HPLC测定不同批次镰形棘豆中2’,4’-二羟基查耳酮含量

目的：建立镰形棘豆中2’,4’-二羟基查耳酮含量的HPLC方法,测定不同批次镰形棘豆中2’,4’-二羟基查耳酮的含量。方法：采用HPLC法对10个主产地12批次镰形棘豆中2’,4’-二羟基查耳酮进行含量测定。色谱条件：Dikma Technologies Diamonsil C18色谱柱（5μm,250mm×4.6mm）;流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液（50：50）;流速为1.0mL·min^-1;检测波长365nm。结果：2’,4’-二羟基查耳酮在0.0834～0.8340μg范围内与峰面积呈良好线性关系,R^2=0.9999,加样回收率平均值为105.2%,RSD=2.078%。结论：该方法准确、灵敏度高、重现性好,可用于镰形棘豆药材的质量控制。     

HPLC 同时测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素和2',4'-二羟基查耳酮含量

目的 建立同时测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素和2',4'-二羟基查耳酮含量的高效液相色谱方法.方法 色谱柱:Lichrospher C18 柱(5 μm,4.6 mm×250 mm);流动相:0.4%磷酸水溶液-甲醇(30:70);流速:1.0 mL/min;检测波长:266 nm;柱温:30 ℃.结果 鼠李柠檬素、2',4'-二羟基查耳酮分别在0.080～0.60 μg(r ＝0.999 8)、0.22～1.68 μg(r ＝1.000)范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为98.8%(RSD＝1.17%)、99.0%(RSD＝1.15%).结论 本法快速、简便,结果准确、可靠,可用于镰形棘豆中鼠李柠檬素和2',4'-二羟基查耳酮的质量监控.     

藏药镰形棘豆中化学成分研究

经硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、ODS反相层析对镰形棘豆的乙酸乙酯部分进行分离,通过理化方法和NMR、MS鉴定7个化合物为β-sitosterol(1)、phenethylamide(2)、isoliquiritigenin(3)、genistin(4)、isorhamnetin(5)、kaempferide-3-O-β-glu(6)、kaempferol(7)。化合物2~7为首次从该植物中获得。     

藏药镰形棘豆的化学成分研究

目的对藏药镰形棘豆Oxytropis falcata植物的化学成分进行研究。方法采用乙醇提取,硅胶柱色谱分离,并通过波谱分析技术鉴定了其化学结构。结果从藏药镰形棘豆中得到10个化合物,分别鉴定为:7-甲氧基二氢黄酮(Ⅰ)、7-羟基二氢黄酮(Ⅱ)、(S)-5-羟基-7-甲氧基二氢黄酮(Ⅲ)、(S)-5,7-二羟基二氢黄酮(Ⅳ)、2′,4′-二羟基双氢查耳酮(Ⅴ)、2′,4′,4-三羟基查耳酮(Ⅵ)、鼠李素(Ⅶ)、臭豆碱(Ⅷ)、β-谷甾醇(Ⅸ)、β-胡萝卜苷(Ⅹ)。结论以上化合物均为首次从该植物中分离得到。     

藏药镰形棘豆中黄酮类化学成分研究

目的：对藏药镰形棘豆Oxytropis falcata的黄酮类化学成分进行研究。方法：通过正相硅胶柱色谱,Sephadex LH-20柱色谱,ODS反相色谱分离﹑纯化,用NMR,MS鉴定结构。结果：从镰形棘豆的氯仿萃取部分分离鉴定了8个黄酮类化合物,分别为2′,4′-二羟基-4-甲氧基查尔酮(1),2′,4′-二羟基查尔酮(2),5,7-二羟基-4′-甲氧基黄酮醇(3),7-羟基-4′-甲氧基二氢黄酮(4),3′,7-二羟基-2′,4′-二甲氧基异黄烷(5),2′-羟基-4′-甲氧基查尔酮(6),2′-甲氧基-4′-羟基查尔酮(7),2′,4′-二羟基二氢查尔酮(8)。结论：这些化合物均为首次从该植物中分离得到。     

