荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物相关性

目的：探讨乙肝病毒DNA（HBV—DNA）与乙型肝炎患者血清病毒标志物（HBV～M）的相关性,为乙肝的早期诊断、病情预测及临床用药提供指导。方法：选择2012年1月到2012年6月半年内682例乙肝患者,分离患者血清标本,采用荧光定量PCR法检测HBV—DNA,并采用ELISA法检测HBV～M,以不同的HBV—M模式做统计分析。结果：大三阳与[-HBsAg（＋）＋HBeAg（＋）]模式的HBV—DNA阳性率分别98．85％和98．04％,两者HBV—DNA阳性率明显高于其他HBV—M模式,差异具有统计学意义（P〈0．05）。大三阳的HBv—DNA含量为（5．8×10^6土2．3×10^5）,明显高于其他模式。结论：不同乙肝病毒标志物模式HBV—DNA的检出率及病毒含量有差异,同时对患者做HBV—DNA检测与乙肝病毒标志物检测,对乙肝的早期诊断、病情判断及临床用药都有重要意义。     

荧光定量PCR法与ELISA法检测乙肝病毒感染相关性探讨

目的分别采用荧光定量PCR法和ELISA法检测乙肝病毒标志物,探讨两种方法的相关性。方法采集490份乙肝表面抗原呈阳性的体检者的血清,采用ELISA法和FQ-PCR两种方法进行HBV DNA定量检测,比较分析其结果。结果 HBs Ag(+),HBe Ag(+),HBc Ab(+)阳性组血清中HBV DNA阳性检出率为95.6%,HBs Ag(+),HBe Ag(+)组阳性检出率为100.0%,HBs Ag(+),HBe Ab(+),HBc Ab(+)组阳性检出率为20.6%,HBs Ag(+),HBc Ab(+)组阳性检出率为36.4%。第1组、第2组、第3组相比较,差异具有显著性(P<0.05);第3组和第4组相比差异也具有显著性(P<0.05)。不同性别感染者HBV DNA阳性检出率无显著性差异(P>0.05),但男性感染者的阳性均值略高于女性感染者。结论荧光定量PCR和ELISA两种方法在检测乙肝病毒标志物中有密切相关性,荧光定量PCR法结果更为科学可靠。     

闽南肝癌高发区HBV-DNA荧光定量PCR检测的意义

[目的 ]分析闽南肝癌高发区乙肝病毒感染者血清 HBV- DNA含量与 HBVM的关系 ,探讨 HBV- DNA定量检测的应用价值。 [方法 ]用荧光定量 PCR技术 ,测定 398份血清中 HBV- DNA含量 ,同时检测 HBVM。 [结果 ]乙肝大三阳患者 HBV- DNA含量最高 (x=10 7.2 8± 1 .1 6 ) ,阳性率 10 0 % ,小三阳次之 (x=10 4.42± 1 .3 2 ) ,阳性率 5 4.8%。肝癌组HBV- DNA阳性率高达 6 6 .7% ,高于其他肝病组。 [结论 ]闽南肝癌高发区乙肝病毒感染人群中 ,HBV- DNA总阳性率较高 ,乙肝病毒持续复制可能是闽南地区肝癌发生的主要因素之一。     

乙肝血清标志物与HBV-DNA检测结果的相关性分析

目的:探讨乙肝血清标志物与HBV-DNA检测结果的相关性,以及二者联合检测在临床诊断中的应用。方法:收集1445例乙肝患者血清,同时采用电化学发光免疫分析法检测乙肝血清标志物和实时荧光定量PCR技术检HBV-DNA拷贝数。结果:HBsAg阳性HBeAg阳性组的HBV-DNA阳性率高于HBsAg阳性HBeAg阴性组和HBsAg阴性HBeAg阴性组(P<0.01),且HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)类型中病毒载量集中在高拷贝区段,但在HBeAg阳性者中仍有部分HBV-DNA为阴性(10.9%),而在HBsAg阳性HBeAg阴性组中HBV-DNA阳性率仍有25.5%。结论:HBeAg阳性是反映病毒复制的良好指标,但无正相关;仅依靠乙肝血清标志物检测不能很准确地判断HBV复制的程度及其传染性的强弱;乙肝血清标志物与HBV-DNA检测的结合能更好地为临床提供准确可靠的诊断数据。     

儿童乙型肝炎血清标志物与HBV-DNA定量检测的关系探讨

[目的]探讨儿童乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物与HBV-DNA含量的关系. [方法]202例血清标本用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒标志物,同时用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测标本中HBV-DNA的含量. [结果]HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组中,HBV-DNA阳性率为98.9%(88/89);HBsAg、HBeAg阳性组的HBV-DNA阳性率为100%(6/6);HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组中,HBV-DNA阳性率为25%(9/36);HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性组的HBV-DNA阳性率为12.5%(2/16);HBsAg、HBcAb阳性组和HBeAb、HBcAb阳性组分别5例中各有1例检出HBV-DNA;33例HBsAb阳性中仅1例HBV-DNA阳性;12例HBV血清标志物全阴的标本未检出HBV-DNA.[结论]儿童乙肝患者的多种血清标志物模式中都存在HBV-DNA复制.以HBeAg阳性者HBV-DNA复制水平最高.血清标志物与HBV-DNA联合检测对乙型肝炎的早期诊断、治疗方案的制定,尤其对抗病毒药物治疗的疗效观察具有重要的临床意义.     

