中药制剂及保健品中违禁添加7种降糖药物的LC-MS/MS定性检测

 目的建立快速、准确的检测中药制剂及保健品中违禁添加降糖药物的分析方法。方法采用C₁₈柱分离,以甲醇-10mmol·L^-1醋酸铵缓冲溶液(0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速0.2mL·min^-1,离子源为ESI源,正离子检测,对中药中非法添加格列本脲、格列吡嗪、格列美脲、格列奇特、瑞格列奈、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍进行定性检测。结果5批受试制剂中有1批检测到违禁添加格列本脲。结论此方法选择性强、灵敏度高,可作为分析中药制剂中违禁添加格列本脲、格列吡嗪、格列美脲、格列奇特、瑞格列奈、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍的有效检测方法。     

UPLC-MS/MS测定降压类中成药及保健品中30种化学药

 目的 建立一种测定降压类中成药及保健品中添加30种化学药的超高效液相-串联四级杆质谱方法。方法 多反应监测模式测定,以Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱进行分离,甲醇-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速：0.2 mL·min^-1。离子化模式：ESI⁺。结果 30种化学药测定的线性范围分别在10～1 000.0, 0～400.0, 2.0～400.0 μg·L^-1,r分别在0.990 3～0.999 8之间,检出浓度分别在0.01~0.83 μg·L^-1之间, 3个水平的回收率分别在72.2%～123.4%之间。结论 该方法快速、准确、灵敏,可用于降压类中成药及保健品中添加30种化学药的测定。     

LC-MS/MS快速测定人血浆中格列齐特

 目的建立测定人血浆中格列齐特的液相色谱-质谱/质谱联用法,并应用于人体药代动力学研究。方法0.25 mL血浆样品经液-液萃取后,以乙腈-水-甲酸(90∶10∶0.5)为流动相,采用Zorbax SB C₈柱分离,通过大气压化学电离四极杆串联质谱,以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z324～m/z127(格列齐特)和m/z494(m/z369(内标格列本脲)。结果格列齐特血浆质量浓度线性范围为1.0～4 000μg·L^-1,定量下限为1.0μg·L^-1。日内和日间精密度(RSD)均小于4%,准确度(RE)在±5.1%内。每个样品色谱分析仅为2.8 min,应用此法每天可以测试150个样品。结论该法操作简便、快速、灵敏,适用于格列齐特的临床药动学研究及制剂的生物等效性评价。     

HPLC-MS/MS检测中药及保健品中添加的11种降糖类化学药物

 目的 建立HPLC-MS/MS方法 检测中药及保健品中非法添加的11种降糖类化学药物。方法 采用Phenomenex C₁₈ (4.6 mm×250 mm,5 μm) 色谱柱,梯度洗脱：流动相A为0.1％甲酸溶液(用氨水调节pH值至 3.2),流动相B为乙腈,检测波长为230 nm,流速为1 mL·min^-1(分流比为4∶1)。选择正离子全扫描方式检测,扫描范围：50～1 000 m/z。电喷雾参数：雾化器压力276 kPa,干燥气（N₂）温度350 ℃,流速9.0 L·min^-1,静电喷雾电压3 200 V,碰撞电压2 V。结果 在本色谱条件下, 11种临床常用的降糖药均有很好的分离。二甲双胍、苯乙双胍、罗格列酮、盐酸吡格列酮、格列吡嗪、甲苯磺丁脲、格列奇特、格列本脲、格列美脲,格列喹酮,瑞格列奈检测限均在1～25 ng之间。结论 本法简便准确,可作为保健品及中成药中非法添加降糖化学成分的快速筛查方法 。
     