藏药镰形棘豆的化学成分及其抗肿瘤活性研究

目的:研究藏药镰形棘豆Oxytropis falcata的化学组成及其抗肿瘤活性.方法:通过硅胶柱色谱、制备TLC分离纯化镰形棘豆的化学成分,通过NMR等波谱技术解析鉴定化合物结构,通过MTT法研究化合物1,3,5抑制人肝癌细胞HepG2、小鼠黑色素瘤细胞B16F10、人肝癌细胞SMMC-7721、人肝癌细胞HuH7以及人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖影响.结果:从镰形棘豆乙醇提取物中分离得到了5个化合物,分别为7-甲氧基二氢黄酮(7-methoxy flavanone,1),7-羟基二氢黄酮(7-hydroxy flavonone,2),2′,4′-二羟基查耳酮(2′,4′-dihydroxy chalcone,3),2′,4′-二羟基-4′-甲氧基查尔酮(2′,4′-dihydroxy-4′-methoxy chalcone,4),N-(2-苯乙基)肉桂酰胺(N-2-phenylethyl cinnamamide,5).四甲基偶氮唑盐比色(MTT)结果表明化合物3具有较好的抗肿瘤活性,其IC50分别为68.60,169.67,105.88,175.18,172.37μmol·L-1.结论:其中化合物5为首次从该种属中分离得到,化合物3对5种肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用.     

藏药镰形棘豆中黄酮类成分山柰素和鼠李素的含量测定

目的 建立藏药镰形棘豆中山柰素、鼠李素的含量测定方法.方法 高效液相色谱(HPLC)法测定镰形棘豆中山柰素和鼠李素的含量.采用C18,流动相以甲醇-0.4%磷酸溶液梯度洗脱检测波长362 nm.结果 此方法线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率山柰素为99.90%,RSD=1.83%;鼠李素为99.62%;RSD=1.14%.结论 该方法简便、稳定,能有效地控制该制剂的质量.     

HPLC法测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素的含量

目的建立镰形棘豆中主要活性成分鼠争柠檬素的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱：Lichrospher C18柱（5μm,4．6mm×250mm）;流动相：0．4％磷酸水溶液-甲醇（20：80）;流速：1．0mL／min;检测波长：350nm。结果鼠李柠檬素在4～30μg范围内线性关系良好（r＝0．9998）,平均回收率为99．7％,RSD=1．4％;5批镰形棘豆药材中鼠李柠檬素的平均含量为0.39％。结论本法操作简便,结果准确,可用于镰形棘豆药材的质量控制方法之一。     

藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素对照品的制备

目的:建立镰形棘豆中鼠李柠檬素对照品的制备方法.方法:运用硅胶柱色谱、Sephndex LH-20凝胶色谱柱等分离纯化的方法制备鼠李柠檬素,采用薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法检测纯度,波谱法鉴定其结构.结果:制备的化合物为鼠李柠檬素,纯度＞98％.结论:该制备方法效率高,所得鼠李柠檬素对照品纯度高,符合中药化学对照品的相关技术要求,可用于大量制备中药定性、定量分析使用的对照品.     

高效液相色谱法测定市售首乌藤中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的测定济南市售首乌藤中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量,同时进行比较。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:lichrospher C_(18)柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-水(20:80),流速:1ml/min,检测波长320 nm。结果市售首乌藤中二苯乙烯苷含量为0.0179%～0.355%。结论市售首乌藤中二苯乙烯苷含量差距较大,其质量存在比较明显的差异。     

高效液相色谱法测定强肾胶囊中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷的含量

目的：建立强肾胶囊含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法测定强肾胶囊中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷的含量。以Shim-packCLC-ODS（4．6mm×150mm）为色谱柱，以甲醇-0．025mol/L磷酸（15：85）为流动相，检测波长320nm。结果：2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷的回收率为96．9％（n=5），RSD为2．1％。结论：本方法快速，准确，方法的稳定性、重现性良好，可用于强肾胶囊的质量控制。     