500例乙肝PCR荧光定量检测结果分析

目的分析乙肝病毒核酸(HBV-DNA)含量检测的结果与乙肝血清标志物检测结果的关系。方法用荧光定量PCR和ELISA两种方法检测500份乙肝病毒感染者血清,并对其结果进行分析。结果500例HBV-DNA定量检测阳性283例,阴性217例;52例HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBeAb组阳性患者(大三阳)检出HBV-DNA阳性51例,66例HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBeAb组阳性患者(小三阳)检出HBV-DNA阳性39例。结论大、小三阳两组患者检出HBV-DNA差异有非常显著性(P<0.001),联合运用乙肝标志物与HBV-DNA检测有助于乙肝的早期诊断、疗效观察和预后判断。     

HBV血清标志物与HBV-DNA定量结果对比分析

我国HBV感染者众多，其血清标志物(乙肝两对半)组合模式多种多样，致使临床上部分患者的HBV感染状态难以判断。而荧光定量PCR法的应用。能准确地反映HBV感染者所处状态、HBV-DNA的复制水平及其传染性。本文采用荧光定量PCR(FQ-PCR)方法，对正常体检及门诊患者检测出的221例HBV不同感染模式的感染者进行HBV-DNA定量，并对结果进行了对比分析。现报告如下。     

2种荧光定量PCR扩增仪检测结果的比较

目的:观察2种荧光定量PCR扩增仪测定乙肝病毒定量(HBV DNA)的结果是否一致。方法:用2台PCR扩增仪同时对20份标本进行检测,观察2台荧光定量PCR定量扩增仪对HBV DNA测定结果的差异。结果:对20份标本HBV DNA含量的对数值进行相关性分析,二者相关性良好(r=0.96)。结论:通过2种荧光定量PCR扩增仪对20份随机样本的检测结果比较,2种仪器检测结果具有较好的一致性,可用于同时检测HBV DNA。     

荧光定量PCR检测289例乙型肝炎病毒DNA意义分析

目的荧光定量PCR检测血样中乙型肝炎病毒DNA拷贝数，探讨血清HBV—DNA检测结果与HBV抗原抗体(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)5项标志物(HBV—M)间的关系及临床意义。方法采用荧光定量PCR和ELISA法分别检测289例乙肝患者血样。结果122例HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性血样中，HBV—DNA阳性检出率98．4％；89例HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性血样中，HBV—DNA阳性检出率42．7％；27例HBsAg、HBcAb均阳性血样中，HBV—DNA阳性检出率29．6％；6例HBV—M全阴性血样中，1例HBV—DNA呈弱阳性。结论只有检测HBV—DNA才能确定HBV的真实感染和复制情况。荧光定量PCR检测HBV—DNA作为判断乙肝病毒感染、复制及传染性强、弱等的确定依据，在追踪患者预后及流行病学上有一定意义。     

孕产妇血清和乳汁HBV-DNA的含量对照分析

目的:根据产检的孕妇血清HBV指标阳性和HBV-DNA含量,跟踪该孕妇产后乳汁HBV-DNA含量,阐明新生儿可通过乳汁感染HBV的可能性,指导孕妇正确的母乳喂养。方法:采用荧光定量PCR检测仪进行荧光定量PCR(FQ-PCR)检测630例HBsAg阳性孕妇血清和乳汁HBV-DNA含量。结果:HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性的孕妇血清和乳汁HBV-DNA检出率和含量都比其他指标阳性的孕妇血清和乳汁HBV-DNA检出率和含量高。结论:当血清HBV-DNA的含量均>1.0×106(对数值6)拷贝/ml时,乳汁HBV-DNA的含量增高。     