HPLC-MS研究格列吡嗪片人体药动学和生物等效性

 目的建立准确、灵敏的HPLC-MS测定格列吡嗪片在血浆中的浓度,研究格列吡嗪片在健康人体中的药动学及生物等效性。方法18名健康男性受试者单次po 10 mg格列吡嗪片受试制剂和参比制剂后,按规定时间采集肘静脉血,经液-液萃取处理后选用Kromasil C₁₈分析柱(4.6 mm×150 mm,5μm);甲醇-水-甲酸(75∶25∶0.625)为流动相,采用LC-MS测定格列吡嗪的血药浓度,并计算两制剂的主要药动学参数及相对生物利用度。结果测定血浆中格列吡嗪的最低检测限为20μg·L^-1,在20～5 000μg·L^-1内线性关系良好;血药浓度测定的日内、日间精密度RSD均小于10%,测得格列吡嗪受试制剂和参比制剂的主要药动学参数t_max分别为(2.4±0.9)和(2.1±1.0)h,ρ_max分别为(1.2±0.3)和(1.3±0.4)mg·L^-1,t_1/2分别为(5.6±2.2)和(5.1±1.6)h,AUC_0-t分别为(7.6±2.9)和(7.5±3.1)mg·h·L^-1,AUC_0-∞分别为(8.4±3.3)和(8.1±3.3)mg·h·L^-1,受试制剂的相对生物利用度为(102.3±23.7)%。结论建立的HPLC-MS灵敏,准确;测定结果经统计学分析,表明格列吡嗪两种片剂生物等效。     

盐酸吡格列酮胶囊生物等效性研究

 目的研究盐酸吡格列酮胶囊在健康人体内的药动学和相对生物利用度，进行生物等效性评价。方法20名男性健康志愿者双周期随机交叉单剂量po盐酸吡格列酮片剂和胶囊30 mg，服药间隔为1周，采用高效液相色谱法测定血浆中吡格列酮浓度。结果两种制剂主要药动学参数无显著性差异，片剂和胶囊的c_max分别为(1172.43±347.01)和(1 108.8±375.55)μg·L^-1；t_max分别为(2.16±0.89)和(1.79±1.10) h；t_1/2分别为(7.75±1.79)和(8.20±2.10) h；AUC_0～tn分别为(12 268.01±3 542.93)和(11623.17±4 038.65) μg·h·L^-1。盐酸吡格列酮胶囊的相对生物利用度为(94.48±15.78)%。结论方差分析和双向单侧t检验结果表明两种制剂具有生物等效性。     

液质联用测定盐酸哌唑嗪的血药浓度及其片剂的生物等效性研究

 目的建立高效液相色谱-质谱联用方法测定人血浆中盐酸哌唑嗪的浓度,研究盐酸哌唑嗪的人体药动学及生物等效性。方法血浆样品中加入内标盐酸特拉唑嗪后,经叔丁基甲醚提取,采用高效液相色谱-质谱法,电喷雾电离源选择性正离子峰检测。用建立的方法测定18名健康男性志愿者单剂量口服盐酸哌唑嗪试验制剂或参比制剂的体内经-时过程,由血药浓度数据求得各自的药动学参数,双单侧t检验进行生物等效性判定。结果在0.5～100μg·L^-1内呈良好的线性关系,方法回收率为95%～97%,日内、日间RSD均小于10%。单次服用4 mg盐酸哌唑嗪试验制剂或参比制剂后的药动学参数AUC_0→15,AUC_0→∞,ρ_max,t_max,t_1/2分别为(171.62±33.22)和(168.19±23.50)μg·h·L^-1,(177.06±34.16)和(174.40±24.36)μg·h·L^-1,(50.04±16.60)和(47.55±12.23)μg·L^-1,(1.35±0.76)和(1.24±0.75)h,(3.4±1.2)和(3.4±1.1)h。试验制剂对参比制剂的相对生物利用度为(102.3±15.3)%。结论该方法准确、灵敏,无杂质干扰。测得的试验制剂与参比制剂的主要药动学参数之间无明显差异,两种片剂为生物等效制剂。     

反相高效液相串联质谱法快速测定人血浆中齐拉西酮的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中齐拉西酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马公司C18反相柱(Dialmonsil C₁₈ column,4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1 mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对齐拉西酮(m/z 413.2→194.1)和内标替米沙坦(m/z 515.3→276.2)进行测定,并用此法测定20例患者稳态血药浓度。结果齐拉西酮的高(250μg·L^-1)、中(100μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为100.33%,94.31%和104.70%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为5μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=1.367 7ρ-0.024 5,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