基于CNKI数据资料剖析藏药镰形棘豆的文献特征和研究现状

目的:分析国内发表的有关藏药镰形棘豆的研究文献,探讨其研究现状。方法:以CNKI数据库为资料来源,对国内期刊收录的镰形棘豆及莪达夏(藏译名:莪达夏)的文献进行管理、分析,从发表年度、文献来源、基金类别、期刊类型、作者特征等方面进行筛选、统计,初步分析国内藏药镰形棘豆的研究现状。结果:藏药镰形棘豆的相关研究文献自1984年开始至2016年5月共有117篇相关文献公开发表,其中100篇文献发表于学术期刊;学科分布方面主要集中在中医学42篇,中药学58篇;以南京、甘肃、福建、青海等地的高校以及研究所等研究机构为主。结论:藏药镰形棘豆的研究逐渐受到国内科研人员的关注,并取得诸多成果,但临床应用及制剂研究不足,需要进一步推进该方面的研究。     

藏药镰形棘豆水提取物对脓毒症大鼠细胞因子水平的影响

目的:探讨镰形棘豆水提取物(EOF)对脓毒症大鼠血清细胞因子水平的影响。方法:采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备动物脓毒症模型,将雄性SD大鼠随机分为5组,正常对照组(6只)、假手术组(24只)、模型组(24只)、EOF低、高剂量组(0.5,2 g.kg-1,24只),于造模后灌服1次。于造模后2,6,12,24 h取大鼠动脉血,采用ELISA测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1(IL-1)水平。结果:相同时间点模型组TNF-α,IL-6,IL-10的水平均高于假手术组(P<0.01);EOF治疗组与模型组相比(除2 h外),TNF-α,IL-6的水平各时间点降低(P<0.05),IL-10的水平升高(P<0.05);EOF高剂量与EOF低剂量相比(除2 h外),TNF-α,IL-6水平各时间点降低更明显(P<0.05),IL-10的水平各时间点升高更明显(P<0.05)。结论:EOF能下调脓毒症大鼠TNF-α,IL-6的水平,上调IL-10的水平;EOF具有抗炎和免疫调节作用,有进一步开发为临床治疗脓毒症新药的潜在可能性。     

反相高效液相色谱法同时测定抗脑衰胶囊中葛根素和2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的 建立抗脑衰胶囊中葛根素和2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法.方法 采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Nova-Pak C18(150 mm ×3.9 mm,4 μm),流速0.8 ml·ml-1,乙腈水(2080)为流动相,检测波长为320 nm.结果 葛根素的线性范围为0.3056～1.528 mg·ml-1,r=0.999 7,平均回收率为98.15%,RSD=1.20%(n=6);2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的线性范围为1.024～8.192 μg·ml-1,r=0.999 5,平均回收率为97.46%,RSD=2.12%(n=6).结论 该方法简便、快速、准确,适合该胶囊中葛根素和2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定.     

白及中2,7-二羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲含量的高效液相色谱法测定

目的 建立白及中2,7 -二羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲高效液相含量测定方法.方法 采用Hypersil ODS(4.6mm x 250 mm,5μm)色谱柱,以40％乙腈/水(V/V)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长为280 nm,柱温30℃.结果 2,7-二羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲在0.027 -0.437 μg呈良好的线性关系,r=0.999 5,平均回收率98.64％.结论 该方法简便、快速、准确、灵敏度高,可用于白及的质量控制.     

HPLC法测定藏药镰形棘豆中鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷的含量

目的:建立镰形棘豆中鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷的含量测定方法,同时比较药材的不同部位经不同溶剂提取后所得含量。方法:采用HPLC法,色谱柱:Symmetry C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:1%乙酸水溶液-乙腈(79:21);流速:1.0mL/min;检测波长:350nm。结果:鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷在20-100μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9995),平均回收率为99.49%,RSD=1.30%。溶剂对该化合物的提取率由高至低依次为甲醇,95%乙醇、水;药材叶中含量比根高。结论:本法简便、准确、重现性好,可用于该药材或相关制剂的质量控制;药材不同部位经不同溶剂提取所得含量差别较大。     