磁珠法结合实时荧光PCR试剂检测HBV-DNA临床性能验证

目的 分析磁珠法提取核酸结合实时荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的性能及其临床应用价值,有助于选择试剂。方法 按照CNAS-CL36能力验证要求,收集四川省人民医院乙肝病人血清样本,对三家磁珠法核酸提取实时荧光定量PCR试剂（A、B、C试剂）的精密度、正确度、检出限、可报告范围、抗干扰能力等等性能参数进行方法学性能验证和评价。结果 试剂A和B均能检出HBV-DNA,检出率100%,试剂C的检出率为83.3%,与厂家公布的定量检测下限20 IU/ml不一致。试剂A检测低浓度和高浓度标本的批内变异系数（CV）均低于5%;试剂B检测低浓度标本的批间CV≥5%,高浓度标本批间CV≤5%,试剂C检测低浓度和高浓度标本的批间CV均≥5%。3种试剂在分析测量范围内均线性关系良好。干扰试验显示,3种试剂均受到严重溶血、脂血标本的影响,但不受轻微溶血、脂血标本的影响。结论 通过对3种试剂的性能验证,达安基因公司的一步法（磁珠法）HBV-DNA定量检测试剂灵敏度高,有利于乙肝筛查和临床疗效的监测、随访。     

HBV-DNA与乙型肝炎血清学标志物的相关性研究

目的探讨乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）与乙肝病毒血清标志物（HBV-M）之间的相关性。方法将临床筛查的600例HBsAg阳性血清标本用ELISA法检测HBV-M,同时用荧光定量PCR法检测HBV-DNA,按不同的HBV-M模式分组进行分析。结果 HBsAg和HBeAg同时阳性的标本,检测HBV-DNA阳性率为100%,明显高于HBeAg阴性模式的阳性率,亦高于HBsAg阳性的其它模式。差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 HBV-DNA检测在各种模式的HBV-M阳性血清中检出率差异有统计学意义,HBeAg阳性者HBV-DNA检出阳性率最高（100%）,检测乙肝患者HBV-M的同时检测HBV-DNA,对于早期诊断、判断患者传染性程度、疗效观察和预后判断具有重要的临床意义。     

荧光定量PCR检测母脐血HBV-DNA与母婴传播的临床研究

目的探讨孕妇乙肝病毒含量与宫内感染的相关性及母乳喂养的临床指导。方法对我院分娩的120例HBV感染产妇,采用荧光定量PCR检测法分别检测其孕晚期的血清,产时的脐血及产后乳汁中HBV-DNA含量,同时采用酶联免疫法行脐血乙肝病毒标志物检测。结果脐血HBV-DNA含量与孕母血清HBV-DNA含量有相关性;乳汁中HBV-DNA含量与其血清中HBV-DNA含量相关,同时与血清HBeAg存在显著相关。结论宫内感染的发生率与孕妇血清HBV-DNA含量相关,孕晚期高病毒血症(>108cp/ml)与宫内感染显著相关;产妇血清高HBV-DNA含量,乳汁HBV-DNA异常(>103cp/ml)或HBeAg阳性者不适宜母乳喂养。     

荧光定量PCR检测乙型肝炎患者唾液HBV-DNA的意义

目的 探讨唾液HBV-DNA在乙型肝炎中的意义。方法 采用荧光定量PCR法检测250例来新乡市中心医院就诊的HBV感染者的唾液和血清。结果 250份标本血清中HBV—DNA为阴性的有25例（10．0％）;唾液中HBV-DNA为阴性的有68例（27．2％）。血清中HBV-DNA大于10^3U／ml的有225例（90％）,唾液中HBV-DNA大于10^3U／ml的有182例（72．8％）。其中大于10^3U／ml标本中,血清209例（83．6％）,唾液123例（49．2％）,血清与唾液HBV—DNA水平之间存在相关性（r=0．79,P〈0．01）。结论乙型肝炎患者的唾液和血清中含有感染性的高载量HBV—DNA,可成为传染源之一。为乙型肝炎的流行病学研究提供了新的思路和理念。     

ELISA法检测乙肝两对半与荧光定量PCR检测HBV-DNA的比较

乙型肝炎病毒是当今流行最广泛,危害最严重的病毒性肝炎之一,相当一部分乙肝携带者可以发展成慢性肝炎,需要接受病毒治疗.目前多以其血清感染标志物乙肝两对半及HBV-DNA定量,作为临床分析和判断乙肝患者病情、疗效及预后的主要依据,但由于两对半的组合模式复杂多样,导致部分患者的HBV感染复制状况难以判断,而HBV-DNA是乙肝病毒感染和复制的特异性指标,是表明其具有传染性的最有力的证据.但是受到实验室要求较高的严格限制,尚无法普及检测,为了进一步探讨乙肝两对半与HBV-DNA定量结果之间的关系.本文对ELISA法检测乙肝两对半与荧光定量PCR检测HBV-DNA的比较进行分析比较.     

