远期记忆。结论：丘脑遗忘症的核心问题是近期记忆的保持障碍和近期及远期记忆的回忆障碍。     

药物预处理的脑保护作用

药物预处理是近年来研究的热点,基于对脑组织缺血预处理的认识,近年来发现一些药物预处理可以诱导脑组织产生保护作用。本文综述了近年有关药物预处理的脑保护作用方面的研究,是研究脑保护的新途径。     

微创血肿清除术治疗脑出血患者近期生存率及颅外并发症研究

目的:分析脑出血患者经微创血肿清除术治疗后的近期生存率以及颅外并发症,探讨微创血肿清除术的临床价值。方法:回顾分析88例进行微创血肿清除术的脑出血患者,研究脑出血量与术后近期生存率之间的关系,并对术后出现的颅外并发症进行统计。结果:出血量30～50ml组近期生存率为93.9%(31/33),51～80ml组近期生存率为80%(20/25),81～100ml组近期生存率50%(10/20),>100ml组近期生存率为0%(0/10),手术颅外并发症有肺部感染10例,消化道出血10例,高血糖31例,心肌梗死16例,急性肾衰21例。结论:随着颅内出血量的增加,脑出血患者术后的近期生存率越低,出血量80ml组的近期生存率高于80ml以上组。微创血肿清除术治疗脑出血会出现多种颅外并发症,其中以肺部感染,消化道出血,高血糖较为常见。     

艾灸神阙等对宫颈癌放疗患者近期腹泻的临床观察

目的：观察艾灸对宫颈癌放疗患者近期腹泻的预防作用。方法：以神阙穴为主，采用艾条温和灸的方法，对36例放疗患者的近期腹泻情况与30例单纯放疗的近期腹泻相比较。结果：艾灸组的近期腹泻发生率和程度明显低于对照组（P＜0．05），结论：艾灸神阙等穴位对宫颈癌放疗患者近期腹泻的发生有一定的预防作用。     

甘露醇在重症监护病房中的应用

近年来,甘露醇临床应用的研究十分活跃,同时,甘露醇在治疗多种疾病中新用途的报道也日益增多。本文简要回顾近年来取得的成就,提出甘露醇临床应用中的一些误区及体会,着重介绍甘露醇在重症监护病房危重病应用中的一些新进展。     

睡眠呼吸紊乱与变态反应性疾病关系的研究进展

近年来研究发现睡眠呼吸紊乱与变态反应性疾病关系密切,两种疾病的进程可受到彼此的影响,本文对最近几年国内外这方面的研究作一综述。