镰形棘豆对SMMC-7721肝癌细胞增殖及MMP-2表达的影响

目的:观察镰形棘豆对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖及其基质金属蛋白酶-2(MMP-2)分泌量的影响.方法:以不同质量浓度(25,50,100,250,500 mg·L-1)的镰形棘豆挥发油、总多糖、总黄酮、总生物碱和总皂苷部位处理SMMC-7721细胞24 h后,采用MTT法检测各部位对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;采用ELISA法测定挥发油部位和总黄酮部位处理SMMC-7721肝癌细胞24 h后细胞上清中MMP-2的分泌量;Real-time PCR法检测处理24 h后MMP-2 mRNA的转录情况.结果:MTT实验结果表明,挥发油和总黄酮部位抑制SMMC-7721细胞的增殖,并表现出一定的浓度依赖性.ELISA实验表明挥发油部位显著性地抑制MMP-2分泌量;Real-time PCR实验表明挥发油和总黄酮均显著抑制MMP-2 mRNA的表达.结论:镰形棘豆挥发油和总黄酮部位抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖活性,可能与其下调MMP-2的分泌量和转录水平有关.     

聚酰胺色谱法联合中压液相制备色谱法提取分离镰形棘豆中活性黄酮类成分

目的:对藏药镰形棘豆中黄酮类成分进行提取分离,并将得到的黄酮化合物进行抗人肺腺癌A549细胞的活性筛选。方法:镰形棘豆药材浸提液经乙酸乙酯萃取,该萃取部位通过聚酰胺柱色谱梯度洗脱,结合中压液相制备色谱法进一步纯化分离,获得单一黄酮化合物,通过高效液相色谱法(HPLC)、质谱法(MS)及核磁共振波谱法(NMR)对化合物进行分析、鉴定;采用CCK-8法,检测黄酮化合物对人肺腺癌A549细胞的抑制作用。结果:从镰形棘豆的乙酸乙酯部位分离得到2个黄酮类单体,鉴定为7-羟基二氢黄酮及2',4'-二羟基二氢查尔酮,HPLC分析两者纯度均大于98%; CCK-8法结果显示,7-羟基二氢黄酮及2',4'-二羟基二氢查尔酮均能显著抑制A549细胞活力,并呈量效关系,48 h的IC50值分别为137. 6μg/m L和63. 83μg/m L。结论:分离得到的2个黄酮成分对A549细胞均有良好的抑制作用,为后期抗肺癌机制研究提供了实验基础。聚酰胺柱色谱法具有富集黄酮的作用,适用于分离黄酮类成分,聚酰胺色谱法联合中压制备液相色谱法,提取分离镰形棘豆中黄酮类成分,简便易行,为分离黄酮类成分提供参考。     

反相高效液相色谱法测定养颜颗粒中二苯乙烯苷的含量

目的建立养颜颗粒中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法。色谱柱为D iamonsilTM(钻石)C18(5μm,4.6×150 mm),流动相为乙腈-水(18∶82),柱温为30℃,检测波长为320nm。结果2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-O-β-D-葡萄糖苷的进样量在0.056 5~0.452μg的范围内呈现良好线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为99.24%,RSD为1.09%。结论采用反相高效液相色谱法测定二苯乙烯苷的含量,方法简便、灵敏、准确,可用于养颜颗粒的质量控制。     

藏药景天祛斑胶囊中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷和红景天苷的含量测定

目的:建立景天祛斑胶囊中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷和红景天苷的含量测定方法。方法:Hy-persil-ODS2 C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷采用RP-HPLC法,流动相为乙腈-水(25∶85),检测波长:320nm,流速:1mL/min;红景天苷采用HPLC法,以乙腈-磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长:225nm,流速:1mL/min。结果:在色谱试验条件下,2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷在0.2626μg~1.313μg范围内呈良好的线性,平均加样回收率为98.74%,RSD=1.48(n=9)。红景天苷在0.1208μg~0.6040μg范围内呈良好的线性,平均加样回收率98.14%,RSD=1.39%(n=9)。结论:方法简单,准确,灵敏,能有效控制景天祛斑胶囊的质量。