HBV-M与定量PCR法检测HBV-DNA相关性探析

目的：探讨乙肝病毒DNA（HBV-DNA）与其血清学标志物HBV-M之间的相关性。方法：选取本院收治的乙肝患者183例作为研究对象,采集并分离患者的血清标本,分别采用荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法对患者的HBV-DNA、HBV-M进行检测,在不同的HBV-M模式下分析其与HBV-DNA间的关系。结果：在HBsAg（＋）＋HBeAg（＋）＋HBcAb（＋）的模式下,HBV-DNA的检测阳性率为97.9%;HBsAg（＋）＋HBeAg（＋）模式下,HBV-DNA的检测阳性率是100%;两者比较差异无统计学意义,但这两种模式下的检测阳性率都显著高于其他模式（P〈0.05）。结论：乙肝病毒的血清学标志物的模式不同,HBV-DNA的检测阳性率不同,乙肝患者机体内的病毒含量也有差异,HBV-M和HBV-DNA的检测分别是乙肝感染的间接证据和直接证据,同时对患者进行这两项指标的检测对于乙肝的临床诊断、病情判定、传染性的评估具有重要的意义。     

荧光定量PCR检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒 DNA

目的探讨定量检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)的临床意义.方法采用荧光定量PCR检测PBMC及血清中HBV-DNA含量.结果 49例慢性乙肝患者PBMC及血清中HBV-DNA阳性率分别为44.9%(22/49),51.0%(25/49),两者阳性率无统计学意义的差异(P＞0.05),具有一致性;血清HBV-DNA高水平组PBMC的HBV-DNA含量与低水平组比较,两者有统计学意义差异(P＜0.01);血清HBV- DNA高水平组PBMC的HBV-DNA阳性率(100%)与血清低水平组PBMC的HBV-DNA阳性率(42.9%)比较,两者有统计学意义的差异(P＜0.05);在24例血清HBV-DNA阴性患者中,发现5例PBMC HBV-DNA阳性.结论 PBMC的HBV-DNA检测可反映病毒在体内的复制程度,是对慢乙肝患者血清HBV-DNA检测有意义的补充,有助于临床上对慢乙肝患者血清病毒复制状态的了解及指导治疗用药.     

乙肝病毒慢性感染者HBV-DNA定量与血清学标志物及年龄性别关系

目的探讨乙肝病毒慢性感染者HBV-DNA定量与血清学标志物(Hepatitis B virus serologic marker,HBVm)及年龄、性别关系。方法 2013年9~12月对1 506例HBsAg阳性的乙肝病毒慢性感染者血清用实时荧光定量(PCR)测定HBV-DNA含量,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HBVm,用速率法检测ALT、AST。结果 HBV-DNA总检出率为48.48%(730/1 506),均值为6.58×107拷贝/ml,HBeAg阳性组检出率83.52%(228/273),平均拷贝数1.78×108;HBeAg阴性组检出率40.71%(502/1 233),平均拷贝数1.15×107。HBV-DNA检出率和平均拷贝数HBeAg阳性组均高于阴性组(P<0.01)。男性HBV-DNA检出率53.22%(438/823)高于女性42.75%(292/683)(P<0.01)。HBVDNA阳性组ALT、AST>40u/L的异常率分别是39.53%(289/731)、64.98%(475/731),均值分别是55.38、46.55u/L;HBV-DNA阴性组ALT、AST>40u/L的异常率分别是12.65%(98/775)、12.26%(95/775),均值分别是25.39、28.85u/L。ALT、AST异常率和均值HBV-DNA阳性组均高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在各种HBVm模式中,以HBeAg阳性者的病毒复制水平最高。HBV-DNA检出率与HBVm模式、性别、年龄、以及ALT、AST异常率有关,平均拷贝数与性别、年龄无关。     

乙肝病毒携带者外周血单个核细胞培养上清液HBV-DNA定量检测意义

目的　探讨慢性无症状乙肝病毒携带者外周血单个核细胞 (PBMC)与HBV -DNA定量的临床关系及意义。方法　采用慢性乙肝病毒HBeAg阳性携带者PBMC体外刺激诱导培养 ,荧光定量PCR(FQ -PCR)法测定上清液HBV -DNA ,ELISA法检测白细胞介素 10、12 (IL -10、12 )与γ 干扰素 (γ IFN)。同期检测肝功能 ,血清HBV -DNA定性试验。结果　PBMC培养后于上清液中以FQ -PCR法检出HBV -DNA。 >5 0 0 0考贝 /ml组中 ,IL -12及γ IFN均明显高于正常对照组。重症肝炎PBMC上清液FQ -PCR测定HBV -DNA阳性率明显高于同期血清PCR定性试验阳性率。PBMC上清液FQ -PCR测定HBV -DNA阳性率与血清HBeAg转换的关系同血清HBV -DNA定性试验阳性率与其关系相仿。与肝功能ALT及TBiL程度无明显相关。结论　HBeAg携带者PBMC培养液HBV -DNA高复制状态时IL -12及γ IFN分泌增强。重症肝炎PBMC上清液HBV -DNAFQ -PCR测定阳性率高于同期血清PCR定性实验