高效液相-串联质谱测定血浆中依西美坦的浓度

 目的建立高效液相色谱-串联质谱的方法测定人血浆内的依西美坦浓度,对两种制剂进行人体生物等效性研究。方法采用Lichrospher C₁₈(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱;柱温25℃;流动相为甲醇-水(含0.05%甲酸)(80∶20);流速为1.0mL·min^-1;通过液相串联质谱,大气压化学电离(APCI),以选择反应监测(SRM)方式进行检测;检测离子为依西美坦m/z 296.8[M+H]⁺→121[M+H]⁺,非那雄胺(内标)m/z373.2[M+H]⁺→305.2[M+H]⁺。结果依西美坦的线性范围为0.0994～39.76μg·L^-1,依西美坦受试制剂和参比制剂的t_1/2分别为(13.37±4.62)和(15.65±5.89)h,ρ^max分别为(19.97±8.51)和(20.04±9.16)μg·L^-1,t_max分别为(0.95±0.39)和(0.90±0.29)h,AUC_0-72分别为(95.64±26.87)和(96.73±25.97)μg·h·L^-1,AUC_0-∞分别为(100.47±28.76)和(114.59±62.32)μg·h·L^-1。结论该方法简便、灵敏度高,两制剂生物等效。     

反相高效液相串联质谱检测法测定人血浆中阿立哌唑的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中阿立哌唑浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马C18反相柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对阿立哌唑(m/z 448.3→285.0)和内标替米沙坦(m/z 515.3→497.3)进行测定。并用此法测定30例患者稳态血药浓度。结果阿立哌唑的高(400μg·L^-1)、中(125μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为94.27%、102.58%和97.97%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为1μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=0.5469ρ+0.0714,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定中药制剂中西地那非的含量

 目的建立一种简单、快速、灵敏、准确地鉴定中药制剂中是否添加西地那非的高效液相色谱串联质谱(LC/MS/MS)的分析方法。方法样品经C₁₈(4.6mm×250mm,5μm),流速200μL·min^-1,乙腈-0.05mol·L^-1乙酸铵(1:1)流动相进行分离。在ESI正离子采集模式下,采用LC/MS/MS的多反应监测(MRM)对西地那非进行定量监测,采用外标法定量。结果本方法满足分析要求,并对12种市场上中药中西地那非进行定量测定。结论目前市场中药制剂中存在添加西地那非的现象。     

HPCE测定治疗哮喘中药中非法添加的氨茶碱药物成分

 目的建立治疗哮喘中药中可能非法添加化学药物成分氨茶碱的HPCE检测方法。方法以100mmol·L^-1磷酸盐缓冲液(磷酸调节pH7.0)为电泳介质,未涂层弹性石英毛细管(50μm×48cm,有效长度40cm)为分离通道,检测波长270nm,压力进样(5kPa×10s),内标法测定含量。结果2种治疗哮喘中药中检测到化学药物成分氨茶碱;氨茶碱在10～250mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9996),样品加样回收率为98.05%,RSD为1.32%。结论方法简便快捷,准确可靠,可作为治疗哮喘中药中非法掺入化学药物成分氨茶碱的有效检验方法。     

HPLC测定小儿双扑伪麻片3组分及含量均匀度

 目的：研究和寻找能准确测定小儿双扑伪麻片中3组分含量的简便方法。方法：采用高效液相色谱法，以2种不同的样品浓度，同一流动相，同一内标，2次进样测定3组分含量，可在20min内完成。结果：本方法线性范围：对乙酰氨基酚为1．5μg·ml^－1～7．5μg·ml^－1，r＝0．9993；盐酸伪麻黄碱为0．12mg·ml^－1～0．36mg·ml^－1，r＝0．9995；马来酸氯苯那敏为8μg·ml^－1～24μg·ml^－1，r＝0．9971。平均回收率（x％）及变异系数（RSD％）分别为：对乙酰氨基酚（99．8±1．7）；盐酸伪麻黄碱（99．8±1．2）、马来酸氯苯那敏（98．7±1．5）。结论：本方法可用于小儿双扑伪麻片的含量测定；外标法可用于盐酸伪麻黄碱、马来酸氯苯那敏的含量均匀度测定。     

LC-MS/MS测定人血浆中盐酸舍曲林的浓度

 目的建立LC-MS/MS测定人血浆中盐酸舍曲林浓度的方法。方法以盐酸帕罗西汀为内标,采用乙腈-0.1%甲酸溶液(50∶50)为流动相,以Discovery C₁₈色谱柱为分析柱,通过电喷雾电离源(ESI),以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z306.0→274.9(盐酸舍曲林)和m/z 330.1→191.9(盐酸帕罗西汀)。结果盐酸舍曲林线性范围0.332～66.400μg·L^-1,定量下限为(0.334±0.002)μg·L^-1(n=5)。日内、日间精密度(RSD)小于9%,平均回收率大于95%。结论本法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于盐酸舍曲林临床药动学研究。     

UPLC–MS/MS同时测定大鼠血、脑脊液中奎硫平及其活性代谢物

 目的建立同时测定大鼠血、脑脊液中奎硫平及其活性代谢物7-羟基奎硫平羟7-羟基-N-去烷基奎硫平浓度的UPLC-MS/MS法。方法样品经碱化后用叔丁基甲醚提取,采用Acquity UPLC^TM BEH C₁₈柱(2.1mm×50mm,1.7μm),柱温40℃,以水(含50mmol·L^-1醋酸铵,3‰甲酸)-乙腈(73∶27)为流动相,流速0.25mL·min^-1,进样量5μL。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,选择离子监测方式进行扫描,测定样品浓度,卡马西平作为内标。结果血浆中:奎硫平在0.0775～155μg·L^-1,7-羟基奎硫平在0.049～98μg·L^-1,7-羟基-N-去烷基奎硫平在0.067～670μg·L^-1内线性关系良好,萃取回收率均>89%,方法回收率均>87%,,内羟,间,密度RSD均<9%。脑脊液中:奎硫平在0.02～38.75μg·L^-1,7-羟基奎硫平在0.0098～29.5μg·L^-1,7-羟基-N-去烷基奎硫平在0.067～670μg·L^-1内线性关系良好,萃取回收率均>87%,方法回收率均>85%,,内羟,间,密度RSD均<16%。结论该方法该该度高、快速羟该确羟有效,且血、脑中浓度均可测定,为研究转运蛋白对抗,神分裂药物进入血脑屏障的影响提供了依据。     

HPLC-MS/MS快速同时测定全血中3种免疫抑制剂的浓度

 目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人全血中环孢素A、他克莫司、西罗莫司的方法。方法采用Symmetry C₁₈色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相:10 mmol·L^-1醋酸铵-0.1%甲酸溶液和0.1%甲酸甲醇溶液为90∶10,流速0.25 mL·min^-1,采用多反应监测进行定量。结果环孢素A在人全血中50～1 500μg·L^-1内线性良好,他克莫司、西罗莫司在人全血中1～30μg·L^-1内线性良好,相对回收率在98.67%～103.56%之间,日内及日间精密度(RSD%)均小于10%。结论本方法能满足同时测定人全血中环孢素A、他克莫司、西罗莫司的要求,用于临床血药浓度的监测。     

高效液相色谱法同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素和氢化可的松的含量

 目的：用HPLC法同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素氢化可的松的含量。方法：采用C₁₈色谱柱，流动相为甲醇-0.05 mol·L^-1KH₂PO₄-三乙胺（50∶50∶0.2），用磷酸调pH3.7，检测波长257 nm。结果：盐酸麻黄素在360～600 μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r=0.9999），回收率101.3%，RSD为1.0%。氢化可的松在36～60μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9998)，回收率101.5%，RSD为1.0%。结论：该方法可同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素氢化可的松含量。     

LC-MS/MS同时测定人血浆中阿莫西林-氨溴索浓度及其药动学研究

 目的建立LC-MS/MS同时测定人血浆中阿莫西林/氨溴索浓度。方法以Lichrospher C₁₈(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇溶液(含0.2%甲酸)和水溶液(含0.2%甲酸),采用梯度洗脱进行分析,流速为1.0mL·min^-1,柱温为30℃。血浆样品经甲醇沉淀后进样,采用多反应监测(MRM)方式对样品进行测定。结果血浆中阿莫西林线性范围为5～20000μg·L^-1,氨溴索线性范围为1～200μg·L^-1;批间和批内精密度RSD均小于9%;方法的准确度为(100±7)%;最低定量限浓度(LLOQ)阿莫西林为5μg·L^-1,氨溴索为1μg·L^-1。结论本试验建立了同时测定阿莫西林和氨溴索浓度的方法,该方法灵敏、准确、简便、快速,适用于阿莫西林/氨溴索人体药动学研究。